消毒與滅菌【知識淺析】

1、第四章 消毒與滅菌技術,教學情境： 醫(yī)院消毒水氣味 注射前皮膚消毒 曬被子 熏蒸食醋預防感冒 等生活經(jīng)歷,1,行業(yè)學習,第四章 消毒與滅菌技術 P19,滅菌：利用物理和化學方法殺滅或除去物料及設備中所有微生物的過程，包括繁殖體和芽孢。 消毒：用物理或化學方法殺死物料、容器、環(huán)境中的一切病原微生物，一般只能殺死營養(yǎng)細胞而不能殺死芽孢。 消毒不一定能達到殺菌的要求，而滅菌能達到消毒的要求。 思考：消毒與滅菌的概念及區(qū)別,2,行業(yè)學習,第一節(jié) 化學滅菌方法P19,原理：某些化學藥劑能與微生物細胞物質發(fā)生反應而具有殺菌作用。如甲醛、氯（或次氯酸鈉）、高錳酸鉀、環(huán)氧乙烷、季銨鹽（如新潔爾滅）等。 適用范

2、圍：化學藥劑適于接種室、培養(yǎng)室等環(huán)境的滅菌，接種操作前小型器具的滅菌等。 化學藥品的滅菌使用方法，根據(jù)滅菌對象的不同有浸泡、添加、擦拭、噴灑、氣態(tài)熏蒸等。,3,行業(yè)學習,1醇：70-75酒精溶液 75酒精溶液的殺菌作用在于使細胞脫水，引起蛋白質凝固變性。對營養(yǎng)細胞、病毒、霉菌孢子均有殺死作用，但對細菌的芽孢殺死作用較差。常用于皮膚和器具表面殺菌。苯氧乙醇2%水溶液 2酸： 乳酸（丙醇酸、乙羥基丙酸)，乙酸，過氧乙酸 過氧乙酸是強氧化劑，它是廣譜、高效、速效的化學殺菌劑，對營養(yǎng)細胞、細菌芽孢、真菌孢子和病毒都有殺滅作用。 3堿：石灰水 （熟石灰的水溶液） 4酚類：苯酚（石炭酸、C6H6O）毒性較

3、大，易污染環(huán)境，且水溶性差，使應用受到限制，而酚類衍生物的使用，擴大了作為消毒劑的使用范圍。來蘇兒（甲酚皂溶液）,4,行業(yè)學習,5醛：甲醛 甲醛(HCHO)是強還原劑，它能與蛋白質的氨基結合，使蛋白質變性，對氨基和蛋白質的變性有較強活性，這是用甲醛作為滅菌劑的根據(jù)。使用時可以以2份37甲醛溶液與1份KMnO4混合，或者將37甲醛溶液直接加熱，產生氣態(tài)甲醛用于滅菌。甲醛滅菌的缺點是穿透力差。 福爾馬林（甲醛30-40%水溶液） 戊二醛 在酸性條件下，不具有殺死芽孢的能力，只有在堿性條件下，才具有殺死芽孢的能力，常用2的溶液，常用于器具、儀器和工具等滅菌。,5,行業(yè)學習,6氧化劑： 高錳酸鉀 高錳

4、酸鉀溶液的滅菌作用是使蛋白質、氨基酸氧化，使微生物死亡，一般用0.10.25的溶液。 氯氣 Cl2+H2O HClO+HCl 次氯酸 鹽酸 過氧化氫，環(huán)氧乙烷，漂白粉（含氯消毒劑）， 漂白粉：（次氯酸鈉、氯化鈣、氫氧化鈉的混合物） 漂白粉的化學名稱是次氯酸鹽(次氯酸鈉，NaOCl)，它是強氧化劑，也是廉價易得的滅菌劑。它的殺菌作用是次氯酸鈉分解為次亞氯酸，后者不穩(wěn)定，在水溶液中分解為新生態(tài)氧和氯，使細菌受強烈氧化作用而導致死亡，對殺死細菌和噬菌體均有效。 臭氧：原理（常溫常壓下）O3=O2+O(單個氧原子）。特點：不存在任何有毒殘留物，稱為無污染消毒劑。適用：環(huán)境消毒,6,行業(yè)學習,去垢劑：新

5、潔爾滅 （苯扎溴銨、溴化芐烷銨） 新潔爾滅是表面活性劑類潔凈消毒劑。它在水溶液中以陽離子形式與菌體表面結合，引起菌體外膜損傷和蛋白變性。10 min能殺死營養(yǎng)細胞，但對細菌芽孢幾乎沒有殺滅作用。一般用于器具和生產環(huán)境的消毒，不能與合成洗滌劑合用，不能接觸鋁制品。,7,行業(yè)學習,8,行業(yè)學習,第二節(jié) 物理滅菌的方法P13,（一）干熱滅菌法 進行干熱滅菌時，微生物細胞發(fā)生氧化，微生物體內蛋白質變性和電解質濃縮引起中毒等作用，其中氧化作用導致微生物死亡是主要依據(jù)。 由于微生物對干熱的耐受力比對濕熱強得多，故干熱滅菌所需的溫度要高，時間要長，一般160170 ，11.5 h。 實際應用時，對一些要求保

6、持干燥的實驗器具和材料可以采用干熱滅菌法,9,行業(yè)學習,（一）干熱滅菌法,是一種極端的手段，溫度高、時間長。 原理：氧化作用是干熱滅菌的主要根據(jù)。 160-170持續(xù)2h或170-180持續(xù)1h； 18045min, 180持續(xù)2h或25045min； 140持續(xù)3h； 160保溫1 h。自然降溫至60才能開啟箱門取出材料。 主要針對必須保持干燥的實驗器具或材料（培養(yǎng)皿、接種針、固定化細胞用的載體材料等）。,10,行業(yè)學習,（二）火焰滅菌法 利用火焰直接殺死微生物的滅菌法稱為火焰滅菌法。該法方法對設備要求低，操作簡單，滅菌徹底，但使用范圍有限，僅適用于接種針、玻璃棒、三角瓶口等的滅菌。,11,

7、行業(yè)學習,（三） 濕熱滅菌技術P11,濕熱蒸汽比干熱空氣穿透力大，易使菌體蛋白變性而使微生物死亡。利用飽和蒸汽進行滅菌的方法稱為濕熱滅菌法。 1流通蒸汽法。只能殺死營養(yǎng)體而不能殺死芽孢 2間歇蒸汽滅菌法。適用于不耐高溫的物品，可達到完全滅菌的目的。 3高壓蒸汽滅菌法。徹底迅速的滅菌方法，最常用。,12,行業(yè)學習,（三） 濕熱滅菌技術P11,1流通蒸汽法。將材料置于蒸鍋或蒸鍋的籠屜上，蓋好蓋，待有蒸汽均勻冒出后，持續(xù)15min。只能殺死營養(yǎng)體而不能殺死芽孢。 簡易消毒法，適用與消毒餐具、衣褲等的消毒,13,行業(yè)學習,（三） 濕熱滅菌技術P11,2間歇蒸汽滅菌法。 100流通蒸汽加熱30min，培

8、養(yǎng)箱內常溫過夜或24h后芽孢萌發(fā)成營養(yǎng)體，再用蒸汽滅菌。反復三次即可?？蛇_到完全滅菌的目的。 適用于不耐高溫的物品，如血清培養(yǎng)基的滅菌。,14,行業(yè)學習,（三） 濕熱滅菌技術P11,3高壓蒸汽滅菌法。一般我們所說的濕熱滅菌法指的就是高溫蒸汽滅菌法。常用高壓蒸汽滅菌器。條件為121 ，101KPa，1530 min，因為蒸汽穿透能力強，滅菌效果好，所以濕熱滅菌為最基本的滅菌方法。 原理：借助于蒸汽釋放的熱能使微生物細胞中的蛋白質、酶和核酸分子內部的化學鍵，特別是氫鍵受到破壞，引起不可逆的變性，使微生物死亡。,15,行業(yè)學習,（三） 濕熱滅菌技術3高壓蒸汽滅菌法,由于蒸汽有很強的穿透能力，濕熱滅菌

9、對耐熱芽孢桿菌來說，溫度升高10 時，滅菌速度常數(shù)可增加810倍，對營養(yǎng)細胞更高。 蒸汽來源方便，價格低廉，滅菌效果可靠，是目前最為常用的滅菌方法。因此實驗室、工廠化生產中廣泛采用濕熱滅菌。濕熱滅菌有經(jīng)濟快速等特點,16,行業(yè)學習,第三節(jié) 其他滅菌技術,低溫法 巴氏消毒法 煮沸消毒法 輻射法 滲透壓法 機械除菌法（過濾除菌）,17,行業(yè)學習,1、煮沸滅菌法 方法：煮沸15-30min,可殺滅營養(yǎng)體； 煮沸1-2h,可殺滅芽孢。加鹽（2%碳酸氫鈉）可加速芽孢死亡 適用于：金屬器械，食具。,18,行業(yè)學習,2、巴氏消毒法 原理：利用病原體不耐熱，用適當?shù)臏?度與保溫時間處理后即可將其全 部殺死。

10、目的：殺滅營養(yǎng)體 方法: (1)63C，保持30min (2) 74C,保持30s 適用:牛奶，發(fā)酵產品,19,行業(yè)學習,3.輻射滅菌法,定義：紫外線、高能電磁波或放射性物質產生的高能粒子能起到滅菌的作用。 種類： 紫外線殺菌 微波消毒 60Co滅菌,20,行業(yè)學習,4.紫外線殺菌,波長為200-300nm的紫外線有殺菌能力。256-266nm殺菌力最強。 原理：使DNA鏈斷裂；抑制DNA正常復制。 紫外線對芽孢和營養(yǎng)細胞都能起作用，但細菌芽孢和霉菌孢子對紫外線的抵抗力強。 紫外線的穿透力低，僅適用于表面滅菌和無菌室、培養(yǎng)間等空間的滅菌，且距照射物不超過1.2 m；對固體物料滅菌不徹底，也不能

11、用于液體物料的滅菌。,21,行業(yè)學習,5.微波消毒： 原理：利用微波（波長短頻率高的電磁波）進行加熱從而殺菌。 適用：牛奶，包裝好的保鮮食品；玻璃器械，敷料。 優(yōu)點：加熱快、均勻，設備簡單易操作 缺點：不能對金屬器械進行微波消毒；微波穿透力弱；高劑量的微波對人體有害，要防止泄露,22,行業(yè)學習,6.60Co滅菌,60Co照射滅菌，被滅菌的物體溫度變化小，僅僅升高5C。 適用于醫(yī)療器械、醫(yī)用塑料制品、外科敷料、污染物、生物組織、生物制品、抗生素、乳糖、動物飼料等。 要求高。要專人操作，專門的防護措施，專門的使用基地等。,23,行業(yè)學習,7.機械除菌法,（1）機械擦拭（略） （2）過濾除菌 定義：利用過濾方法阻攔微生物達到除菌的目的。 此法僅適用于澄清液體和氣體的除菌。工業(yè)上常用過濾法大量制備無菌空氣，供好氧微生物培養(yǎng)過程使用。,24,行業(yè)學習,（2）過濾除菌,常用濾菌器：蔡氏濾菌器；濾燭濾菌器；玻璃濾菌器；濾膜濾菌器。（P16圖2-3） 常用濾材：玻璃棉，陶瓷，石棉。細菌過濾器常用直徑為0.2-0.45 m的醋酸纖維素濾膜。,25,行業(yè)學習,空氣過濾除菌器,26,行業(yè)學習,