檢驗科血清抗O測定標準操作規(guī)程

玉環(huán)縣人民醫(yī)院檢驗科文件編號：JYK-3-SH-038版本/修訂號：C/0主題內(nèi)容生化室作業(yè)指導(dǎo)書生效日期：20110701第1頁共4頁編寫制定日期審核審核日期：核準執(zhí)行日期李永臣2010-09-15李永臣2011-07-01章林華2011-07-01血清抗鏈球菌溶血素O（ASO）測定標準操作規(guī)程1檢驗申請單獨檢驗項目申請：血清抗鏈球菌溶血素O(縮寫ASO)；組合項目申請：血生化中項目組合。臨床醫(yī)生根據(jù)需要提出檢驗申請。2標本采集與處理2.1標本采集2.1.1常規(guī)靜脈采血約2ml，不抗凝，置普通試管中?；虿捎煤蛛x膠的真空采血管。2.1.2檢驗申請單和血標本試管標上統(tǒng)一且唯一的標識符。2.1.3急診標本采集后，在檢驗申請單上填寫標本采集時間。2.1.4標本采集后與檢驗申請單一起及時運送至檢驗科。專人負責標本的接收并記錄標本的狀態(tài)，對不合格標本予以拒收。2.1.5下列標本為不合格標本2.1.5.1標本量不足：少于0.3ml的全血標本，或少于0.1ml的血清或血漿。2.1.5.2對反應(yīng)吸光度有干擾的標本，包括嚴重溶血、嚴重渾濁的標本。2.1.5.3無法確認標本與申請單對應(yīng)關(guān)系的。2.1.5.4其他如標識涂改、標本試管破裂等。2.2標本保存2.2.1接收標本后在30min內(nèi)將標本離心分離出血清。2.2.2標本保存時間：室溫（15～25℃）下可穩(wěn)定24小時，普通冰箱中（2～8℃）穩(wěn)定7天,-20℃可保存6個月.為避免標本中水分揮發(fā)使血清濃縮，對保存時間超過1天的標本均加塞密閉或覆蓋濕巾。2.2.3已完成測試的標本保持完整的識別號，置4～8℃冰箱內(nèi)保存7天。2.3標本采集的注意事項2.3.1采血前使受檢者保持平靜、松弛和空腹狀態(tài)。2.3.2不建議采集抗凝血標本，如果必須使用血漿，推薦的抗凝劑是肝素或EDTA。3方法原理660nm樣本中ASO+包被SLO的膠乳大分子免疫復(fù)合物在660nm監(jiān)測生成的復(fù)合物的濁度變化，與樣本中ASO效價成正比。4試劑及其他用品4.1試劑：血清抗鏈球菌溶血素O試劑盒，由北京利德曼生化技術(shù)有限公司出品。4.2試劑盒保存：保存于2～8℃，不開蓋情況下至標簽的失效期。4.3試劑盒準備：液態(tài)雙試劑型，即開即用，無特殊準備。4.4試劑盒主要成分：組成R1：緩沖液200mmol/L（PH=8.6）疊氮鈉0.09%R2：包被SLO的膠乳2.5mg/dL疊氮鈉0.09%5校準品與校準模式5.1校準品：與試劑盒配套的ASO校準液。5.2校準類型和校準點數(shù)目：非線性模式，5個校準點。5.3校準周期：校準間隔時間14天。但在：①更換試劑或出現(xiàn)質(zhì)控漂移時；②儀器進行全面保養(yǎng)后；③儀器的重要零件更換后；均須進行一次校準。5.4校準液重建方法：儀器自動稀釋成5個不同的濃度標準品。6質(zhì)控品與室內(nèi)質(zhì)控規(guī)則6.1質(zhì)控品采用由利德曼公司提供的免疫多項定值質(zhì)控血清。6.2質(zhì)控液重建方法：液態(tài)質(zhì)控血清，即開即用，無需特殊準備。6.3質(zhì)控品測定：在每星期一或換試劑時加做質(zhì)控一次。6.4質(zhì)控規(guī)則：采用Westgard多規(guī)則質(zhì)控規(guī)則，由計算機程序進行檢索與判斷。6.5如出現(xiàn)失控情況，按室內(nèi)質(zhì)控標準操作程序采取各種有效的糾正措施及時糾正，并在確認重新回復(fù)到控制狀態(tài)后開始標本檢測。7適用儀器適用AEROSET和C16000全自動生化分析儀器全自動生化分析儀器。8標本檢測步驟裝載試劑→進行校準→進行質(zhì)控→輸入標本檢測項目→加載標本→標本測定→結(jié)果復(fù)核→報告。9主要分析參數(shù)參見說明書。10結(jié)果計算計算標準液的吸光度的差值（A2－A1），建立標準液吸光度－濃度工作曲線。計算標本的吸光度差值，并在工作曲線上讀取濃度值（mg/dL）。如標本的吸光度值大于標準液的最大值，則需稀釋標本后，重新測量。11檢驗結(jié)果的報告及范圍11.1結(jié)果的報告11.1.1結(jié)果經(jīng)審核確認準確無誤后發(fā)出報告。11.1.2報告單上標明結(jié)果的計量單位、參考區(qū)間、報告日期、時間、操作者和審核者簽名，并有與申請單相同的醫(yī)學(xué)信息。11.1.3如收到標本的質(zhì)量可能對測定結(jié)果有影響的也在報告單上指出。11.2報告范圍：0-300IU/mL，超過此范圍的結(jié)果報告時必須附有證明該結(jié)果準確可靠的文字說明，例如：系根據(jù)標本稀釋后重復(fù)測定的結(jié)果。12操作性能12.1精密度：批內(nèi)CV<3.10%，批間CV<4.83%。12.2線性范圍：0～300IU/mL。12.3回收率為90%-110％范圍內(nèi).12.4方法的有限性及干擾因素：內(nèi)源性干擾物溶血、脂血、黃疸對測試結(jié)果無明顯影響.13參考范圍及醫(yī)學(xué)決定水平成人：0-180IU/mL，兒童0-250IU/mL14臨床意義鏈球菌溶血素O（SLO）是鏈球菌的一種胞外產(chǎn)物，它能溶解細胞膜從而導(dǎo)致溶血?？规溓蚓苎兀ˋSO）是SLO的抗體。ASO測試能為早期的鏈球菌所導(dǎo)致的感染提供證據(jù)，主要應(yīng)用于急性風(fēng)濕熱、鏈球菌感染后的血管球性腎炎、患有咽炎的個人以及其它急性感染。通常，與抗原對應(yīng)的抗體在急性鏈球菌感染后三周左右達到峰值，并保持在峰值水平3-4個月，然后逐漸降低到正常水平。15結(jié)果審核以及分析與相關(guān)項目的聯(lián)系15.1由資深專業(yè)人員負責檢驗結(jié)果的審核。15.2認真審核每一個測定結(jié)果，審核者對發(fā)出報告結(jié)果的準確性和可靠性負責，并在報告單的審核者處簽名。15.3相關(guān)項目：審核如出現(xiàn)與臨床不符甚至相悖的情況，應(yīng)分析與查找原因。無威脅生命的“緊急值”及報告規(guī)定17有關(guān)引用程序與文件17.1Abbott自動生化分析儀儀器標準操作規(guī)程。17.2生