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中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) GB 4789.42010 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn) National food safety standard Food microbiological examination: Salmonella 中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部中 華 人 民 共 和 國(guó) 衛(wèi) 生 部 發(fā)布 2010-03-26 發(fā)布 2010-06-01 實(shí)施 GB 4789.42010 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 GB/T 4789.4-2008食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn) 。 本標(biāo)準(zhǔn)與 GB/T 4789.4-2008 相比,主要變化如下: 修改了標(biāo)準(zhǔn)的中英文名稱; 修改了標(biāo)準(zhǔn)的范圍; 修改了培養(yǎng)基和試劑; 修改了設(shè)備和材料; 修改了附錄 A。 本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A、附錄 B 為規(guī)范性附錄。 本標(biāo)準(zhǔn)所代替的歷次版本發(fā)布情況為: GB 4789.4-84、GB 4789.4-1994、GB/T 4789.4-2003、GB/T 4789.4-2008。 GB 4789.42010 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品微生物學(xué)檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn) 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中沙門(mén)氏菌(Salmonella)的檢驗(yàn)方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于食品中沙門(mén)氏菌的檢驗(yàn)。 2 設(shè)備和材料 除微生物實(shí)驗(yàn)室常規(guī)滅菌及培養(yǎng)設(shè)備外,其他設(shè)備和材料如下: 2.1 冰箱:2 5 。 2.2 恒溫培養(yǎng)箱:36 1 ,42 1 。 2.3 均質(zhì)器。 2.4 振蕩器。 2.5 電子天平:感量 0.1 g。 2.6 無(wú)菌錐形瓶:容量 500 mL,250 mL。 2.7 無(wú)菌吸管:1 mL(具 0.01 mL 刻度) 、10 mL(具 0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸頭。 2.8 無(wú)菌培養(yǎng)皿:直徑 90 mm。 2.9 無(wú)菌試管:3 mm50 mm、10 mm75 mm。 2.10 無(wú)菌毛細(xì)管。 2.11 pH 計(jì)或 pH 比色管或精密 pH 試紙。 2.12 全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng)。 3 培養(yǎng)基和試劑 3.1 緩沖蛋白胨水(BPW) : 見(jiàn)附錄 A 中 A.1。 3.2 四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液:見(jiàn)附錄 A 中 A.2。 3.3 亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液:見(jiàn)附錄 A 中 A.3。 3.4 亞硫酸鉍(BS)瓊脂:見(jiàn)附錄 A 中 A.4。 3.5 HE 瓊脂:見(jiàn)附錄 A 中 A.5。 3.6 木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂:見(jiàn)附錄 A 中 A.6。 GB 4789.42010 2 3.7 沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基。 3.8 三糖鐵(TSI)瓊脂:見(jiàn)附錄 A 中 A.7。 3.9 蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑:見(jiàn)附錄 A 中 A.8。 3.10 尿素瓊脂(pH 7.2) :見(jiàn)附錄 A 中 A.9。 3.11 氰化鉀 (KCN) 培養(yǎng)基:見(jiàn)附錄 A 中 A.10。 3.12 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基:見(jiàn)附錄 A 中 A.11。 3.13 糖發(fā)酵管:見(jiàn)附錄 A 中 A.12。 3.14 鄰硝基酚 -D 半乳糖苷(ONPG)培養(yǎng)基:見(jiàn)附錄 A 中 A.13。 3.15 半固體瓊脂:見(jiàn)附錄 A 中 A.14。 3.16 丙二酸鈉培養(yǎng)基:見(jiàn)附錄 A 中 A.15。 3.17 沙門(mén)氏菌 O 和 H 診斷血清。 3.18 生化鑒定試劑盒。 GB 4789.42010 3 4 檢驗(yàn)程序 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)程序見(jiàn)圖 1。 圖 1 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)程序 5 操作步驟 5.1 前增菌 稱取 25 g(mL)樣品放入盛有 225 mL BPW 的無(wú)菌均質(zhì)杯中,以 8 000 r/min10 000 r/min 均質(zhì) 1 min2 min,或置于盛有 225 mL BPW 的無(wú)菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打 1 min2 min。若樣 品為液態(tài), 不需要均質(zhì), 振蕩混勻。 如需測(cè)定 pH 值, 用 1 mol/mL 無(wú)菌 NaOH 或 HCl 調(diào) pH 至 6.80.2。 檢樣 36 1 ,8 h18 h TSI,賴氨酸,NA, 靛基質(zhì), 尿素 (pH 7.2),KCN 挑取可疑菌落 BS XLD(或 HE、顯色培養(yǎng)基) 1 mL+TTB 10 mL 1 mL+SC 10 mL 25 g(mL)樣品+225 mLBPW H2S+ 靛 基 質(zhì) - 尿素-KCN- 賴氨酸 + H2S+ 靛 基 質(zhì) + 尿素- KCN- 賴氨酸+ H2S-靛基質(zhì)-尿 素-KCN- 賴氨酸+/- 反應(yīng)結(jié)果與左 側(cè)描述不符 生化鑒定試劑盒或全 自動(dòng)微生物生化鑒定 系統(tǒng)+ 42 1 ,18 h24 h 36 1 ,18 h24 h 36 1 ,40 h48 h 36 1 ,18 h24 h 甘露醇+、山梨醇+ ONPG- 報(bào)告 非沙門(mén)氏菌 沙門(mén)氏菌,血清學(xué)試驗(yàn) GB 4789.42010 4 無(wú)菌操作將樣品轉(zhuǎn)至 500 mL 錐形瓶中,如使用均質(zhì)袋,可直接進(jìn)行培養(yǎng),于 36 1 培養(yǎng) 8 h 18h。 如為冷凍產(chǎn)品,應(yīng)在 45 以下不超過(guò) 15 min,或 2 5 不超過(guò) 18 h 解凍。 5.2 增菌 輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)過(guò)的樣品混合物,移取 1 mL,轉(zhuǎn)種于 10 mL TTB 內(nèi),于 42 1 培養(yǎng) 18 h24 h。同時(shí),另取 1 mL,轉(zhuǎn)種于 10 mL SC 內(nèi),于 36 1 培養(yǎng) 18 h24 h。 5.3 分離 分別用接種環(huán)取增菌液 1 環(huán),劃線接種于一個(gè) BS 瓊脂平板和一個(gè) XLD 瓊脂平板(或 HE 瓊脂 平板或沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板) 。于 36 1 分別培養(yǎng) 18 h24 h (XLD 瓊脂平板、HE 瓊脂 平板、沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基平板) 或 40 h48 h (BS 瓊脂平板) ,觀察各個(gè)平板上生長(zhǎng)的菌落, 各個(gè)平板上的菌落特征見(jiàn)表 1。 表 1 沙門(mén)氏菌屬在不同選擇性瓊脂平板上的菌落特征 選擇性瓊脂平板 沙門(mén)氏菌 BS 瓊脂 菌落為黑色有金屬光澤、棕褐色或灰色,菌落周?chē)囵B(yǎng)基可呈黑色或棕色;有些 菌株形成灰綠色的菌落,周?chē)囵B(yǎng)基不變。 HE 瓊脂 藍(lán)綠色或藍(lán)色,多數(shù)菌落中心黑色或幾乎全黑色;有些菌株為黃色,中心黑色或 幾乎全黑色。 XLD 瓊脂 菌落呈粉紅色,帶或不帶黑色中心,有些菌株可呈現(xiàn)大的帶光澤的黑色中心,或 呈現(xiàn)全部黑色的菌落;有些菌株為黃色菌落,帶或不帶黑色中心。 沙門(mén)氏菌屬顯色培養(yǎng)基 按照顯色培養(yǎng)基的說(shuō)明進(jìn)行判定。 5.4 生化試驗(yàn) 5.4.1 自選擇性瓊脂平板上分別挑取 2 個(gè)以上典型或可疑菌落,接種三糖鐵瓊脂,先在斜面劃線, 再于底層穿刺;接種針不要滅菌,直接接種賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基和營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板,于 36 1 培養(yǎng) 18 h24 h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至 48 h。在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi),沙門(mén)氏菌屬 的反應(yīng)結(jié)果見(jiàn)表 2。 表 2 沙門(mén)氏菌屬在三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基內(nèi)的反應(yīng)結(jié)果 三糖鐵瓊脂 初步判斷 斜面 底層 產(chǎn)氣 硫化氫 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 K A () () 可疑沙門(mén)氏菌屬 K A () () 可疑沙門(mén)氏菌屬 A A () () 可疑沙門(mén)氏菌屬 A A / / 非沙門(mén)氏菌 K K / / / 非沙門(mén)氏菌 注:K:產(chǎn)堿,A:產(chǎn)酸;:陽(yáng)性,:陰性;() :多數(shù)陽(yáng)性,少數(shù)陰性;/:陽(yáng)性或陰性。 5.4.2 接種三糖鐵瓊脂和賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基的同時(shí),可直接接種蛋白胨水 (供做靛基質(zhì)試 驗(yàn)) 、尿素瓊脂 (pH7.2) 、氰化鉀 (KCN) 培養(yǎng)基,也可在初步判斷結(jié)果后從營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑 取可疑菌落接種。于 36 1 培養(yǎng) 18 h24 h,必要時(shí)可延長(zhǎng)至 48 h,按表 3 判定結(jié)果。將已挑菌 落的平板儲(chǔ)存于 2 5 或室溫至少保留 24 h,以備必要時(shí)復(fù)查。 GB 4789.42010 5 表 3 沙門(mén)氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表 反應(yīng)序號(hào) 硫化氫 (H2S) 靛基質(zhì)pH 7.2 尿素氰化鉀 (KCN) 賴氨酸脫羧酶 A1 A2 A3 / 注:陽(yáng)性;陰性;/陽(yáng)性或陰性。 5.4.2.1 反應(yīng)序號(hào) A1:典型反應(yīng)判定為沙門(mén)氏菌屬。如尿素、KCN 和賴氨酸脫羧酶 3 項(xiàng)中有 1 項(xiàng)異常,按表 4 可判定為沙門(mén)氏菌。 如有 2 項(xiàng)異常為非沙門(mén)氏菌。 表 4 沙門(mén)氏菌屬生化反應(yīng)初步鑒別表 pH 7.2 尿素 氰化鉀(KCN) 賴氨酸 脫羧酶 判 定 結(jié) 果 甲型副傷寒沙門(mén)氏菌(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果) 沙門(mén)氏菌或(要求符合本群生化特性) 沙門(mén)氏菌個(gè)別變體(要求血清學(xué)鑒定結(jié)果) 注:表示陽(yáng)性;表示陰性。 5.4.2.2 反應(yīng)序號(hào) A2:補(bǔ)做甘露醇和山梨醇試驗(yàn),沙門(mén)氏菌靛基質(zhì)陽(yáng)性變體兩項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果均為陽(yáng) 性,但需要結(jié)合血清學(xué)鑒定結(jié)果進(jìn)行判定。 5.4.2.3 反應(yīng)序號(hào) A3:補(bǔ)做 ONPG。ONPG 陰性為沙門(mén)氏菌,同時(shí)賴氨酸脫羧酶陽(yáng)性,甲型副傷寒 沙門(mén)氏菌為賴氨酸脫羧酶陰性。 5.4.2.4 必要時(shí)按表 5 進(jìn)行沙門(mén)氏菌生化群的鑒別。 表 5 沙門(mén)氏菌屬各生化群的鑒別 項(xiàng) 目 衛(wèi)矛醇 山梨醇 水楊苷 ONPG 丙二酸鹽 KCN 注:表示陽(yáng)性; 表示陰性。 5.4.3 如選擇生化鑒定試劑盒或全自動(dòng)微生物生化鑒定系統(tǒng),可根據(jù) 5.4.1 的初步判斷結(jié)果,從營(yíng) 養(yǎng)瓊脂平板上挑取可疑菌落,用生理鹽水制備成濁度適當(dāng)?shù)木鷳乙海褂蒙b定試劑盒或全自動(dòng) 微生物生化鑒定系統(tǒng)進(jìn)行鑒定。 5.5 血清學(xué)鑒定 5.5.1 抗原的準(zhǔn)備 一般采用 1.21.5瓊脂培養(yǎng)物作為玻片凝集試驗(yàn)用的抗原。 O 血清不凝集時(shí),將菌株接種在瓊脂量較高的 (如 23) 培養(yǎng)基上再檢查;如果是由于 Vi 抗原的存在而阻止了 O 凝集反應(yīng)時(shí),可挑取菌苔于 1 mL 生理鹽水中做成濃菌液,于酒精燈火焰 GB 4789.42010 6 上煮沸后再檢查。H 抗原發(fā)育不良時(shí),將菌株接種在 0.550.65半固體瓊脂平板的中央,俟菌落 蔓延生長(zhǎng)時(shí),在其邊緣部分取菌檢查;或?qū)⒕晖ㄟ^(guò)裝有 0.30.4半固體瓊脂的小玻管 1 次2 次,自遠(yuǎn)端取菌培養(yǎng)后再檢查。 5.5.2 多價(jià)菌體抗原(O)鑒定 在玻片上劃出 2 個(gè)約 1 cm2 cm 的區(qū)域,挑取 1 環(huán)待測(cè)菌,各放 1/2 環(huán)于玻片上的每一區(qū)域上 部,在其中一個(gè)區(qū)域下部加 1 滴多價(jià)菌體(O)抗血清,在另一區(qū)域下部加入 1 滴生理鹽水,作為對(duì) 照。再用無(wú)菌的接種環(huán)或針?lè)謩e將兩個(gè)區(qū)域內(nèi)的菌落研成乳狀液。將玻片傾斜搖動(dòng)混合 1 min,并對(duì) 著黑暗背景進(jìn)行觀察,任何程度的凝集現(xiàn)象皆為陽(yáng)性反應(yīng)。 5.5.3 多價(jià)鞭毛抗原(H)鑒定 同 5.5.2。 5.5.4 血清學(xué)分型(選做項(xiàng)目) 5.5.4.1 O 抗原的鑒定 用 AF 多價(jià) O 血清做玻片凝集試驗(yàn),同時(shí)用生理鹽水做對(duì)照。在生理鹽水中自凝者為粗糙形 菌株,不能分型。 被 AF 多價(jià) O 血清凝集者,依次用 O4;O3、O10;O7;O8;O9;O2 和 O11 因子血清做凝集 試驗(yàn)。根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果,判定 O 群。被 O3、O10 血清凝集的菌株,再用 O10、O15、O34、O19 單因 子血清做凝集試驗(yàn),判定 E1、E2、E3、E4 各亞群,每一個(gè) O 抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù) O 單因 子血清的檢查結(jié)果,沒(méi)有 O 單因子血清的要用兩個(gè) O 復(fù)合因子血清進(jìn)行核對(duì)。 不被 AF 多價(jià) O 血清凝集者,先用 9 種多價(jià) O 血清檢查,如有其中一種血清凝集,則用這種 血清所包括的 O 群血清逐一檢查,以確定 O 群。每種多價(jià) O 血清所包括的 O 因子如下: O 多價(jià) 1 A,B,C,D,E,F(xiàn),群 (并包括 6,14 群) O 多價(jià) 2 13,16,17,18,21 群 O 多價(jià) 3 28,30,35,38,39 群 O 多價(jià) 4 40,41,42,43 群 O 多價(jià) 5 44,45,47,48 群 O 多價(jià) 6 50,51,52,53 群 O 多價(jià) 7 55,56,57,58 群 O 多價(jià) 8 59,60,61,62 群 O 多價(jià) 9 63,65,66,67 群 5.5.4.2 H 抗原的鑒定 屬于 AF 各 O 群的常見(jiàn)菌型,依次用表 6 所述 H 因子血清檢查第 1 相和第 2 相的 H 抗原。 表 6 AF 群常見(jiàn)菌型 H 抗原表 O 群 第 1 相 第 2 相 A B B C1 C2 D( 不產(chǎn)氣的) D(產(chǎn)氣的) E1 E4 E4 a g,f,s i,b,d k,v,r,c b,d,r d g,m,p,q h,v g,s,t i 無(wú) 無(wú) 2 5,Z15 2,5 無(wú) 無(wú) 6,w,x 無(wú) GB 4789.42010 7 不常見(jiàn)的菌型,先用 8 種多價(jià) H 血清檢查,如有其中一種或兩種血清凝集,則再用這一種或兩種 血清所包括的各種 H 因子血清逐一檢查,以第 1 相和第 2 項(xiàng)的 H 抗原。8 種多價(jià) H 血清所包括的 H 因子如下: H 多價(jià) 1 a,b,c,d,i H 多價(jià) 2 eh,enx,enz15,fg,gms,gpu,gp,gq,mt,gz51 H 多價(jià) 3 k,r,y,z,z10,lv,lw,lz13,lz28,lz40 H 多價(jià) 4 1,2;1,5;1,6;1,7;z6 H 多價(jià) 5 z4z23,z4z24,z4z32,z29,z35,z36,z38 H 多價(jià) 6 z39,z41,z42,z44 H 多價(jià) 7 z52,z53,z54,z55 H 多價(jià) 8 z56,z57,z60,z61,z62 每一個(gè) H 抗原成分的最后確定均應(yīng)根據(jù) H 單因子血清的檢查結(jié)果, 沒(méi)有 H 單因子血清的要用兩 個(gè) H 復(fù)合因子血清進(jìn)行核對(duì)。 檢出第 1 相 H 抗原而未檢出第 2 相 H 抗原的或檢出第 2 相 H 抗原而未檢出第 1 相 H 抗原的,可 在瓊脂斜面上移種 12 代后再檢查。 如仍只檢出一個(gè)相的 H 抗原, 要用位相變異的方法檢查其另一 個(gè)相。單相菌不必做位相變異檢查。 位相變異試驗(yàn)方法如下: 小玻管法: 將半固體管(每管約 1 mL2 mL) 在酒精燈上溶化并冷至 50 ,取已知相的 H 因子血清 0.05 mL0.1 mL,加入于溶化的半固體內(nèi),混勻后,用毛細(xì)吸管吸取分裝于供位相變異試 驗(yàn)的小玻管內(nèi),俟凝固后,用接種針挑取待檢菌,接種于一端。將小玻管平放在平皿內(nèi),并在其旁 放一團(tuán)濕棉花,以防瓊脂中水分蒸發(fā)而干縮,每天檢查結(jié)果,待另一相細(xì)菌解離后,可以從另一端 挑取細(xì)菌進(jìn)行檢查。培養(yǎng)基內(nèi)血清的濃度應(yīng)有適當(dāng)?shù)谋壤?,過(guò)高時(shí)細(xì)菌不能生長(zhǎng),過(guò)低時(shí)同一相細(xì) 菌的動(dòng)力不能抑制。一般按原血清 1:2001:800 的量加入。 小倒管法:將兩端開(kāi)口的小玻管 (下端開(kāi)口要留一個(gè)缺口,不要平齊) 放在半固體管內(nèi),小玻 管的上端應(yīng)高出于培養(yǎng)基的表面,滅菌后備用。臨用時(shí)在酒精燈上加熱溶化,冷至 50 ,挑取因子 血清 1 環(huán),加入小套管中的半固體內(nèi),略加攪動(dòng),使其混勻,俟凝固后,將待檢菌株接種于小套管 中的半固體表層內(nèi),每天檢查結(jié)果,待另一相細(xì)菌解離后,可從套管外的半固體表面取菌檢查,或 轉(zhuǎn)種 1軟瓊脂斜面,于 37 培養(yǎng)后再做凝集試驗(yàn)。 簡(jiǎn)易平板法:將 0.350.4半固體瓊脂平板烘干表面水分,挑取因子血清 1 環(huán),滴在半固體 平板表面,放置片刻,待血清吸收到瓊脂內(nèi),在血清部位的中央點(diǎn)種待檢菌株,培養(yǎng)后,在形成蔓 延生長(zhǎng)的菌苔邊緣取菌檢查。 5.5.4.3 Vi 抗原的鑒定 用 Vi 因子血清檢查。已知具有 Vi 抗原的菌型有:傷寒沙門(mén)氏菌,丙型副傷寒沙門(mén)氏菌,都柏林 沙門(mén)氏菌。 5.5.4.4 菌型的判定 根據(jù)血清學(xué)分型鑒定的結(jié)果,按照附錄 A 或有關(guān)沙門(mén)氏菌屬抗原表判定菌型。 6 結(jié)果與報(bào)告 綜合以上生化試驗(yàn)和血清學(xué)鑒定的結(jié)果,報(bào)告25 g(mL)樣品中檢出或未檢出沙門(mén)氏菌。 GB 4789.42010 8 附錄A (規(guī)范性附錄) 培養(yǎng)基和試劑 A.1 緩沖蛋白胨水(BPW) A.1.1 成分 蛋白胨 10.0 g 氯化鈉 5.0 g 磷酸氫二鈉(含 12 個(gè)結(jié)晶水) 9.0 g 磷酸二氫鉀 1.5 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.20.2 A.1.2 制法 將各成分加入蒸餾水中,攪混均勻,靜置約 10 min,煮沸溶解,調(diào)節(jié) pH,高壓滅菌 121 ,15 min。 A.2 四硫磺酸鈉煌綠(TTB)增菌液 A.2.1 基礎(chǔ)液 蛋白胨 10.0 g 牛肉膏 5.0 g 氯化鈉 3.0 g 碳酸鈣 45.0 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.00.2 除碳酸鈣外,將各成分加入蒸餾水中,煮沸溶解,再加入碳酸鈣,調(diào)節(jié) pH,高壓滅菌 121 , 20 min。 A.2.2 硫代硫酸鈉溶液 硫代硫酸鈉(含 5 個(gè)結(jié)晶水) 50.0 g 蒸餾水 加至 100 mL 高壓滅菌 121 ,20 min。 A.2.3 碘溶液 碘 片 20.0 g 碘化鉀 25.0 g 蒸餾水 加至 100 mL 將碘化鉀充分溶解于少量的蒸餾水中,再投入碘片,振搖玻瓶至碘片全部溶解為止,然后加蒸 餾水至規(guī)定的總量,貯存于棕色瓶?jī)?nèi),塞緊瓶蓋備用。 A.2.4 0.5煌綠水溶液 煌綠 0.5 g 蒸餾水 100 mL 溶解后,存放暗處,不少于 1d,使其自然滅菌。 A.2.5 牛膽鹽溶液 牛膽鹽 10.0 g GB 4789.42010 9 蒸餾水 100 mL 加熱煮沸至完全溶解,高壓滅菌 121 ,20 min。 A.2.6 制法 基礎(chǔ)液 900 mL 硫代硫酸鈉溶液 100 mL 碘溶液 20.0 mL 煌綠水溶液 2.0 mL 牛膽鹽溶液 50.0 mL 臨用前,按上列順序,以無(wú)菌操作依次加入基礎(chǔ)液中,每加入一種成分,均應(yīng)搖勻后再加入另 一種成分。 A.3 亞硒酸鹽胱氨酸(SC)增菌液 A.3.1 成分 蛋白胨 5.0 g 乳糖 4.0 g 磷酸氫二鈉 10.0 g 亞硒酸氫鈉 4.0 g L-胱氨酸 0.01 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.00.2 A.3.2 制法 除亞硒酸氫鈉和 L-胱氨酸外,將各成分加入蒸餾水中,煮沸溶解,冷至 55 以下,以無(wú)菌操作 加入亞硒酸氫鈉和 1 g/L L-胱氨酸溶液溶液 10 mL(稱取 0.1 g L-胱氨酸,加 1 mol/L 氫氧化鈉溶液 15 mL,使溶解,再加無(wú)菌蒸餾水至 100 mL 即成,如為 DL-胱氨酸,用量應(yīng)加倍) 。搖勻,調(diào)節(jié) pH。 A.4 亞硫酸鉍(BS)瓊脂 A.4.1 成分 蛋白胨 10.0 g 牛肉膏 5.0 g 葡萄糖 5.0 g 硫酸亞鐵 0.3 g 磷酸氫二鈉 4.0 g 煌 綠 0.025 g 或 5.0gL 水溶液 5.0mL 檸檬酸鉍銨 2.0 g 亞硫酸鈉 6.0 g 瓊 脂 18.0 g20 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.50.2 A.4.2 制法 將前三種成分加入 300 mL 蒸餾水(制作基礎(chǔ)液) ,硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉分別加入 20 mL 和 30 mL 蒸餾水中,檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉分別加入另一 20 mL 和 30 mL 蒸餾水中,瓊脂加入 600 mL 蒸 餾水中。然后分別攪拌均勻,煮沸溶解。冷至 80 左右時(shí),先將硫酸亞鐵和磷酸氫二鈉混勻,倒入 基礎(chǔ)液中,混勻。將檸檬酸鉍銨和亞硫酸鈉混勻,倒入基礎(chǔ)液中,再混勻。調(diào)節(jié) pH,隨即傾入瓊脂 液中,混合均勻,冷至 50 55 。加入煌綠溶液,充分混勻后立即傾注平皿。 GB 4789.42010 10 注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱,避免降低其選擇性,貯于室溫暗處,超過(guò) 48 h 會(huì) 降低其選擇性,本培養(yǎng)基宜于當(dāng)天制備,第二天使用。 A.5 HE 瓊脂(Hektoen Enteric Agar) A.5.1 成分 蛋白胨 12.0 g 牛肉膏 3.0 g 乳糖 12.0 g 蔗糖 12.0 g 水楊素 2 .0 g 膽鹽 20.0 g 氯化鈉 5.0 g 瓊脂 18.0 g20.0 g 蒸餾水 1 000 mL 0.4溴麝香草酚藍(lán)溶液 16.0 mL Andrade 指示劑 20.0 mL 甲液 20.0 mL 乙液 20.0 mL pH 7.50.2 A.5.2 制法 將前面七種成分溶解于 400 mL 蒸餾水內(nèi)作為基礎(chǔ)液;將瓊脂加入于 600 mL 蒸餾水內(nèi)。 然后分別 攪拌均勻,煮沸溶解。加入甲液和乙液于基礎(chǔ)液內(nèi),調(diào)節(jié) pH。再加入指示劑,并與瓊脂液合并,待冷至 50 55 傾注平皿。 注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱,避免降低其選擇性。 甲液的配制 硫代硫酸鈉 34.0 g 檸檬酸鐵銨 4.0 g 蒸餾水 100 mL 乙液的配制 去氧膽酸鈉 10.0 g 蒸餾水 100 mL Andrade 指示劑 酸性復(fù)紅 0.5 g 1mol/L 氫氧化鈉溶液 16.0 mL 蒸餾水 100 mL 將復(fù)紅溶解于蒸餾水中,加入氫氧化鈉溶液。數(shù)小時(shí)后如復(fù)紅褪色不全,再加氫氧化鈉溶液 1 mL2 mL。 A.6 木糖賴氨酸脫氧膽鹽(XLD)瓊脂 A.6.1 成分 酵母膏 3.0 g L-賴氨酸 5.0 g 木糖 3.75 g 乳糖 7.5 g GB 4789.42010 11 蔗糖 7.5 g 去氧膽酸鈉 2.5 g 檸檬酸鐵銨 0.8 g 硫代硫酸鈉 6.8 g 氯化鈉 5.0 g 瓊脂 15.0 g 酚紅 0.08 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.40.2 A.6.2 制法 除酚紅和瓊脂外, 將其他成分加入 400 mL 蒸餾水中, 煮沸溶解, 調(diào)節(jié) pH。 另將瓊脂加入 600 mL 蒸餾水中,煮沸溶解。 將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑,待冷至 50 55 傾注平皿。 注:本培養(yǎng)基不需要高壓滅菌,在制備過(guò)程中不宜過(guò)分加熱,避免降低其選擇性,貯于室溫暗處。 本培養(yǎng)基宜于當(dāng)天制備,第二天使用。 A.7 三糖鐵(TSI)瓊脂 A.7.1 成分 蛋白胨 20.0 g 牛肉膏 5.0 g 乳 糖 10.0 g 蔗 糖 10.0 g 葡萄糖 1.0 g 硫酸亞鐵銨 (含6個(gè)結(jié)晶水) 0.2 g 酚 紅 025 g或5.0 g/L溶液5.0 mL 氯化鈉 5.0 g 硫代硫酸鈉 0.2 g 瓊 脂 12.0 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.40.2 A.7.2 制法 除酚紅和瓊脂外, 將其他成分加入 400 mL 蒸餾水中, 煮沸溶解, 調(diào)節(jié) pH。 另將瓊脂加入 600 mL 蒸餾水中,煮沸溶解。 將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑,混勻,分裝試管,每管約 2 mL4 mL,高壓滅菌 121 10 min 或 115 15 min,滅菌后置成高層斜面,呈桔紅色。 A.8 蛋白胨水、靛基質(zhì)試劑 A.8.1 蛋白胨水 蛋白胨(或胰蛋白胨) 20.0 g 氯化鈉 5.0 g 蒸餾水 1 000 mL pH 7.40.2 將上述成分加入蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)節(jié) pH,分裝小試管,121 高壓滅菌 15 min。 A.8.2 靛基質(zhì)試劑 GB 4789.42010 12 A.8.2.1 柯凡克試劑:將 5 g 對(duì)二甲氨基甲醛溶解于 75 mL 戊醇中,然后緩慢加入濃鹽酸 25 mL。 A.8.2.2 歐-波試劑:將 1 g 對(duì)二甲氨基苯甲醛溶解于 95 mL95乙醇內(nèi)。然后緩慢加入濃鹽酸 20 mL。 A.8.3 試驗(yàn)方法 挑取小量培養(yǎng)物接種,在 36 1 培養(yǎng) 1 d2 d,必要時(shí)可培養(yǎng) 4 d5 d。加入柯凡克試劑約 0.5 mL,輕搖試管,陽(yáng)性者于試劑層呈深紅色;或加入歐-波試劑約 0.5 mL,沿管壁流下,覆蓋于培養(yǎng) 液表面,陽(yáng)性者于液面接觸處呈玫瑰紅色。 注:蛋白胨中應(yīng)含有豐富的色氯酸。每批蛋白胨買(mǎi)來(lái)后,應(yīng)先用已知菌種鑒定后方可使用。 A.9 尿素瓊脂(pH 7.2) A.9.1 成分 蛋白胨 1.0 g 氯化鈉 5.0 g 葡萄糖 1.0 g 磷酸二氫鉀 2.0 g 0.4酚 紅 3.0 mL 瓊 脂 20.0 g 蒸餾水 1 000 mL 20%尿素溶液 100 mL pH7.20.2 A.9.2 制法 除尿素、瓊脂和酚紅外,將其他成分加入 400 mL 蒸餾水中,煮沸溶解,調(diào)節(jié) pH。另將瓊脂加 入 600 mL 蒸餾水中,煮沸溶解。 將上述兩溶液混合均勻后,再加入指示劑后分裝,121 高壓滅菌 15 min。冷至 50 55 , 加入經(jīng)除菌過(guò)濾的尿素溶液。尿素的最終濃度為 2。分裝于無(wú)菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆谩?A.9.3 試驗(yàn)方法 挑取瓊脂培養(yǎng)物接種,在 36 1 培養(yǎng) 24 h,觀察結(jié)果。尿素酶陽(yáng)性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變 為紅色。 A.10 氰化鉀 (KCN) 培養(yǎng)基 A.10.1 成分 蛋白胨 10.0 g 氯化鈉 5.0 g 磷酸二氫鉀 0.225 g 磷酸氫二鈉 5.64 g 蒸餾水 1 000 mL 0.5氰化鉀 20.0 mL A.10.2 制法 將除氰化鉀以外的成分加入蒸餾水中,煮沸溶解,分裝后 121 高壓滅菌 15 min。放在冰箱內(nèi) 使其充分冷卻。每 100 mL 培養(yǎng)基加入 0.5氰化鉀溶液 2.0 mL(最后濃度為 1:10 000) ,分裝于無(wú)菌 試管內(nèi),每管約 4 mL,立刻用無(wú)菌橡皮塞塞緊,放在 4 冰箱內(nèi),至少可保存兩個(gè)月。同時(shí),將不加氰化 鉀的培養(yǎng)基作為對(duì)照培養(yǎng)基,分裝試管備用。 A.10.3 試驗(yàn)方法 將瓊脂培養(yǎng)物接種于蛋白胨水內(nèi)成為稀釋菌液,挑取 1 環(huán)接種于氰化鉀(KCN)培養(yǎng)基。并另 GB 4789.42010 13 挑取 1 環(huán)接種于對(duì)照培養(yǎng)基。在 36 1 培養(yǎng) 1 d2 d,觀察結(jié)果。如有細(xì)菌生長(zhǎng)即為陽(yáng)性(不抑 制) ,經(jīng) 2 d 細(xì)菌不生長(zhǎng)為陰性(抑制) 。 注:氰化鉀是劇毒藥,使用時(shí)應(yīng)小心,切勿沾染,以免中毒。夏天分裝培養(yǎng)基應(yīng)在冰箱內(nèi)進(jìn)行。試驗(yàn)失敗的主要 原因是封口不嚴(yán),氰化鉀逐漸分解,產(chǎn)生氫氰酸氣體逸出,以致藥物濃度降低,細(xì)菌生長(zhǎng),因而造成假陽(yáng)性反應(yīng)。試 驗(yàn)時(shí)對(duì)每一環(huán)節(jié)都要特別注意。 A.11 賴氨酸脫羧酶試驗(yàn)培養(yǎng)基 A.11.1 成分 蛋白胨 5.0 g 酵母浸膏 3.0 g 葡萄糖 1.0 g 蒸餾水 1 000 mL 1.6溴甲酚紫-乙醇溶液 1.0 mL L-賴氨酸或 DL-賴氨酸 0.5 g/100 mL或1.0 g/100 mL pH 6.80.2 A.11.2 制法 除賴氨酸以外的成分加熱溶解后,分裝每瓶 100 mL,分別加入賴氨酸。L-賴氨酸按 0.5加入, DL-賴氨酸按 1加入。調(diào)節(jié) pH。對(duì)照培養(yǎng)基不加賴氨酸。分裝于無(wú)菌的小試管內(nèi),每管 0.5 mL, 上面滴加一層液體石蠟,115 高壓滅菌 10 min。 A.11.3 試驗(yàn)方法 從瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物接種,于 36 1 培養(yǎng) 18 h24 h,觀察結(jié)果。氨基酸脫羧酶陽(yáng)性者 由于產(chǎn)堿,培養(yǎng)基應(yīng)呈紫色。陰性者無(wú)堿性產(chǎn)物,但因葡萄糖產(chǎn)酸而使培養(yǎng)基變?yōu)辄S色。對(duì)照管應(yīng) 為黃色。 A.12 糖發(fā)酵管 A.12.1 成分 牛肉膏 5.0 g 蛋白胨 10.0 g 氯化鈉 3.0 g 磷酸氫二鈉(含 12 個(gè)結(jié)晶水) 2.0 g 0.2溴麝香草酚藍(lán)溶液 12.0 mL 蒸餾水 1 000 mL pH 7.40.2 A.12.2 制法 A.12.2.1 葡萄糖發(fā)酵管按上述成分配好后,調(diào)節(jié) pH。按 0.5加入葡萄糖,分裝于有一個(gè)倒置小 管的小試管內(nèi),121 高壓滅菌 15 min。 A.12.2.2 其他各種糖發(fā)酵管可按上述成分配好后,分裝每瓶 100 mL,121 高壓滅菌 15 min。另將 各種糖類分別配好 10溶液,同時(shí)高壓滅菌。將 5 mL 糖溶液加入于 100 mL 培養(yǎng)基內(nèi),以無(wú)菌操作 分裝小試管。 注:蔗糖不純,加熱后會(huì)自行水解者,應(yīng)采用過(guò)濾法除菌。 A.12.3 試驗(yàn)方法:從瓊脂斜面上挑取小量培養(yǎng)物接種,于 36 1 培養(yǎng),一般 2 d3 d。遲緩反應(yīng) 需觀察 14 d30 d。 A.13 ONPG 培養(yǎng)基 GB 4789.42010 14 A.13.1 成分 鄰硝基酚 -D 半乳糖苷(ONPG) (O-Nitrophenyl-D-galactopyranoside) 60.0 mg 0.01mol/L 磷酸鈉緩沖液(pH7.5) 10.0 mL 1蛋白胨水(pH7.5) 30.0 mL A.13.2 制法 將 ONPG 溶于緩沖液內(nèi),加入蛋白胨水,以過(guò)濾法除菌,分裝于無(wú)菌的小試管內(nèi),每管 0.5 mL, 用橡皮塞塞緊。 A.13.3 試驗(yàn)方法 自瓊脂斜面上挑取培養(yǎng)物 1 滿環(huán)接種于 36 1 培養(yǎng) 1 h3 h 和 24 h 觀察結(jié)果。如果 -半乳 糖苷酶產(chǎn)生,則于 1 h3 h 變黃色,如無(wú)此酶則 24 h 不變色。 A.14 半固體瓊脂 A.14.1 成分 牛肉膏 0.3 g 蛋白胨 1.0 g 氯化鈉 0.5 g 瓊脂 0.35g0.4 g 蒸餾水 100 mL pH 7.40.2 A.14.2 制法 按以上成分配好,煮沸溶解,調(diào)節(jié) pH。分裝小試管。121 高壓滅菌 15 min。直立凝固備用。 注:供動(dòng)力觀察、菌種保存、H 抗原位相變異試驗(yàn)等用。 A.15 丙二酸鈉培養(yǎng)基 A.15.1 成分 酵母浸膏 1.0 g 硫酸銨 2.0 g 磷酸氫二鉀 0.6 g 磷酸二氫鉀 0.4 g 氯化鈉 2.0 g 丙二酸鈉 3.0 g 0.2溴麝香草酚藍(lán)溶液 12.0 mL 蒸餾水 1 000 mL pH 6.80.2 A.15.2 制法 除指示劑以外的成分溶解于水,調(diào)節(jié) pH,再加入指示劑,分裝試管,121 高壓滅菌 15 min。 A.15.3 試驗(yàn)方法 用新鮮的瓊脂培養(yǎng)物接種,于36 1 培養(yǎng)48 h,觀察結(jié)果。陽(yáng)性者由綠色變?yōu)樗{(lán)色。 GB 4789.42010 15 附錄 B (規(guī)范性附錄) 常見(jiàn)沙門(mén)氏菌抗原 B.1 常見(jiàn)沙門(mén)氏菌抗原 常見(jiàn)沙門(mén)氏菌抗原見(jiàn)表 B.1。 表 B.1 常見(jiàn)沙門(mén)氏菌抗原表 H 抗原 菌 名 拉丁菌名 O 抗 原 第 1 相 第 2 相 A 群 甲型副傷寒沙門(mén)氏菌 S. paratyphi A 1,2,12 a 1,5 B 群 基桑加尼沙門(mén)氏菌 S .kisangani 1,4,5,12 a 1,2 阿雷查瓦萊塔沙門(mén)氏菌 S. arechavaleta 4,5,12 a 1,7 馬流產(chǎn)沙門(mén)氏菌 S. abortusequi 4,12 - e,n,x, 乙型副傷寒沙門(mén)氏菌 S. paratyphi B 1,4,5,12 b 1,2 利密特沙門(mén)氏菌 S. limete 1,4,12,27 b 1,5 阿邦尼沙門(mén)氏菌 S. abony 1,4,5,12,27 b e,n,x 維也鈉沙門(mén)氏菌 S. wien 1,4,12,27 b l,w 伯里沙門(mén)氏菌 S .bury 4,12,27 c z6 斯坦利沙門(mén)氏菌 S. stanley 1,4,5,12,27 d 1,2 圣保羅沙門(mén)氏菌 S. saintpaul 1,4,5,12 e,h 1,2 里定沙門(mén)氏菌 S .reading 1,4,5,12 e,h 1,5 徹斯特沙門(mén)氏菌 S. chester 1,4,5,12 e,h e,n,x 德?tīng)柋吧抽T(mén)氏菌 S. derby 1,4,5,12 f,g 1,2 阿貢納沙門(mén)氏菌 S. agona 1,4,5,12 f,g,s 1,2 埃森沙門(mén)氏菌 S. essen 4,12 g,m - 加利福尼亞沙門(mén)氏菌 S. california 4,12 g,m,t z67 金斯敦沙門(mén)氏菌 S. kingston 1,4,5,12,27 g,s,t 1,2 布達(dá)佩斯沙門(mén)氏菌 S. budapest 1,4,12,27 g,t - 鼠傷寒沙門(mén)氏菌 S. typhimurium 1,4,5,12 i 1,2 GB 4789.42010 16 拉古什沙門(mén)氏菌 S. Lagos 1,4,5,12 i 1,5 布雷登尼沙門(mén)氏菌 S.bredeney 1,4,12,27 l,v 1,7 基爾瓦沙門(mén)氏菌 S.kilwa 4,12 l,w e,n,x 海德?tīng)柋ど抽T(mén)氏菌 S.heidelberg 1,4,15,12 r 1,2 印地安納沙門(mén)氏菌 S.indiana 1,4,12 z 1,7 斯坦利維爾沙門(mén)氏菌 S.stanleyville 1,4,5,12.27 z4,z23 1,2 伊圖里沙門(mén)氏菌 S.ituri 1,4,12 z10 1,5 C1 群 奧斯陸沙門(mén)氏菌 S.oslo 6,7,14 a e,n,x 愛(ài)丁保沙門(mén)氏菌 S.edinburg 6,7, 14 b 1,5 布隆方丹沙門(mén)氏菌 S.bloemfontein 6,7 b e,n,x:z42 丙型副傷寒沙門(mén)氏菌 S.paratyphi C 6,7,Vi c 1,5 豬霍亂沙門(mén)氏菌 S.choleraesuis 6,7 c 1,5 豬傷寒沙門(mén)氏菌 S.typhisuis 6,7 c 1,5 羅米他沙門(mén)氏菌 S.lomita 6,7 e,h 1,5 布倫登盧普沙門(mén)氏菌 S.braenderup 6,7, 14 e,h e,n,z15 里森沙門(mén)氏菌 S.rissen 6,7, 14 f,g - 蒙得維的亞沙門(mén)氏菌 S.montevideo 6,7, 14 g,m,p,s 1,2,7 里吉爾沙門(mén)氏菌 S.riggil 6,7 g,t - 奧雷寧堡沙門(mén)氏菌 S.oranieburg 6,7, 14 m,t 2,5,7 奧里塔蔓林沙門(mén)氏菌 S.oritamerin 6,7 i 1,5 湯卜遜沙門(mén)氏菌 S.thompson 6,7, 14 k 1,5 康科德沙門(mén)氏菌 S.concord 6,7 l,v 1,2 伊魯木沙門(mén)氏菌 S.irumu 6,7 l,v 1,5 姆卡巴沙門(mén)氏菌 S.mkamba 6,7 l,v 1,6 波恩沙門(mén)氏菌 S.bonn 6,7 l,v e,n,x 波茨坦沙門(mén)氏菌 S.potsdam 6,7, 14 l,v e,n,z15 格但斯克沙門(mén)氏菌 S.gdansk 6,7, 14 l,v z6 維爾肖沙門(mén)氏菌 S.virchow 6,7, 14 r 1,2 GB 4789.42010 17 嬰兒沙門(mén)氏菌 S.infantis 6,7, 14 r 1,5 巴布亞沙門(mén)氏菌 S.papuana 6,7 r e,n,z15 巴累利沙門(mén)氏菌 S.bareilly 6,7, 14 y 1,5 哈特福德沙門(mén)氏菌 S.hartford 6,7 y e,n,x 三河島沙門(mén)氏菌 S.mikawasima 6,7, 14 y e,n,z15 姆班達(dá)卡沙門(mén)氏菌 S.mbandaka 6,7, 14 z10 e,n,z15 田納西沙門(mén)氏菌 S.tennessee 6,7, 14 z29 1,2,7 布倫登盧普沙門(mén)氏菌 S.braenderup 6,7, 14 e,h e,n,z15 耶路撒冷沙門(mén)氏菌 S.jerusalem 6,7, 14 z10 l,w C2 群 習(xí)志野沙門(mén)氏菌 S.narashino 6.8 a e,n,x 名古屋沙門(mén)氏菌 S.nagoya 6,8 b 1,5 加瓦尼沙門(mén)氏菌 S.gatuni 6,8 b e,n,x 慕尼黑沙門(mén)氏菌 S.muenchen 6,8 d 1,2 蔓哈頓沙門(mén)氏菌 S.manhattan 6,8 d 1,5 紐波特沙門(mén)氏菌 S.newport 6,8,20 e,h 1,2 科特布斯沙門(mén)氏菌 S.kottbus 6,8 e,h 1,5 茨昂威沙門(mén)氏菌 S.tshiongwe 6,8 e,h e,n,z15 林登堡沙門(mén)氏菌 S.lindenburg 6,8 i 1,2 塔科拉迪沙門(mén)氏菌 S.takoradi 6,8 i 1,5 波那雷恩沙門(mén)氏菌 S.bonariensis 6,8 i e,n,x 利齊菲爾德沙門(mén)氏菌 S.litchfield 6,8 l,v 1,2 病牛沙門(mén)氏菌 S.bovismorbificans 6,8, 20 r,i 1,5 查理沙門(mén)氏菌 S.chailey 6,8 z4,z23 e,n,z15 C3 群 巴爾多沙門(mén)氏菌 S.bardo 8 e,h 1,2 依麥克沙門(mén)氏菌 S.emek 8,20 g,m,s - 肯塔基沙門(mén)氏菌 S.kentucky 8, 20 i z6 GB 4789.42010 18 D 群 仙臺(tái)沙門(mén)氏菌 S.sendai 1,9,12 a 1,5 傷寒沙門(mén)氏菌 S.typhi 9,12,Vi d - 塔西沙門(mén)氏菌 S.tarshyne 9,12 d 1,6 伊斯特本沙門(mén)氏菌 S.eastbourne 1,9,12 e,h 1,5 以色列沙門(mén)氏菌 S.israel 9,12 e,h e,n,z15 腸炎沙門(mén)氏菌 S.enteritidis 1,9,12 g,m 1,7 布利丹沙門(mén)氏菌 S.blegdam 9,12 g,m,q - 沙門(mén)氏菌 Salmonella 1,9,12 g,m,s,t 1,5,7 都柏林沙門(mén)氏菌 S.dublin 1,9,12,Vi g,p - 芙蓉沙門(mén)氏菌 S.seremban 9,12 i 1,5 巴拿馬沙門(mén)氏菌 S.panama 1,9,12 l,v 1,5 戈丁根沙門(mén)氏菌 S.goettingen 9,12 l,v e,n,z15 爪哇安納沙門(mén)氏菌 S.javiana 1,9,12 L,z28 1,5 雞-雛沙門(mén)氏菌 S.gallinarum-pullorum 1,9,12 - - E1 群 奧凱??粕抽T(mén)氏菌 S.okefoko 3,10 c z6 瓦伊勒沙門(mén)氏菌 S.vejle 3,10,15 e,h 1
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