2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請(qǐng)※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教五四新版選擇性必修3生物上冊(cè)月考試卷含答案考試試卷考試范圍：全部知識(shí)點(diǎn)；考試時(shí)間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級(jí)：______考號(hào)：______總分欄題號(hào)一二三四五六總分得分評(píng)卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、下列關(guān)于如下圖所示DNA分子片段的說法；正確的是（）

A.限制酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位B.限制酶可作用于④部位，解旋酶作用于①部位C.作用于①部位的限制酶同時(shí)也可以作用于④部位D.作用于①部位的限制酶與作用于⑤部位的限制酶的堿基識(shí)別序列相反2、如圖表示基因工程中獲取目的基因的示意圖；不正確的是（）

A.①過程需要逆轉(zhuǎn)錄酶B.②過程用到的限制性核酸內(nèi)切酶在從基因組文庫中獲取目的基因時(shí)也要用到C.③表示PCR技術(shù)，用來擴(kuò)增目的基因D.若獲取的目的基因相同，則圖中基因組文庫小于cDNA文庫3、某小鼠生活過程中被多種病原體感染過，科學(xué)家以該小鼠為實(shí)驗(yàn)材料，利用單克隆抗體技術(shù)，獲得了抗某種病原體的髙純度單克隆抗體。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.被多種病原體感染過的小鼠體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生多種漿細(xì)胞B.經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞可分泌多種特異性抗體C.單克隆抗體特異性強(qiáng)是因?yàn)樗兌雀撸荒芘c特定的抗原結(jié)合D.單克隆抗體的制備過程中應(yīng)用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和細(xì)胞融合技術(shù)4、下列有關(guān)酶制劑應(yīng)用的敘述，正確的是（）A.加酶洗衣粉因?yàn)樘砑恿嗣钢苿?，所以比普通洗衣粉更易污染環(huán)境B.固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)C.加酶洗衣粉的洗滌效果總比普通洗衣粉的好D.腐乳發(fā)酵前期主要依賴毛霉產(chǎn)生的淀粉酶5、下列有關(guān)生物技術(shù)引起的倫理問題的敘述，不正確的是A.人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人B.設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，不會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響C.進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí)，可通過測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)來進(jìn)行D.對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法解決6、某生物興趣小組的同學(xué)測(cè)定藥物對(duì)體外培養(yǎng)細(xì)胞的毒性，準(zhǔn)備對(duì)小鼠的肝腫瘤細(xì)胞（甲）和正常肝細(xì)胞（乙）進(jìn)行培養(yǎng)。下列說法正確的是A.利用胃蛋白酶處理兩種肝組織塊后可得到肝細(xì)胞懸液B.細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進(jìn)行，CO2的作用是刺激細(xì)胞的呼吸C.甲、乙細(xì)胞在持續(xù)的原代培養(yǎng)過程中，乙會(huì)出現(xiàn)停止增殖的現(xiàn)象D.該試驗(yàn)中用到的培養(yǎng)液也能用來培養(yǎng)乙肝病毒7、利用重疊延伸PCR技術(shù)進(jìn)行定點(diǎn)突變可以實(shí)現(xiàn)對(duì)纖維素酶基因進(jìn)行合理性改造；其過程如下圖所示。下列分析錯(cuò)誤的是（）

A.PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴(kuò)增的結(jié)果B.引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補(bǔ)的堿基C.①過程需要先加熱至90～95℃后再冷卻至50～60℃D.②過程需要利用引物a和引物d獲得突變產(chǎn)物AD8、下表為常用的限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）及其識(shí)別序列和切割位點(diǎn)，由此推斷的以下說法中，正確的是（）。限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)|限制酶名稱識(shí)別序列和切割位點(diǎn)BarmHIG↓GATCCKpnIGGTAC↓CEcoRIG↓AATTCSau3AI↓GATCHindIGTY↓RACSmaICCC↓GGG

（注：Y＝C或T，R＝A或G）A.一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列B.限制酶切割后一定形成黏性末端C.不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端D.限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列內(nèi)部9、苯丙酮尿癥（PKU）是一種由致病基因決定的氨基酸代謝病，常造成新生兒神經(jīng)系統(tǒng)損害而智力低下，下圖1是某家族中該病的遺傳系譜圖。為避免再生下患兒，該家族成員去醫(yī)院進(jìn)行了基因檢測(cè)，已知被檢測(cè)的PKU基因?yàn)?42bp（bp表示堿基對(duì)）．檢測(cè)人員用特定限制酶酶切部分家庭成員（I1、II2、III3）的PKU基因；產(chǎn)生了大小不同的幾種片段．結(jié)果如圖2所示。下列敘述正確的是（）

A.苯丙酮尿癥是單基因遺傳病由一個(gè)基因決定B.若III2與III3近親結(jié)婚，生－個(gè)患病孩子的概率是C.III1的每個(gè)PKU基因中共有2個(gè)該特定限制酶的酶切位點(diǎn)D.可以在患者家系中調(diào)查該遺傳病的發(fā)病率評(píng)卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、下圖表示形成cDNA并進(jìn)行PCR擴(kuò)增的過程。據(jù)圖分析；下列敘述錯(cuò)誤的是（）

A.①過程所需的原料是脫氧核苷酸B.②過程所需的酶必須耐高溫C.③過程需要解旋酶破壞氫鍵D.④過程的引物對(duì)之間不能互補(bǔ)配對(duì)11、研究發(fā)現(xiàn)；某些致病菌生長(zhǎng)繁殖需要外界提供相應(yīng)的生長(zhǎng)因子。將流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時(shí)，金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，稱為衛(wèi)星現(xiàn)象（圖甲）為進(jìn)一步探究流感嗜血桿菌所需生長(zhǎng)因子的種類，把其菌懸液與不含生長(zhǎng)因子但含有其他必需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分成四個(gè)區(qū)域，將從血液中提取的V；X兩種生長(zhǎng)因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖乙所示。下列敘述正確的是（）

A.圖甲中的不同菌落可以通過觀察菌落特征進(jìn)行鑒別B.衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長(zhǎng)因子或引起溶血所致C.可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)D.圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需要生長(zhǎng)因子V或X12、2016年初；首位由“三合一”胚胎人工授精技術(shù)培育的嬰兒出生，其培有過程如下圖所示。下列相關(guān)說法正確的是（）

A.“三親嬰兒”孕育過程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、核移植等技術(shù)B.融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MII中期才能完成受精作用C.卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者攜帶的血友病基因能遺傳給“三親嬰兒”D.“三親嬰兒”培育技術(shù)可以用來避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳13、擴(kuò)展青霉常見于腐爛蘋果中，其分泌的展青霉素（Pat）是一種具有致突變作用的毒素。為研究腐爛蘋果中Pat的分布，進(jìn)行了如圖實(shí)驗(yàn)，其中“病健交界處”為病斑與正常部位的交界處，依據(jù)與病斑的距離不同將蘋果劃分為①~⑤號(hào)部位，其中⑤為剩余部分。測(cè)定病斑直徑為1、2、3cm的蘋果中①~⑤號(hào)部位的Pat含量，結(jié)果如下。下列說法正確的是（）

A.該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小B.可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染C.病斑越大，靠近腐爛部位的果肉中Pat含量越高D.由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，蘋果去除腐爛部位后可放心食用14、利用基因編輯技術(shù)將病毒外殼蛋白基因?qū)胴i細(xì)胞中，然后通過核移植技術(shù)培育基因編輯豬，可用于生產(chǎn)基因工程疫苗。如圖為基因編輯豬培育流程，下列敘述不正確的是（）

A.對(duì)1號(hào)豬使用促性腺激素處理，可使其超數(shù)排卵B.采集到的卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到MⅡ期才能用于核移植C.產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自2號(hào)與3號(hào)豬D.為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否被導(dǎo)入4號(hào)豬并正常表達(dá)，可采用DNA測(cè)序的方法15、茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序，發(fā)酵前要下“誘水”，下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上。發(fā)花可使磚茶原料在加工過程中形成“金花”，學(xué)名“冠突散囊菌”——茶界“益生菌”，也是國(guó)家茶業(yè)界二級(jí)機(jī)密保護(hù)菌種。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（）A.茯磚茶的制作需利用酵母菌等多種細(xì)菌進(jìn)行發(fā)酵B.下“誘水”相當(dāng)于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測(cè)相關(guān)菌種可耐熱C.發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收D.茯磚茶發(fā)酵完成后要滅菌并密封，有利于長(zhǎng)期保存16、如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析正確的是（）

A.某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目少B.3號(hào)試管中的樣品溶液稀釋倍數(shù)為104倍C.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為1.7×108個(gè)D.該實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，用以判斷選擇培養(yǎng)基是否有選擇作用17、甲流試劑盒中的抗血凝素單克隆抗體能與甲流病毒的血凝素蛋白（HA）特異性結(jié)合，發(fā)揮診斷作用。利用小鼠制備抗HA單克隆抗體的流程如圖，下列敘述正確的是（）

A.制備抗HA單克隆抗體使用的B淋巴細(xì)胞取自注射過HA的小鼠脾臟B.在特定的選擇培養(yǎng)基上，未融合的親本細(xì)胞和融合的具有同種核的細(xì)胞都會(huì)死亡C.放入96孔板的細(xì)胞為多種雜交瘤細(xì)胞，均能產(chǎn)生所需抗體D.將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體18、某植物有甲、乙兩品種，科研人員在設(shè)計(jì)品種乙組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)時(shí)，參照品種甲的最佳激素配比（見下表）進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。為確定品種乙的II階段的最適細(xì)胞分裂素濃度，參照表中α2（α2>2．0μmol·L-1），以0．5μmol·L-1為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，其中細(xì)胞分裂素最高濃度設(shè)為M。下列有關(guān)敘述正確的是（）。品種甲組織培養(yǎng)階段細(xì)胞分裂素/（μmol·L-1）生長(zhǎng)素/（μmol·L-1）I誘導(dǎo)形成愈傷組織α1b1II誘導(dǎo)形成幼芽α2b2Ⅲ誘導(dǎo)生根α3b3

A.表中發(fā)生基因選擇性表達(dá)的是II和Ⅲ階段B.實(shí)驗(yàn)中共配制了2種不同的培養(yǎng)基，即生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基C.確定品種乙II階段最適細(xì)胞分裂素濃度的實(shí)驗(yàn)中，M為α2+2μmol·L-1D.生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素評(píng)卷人得分三、填空題(共7題，共14分)19、一般包括______、______等技術(shù)20、在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？____________________________21、統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目_____________。這是因?yàn)開_____________________。因此，統(tǒng)計(jì)結(jié)果一般用而不是用活菌數(shù)來表示。除了上述的活菌計(jì)數(shù)法外，______________也是測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法。22、______——“分子縫合針”23、_________℃左右最適合酵母菌繁殖，酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在_______________℃。24、胚胎工程。

胚胎工程指對(duì)動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)，由______、______、______、胚胎冷凍保存技術(shù)和______技術(shù)等組成的現(xiàn)代生物技術(shù)。25、注意：a生理基礎(chǔ)：______，______

b植物細(xì)胞融合前需用______和______除去細(xì)胞壁評(píng)卷人得分四、判斷題(共1題，共4分)26、動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)是將動(dòng)物一個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞核移入去核的卵母細(xì)胞中，使這個(gè)重新組合的細(xì)胞發(fā)育成新胚胎，繼而發(fā)育成動(dòng)物個(gè)體的技術(shù)，體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞的全能性。（選擇性必修3P52）()A.正確B.錯(cuò)誤評(píng)卷人得分五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共12分)27、研究表明生物制劑W對(duì)不同種類動(dòng)物細(xì)胞的分裂均有促進(jìn)作用。有同學(xué)設(shè)計(jì)相關(guān)實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證這個(gè)觀點(diǎn)。請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料；完善該實(shí)驗(yàn)步驟，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

實(shí)驗(yàn)材料：培養(yǎng)液；正常肝組織、肝癌組織、W、胰蛋白酶。

（要求與說明：答題時(shí)不考慮加入W后的體積變化等誤差。提供的細(xì)胞均具有分裂能力；只進(jìn)行原代培養(yǎng)且培養(yǎng)條件適宜）

（1）實(shí)驗(yàn)步驟：

①用_________分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。培養(yǎng)液需要中加入__________等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和__________用以滅菌。

②在顯微鏡下用_____________直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③取滅菌后的培養(yǎng)瓶若干個(gè)均分為A、B兩組，A組加入正常肝細(xì)胞懸液；B組加入_________。從A、B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組，分別加入_________。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入_____________后搖勻；在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄細(xì)胞數(shù)量。

⑤重復(fù)④若干次。

⑥統(tǒng)計(jì)并分析所得數(shù)據(jù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果（用坐標(biāo)系和曲線示意圖表示）_____________28、干燥綜合征（SS）是臨床常見的一種自身免疫?。换颊哐逯写嬖诙喾N抗體，其中以SSB抗體特異性最強(qiáng)。下圖表示科研人員利用基因工程技術(shù)獲得SSB蛋白及利用SSB蛋白對(duì)小鼠進(jìn)行免疫的過程?；卮鹣铝袉栴}：

(1)利用RNA通過①過程獲得cDNA需要________酶。已知真核生物mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。為了針對(duì)性獲得cDNA，應(yīng)如何設(shè)計(jì)逆轉(zhuǎn)錄第一步時(shí)的DNA引物______，設(shè)計(jì)引物的目的是______。

(2)為確保與pET41a質(zhì)粒定向連接，對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)，應(yīng)在相應(yīng)引物的_______（填“5'”或“3'”）端加上______酶切位點(diǎn)。

(3)③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌，目的是______，然后將處理后的大腸桿菌先接種在添加_______的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加______的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集_______菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理；篩選得到SSB蛋白。

(4)將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液_______。評(píng)卷人得分六、綜合題(共3題，共12分)29、心臟移植是挽救終末期心臟病患者生命唯一有效的手段；然而心臟移植過程中會(huì)發(fā)生缺血再灌注損傷（IRI），可能導(dǎo)致心臟壞死。研究發(fā)現(xiàn)，IRI通過促進(jìn)Caspase8等一系列凋亡基因的表達(dá)，導(dǎo)致細(xì)胞凋亡壞死最終引起器官損傷。根據(jù)Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）可以使Caspase8基因沉默，有效抑制IRI所致的器官損傷。圖是利用豬的心肌細(xì)胞開展siRNA作用研究的示意圖。回答下列問題：

(1)圖中步驟②構(gòu)建重組質(zhì)粒需要使用___________等工具酶。與直接將siRNA導(dǎo)入豬的心肌細(xì)胞相比，通過重組質(zhì)粒將siRNA對(duì)應(yīng)的DNA序列導(dǎo)入心肌細(xì)胞，其優(yōu)點(diǎn)是____________（答出一點(diǎn)）。

(2)siRNA對(duì)應(yīng)DNA序列在心肌細(xì)胞中表達(dá)產(chǎn)生的siRNA，與RISC組裝形成基因沉默復(fù)合物，通過抑制基因表達(dá)的___________過程；使Caspase8基因沉默，從而降低IRI引起的細(xì)胞凋亡。

(3)研究人員根據(jù)Caspase8基因的堿基序列，設(shè)計(jì)了三種序列分別導(dǎo)入豬的心肌細(xì)胞，通過測(cè)定靶基因Caspase8的mRNA含量來確定最優(yōu)序列。測(cè)定mRNA含量時(shí)，需提取心肌細(xì)胞的總RNA，經(jīng)過________過程得到cDNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，測(cè)定PCR產(chǎn)物量，結(jié)果如圖所示。據(jù)此判斷最優(yōu)序列是___________。

(4)選用豬的心肌細(xì)胞做受體細(xì)胞是因?yàn)樨i在基因、解剖結(jié)構(gòu)、生理生化和免疫反應(yīng)等方面與人類極為相似。為了解決心臟移植供體短缺問題，許多科學(xué)家正在研究用豬心臟代替人的心臟。你認(rèn)為將豬心臟移植到人體面臨的最大挑戰(zhàn)是免疫排斥反應(yīng)，這是因?yàn)槊庖呦到y(tǒng)會(huì)把外來器官當(dāng)作抗原（“非己”）成分進(jìn)行攻擊。請(qǐng)說出一種解決這一問題的思路：___________（利用基因工程的方法）。30、科研工作者將蘇云金桿菌的Bt抗蟲基因?qū)肫胀ㄆ废得藁ǎ@得了三個(gè)純合抗蟲品系甲、乙和丙。將三個(gè)抗蟲品系與普通品系棉花雜交，F(xiàn)1均表現(xiàn)為抗蟲，且F1自交所得F2的表型及比例為抗蟲：不抗蟲=3：1?；卮鹣铝袉栴}：

(1)將蘇云金桿菌的Bt抗蟲基因?qū)肫胀ㄆ废得藁梢圆捎胈______法。若將Bt抗蟲基因插入某種細(xì)菌Ti質(zhì)粒的T-DNA上，再讓其侵染普通品系棉花細(xì)胞，該過程主要利用了細(xì)菌Ti質(zhì)粒_______的特點(diǎn)；成功將Bt抗蟲基因?qū)朊藁?xì)胞。

(2)以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，甲、乙、丙三個(gè)品系中Bt抗蟲基因的遺傳都遵循_______定律。

(3)將上述過程獲得的甲；乙、丙三個(gè)純合品系相互雜交；得到的結(jié)果如下：

甲×乙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

乙×丙→F1抗蟲→F2抗蟲：不抗蟲=15：1

丙×甲→F1抗蟲→F2全表現(xiàn)為抗蟲。

①若依次用A/a、B/b、C/c表示甲、乙、丙三個(gè)品系染色體上的Bt抗蟲基因，由雜交實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷，甲、乙、丙三個(gè)品系中Bt抗蟲基因所在染色體的位置關(guān)系是什么？請(qǐng)?jiān)谙聢D細(xì)胞中畫出相關(guān)基因在染色體上的位置_______。

②將甲、乙雜交的F1與乙、丙雜交的F1雜交，所得F2的表型及比例為抗蟲：不抗蟲等于_____。

(4)通過基因工程另獲得一對(duì)純合抗蟲基因的品系丁，若要通過雜交實(shí)驗(yàn)來確定丁品系中的Bt抗蟲基因插入新的染色體上，還是和乙的Bt抗蟲基因位于同源染色體上，請(qǐng)寫出該實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路：___。預(yù)期實(shí)驗(yàn)結(jié)果和結(jié)論：_______。31、下圖為轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程流程圖；其中質(zhì)粒上的PstⅠ；SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)見表。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

。限制酶ApalEcoRIPstISmaI識(shí)別序列及切割位點(diǎn)

（1）圖中質(zhì)粒被限制酶EcoRⅠ、PstⅠ、SmaⅠ同時(shí)切割后可得到________個(gè)DNA片段，________個(gè)黏性末端。

（2）形成重組質(zhì)粒A時(shí)，應(yīng)選用限制酶____________，對(duì)____________________進(jìn)行切割。

（3）圖中①②分別表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的____________________。該技術(shù)表明，當(dāng)植物細(xì)胞處于__________狀態(tài)時(shí)，在一定的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、____________和其他外界條件的作用下；可表現(xiàn)出全能性，發(fā)育成完整植株。

（4）培養(yǎng)基中的卡那霉素會(huì)抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng)，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使重組質(zhì)粒A中含有____________。經(jīng)過②后得到的叢芽或胚狀體加上人工薄膜后就制成了____________。

（5）為了確定轉(zhuǎn)基因抗病香蕉是否培育成功，可用____________方法從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的抗病性。

（6）在轉(zhuǎn)基因抗病香蕉培育過程中，受體細(xì)胞如果采用形成層組織細(xì)胞，與采用葉肉組織細(xì)胞相比較，其優(yōu)點(diǎn)是____________________。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

重組DNA技術(shù)中切割DNA分子的工具是限制性內(nèi)切酶；這類酶主要是從原核生物中分離純化出來的，它們能識(shí)別雙鏈DNA分子的特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開。分析圖示可知，①②④⑤為磷酸二酯鍵，③為氫鍵。

【詳解】

AB；限制酶可切開特定位置的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵；即可作用于①②④⑤部位（磷酸二酯鍵），而解旋酶能將DNA雙螺旋的兩條鏈解開，即作用于③部位（氫鍵），A正確，B錯(cuò)誤；

C；由圖示DNA片段的堿基序列可知；作用于①部位的限制酶同時(shí)也可以作用于⑤部位，在G與A之間切割，C錯(cuò)誤；

D；作用于①部位的限制酶與作用于⑤部位的限制酶的堿基識(shí)別序列相同；它們識(shí)別的序列都為—GAATTC—，D錯(cuò)誤。

故選A。2、D【分析】【分析】

基因文庫包括基因組文庫和部分基因文庫（如cDNA文庫）。將含有某種生物不同基因的許多DNA片段；導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存，各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因，稱為基因文庫。如果這個(gè)文庫包含了某種生物的所有基因，那么，這種基因文庫叫做基因組文庫。如果這個(gè)文庫只包含了某種生物的一部分基因，這種基因文庫叫做部分基因文庫，例如cDNA文庫，首先得到mRNA，再反轉(zhuǎn)錄得cDNA，形成文庫。cDNA文庫與基因組文庫的區(qū)別在于cDNA文庫在mRNA拼接過程中已經(jīng)除去了內(nèi)含子等成分，便于DNA重組時(shí)直接使用。

【詳解】

A；①過程是RNA逆轉(zhuǎn)錄形成DNA的過程；需要逆轉(zhuǎn)錄酶，A正確；

B；②過程將DNA切割成不同大小的片段；用到的限制性核酸內(nèi)切酶在從基因組文庫中獲取目的基因時(shí)也要用到，B正確；

C；③表示以DNA為模板進(jìn)行的PCR技術(shù)；用來擴(kuò)增目的基因，C正確；

D；若獲取的目的基因相同；則圖中基因組文庫大于cDNA文庫，D錯(cuò)誤。

故選D。3、B【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；由于抗體具有特異性；一種抗體只能和相應(yīng)的抗原結(jié)合，該小鼠被多種病原體感染過，所以體內(nèi)抗體種類多，每種抗體由相應(yīng)的漿細(xì)胞產(chǎn)生，所以小鼠體內(nèi)有多種漿細(xì)胞，A正確；

B；經(jīng)細(xì)胞融合后形成的單個(gè)雜交瘤細(xì)胞最多只能分泌一種特異性抗體；B錯(cuò)誤；

C；單克隆抗體是單一的B淋巴細(xì)胞克隆的細(xì)胞群分泌的；所以抗體純度高，特異性強(qiáng)，只能與特定的抗原結(jié)合，C正確；

D；由分析可知；單克隆抗體的制備采用了動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】4、B【分析】【分析】

1；加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉；目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶，其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。

2；酶是活細(xì)胞產(chǎn)生的具有催化功能的有機(jī)物；具有高效性、專一性，酶的作用條件較溫和。酶對(duì)有機(jī)溶劑非常敏感，容易失活。

【詳解】

A；加酶洗衣粉中的酶制劑屬于有機(jī)物；易被分解，不會(huì)造成環(huán)境污染，A錯(cuò)誤；

B；固定化葡萄糖異構(gòu)酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)；固定化細(xì)胞可催化一系列化學(xué)反應(yīng)，B正確；

C；酶發(fā)揮作用需要適宜的條件；因此加酶洗衣粉的洗滌效果不一定總比普通洗衣粉好，C錯(cuò)誤；

D；腐乳前期發(fā)酵主要依賴毛霉產(chǎn)生的蛋白酶將蛋白質(zhì)水解為小分子的多肽和氨基酸；D錯(cuò)誤。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【詳解】

人們現(xiàn)在的倫理道德觀念還不能接受克隆人；設(shè)計(jì)試管嬰兒是為了治療疾病，但有可能被濫用，如用于設(shè)計(jì)嬰兒性別等，可能會(huì)出現(xiàn)負(fù)面影響；進(jìn)行基因檢測(cè)時(shí)，可通過基因進(jìn)行檢測(cè)，也可通過測(cè)定基因的表達(dá)產(chǎn)物——蛋白質(zhì)來進(jìn)行檢測(cè)；對(duì)于基因歧視現(xiàn)象，可通過正確的科學(xué)知識(shí)傳播、倫理道德教育和立法解決。6、C【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊（動(dòng)物胚胎或幼齡動(dòng)物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)。

2；細(xì)胞貼壁和接觸抑制：懸液中分散的細(xì)胞很快就貼附在瓶壁上；稱為細(xì)胞貼壁．細(xì)胞數(shù)目不斷增多，當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長(zhǎng)到表面相互抑制時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂增殖，這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的接觸抑制。

【詳解】

A、處理肝組織塊獲得到肝細(xì)胞懸液用胰蛋白酶，A錯(cuò)誤；

B、細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)在含5%CO2，CO2用于維持培養(yǎng)液的pH值，B錯(cuò)誤；

C、正常細(xì)胞不具有無限增殖能力，培養(yǎng)一段時(shí)間后會(huì)停止分裂，C正確；

D；病毒只能寄生在活細(xì)胞中；不能用培養(yǎng)液直接培養(yǎng)，D錯(cuò)誤。

故選C。7、D【分析】【分析】

1；PCR原理：在解旋酶作用下；打開DNA雙鏈，每條DNA單鏈作為母鏈，以4中游離脫氧核苷酸為原料，合成子鏈，在引物作用下，DNA聚合酶從引物3'端開始延伸DNA鏈，即DNA的合成方向是從子鏈的5'端自3'端延伸的。實(shí)際上就是在體外模擬細(xì)胞內(nèi)DNA的復(fù)制過程。DNA的復(fù)制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能從3′端延伸DNA鏈。

2；PCR反應(yīng)過程是：變性→復(fù)性→延伸。

3；結(jié)果：上述三步反應(yīng)完成后；一個(gè)DNA分子就變成了兩個(gè)DNA分子，隨著重復(fù)次數(shù)的增多，DNA分子就以2n的形式增加。PCR的反應(yīng)過程都是在PCR擴(kuò)增儀中完成的。

【詳解】

A、PCR技術(shù)中DNA單鏈延伸的方向是沿著引物的5'端向3'端延伸的，據(jù)此可分析，PCR1過程中的產(chǎn)物AB是依賴引物a和引物b擴(kuò)增的結(jié)果；A正確；

B、根據(jù)突變位點(diǎn)的產(chǎn)生可推知，引物c和引物b上均含有與模板鏈不能互補(bǔ)的堿基；B正確；

C；①過程是雙螺旋解開的過程；即氫鍵斷裂可通過先加熱至90～95℃完成，而后再冷卻至55～60℃使氫鍵形成，為子鏈的延伸做準(zhǔn)備，C正確；

D；②過程為子鏈延伸的過程；該過程需要利用AB上鏈和CD下鏈之間的互補(bǔ)配對(duì)實(shí)現(xiàn)子鏈的延伸過程，D錯(cuò)誤。

故選D。8、C【分析】【分析】

限制酶的特點(diǎn)：識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列；并在特定的位點(diǎn)進(jìn)行切割，切割后可能形成黏性末端或平末端。

【詳解】

A；由圖可知；由于Y＝C或T，R＝A或G，因此HindⅠ可以識(shí)別多種核苷酸序列，A錯(cuò)誤；

B；限制酶切割后可能形成黏性末端或平末端；B錯(cuò)誤；

C；不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端；如BamHⅠ和Sau3AⅠ，C正確；

D；限制酶的切割位點(diǎn)在識(shí)別序列內(nèi)部或外部；如Sau3AⅠ，D錯(cuò)誤。

故選C。9、C【分析】【分析】

據(jù)圖分析，圖中Ⅱ1和Ⅱ2正常，而他們的兒子Ⅲ1有病，說明苯丙酮尿癥為隱性遺傳病；又因?yàn)棰?有病，而其兒子Ⅱ2正常；說明該病不可能在X染色體上，因此該病為常染色體隱性遺傳病。

【詳解】

A；苯丙酮尿癥是單基因遺傳??；單基因遺傳病是由一對(duì)等位基因決定的，A錯(cuò)誤；

B、Ⅲ2與Ⅲ3為堂兄妹（近親）；由遺傳系譜圖可知，兩者基因型分別為（1/3AA；2/3Aa）、Aa，若兩者結(jié)婚，結(jié)合酶切位點(diǎn)可知，III2基因型應(yīng)為Aa，由于兩者均是Aa，則后代為一個(gè)患病男孩（aa）的概率=1/4×1/2＝1/8，B錯(cuò)誤；

C、根據(jù)題意分析，已知被檢測(cè)的Ⅲ1的PKU基因?yàn)?42bp，限制酶切割后產(chǎn)生50bp和42bp兩種長(zhǎng)度的片段，142-50-42=50bp，說明50bp的片段有2個(gè)；即切割后產(chǎn)生了三個(gè)片段，因此其PKU基因中具有2個(gè)該特定限制酶的酶切位點(diǎn)，C正確；

D；調(diào)查遺傳病的發(fā)病率應(yīng)在人群中隨機(jī)取樣；D錯(cuò)誤。

故選C。二、多選題(共9題，共18分)10、B:C【分析】【分析】

PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過程；其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物。

PCR由變性--退火--延伸三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：

①模板DNA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至93℃左右一定時(shí)間后；使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴(kuò)增形成的雙鏈DNA解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應(yīng)作準(zhǔn)備；

②模板DNA與引物的退火（復(fù)性）：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后；溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補(bǔ)序列配對(duì)結(jié)合；

③引物的延伸：DNA模板--引物結(jié)合物在72℃；DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下；以dNTP為反應(yīng)原料，靶序列為模板，按堿基互補(bǔ)配對(duì)與半保留復(fù)制原理，合成一條新的與模板DNA鏈互補(bǔ)的半保留復(fù)制鏈，重復(fù)循環(huán)變性--退火--延伸三過程就可獲得更多的“半保留復(fù)制鏈”，而且這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板。每完成一個(gè)循環(huán)需2～4分鐘，2～3小時(shí)就能將待擴(kuò)目的基因擴(kuò)增放大幾百萬倍。

【詳解】

A；①過程為逆轉(zhuǎn)錄；所需的原料是脫氧核苷酸，A正確；

B；②過程由DNA單鏈合成DNA雙鏈過程所需要的DNA聚合酶不需要耐高溫；B錯(cuò)誤；

C；③過程為變性；溫度上升到90℃以上時(shí)，雙鏈DNA解聚為單鏈，不需要DNA解旋酶破壞氫鍵，C錯(cuò)誤；

D；④過程為復(fù)性；溫度降到50℃左右時(shí)，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對(duì)與兩條DNA單鏈結(jié)合，但引物對(duì)之間不能互補(bǔ)配對(duì)，D正確。

故選BC。11、A:B:C【分析】【分析】

據(jù)圖分析可知；流感嗜血桿菌的菌落主要分布于添加了X和V的區(qū)域的交界處，說明該菌生長(zhǎng)需要的生長(zhǎng)因子是X和V。

菌落的特征：形狀；大小、顏色、隆起程度、質(zhì)地、邊緣等。

培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)組成：碳源；氮源、水、無機(jī)鹽、特殊生長(zhǎng)因子。

【詳解】

A；鑒定不同種的菌落可以觀察菌落的特征；比如形態(tài)、顏色、隆起程度等，A正確；

B；流感嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌在血平板上共同培養(yǎng)時(shí)；金黃色葡萄球菌周圍的流感嗜血桿菌菌落較大，越遠(yuǎn)則菌落越小，由此推測(cè)衛(wèi)星現(xiàn)象可能是金黃色葡萄球菌合成相關(guān)生長(zhǎng)因子或引起溶血所致，B正確；

C；分析題干信息可知；可用加熱（破壞血細(xì)胞）血瓊脂平板進(jìn)行流感嗜血桿菌的純培養(yǎng)，C正確；

D、圖乙結(jié)果表明流感嗜血桿菌生長(zhǎng)需要生長(zhǎng)因子V和X，不是V或X，D錯(cuò)誤。12、A:B:D【分析】【分析】

1；試管嬰兒技術(shù)是指通過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精；并通過培養(yǎng)發(fā)育為早期胚胎后，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。設(shè)計(jì)試管嬰兒技術(shù)是通過體外受精獲得許多胚胎，然后從中選擇符合要求的胚胎，再經(jīng)移植后產(chǎn)生后代的技術(shù)。

2；分析題圖：圖示表示三親嬰兒的培育過程；由圖可知，三親嬰兒的培育采用了核移植技術(shù)、體外受精技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等。

【詳解】

A；由圖可知；“三親嬰兒”孕育過程中使用了動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)、體外受精、核移植等技術(shù)，A正確；

B；融合激活后的卵母細(xì)胞要培養(yǎng)到MⅡ中期才具備受精能力；從而完成受精作用，B正確；

C；卵母細(xì)胞A的捐獻(xiàn)者提供的是細(xì)胞質(zhì)；而其攜帶的血友病基因位于細(xì)胞核內(nèi)的染色體上，所以其攜帶的血友病基因不能遺傳給“三親嬰兒”，C錯(cuò)誤；

D；“三親嬰兒”培育技術(shù)可以通過核移植來避免細(xì)胞質(zhì)遺傳病的遺傳；D正確。

故選ABD。13、A:B:C【分析】【分析】

1；據(jù)圖分析可知；①號(hào)部位為病斑區(qū)域，即腐爛部位，①與②交界處為“病鍵交界處”，是腐爛部位與未腐爛部位交界的地方，②③④⑤均為未腐爛部位，且距離腐爛部位依次變遠(yuǎn)。

2；在曲線圖中；病班部位的Pat含量最高，而距離病班部位越來越遠(yuǎn)，Pat含量就會(huì)越來越少。

【詳解】

A；由曲線圖可知；該實(shí)驗(yàn)自變量是腐爛蘋果中的病斑大小和離病斑距離大小，A正確；

B；青霉素可以抑制細(xì)菌生長(zhǎng)；可向擴(kuò)展青霉培養(yǎng)液中加入青霉素以防止雜菌污染，B正確；

C；病斑越大；說明病斑中擴(kuò)展青霉素的密度就越大，產(chǎn)生的Pat就越多，C正確；

D；如果只去除腐爛部位；那么未腐爛部位中的Pat仍然會(huì)對(duì)人體造成傷害，存在健康風(fēng)險(xiǎn)，故窩爛蘋果去除腐爛部位后不能食用，D錯(cuò)誤。

故選ABC。14、C:D【分析】【分析】

據(jù)圖分析；圖示基因編輯豬培育過程涉及的技術(shù)手段有轉(zhuǎn)基因技術(shù)；核移植技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)和胚胎移植技術(shù)等，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將病毒外殼蛋白基因（目的基因）導(dǎo)入2號(hào)豬的體細(xì)胞核中，然后將2號(hào)豬的體細(xì)胞核移植到1號(hào)豬的去核卵母細(xì)胞中，再將重組細(xì)胞培養(yǎng)到囊胚并移植到3號(hào)豬的子宮中去，最后分娩產(chǎn)生了4號(hào)轉(zhuǎn)基因克隆豬。

【詳解】

A；對(duì)供體母豬使用促性腺激素處理；使其超數(shù)排卵，A正確；

B；獲得的卵母細(xì)胞去核后；需要培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才能進(jìn)行核移植，B正確；

C；染色體位于細(xì)胞核；則產(chǎn)出的基因編輯豬的性染色體來自于2號(hào)豬，C錯(cuò)誤；

D；為檢測(cè)病毒外殼蛋白基因是否正常表達(dá)；可采用的方法是抗原-抗體雜交，D錯(cuò)誤。

故選CD。15、A:D【分析】【分析】

根據(jù)題意分析：茯磚茶的制作包括發(fā)酵與發(fā)花等工序；發(fā)酵過程涉及多種酶催化，發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收。

【詳解】

A；酵母菌是真菌；不是細(xì)菌，A錯(cuò)誤；

B；下“誘水”就是將原有老茶煮水后噴灑在料堆之上；相當(dāng)于微生物培養(yǎng)過程中的“接種”，推測(cè)相關(guān)菌種可耐熱，B正確；

C；發(fā)酵過程涉及多種酶催化；發(fā)酵后富含多種小分子營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，因此發(fā)酵后飲用有利于營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收，C正確；

D；茯磚茶在儲(chǔ)藏過程中仍然繼續(xù)自然發(fā)酵；因此滅菌并密封處理，不利于長(zhǎng)期保存，D錯(cuò)誤。

故選AD。16、A:B:D【分析】【分析】

分析題圖：圖中5支試管為梯度稀釋；最后經(jīng)稀釋涂布平板法接種培養(yǎng)后進(jìn)行計(jì)數(shù)。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)在30~300的平板，取其平均值，進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)數(shù)公式為（C÷V）×M。（C為平均菌落數(shù)，V為涂布液體積，M為稀釋倍數(shù)）。

【詳解】

A；設(shè)置重復(fù)組；增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，故某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板。稀釋涂布平板得到的菌落可能存在兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌細(xì)胞長(zhǎng)成一個(gè)菌落，使該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果往往會(huì)比實(shí)際活菌數(shù)目要低，A正確；

B、據(jù)圖可知，將10g土樣加入到90mL無菌水中定容至100mL后，此時(shí)土樣稀釋倍數(shù)為10倍，再經(jīng)3次10倍稀釋得到3號(hào)試管中的樣品，故3號(hào)試管中樣品的稀釋倍數(shù)是104倍；B正確；

C、5號(hào)試管進(jìn)行稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)的結(jié)果表明每克土壤中的菌株數(shù)為（168+175+167）÷3×106÷0.1≈1.7×109個(gè)；C錯(cuò)誤；

D；要判斷選擇培養(yǎng)基是否起到選擇作用；需設(shè)置接種了的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作對(duì)照，若牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)基上的菌落種類數(shù)目多于選擇培養(yǎng)基上的菌落類型，則說明起到了選擇作用，D正確。

故選ABD。17、A:B:D【分析】【分析】

單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)；之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體。

【詳解】

A；抗原與抗體的結(jié)合具有特異性；為制備抗HA單克隆抗體，則使用的B淋巴細(xì)胞應(yīng)取自注射過HA的小鼠脾臟，A正確；

B；在特定的選擇培養(yǎng)基上；未融合的親本細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞類型、骨髓瘤細(xì)胞類型）和融合的具有同種核的細(xì)胞（B淋巴細(xì)胞-B淋巴細(xì)胞型和骨髓瘤-骨髓瘤細(xì)胞型）都會(huì)死亡，B正確；

C；將B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后；放入96孔板，不一定都能產(chǎn)生所需抗體，還需進(jìn)行抗體陽性檢測(cè)，C錯(cuò)誤；

D；據(jù)圖可知；圖中細(xì)胞群a在加入HA抗原后呈陽性，說明細(xì)胞群a產(chǎn)生了抗HA抗原的抗體，故將圖中細(xì)胞群a在體外大規(guī)模培養(yǎng)，可以提取出大量的抗HA單克隆抗體，D正確。

故選ABD。18、A:B:D【分析】【分析】

植物組織培養(yǎng)中植物激素使用：物組織培養(yǎng)中關(guān)鍵性激素是生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素；同時(shí)使用生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素時(shí)；兩者用量的比例影響植物細(xì)胞的發(fā)育方向；先使用細(xì)胞分裂素，后使用生長(zhǎng)素，細(xì)胞既分裂又分化。

【詳解】

A；Ⅰ階段為脫分化；II階段和Ⅲ階段為再分化，Ⅰ、II、Ⅲ階段中會(huì)發(fā)生基因的選擇性表達(dá)，A錯(cuò)誤；

B；實(shí)驗(yàn)至少配制了3種不同的培養(yǎng)基；即形成愈傷組織的培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基和生芽培養(yǎng)基，B錯(cuò)誤；

C、由于參照品種B的激素配比（a2＞2.0），以0.5μmol/L為梯度，設(shè)計(jì)5個(gè)濃度水平的實(shí)驗(yàn)，則細(xì)胞分裂素濃度依次為a2-1.0μmol/L、a2-0.5μmol/L、a2μmol/L、a2+0.5μmol/L、a2+1.0μmol/L，可見細(xì)胞分裂素的最高濃度M應(yīng)設(shè)為a2+1.0μmol/L；C錯(cuò)誤；

D；生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素的配比是啟動(dòng)細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵因素；D正確。

故選ABD。三、填空題(共7題，共14分)19、略

【解析】①.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)和核移植技術(shù)、②.動(dòng)物細(xì)胞融合與單克隆抗體20、略

【解析】避免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】低當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落菌落數(shù)22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】DNA連接酶23、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】2018～2524、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】體外受精技術(shù)、胚胎移植技術(shù)、胚胎分割技術(shù)性別控制25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞膜流動(dòng)性植物細(xì)胞全能性纖維素酶果膠酶四、判斷題(共1題，共4分)26、B【分析】【詳解】

動(dòng)物細(xì)胞核移植技術(shù)體現(xiàn)了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性，不能體現(xiàn)動(dòng)物細(xì)胞的全能性，高度分化的動(dòng)物細(xì)胞的全能性受到了限制，故錯(cuò)誤。五、實(shí)驗(yàn)題(共2題，共12分)27、略

【分析】【分析】

1；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：

（1）無菌；無毒的環(huán)境：①消毒、滅菌；②添加一定量的抗生素；③定期更換培養(yǎng)液；以清除代謝廢物；

（2）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：糖；氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等；還需加入血清、血漿等天然物質(zhì)；

（3）適宜的溫度和pH；

（4）氣體環(huán)境：95%空氣（細(xì)胞代謝必需的）和5%的CO2（維持培養(yǎng)液的pH）。

2；實(shí)驗(yàn)操作步驟的安排一般如下：第一步：取材隨機(jī)均分為幾組；編號(hào)；第二步：不同組自變量的處理；第三步：把上述各組放在無關(guān)變量相同且適宜等條件下處理一段時(shí)間；第四步：觀察并記錄比較相應(yīng)的因變量。根據(jù)題意可知，本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用，則該實(shí)驗(yàn)的自變量是細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，因變量是細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)目，對(duì)細(xì)胞直接計(jì)數(shù)可以采用血球板計(jì)數(shù)法。

【詳解】

（1）①動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)前需要用胰蛋白酶或膠原蛋白酶分別處理正常肝組織和肝癌組織獲得分散的細(xì)胞。將兩種分散的細(xì)胞加入培養(yǎng)液中制成兩種細(xì)胞懸液。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液中需要加入葡萄糖；氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清；為了保證無菌的條件，一般在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素。

②在顯微鏡下可以采用血球計(jì)數(shù)板直接計(jì)數(shù)兩種細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；并進(jìn)行記錄。

③本實(shí)驗(yàn)的目的是驗(yàn)證生物制劑W對(duì)動(dòng)物不同細(xì)胞的分裂具有促進(jìn)作用；根據(jù)題干所給實(shí)驗(yàn)材料可知，不同細(xì)胞是指正常肝細(xì)胞和癌細(xì)胞，因此該實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置四組，變量為細(xì)胞的種類及是否加入生物制劑W，具體如下：

A組：培養(yǎng)液中加入正常肝細(xì)胞懸液；B組：培養(yǎng)液中加入與之等量癌細(xì)胞懸液；從A；B組中各取出一半培養(yǎng)瓶作為C、D組；C、D兩組：培養(yǎng)液中加入等量的生物制劑W。放入動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)箱在適宜條件下培養(yǎng)。

④該實(shí)驗(yàn)的因變量是計(jì)數(shù)細(xì)胞懸液中細(xì)胞的數(shù)量；因此各組樣品在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段合適的時(shí)間后，每組取部分樣品，加入胰蛋白酶或膠原蛋白酶搖勻，將細(xì)胞分散成單個(gè)，然后在顯微鏡下計(jì)數(shù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果；若較長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，因?yàn)檎＜?xì)胞的增殖次數(shù)有限，故A組中細(xì)胞數(shù)量最少，由于W促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，因此C組細(xì)胞數(shù)量多于A組；而癌細(xì)胞可以無限增殖，且由于其細(xì)胞膜上的糖蛋白減少，易于擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移，同時(shí)失去接觸抑制，可大量培養(yǎng)增殖，故B；D兩組中細(xì)胞數(shù)量明顯更多，且由于W的促進(jìn)作用，D組多于B組；由于此實(shí)驗(yàn)是驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，所以實(shí)驗(yàn)結(jié)果是加入生物制劑W的實(shí)驗(yàn)組比對(duì)照組細(xì)胞數(shù)多，同時(shí)癌細(xì)胞分裂能力比正常細(xì)胞高，故繪制坐標(biāo)曲線具體如下:

【點(diǎn)睛】

本題考查驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，要求學(xué)生明確實(shí)驗(yàn)的目的，正確區(qū)分實(shí)驗(yàn)的變量，能夠根據(jù)題意判斷自變量和因變量，然后根據(jù)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的單一變量和等量原則，同時(shí)結(jié)合題干所給的實(shí)驗(yàn)材料完善實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，并能預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果和繪制相關(guān)曲線圖表示實(shí)驗(yàn)的結(jié)果。【解析】胰蛋白酶（膠原蛋白酶）葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素、動(dòng)物血清抗生素血球計(jì)數(shù)板等量肝癌細(xì)胞懸液等量生物制劑W胰蛋白酶（膠原蛋白酶）28、略

【分析】【分析】

1；基因工程的四個(gè)步驟：目的基因的篩選與獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定。

2、在基因工程操作中，常用原核生物作為受體細(xì)胞，其中以大腸桿菌應(yīng)用最為廣泛。研究人員一般先用Ca2＋處理大腸桿菌細(xì)胞；使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，然后再將重組的基因表達(dá)載體導(dǎo)入其中。

【詳解】

（1）利用RNA通過①過程（逆轉(zhuǎn)錄）獲得cDNA需要逆轉(zhuǎn)錄酶；已知真核生物基因的mRNA在3'端加有PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）保護(hù)尾部不被降解。逆轉(zhuǎn)錄第一步以mRMA為模板合成DNA單鏈；新鏈與模板鏈反向平行，由于新鏈只能由5'端向3'端延伸，所以逆轉(zhuǎn)錄第一步的引物應(yīng)與mRNA尾部的PolyA（多聚腺嘌呤核糖核苷酸）互補(bǔ)配對(duì)，即用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物；設(shè)計(jì)引物的目的是使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。

（2）對(duì)逆轉(zhuǎn)錄得到的cDNA擴(kuò)增時(shí)；引物的5'端結(jié)合母鏈的3'端之后DNA聚合酶開始擴(kuò)增DNA。為確保其與pET41a質(zhì)粒定向連接，應(yīng)使用不同種的限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，由圖可知，使用EcoRI酶會(huì)破環(huán)SSB基因，故應(yīng)在相應(yīng)引物的5'端加上BamHI和XhoⅠ酶切位點(diǎn)。

（3）由題圖分析可知：質(zhì)粒上存在卡那霉素和氯霉素抗性基因，由于XhoⅠ酶破壞了氯霉素抗性基因，所以成功組裝的重組質(zhì)粒不能在添加了氯霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，③過程用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染大腸桿菌時(shí)，需要用Ca2+處理大腸桿菌；目的是使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)，然后分別將處理后的大腸桿菌先接種在添加卡那霉素的培養(yǎng)基（A）上培養(yǎng)，待長(zhǎng)出菌落后再利用無菌膜同位置轉(zhuǎn)移到添加氯霉素的培養(yǎng)基（B）上培養(yǎng)，收集能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落進(jìn)一步純化后將菌體破碎處理，經(jīng)篩選即可得到SSB蛋白。

（4）將改造后的大腸桿菌生產(chǎn)的SSB蛋白注入到小鼠體內(nèi)是為了檢測(cè)該蛋白是否具有抗原性，如果該蛋白有抗原性，會(huì)引起機(jī)體的免疫反應(yīng)，產(chǎn)生相應(yīng)抗體。則后續(xù)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容應(yīng)為抽取小鼠血液提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體。【解析】(1)逆轉(zhuǎn)錄用多聚胸腺嘧啶脫氧核苷酸序列為引物

使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸

(2)5’BamHⅠ和XhoI

(3)使大腸桿菌成為易于吸收外源DNA的狀態(tài)卡那霉素氯霉素能在含卡那霉素的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)而不能在含氯霉素培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的。

(4)提取其中的抗體，利用抗原—抗體雜交的方法檢測(cè)其是否含有抗SSB的抗體六、綜合題(共3題，共12分)29、略

【分析】【分析】

根據(jù)Caspase8基因合成的小干擾RNA（siRNA）；最終生成基因沉默復(fù)合物，該復(fù)合物Caspase8mRNA結(jié)合，影響其正常翻譯，從而有效抑制IRI所致的器官損傷。

【詳解】

（1）限制酶和DNA連接酶是構(gòu)建重組質(zhì)粒需要的工具酶；與直接將siRNA導(dǎo)入豬的心肌細(xì)胞相比；通過重組質(zhì)粒將siRNA對(duì)應(yīng)的DNA序列導(dǎo)入心肌細(xì)胞，siRNA可隨重組質(zhì)粒增殖持續(xù)產(chǎn)生，從而使靶基因長(zhǎng)時(shí)間沉默。

（2）mRNA是翻譯的模板；據(jù)圖可知，基因沉默復(fù)合物作用于Caspase8mRNA，抑制了基因表達(dá)的翻譯過程，使Caspase8基因沉默。

（3）測(cè)定mRNA含量時(shí)；需提取細(xì)胞總RNA，經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄過程得到cDNA，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增，通過PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的量間接反映細(xì)胞中相關(guān)基因mRNA含量；據(jù)圖可知，在序列2作用下，PCR產(chǎn)物最少，推測(cè)Caspase8的mRNA含量最低，表明其抑制效果最好，是最優(yōu)序列。

（4）對(duì)于人體而言；豬的器官屬于外來物質(zhì)，免疫系統(tǒng)會(huì)把外來器官當(dāng)作抗原成分進(jìn)行攻擊；利用基因工程技術(shù)將免疫排斥有關(guān)豬的抗原基因敲除或轉(zhuǎn)入一些人類特有蛋白的基因，將豬細(xì)胞偽裝人的細(xì)胞。

【點(diǎn)睛】

本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求學(xué)生理解并識(shí)記有關(guān)的原理及操作步驟，掌握各種操作步驟中需要注意的細(xì)節(jié)，能將教材中的知識(shí)結(jié)合題中信息進(jìn)行遷移應(yīng)用?！窘馕觥?1)限制酶；DNA連接酶可持續(xù)產(chǎn)生siRNA；使靶基因長(zhǎng)時(shí)間沉默。

(2)翻譯。

(3)逆轉(zhuǎn)錄序列2

(4)可以利用基因工程技術(shù)將免疫排斥有關(guān)豬的抗原基因敲除或轉(zhuǎn)入一些人類特有蛋白的基因，將豬細(xì)胞偽裝人的細(xì)胞30、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲取方法有：從基因文庫中獲??；利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因；啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同；導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法；基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)