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熱點重難強化練5 生物技術(shù)實踐與現(xiàn)代生物科技專題 (一)生物技術(shù)實踐1(2016安徽六安一中綜練九)下表是某同學設計的三組培養(yǎng)基:組別培養(yǎng)基a礦質(zhì)元素、蔗糖、維生素、甘氨酸、水、瓊脂b葡萄糖、氨基酸、維生素、無機鹽、血清、水、瓊脂c牛肉膏、蛋白胨、水、氯化鈉、瓊脂(1)其中a組培養(yǎng)基可能用于培養(yǎng)_,但在分化階段必須添加有關(guān)的_。(2)用b組培養(yǎng)基可培養(yǎng)_,但不需要添加_。(3)用c組培養(yǎng)基可檢驗硬幣上是否有細菌,培養(yǎng)一段時間后,可在此固體平板培養(yǎng)基上形成很多不同的_,從中選擇不同的類型分別接種到固體培養(yǎng)基的試管斜面上,可用于分離細菌。(4)以上三種不同的培養(yǎng)基在用于培養(yǎng)之前都必須進行_操作,而且不同的培養(yǎng)基都必須有相應的適宜_。解析 (1)a組含有蔗糖、礦質(zhì)元素等可以用來進行植物組織培養(yǎng);在分化階段需要加入生長素和細胞分裂素等植物激素,并控制好相互比例。(2)b組含動物血清、葡萄糖等可以用來培養(yǎng)動物細胞;由于動物細胞培養(yǎng)時用的是液體培養(yǎng)基,不需要加入凝固劑瓊脂。(3)細菌在固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)時會繁殖形成很多不同的菌落。(4)以上三種不同的培養(yǎng)基在用于培養(yǎng)之前都必須進行滅菌操作,而且不同的培養(yǎng)基都必須有相應的適宜pH,以適應不同生物細胞的生長需要。答案 (1)植物離體組織植物激素(2)動物細胞瓊脂(3)菌落(4)滅菌pH2(2016陜西西安適應性考試六)請回答下列與發(fā)酵食品有關(guān)的問題:(1)葡萄酒釀造前需要沖洗葡萄,其主要目的是_,葡萄酒呈現(xiàn)紅色的原因是_。喝剩的葡萄酒放置一段時間后變酸的原因是_。(2)蘋果醋生產(chǎn)過程中利用了_菌的發(fā)酵作用,該過程需將溫度控制在_。(3)制作酸奶需要的細菌的代謝類型是_型,含有抗生素的牛奶能否作為酸奶發(fā)酵原料_(能/否),原因是_。解析 (1)葡萄酒釀造前沖洗葡萄的目的主要是洗去浮塵;葡萄皮中含有色素,溶解在發(fā)酵液中,使葡萄酒呈現(xiàn)紅色;葡萄酒中的乙醇在醋酸菌作用下會變酸。(2)蘋果醋生產(chǎn)過程中利用了醋酸菌發(fā)酵作用;醋酸菌生長最適溫度為3035 。(3)制作酸奶利用了乳酸菌發(fā)酵作用,乳酸菌的代謝類型異養(yǎng)厭氧型;抗生素能殺死乳酸菌。答案 (1)洗去浮塵紅色葡萄皮中的色素溶解在發(fā)酵液中空氣中的醋酸菌混入葡萄酒后發(fā)酵產(chǎn)生了醋酸(2)醋酸3035 (3)異養(yǎng)厭氧否抗生素可以殺死乳酸菌3(2016安徽六安一中一模)將植物中的有效成分提取出來,可顯著提高其利用價值。回答下列問題:(1)許多植物芳香油的提取在原理和程序上具有相似性,某同學根據(jù)玫瑰精油的提取方法,設計提取茉莉油的實驗流程如下:茉莉花水A油水混合物B加CD茉莉油。上述流程中的A表示_過程,B過程常需要用到的儀器是_,C物質(zhì)是_,加C的目的是_。茉莉油的提取能否采用這一流程進行生產(chǎn),應該考慮茉莉油是否像玫瑰油一樣具有較強的_,還應考慮茉莉花在水中蒸餾是否會出現(xiàn)_等問題。(2)辣椒素的提取與胡蘿卜素的提取有類似之處,可采用萃取法進行提取。提取時若需要加熱,應采用水浴加熱的方法,原因是_;加熱時,還要在瓶口安裝冷凝回流裝置,目的是_。解析 (1)茉莉油與玫瑰油的性質(zhì)相似,在提取原理和程序上具有相似性,結(jié)合對玫瑰油的提取過程的分析,題干提取茉莉油的實驗流程中的A表示水蒸氣蒸餾過程,B過程為分離油層的過程,此過程常需要用到的儀器是分液漏斗。題干提取茉莉油的實驗流程中的C物質(zhì)是無水硫酸鈉,加無水硫酸鈉的目的是除去芳香油中的水分,提高芳香油的純度;茉莉油的提取能否采用這一流程進行生產(chǎn),應該考慮茉莉油是否像玫瑰油一樣具有較強的揮發(fā)性,還應考慮茉莉花在水中蒸餾是否會出現(xiàn)原料焦糊和有效成分部分水解等問題。(2)用萃取法提取辣椒素使用的有機溶劑都是易燃物,提取時若直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸,應采用水浴加熱的方法;水浴加熱時,還要在瓶口安裝冷凝回流裝置,可防止有機溶劑的揮發(fā)。答案 (1)水蒸氣蒸餾分液漏斗無水硫酸鈉除水揮發(fā)性原料焦糊和有效成分水解(2)有機溶劑易燃,直接使用明火加熱容易引起燃燒、爆炸防止有機溶劑的揮發(fā)4燒傷病人容易感染綠膿桿菌,引起化膿性感染,比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素都是非常經(jīng)典的抗綠膿桿菌的藥物。臨床使用抗生素前,有時需要做細菌耐藥實驗。實驗時,從病人身上獲取少量樣本,按照一定的實驗步驟操作,以確定該病人體內(nèi)的綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性。(1)獲取綠膿桿菌單菌落:配制適于綠膿桿菌生長的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般含有_、_、水和無機鹽,調(diào)節(jié)pH至7,滅菌處理,待培養(yǎng)基冷卻至50 時,在_附近倒平板。經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得單菌落。(2)檢測綠膿桿菌對不同抗生素的敏感性:取該單菌落適當稀釋,用_法接種于固體培養(yǎng)基表面,使其均勻生長,布滿平板。將分別含等劑量的比阿培南、美羅培南、頭孢菌素和碳青霉烯類抗生素的同大小的濾紙片均勻置于該平板上的不同位置,適宜條件培養(yǎng)一段時間,結(jié)果是含不同抗生素的濾紙片周圍均出現(xiàn)透明圈,這說明綠膿桿菌對上述抗生素_;含頭孢菌素的濾紙片周圍的透明圈比含美羅培南的小,這說明_;含比阿培南、碳青霉烯類的濾紙片周圍的透明圈也比含美羅培南的小,且比阿培南透明圈中出現(xiàn)了一個菌落,請推測此菌落產(chǎn)生的可能原因:一是_,二是_。(3)根據(jù)上述實驗結(jié)果,為達到抗綠膿桿菌的目的,對于該患者來說最好應選用抗生素_。解析 (1)微生物的培養(yǎng)基中一般含有碳源、氮源、水和無機鹽等;倒平板應在酒精燈火焰附近進行,這樣可以達到火焰“封口”,防止雜菌污染的目的。(2)要使細菌在固體培養(yǎng)基表面均勻分布,應該用稀釋涂布平板法接種;在含有抗生素的濾紙片周圍出現(xiàn)透明圈,說明濾紙片上的抗生素能殺死細菌,即細菌對抗生素敏感,透明圈越大,說明細菌對抗生素越敏感;比阿培南透明圈中出現(xiàn)一個菌落的原因可能是由于雜菌污染(該雜菌對比阿培南不敏感),也有可能是綠膿桿菌中某個菌體產(chǎn)生了抗藥性變異。(3)在美羅培南周圍的透明圈最大,說明綠膿桿菌對美羅培南最敏感。答案 (1)碳源氮源酒精燈火焰(2)稀釋涂布平板敏感綠膿桿菌對頭孢菌素的敏感性比對美羅培南弱(合理即可)雜菌污染抗比阿培南的綠膿桿菌(或綠膿桿菌產(chǎn)生耐藥性突變)形成的菌落(3)美羅培南(二)現(xiàn)代生物科技專題1小鼠是動物實驗的常用材料,請閱讀下列相關(guān)材料并回答下列問題:材料1:科學家將牛的生長激素基因?qū)胄∈蟮氖荏w細胞,經(jīng)培養(yǎng)得到了體型巨大的“超級小鼠”。材料2:利用滅活的單純皰疹病毒I型,反復多次注射到小鼠體內(nèi),待小鼠血清中抗體檢測呈陽性時,再將在小鼠體內(nèi)取得的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,最終得到單克隆抗體。(1)材料1中常用小鼠的_做受體細胞;將重組細胞培養(yǎng)至_(時期)時,可植入代孕母鼠的子宮內(nèi),重組胚胎在子宮內(nèi)不會死亡的生理學基礎是_。(2)材料2中來自小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合,常用的化學誘導劑是_。若細胞兩兩融合,會產(chǎn)生_種融合細胞。(3)經(jīng)篩選得到的雜種細胞,還需經(jīng)_和_,才能得到數(shù)量足夠且能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞。(4)雜交瘤細胞可在體外大規(guī)模培養(yǎng),最后從_中獲得單克隆抗體。這樣獲得的單克隆抗體具有_的優(yōu)點。解析 (1)培育轉(zhuǎn)基因動物時,常用受精卵作為受體細胞,因為受精卵的全能性最高;胚胎移植時,應將重組細胞培養(yǎng)至桑椹胚或囊胚階段才可植入代孕母鼠的子宮內(nèi);重組胚胎在子宮內(nèi)不會死亡的生理學基礎是受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應。(2)誘導細胞融合常用的化學試劑是聚乙二醇;誘導小鼠的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞融合時,若細胞兩兩融合,會產(chǎn)生3種融合細胞,即B淋巴細胞自身融合的細胞、骨髓瘤細胞自身融合的細胞、雜交瘤細胞。(3)經(jīng)篩選得到的雜種細胞,還需經(jīng)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測,才能得到數(shù)量足夠且能產(chǎn)生專一抗體的雜交瘤細胞。(4)雜交瘤細胞可在體外大規(guī)模培養(yǎng),最后從培養(yǎng)液中獲得單克隆抗體。這樣獲得的單克隆抗體具有特異性強、靈敏度高的優(yōu)點。答案 (1)受精卵桑椹胚(囊胚)受體對移入子宮的外來胚胎不發(fā)生免疫排斥反應(2)聚乙二醇(PEG)3(3)克隆化培養(yǎng)抗體檢測(4)培養(yǎng)液特異性強、靈敏度高2下面是一項“利用轉(zhuǎn)基因番茄生產(chǎn)人胰島素的方法”的專利摘要,請回答:本發(fā)明利用轉(zhuǎn)基因番茄作為生物反應器生產(chǎn)人胰島素。所用的人胰島素基因是依據(jù)植物“偏愛”的密碼子來設計所含的密碼子,通過某方法合成若干DNA片段,拼接而成,重組DNA分子可通過農(nóng)桿菌介導的方法轉(zhuǎn)入番茄中,在番茄的果實中表達人胰島素。(1)本專利是采用_方法獲得目的基因。獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同,但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同,原因是_。要想在體外獲得大量該目的基因的片段,可以采用_技術(shù)。該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是_;原料是四種脫氧核苷酸。(2)根據(jù)上述摘要,轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是_,載體上的_可以轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上。(3)如果要檢測在受體細胞中是否存在目的基因可采用_技術(shù),再經(jīng)_方法培養(yǎng)成個體。解析 (1)根據(jù)題干信息“所用的人胰島素基因是依據(jù)植物偏愛的密碼子來設計所含的密碼子,通過某方法合成若干DNA片段,拼接而成”可知,本專利是采用人工合成方法獲得目的基因。由于密碼子具有簡并性,即使基因序列不同,但其控制合成的蛋白質(zhì)可以相同,因此獲得的人胰島素基因與人體細胞中胰島素基因的堿基序列不同,但兩者所編碼的蛋白質(zhì)中氨基酸序列相同。PCR技術(shù)可以在體外大量擴增目的基因片段,PCR技術(shù)是在較高溫度環(huán)境中進行的,因此該技術(shù)中使用的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(或Taq酶)。(2)根據(jù)題干信息“通過農(nóng)桿菌介導的方法”可知,轉(zhuǎn)基因操作時所用的載體是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒,載體上的TDNA可以轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上。(3)要檢測在受體細胞中是否存在目的基因,可采用DNA分子雜交技術(shù);將轉(zhuǎn)基因受體細胞培育成轉(zhuǎn)基因植株,可采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)。答案 (1)人工合成密碼子具有簡并性,基因序列不同,蛋白質(zhì)可以相同 PCR 熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(或Taq酶)(2)農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒 TDNA(3)DNA分子雜交 組織培養(yǎng)3(2016河南八市4月質(zhì)檢)馬術(shù)用馬應具有“跑得快、身軀龐大沉穩(wěn)、安靜”等特點。一馬場從國外引進一匹雄性阿拉伯馬(跑得快)和一匹雌性佩爾什馬(身軀龐大沉穩(wěn)、安靜),希望利用這兩匹馬和一群本地馬來培育馬術(shù)用馬。請回答下列問題:(1)利用這兩匹進口馬雜交,子代產(chǎn)生的變異來源主要是_。(2)從本地母馬中選擇_作為代孕馬,將進口馬配種后收集其胚胎,并培養(yǎng)到適宜階段移植到代孕母馬體內(nèi),從而快速獲得更多雜交子代。胚胎細胞所需的營養(yǎng)物質(zhì)尚未完全搞清楚,所以培養(yǎng)液需加入_。培養(yǎng)得到的胚胎可以通過_技術(shù)提高其利用率。(3)歐洲各地有很多馬術(shù)用馬培育基地,可建議馬場直接購買其_,無須再購買種畜,以節(jié)省大量資金。(4)研究者設想,取優(yōu)良品種的耳細胞傳代培養(yǎng)在_代以內(nèi),將培養(yǎng)得到的耳細胞注入到_期的去核卵母細胞內(nèi),構(gòu)建并培養(yǎng)得到重組胚胎,移植到代孕母馬體內(nèi),即得到大量優(yōu)良品種。該設想涉及到的生物工程技術(shù)手段有_(至少答出兩點)。解析 (1)雜交育種的原理是基因重組。(2)代孕馬的要求是健康、繁殖力強;早期胚胎發(fā)育過程中需要添加動物血清;胚胎分割能提高胚胎利用率。(3)胚胎移植技術(shù)可以節(jié)約大量引種資金。(4)傳代培養(yǎng)10代以內(nèi)細胞能保持正常二倍體核型;動物體細胞核移植時,一般將細胞核注入去核的M期次級卵母細胞中;該過程中利用的生物技術(shù)有動物細胞培養(yǎng)、體細胞核移植和胚胎移植技術(shù)等。答案 (1)基因重組(2)健康的、繁殖能力強的(答案合理即可)動物血清(或血清,血漿)胚胎分割(3)(冷凍)胚胎 (4)10M(減數(shù)第二次分裂)動物細胞培養(yǎng)、體細胞核移植和胚胎移植技術(shù)4(2016貴州黔南三校聯(lián)考)根據(jù)所學知識回答問題:(1)基因工程中基因表達載體除包括目的基因外,還必須有_及標記基因等。(2)若要將某目的基因通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導入植物細胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的_中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細胞,通過DNA重組將目的基因插入植物細胞的_中。植物組織培養(yǎng)的主要原理是植物細胞具有_,具體過程是在_和人工控制條件下,將離體的植物器官、組織、細胞培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上,給予適宜的條件,誘導其經(jīng)過_產(chǎn)生愈傷組織,最終形成完整的植株。(3)在哺乳動物的核移植實驗中,通過一定的措施將受體細胞激活,使其進行細胞分裂和發(fā)育,當胚胎發(fā)育到_階段時,將胚胎移入受體(代孕)動物體內(nèi)。(4)生態(tài)工程是實現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟最重要的手段之一,請寫出它遵循的基本原理(至少答兩項)_。解析 (1)在基因工程中,基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子、標記基因等。(2)農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的TDNA能轉(zhuǎn)移到
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