《匯報B細(xì)胞遷移》PPT課件.ppt

1、在對B淋巴細(xì)胞遷移能力的討論中，松解波2005.8.15，B淋巴細(xì)胞，人B細(xì)胞在骨髓內(nèi)分化成熟，直到胚胎末期出生。成熟的B細(xì)胞可以定居在淋巴結(jié)的皮層區(qū)域和脾臟的紅色骨髓和白水的淋巴小結(jié)等周圍淋巴組織。外周血中B細(xì)胞約占淋巴細(xì)胞總數(shù)的10%。B細(xì)胞分化，pre-B cell無膜表面Ig的表達(dá)，immature B cell開始表達(dá)mIgM，與抗原結(jié)合形成自身免疫耐受等。Matrue B cell通過骨髓中的血液同時表達(dá)周圍淋巴器官，膜表面mIgM和MIGD，MIGD的表達(dá)防止B細(xì)胞和抗原結(jié)合后發(fā)生的免疫耐受。刺激Activated B細(xì)胞抗原后成為Activated B細(xì)胞，發(fā)生增殖和分化，膜結(jié)

2、合Ig水平逐漸降低，分泌型Ig逐漸增加，可能發(fā)生免疫球蛋白基因中鏈類別的轉(zhuǎn)換。Plasma cell、PC合成和分泌各種免疫球蛋白、mIg、MHC抗原、CD19、CD20、CD21等標(biāo)記消失。趨化因子、受體、趨化因子吸引早期B細(xì)胞。在每個B細(xì)胞子群體的歸巢和抗原不依賴性及抗原依賴性反應(yīng)階段的定位中起著重要作用。distinct Gene Expression Profiles in Different B- Cell Compartments in Human Peripheral Lymphoid Organs Yuleishen，jave ed Iqbal，LiGC DC能把MNZ B細(xì)胞

3、拉到GC。高表達(dá)的CCL18在GC反應(yīng)的啟動中尤為重要。首先在接觸抗原的pre-GC B細(xì)胞中收集抗原，然后與GC的DC交互，開始并保持GC反應(yīng)。CXCL10 (IP-10)在GC中具有更高的表達(dá)級別。有多種效果，包括單核細(xì)胞刺激和T細(xì)胞遷移CCL20表達(dá)增加。MNZ cells。人nave和memory B細(xì)胞表達(dá)CCL20同源受體CCR6，CCL20的高表達(dá)在MNZ nave B細(xì)胞中。CXCL12的受體是CXCR4，包括CD34細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、CD4 T細(xì)胞、B細(xì)胞、上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、DC。骨髓中基質(zhì)細(xì)胞分泌CXCL12，造血整體細(xì)胞參與胚胎發(fā)生中轉(zhuǎn)移到骨髓。外周淋巴器官CXCL12可

4、能參與B細(xì)胞，有其他細(xì)胞，如T細(xì)胞，可能漿細(xì)胞為MGZ。CCL14 (HCC1)和CCL3 (MIP-I)在MGZ中高度表示。CCL14也可以通過CCL3的受體激活。CCL3在消除病毒感染和先天免疫方面起著重要作用的炎癥性細(xì)胞因子，因此牙齒基因在脾臟MGZ先天免疫中可能發(fā)揮重要作用。CXCL13和CCL5 MGZ and MNZ的CXCL13和CCL5在顯微解剖中比流式篩選更具向上調(diào)節(jié)性。之前的研究表明，CXCL13(BLC)對Peyers patches (PP)和許多外周淋巴結(jié)的發(fā)育有重要作用，可以控制B細(xì)胞的移動，從而形成B細(xì)胞環(huán)境。CCL5 (RANTES)矩陣相關(guān)趨化因子、激活的T細(xì)

5、胞、巨噬細(xì)胞和NK與CD44交互作用，激活MAPK路徑。CCL5在適當(dāng)?shù)臈l件下對細(xì)胞，尤其是相關(guān)MGZ B細(xì)胞識別抗原信號的激活有重要作用。IL-7R MGZ細(xì)胞高度表達(dá)IL-7R，與在MGZ配置中的作用一致。b除了在細(xì)胞分化和增殖中的作用外，IL-7R的表達(dá)對前體細(xì)胞聚集的次淋巴器官發(fā)育和器官組織構(gòu)成至關(guān)重要。問題1，b細(xì)胞有移動能力嗎？human airway epithelial monolayers promote selective trans migration of memory t cells : a trans epithelial model of lymphocyte m

6、igration into淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞粘在血管內(nèi)皮上，滲透粘膜下細(xì)胞外基質(zhì)，通過肺上皮進(jìn)入氣道。淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞通過上皮進(jìn)入氣道具有功能意義。牙齒細(xì)胞如何從外周血進(jìn)入呼吸道？外周血分離PBMC，(梯度密度離心)，1.5-2X107/毫升顯液37C BEGM字典平衡/字典溫度，transwell，損失：1.5-2X106/100微升37C，CDs、kawai k、tsunonh、matsu hashi m、kita yama j、OS adads Yone yamas、Watanabe t、Takahashi k、na gawa H. j allergy clin最近的報道中確認(rèn)了CD1

7、1b表達(dá)在CD8 T細(xì)胞中起著重要作用。外周血中的一些B細(xì)胞表達(dá)CD11b，但表達(dá)B細(xì)胞移動中的作用和CD11b的B細(xì)胞特征還沒有得到充分研究。研究目的是解釋CD11b在B細(xì)胞中表達(dá)CD11b的功能激活研究B細(xì)胞中表達(dá)的細(xì)胞的移動能力。外周血B細(xì)胞分類(根據(jù)IGD CD27)，CB3轉(zhuǎn)換為經(jīng)典內(nèi)存B細(xì)胞，從初始表示IgM轉(zhuǎn)換為表面表示IgG、IgA或IgE。CB2說明氣體的高頻突變、IgM表達(dá)、memory cells的組成細(xì)胞子集，但其特征和基因表達(dá)與一般cB3不同。活化B細(xì)胞的一部分分化為小淋巴細(xì)胞，停止增殖和分化，能存活幾個月到幾年，再次接觸相同抗原時，快速激活和分化，抗體潛伏期短，抗體

8、水平，維持時間可能會延長。這種B細(xì)胞叫做內(nèi)存B細(xì)胞。只有表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)CD27的B細(xì)胞才能在有絲分裂原子極下分泌抗體，因此CD27可以用作區(qū)分天然(naive) B細(xì)胞和抗原刺激的成熟B細(xì)胞的標(biāo)記。未成熟的B細(xì)胞一旦接觸到自己的抗原，就會凋亡，直到同時表達(dá)IgD，才會成為成熟的B細(xì)胞(cB2)。成熟的B細(xì)胞被轉(zhuǎn)移到外周免疫器官或組織，由抗原激活，并能變成抗體分泌的漿細(xì)胞或抗原的再接觸快速反應(yīng)的記憶細(xì)胞(cB3)，未成功完成成熟發(fā)育的B會枯萎死亡。分類標(biāo)準(zhǔn)，研究方法，外周血CD19 B細(xì)胞的分離類分析細(xì)胞表面分子。細(xì)胞遷移實驗。健康人的外周血，PBMC，F(xiàn)icoll-Paque梯度密度離心法，免疫

9、磁鐵分離系統(tǒng)，CD19 B細(xì)胞，F(xiàn)CAS:純度97，表型分析：CD19，cd27，igd FCASCD11b和CD11b-B細(xì)胞的表面分子差異：CD11b-B細(xì)胞大部分為IgD CD27-IgM CD25-，幾乎一半為CD5。CD11B-大部分是cB1細(xì)胞，CD11b細(xì)胞IgD、CD27、IgM、CD5表達(dá)是雙峰駝，CD25表達(dá)略高，因此可以推斷cB1、cB2、cB3具有CD11b、CD27:細(xì)胞成熟度。MIgM和mIgD:未成熟的B細(xì)胞表達(dá)m IgM，成熟的B細(xì)胞同時表達(dá)m IgM和m IgD，抗原刺激后B細(xì)胞m IgD很快區(qū)分CD5: B1，B2細(xì)胞。CD25: IL-2受體的子單位，激活

10、的B淋巴細(xì)胞，Memory B細(xì)胞和naive B細(xì)胞的CD11b表達(dá)，(A)大部分CD11b-B細(xì)胞為cB1 (91.6%)，CD11b細(xì)胞包含cB1(B)大多數(shù)cB1是CD11b- (77.4%)，大多數(shù)cB2和cB3內(nèi)存B細(xì)胞是CD11b (71.5%和81.3%) CB3的CD11b表達(dá)是cB2。這比CD11b表示法重要得多。Cb2 (open bar)、and cb3(shaded bar)purified B cells(left)、CD11b-b cells (middle)和CD 11b cells遷移cB3占移動細(xì)胞的40%，CB3低于之前的11.1%。遷移后的B細(xì)胞主要為C

11、D11b，以cB3為主，SDF-1和BLC顯著增加移動細(xì)胞的數(shù)量，添加anti-CD11b，防止mAb顯著抑制B細(xì)胞的移動。從以上數(shù)據(jù)可以推斷為CD11b，但趨化因子受體在memory B遷移中起著重要作用，這證實了CD11b的外周血表達(dá)占B細(xì)胞的30%。比較了CD11b和CD11b- B細(xì)胞表面分子的表達(dá)，CD11b-大部分是cB1細(xì)胞。cB1、cB2、cB3都是CD11b，與naive B細(xì)胞相比，Memory B細(xì)胞移動活性高，CD11b表達(dá)水平：cB3 cB2 cB1。遷移的B細(xì)胞主要是CD11B，以cB3為主，因此CD11b特異性通過抗體阻斷大大減少了移動細(xì)胞的數(shù)量，因此CD11b細(xì)

12、胞的移動能力比CD11b-B細(xì)胞強(qiáng)。CD11b細(xì)胞和CD11b-B細(xì)胞趨化因子受體的表達(dá)沒有差異，遷移受CD11b mAb的影響，因此遷移的差異不依賴趨化因子受體，而是依賴CD11b。討論，之前報道了老鼠B-1細(xì)胞表達(dá)了CD11b。起初表現(xiàn)在腹腔內(nèi)，引發(fā)IgM，在宿主防御中起著重要作用。但是人的B細(xì)胞系統(tǒng)不同于老鼠。CD11B表達(dá)了一些外周血B細(xì)胞的報道，但CD11b細(xì)胞的功能活性需要進(jìn)一步研究。b細(xì)胞的移動盡管抑制了阻塞性CD11b抗體，但被抑制到40%。還可以遷移CD11b- B細(xì)胞的一小部分。這也表明CD11b以外的分子參與B細(xì)胞的遷移。有報道說其他黏附分子在B細(xì)胞巢中起著重要作用。整合

13、素41，47，E7，皮膚淋巴細(xì)胞抗原在每個B細(xì)胞亞群中表達(dá)，牙齒差異被認(rèn)為有助于解釋B細(xì)胞遷移的多樣性。根據(jù)淋巴器官表達(dá)各種配體，如vascular cell adhesion molecule 1(vcam 1)、mucosal(粘膜)adress in cell adhesion molecule、e-selectionMemory B細(xì)胞和naive B細(xì)胞徐璐有不同的傳遞系統(tǒng)。naive B細(xì)胞主要接受淋巴結(jié)、扁桃體、脾臟、Peyer s patches等次淋巴器官，陽性和陰性選擇。Naive B細(xì)胞表示低級CD11B，因此CD11B在返回巢中沒有重要作用。Memory B細(xì)胞轉(zhuǎn)移到淋巴器官(淋巴)，也到達(dá)腸固有層、肺間隔、感染皮膚、關(guān)節(jié)等淋巴結(jié)外的免疫效果部位。CD11b被認(rèn)為在memory B淋巴細(xì)胞流出中起著重要作用。b細(xì)胞