PBS緩沖液的配制方法

1、PBS緩沖液配方無論是在免疫組織化學還是細胞培養(yǎng)中，都經(jīng)常使用PBS緩沖液。以下是我們實驗室的配方，供您參考。我們的實驗室配方：溶液：0.1摩爾/升磷酸二氫鉀；1.361克磷酸二氫鉀(KH2PO4，分子量136.09)，加入雙蒸水至100毫升。乙溶液：0.1摩爾/升磷酸氫二鈉；1.78克氫二鈉(Na2HPO4.2H2O，分子量177.99)，加入雙蒸水至100毫升?；?.58克氫二鈉(Na2HPO4.12H2O，分子量358.14)，并加入雙蒸水至100毫升。ph-溶液a(毫升)-溶液b(毫升)5.60 - 9.50 - 0.255.91 - 9.00 - 1.006.24 - 8.00 -

2、2.006.47 - 7.00 - 3.006.64 - 6.00 - 4.006.81 - 5.00 - 5.006.98 - 4.00 - 6.007.17 - 3.00 - 7.007.38 - 2.00 - 8.007.73 - 1.00 - 9.008.04 - 0.50 - 9.50一般來說，用于免疫組織化學的PBS只含有na2hpo 412H2O(磷酸氫二鈉)磷酸二氫鈉氯化鈉用于細胞培養(yǎng)的PBS應該含有氯化鉀稱取8克氯化鈉、0.2克KCl、1.44克Na2HPO4和0.24克KH2PO4，溶于800毫升蒸餾水中，用鹽酸調(diào)節(jié)溶液的酸堿度至7.4，最后加入蒸餾水至1L恒量，至0.01

3、米磷酸鹽緩沖鹽水稱取8克氯化鈉、0.2克KCl、3.63克Na2HPO4 12H2O和0.24克KH2PO4，將其溶解在900毫升雙蒸水中，用鹽酸調(diào)節(jié)酸堿度至7.4，加水至恒定體積的1L，并在常溫下儲存以備后用。PBS是最常見的實驗室緩沖液，但其配方不同。以下是我的總結(jié)：母液的制備：0.2MNa2HPO4:稱取71.6克h2hpo 4-12H2O，將其溶解在1000毫升水中0.2摩爾磷酸氫二鈉：稱取31.2摩爾磷酸氫二鈉-2H2O，將其溶解在1000毫升水中不同濃度鉛的制備(ph=7.4):0.2毫升(酸堿度=7.4，100毫升):取19毫升0.2毫升/升磷酸氫二鈉和81毫升0.2毫升/升磷酸

4、氫二鈉。然后按照相應的比例稀釋0.2毫升(酸堿度=7.4)，如：0.1毫升(酸堿度=7.4):取500毫升0.2毫升，用水稀釋至1000毫升。0.01毫升(酸堿度=7.4):取50毫升0.2毫升，用水稀釋至1000毫升。0.02毫升(酸堿度=7.4):取100毫升0.2 MPB，用水稀釋至1000毫升。如果需要氯化鈉，加入0.9%(克/100毫升)的氯化鈉。其他：其他0.2毫升(100毫升)不同酸堿度的配方：ph0.2亞硫酸氫鈉(毫升)5.793.56.55.89285.990106.087.712.36.185156.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.

5、531.56.662.537.56.756.543.56.851496.945557.038627.133677.228727.323777.419ml81ml7.516847.613877.710.50.57.88.591.57.97938.05.394.7磷酸鹽緩沖液、磷酸氫二鈉和磷酸二氫鈉緩沖液配方磷酸鹽緩沖液試劑：Na2SO 4 H2O Na2SO 4 H2O制備方法：制備時，通常先制備0.2摩爾/升磷酸氫二鈉和0.2摩爾/升磷酸氫二鈉，然后按一定比例混合得到0.2摩爾/升磷酸鹽緩沖溶液?？筛鶕?jù)需要制備不同濃度的鉛和PBS。(1)0.2摩爾/升Na2HPO4；稱取Na2HPO4.12H

6、2O 31.2g克(或NaH2PO4H2O 27.6g克)，加入蒸餾水至1000毫升溶解。(2)0.2毫升/升Na2HPO4:稱取NaHPO4.12H2O 71.632g克(或Na2HPO47H2O 53.6g克或Na2HPO42H2O 35.6g克)，加入蒸餾水至1000毫升溶解。(3)制備0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉，其酸堿度為7.4:取19毫升0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉和81毫升0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉，充分混合，得到0.2摩爾/升的磷酸氫二鈉(酸堿度約為7.4 7.5)。如果酸堿度高或低，可以通過改變兩者的比例來調(diào)節(jié)，并且可以在室溫下儲存。0.2毫升/升磷酸鹽緩沖溶液(pH 5.7 8

7、.0)0.2摩爾/升磷酸氫二鈉(毫升)5.7 93.5 6.55.8 92.0 8.05.9 90.0 10.06.0 87.7 12.36.1 85.0 15.06.2 81.563 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51.0 49.06.9 45.0 55.07.0 39.0 61.07.1 33.0 67.07.2 28.0 72.07.3 23.0 67.07.4 19.0 81.07.5 16.0 84.07.6 13.0 87.07.7 10.5 89.57.8 8.5 91.57.97

8、.0 93.08.05.3 94.7我在網(wǎng)上搜索了很多關(guān)于磷酸鹽緩沖液的帖子，但是我還是不能確定正確的答案?，F(xiàn)在把它們聯(lián)系起來，希望一些專家能參與討論。我會整理出最終的正確答案，并提供給每個人。PBS可以是三種解決方案的英文縮寫，它們是1.磷酸鹽緩沖溶液(磷酸鹽緩沖溶液)，2.磷酸鹽緩沖鹽水和3.磷酸鹽緩沖鈉，不同的制備方法，不同的酸堿度，不同的生物功能。除非另有說明，生物學中常用的PBS是中性磷酸鹽緩沖溶液。不含鈣和鎂離子的磷酸鹽緩沖鹽水(0.15毫升/升酸堿度7.2)氯化鈉8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g克(Na2HPO412H2O為2.89克)KH2PO4 0.2g將上

9、述試劑依次溶于1 000毫升去離子水中，115高壓滅菌10分鐘 15分鐘，4冰箱保存?zhèn)溆?。該溶液可用于制備和稀釋細胞分散劑以及洗滌細胞培養(yǎng)物。我們都使用第二種類型問題1:為什么使用第三種或第一種磷酸鹽緩沖鹽水？很多年來，我一直認為PBS是磷酸鹽緩沖溶液，另外兩個表達的英文名字很常見，但我一直認為它們是相似的東西。這是我第一次聽說不同的中文翻譯。我公司使用的PBS種類很多，抗體組使用的中和PBS配方比較簡單，不含鉀離子，只起到緩沖酸堿度的作用；Na _ 2 HPO _ 4 KH _ 2 PO _ 4可以以不同的比例均勻混合，得到不同PH值的緩沖溶液，用于不同的目的，在分子生物學中有著廣泛的應用。

10、對于活細胞或細菌的處理，為了保持滲透壓，將加入其他溶液，其中最常見的是氯化鈉和KCl來調(diào)節(jié)離子濃度。這些是個人理解，歡迎批評。問題2:既然抗體組的PBS可以緩沖酸堿度，加入80G NACL有什么效果？你需要平衡滲透壓嗎？還有，是不是因為細胞上的鈉鉀泵增加了鉀離子？血清中沒有細胞。你怎么能談論鈉鉀泵？我認為這場比賽的原因?qū)嶋H上是模擬了血清中的緩沖環(huán)境。血清中沒有細胞，那么你怎么能談論鈉鉀泵呢？我沒說血清。我們用的沒有加K，我是說有K的那個問題3:沒有NACL會發(fā)生什么？如何省錢在中和磷酸鹽緩沖液中，氯化鈉的主要功能應該是維持一定的離子濃度以維持抗體活性。當離子濃度過高或過低時，蛋白質(zhì)會變性，抗體