菌根真菌在植物組培苗生產(chǎn)技術(shù)中的應(yīng)用.doc

熱 帶 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué)第 5 期 (總第 93 期)2001 年 10 月Oct . 2001CH IN ESE J OU RNAL O F TRO P ICAL A GR ICUL TU R ENo . 5 2001菌根真菌在植物組培苗生產(chǎn)技術(shù)中的應(yīng)用王真輝 中 國(guó) 熱 帶 農(nóng) 業(yè) 科 學(xué) 院 橡 膠 栽 培 研 究 所(海南儋州571737)農(nóng)業(yè)部熱帶作物栽培生理學(xué)重點(diǎn)開(kāi)放實(shí)驗(yàn)室摘要 綜合評(píng)述了國(guó)內(nèi)外近 20 a 來(lái)應(yīng)用菌根真菌于植物組培苗生產(chǎn)技術(shù)中的研究進(jìn)展與成果 。關(guān)鍵詞 菌根真菌 ;共生 ;組織培養(yǎng) ;微繁中圖法分類(lèi)號(hào) Q949 . 32 ; Q143 . 2 ; S188菌根真菌不僅具有促進(jìn)宿主植物吸收礦質(zhì)養(yǎng)分及生長(zhǎng)發(fā)育的功能 ,而且在逆境條 件下 (如土壤受重金屬污染 ,宿主遭受病害 、 營(yíng)養(yǎng)和水分過(guò)?；蛱澣睍r(shí)) ,對(duì)于宿主植物 的生存 、生長(zhǎng)和產(chǎn)量方面 ,也發(fā)揮著重要的 作用1 。地球上大多數(shù)植物都能與菌根真 菌形成共生關(guān)系 ,而且有許多植物對(duì)菌根具 有較高的依賴(lài)性 。目前 ,離體組織培養(yǎng)已逐漸成為一些經(jīng) 濟(jì)作物 、林木和果樹(shù)的主要繁殖形式 。在這 種形式的種苗繁育過(guò)程中 ,由于前期 ( 指?jìng)€(gè) 體增殖階段 ,包括愈傷組織的培養(yǎng) ,芽 、根的 誘導(dǎo)) 是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的 ,因而 ,種苗與 菌根真菌接觸的機(jī)會(huì)大為減少 ,甚至到了后 期 (指苗圃馴化培育階段) 也還常常得不到 菌根真菌的幫助 ,導(dǎo)致苗木生長(zhǎng)狀況較差 , 抵抗力較弱 ,成活率較低 。因此 ,盡早對(duì)組 培苗進(jìn)行高效菌根真菌的人工接種 ,實(shí)現(xiàn)菌根化 ,是培育壯苗的重要途徑之一 。現(xiàn)將國(guó)內(nèi)外學(xué)者近 20 a 來(lái)在此領(lǐng)域的研究進(jìn)展與 成果綜述如下 。1 菌根真菌與宿主植物1 . 1菌根真菌與宿主植物的相互選擇 菌根真菌對(duì)宿主植物雖然沒(méi)有表現(xiàn)出嚴(yán)格的專(zhuān)一性 ,但卻對(duì)宿主植物具有一定的 選擇性2 。菌根真菌與宿主植物的正確組 合 ,是發(fā)揮菌根效應(yīng)的關(guān)鍵 。同時(shí) ,生態(tài)條 件也是影響菌根真菌的接種效應(yīng)的重要因 子 。因此 ,在菌根真菌的應(yīng)用研究中 ,篩選 出能適應(yīng)一定的生態(tài)條件并能與宿主植物 形成最佳組合的高效菌根真菌菌種 ,是最根 本 、最關(guān)鍵的內(nèi)容 。MC. G. Chvez 等人研究了 3 種 VAM 真菌對(duì)苗圃中 4 個(gè)品種的草莓微繁苗的侵 染反 應(yīng) 。他 們 發(fā) 現(xiàn) , 這 些 VAM 真 菌 的 侵 收稿日期 :2001 - 06 - 18編輯/ 鄭里程王真輝 ,男 ,1972 年生 ,森林培育學(xué)碩士 。聯(lián)系電話 : 0898 - 23300595/ 0459 ; B P :959515951948 。染 ,可影響草莓組培苗的生長(zhǎng)勢(shì)和生產(chǎn)力 ;在不同的 VAM 真菌與草莓品種的組合中 , 組培苗的菌根效應(yīng)明顯不同3 。A . C. Az2 co n 等人所進(jìn)行的番荔枝 ( A n non a che ri m o2 l a) 微繁苗接種 AM 菌根真菌的效應(yīng)試驗(yàn) , 也得到與此相類(lèi)似的結(jié)果4 。M . S. Reddy 等人為了選擇與細(xì)葉桉采用盆栽法 ,研究了 VA 菌根真菌對(duì)組培幼苗莖 、葉和根系中的玉米素 、玉米素核苷 、赤 霉素 、吲哚乙酸和脫落酸等 5 種內(nèi)源激素的 含量的影響 。結(jié)果表明 ,在組培苗生長(zhǎng)的各 個(gè)時(shí)期 ,接種處理對(duì)植物體內(nèi)幾種內(nèi)源激素 的含量均有一定的影響9 。A . Martins 等 人 認(rèn) 為 , 栗 ( Cast a nea sat i v a Mill . ) 微繁苗的菌根化 , 在促進(jìn)植株 生長(zhǎng)的同時(shí) ,也增加了其蛋白質(zhì)含量與凈光 合速率 ,并使其呼吸速率與 CO2 補(bǔ)償點(diǎn)降( Eucal y pt uste ret icor nis ) 最 親 和 的 外 生 菌根菌 , 在微繁苗開(kāi)始生根時(shí) , 分別接種 A 2m a ni t a m u ri n a 、Hyste ra n gi u m i nca rce ra2t u m 、L acca ri a l accat a 、Pisol i t h us t i nct ori us 、S cle rode r m a cep a 和 S . f l av i d u m 。結(jié)果顯 示 , S cle rode r m a 屬 的 這 2 個(gè) 種 和 H . i n2 ca rce rat u m 不能與細(xì)葉桉形成菌根 ; 用 P.t i nctori us 的 2 個(gè) 當(dāng) 地 分 離 物 接 種 的 細(xì) 葉 桉 ,其菌根數(shù)量明顯多于其它處理的 ,且其 中 1 個(gè)處理的微繁植株 ,移栽到苗圃后的生 長(zhǎng)狀況顯著優(yōu)于非菌根苗5 。M . S. Red2 dy 等人在另一項(xiàng)研究中發(fā)現(xiàn) , 在參試的 5 種外生菌根真菌中 ,只有 Pa x i l l us i nov l u t us 能與楊屬 ( Pop ul us ) 的 P. del toi des 微繁苗 形成菌根 ; 這 個(gè) 組 合 的 植 株 高 生 長(zhǎng) 量 和 干 重 ,都顯著大于其余 4 個(gè)組合的6 。I. Balla 等人的試驗(yàn)結(jié)果表明 , 接種以 當(dāng)?shù)靥覉@分離到的菌根真菌菌株 ,對(duì)桃樹(shù)微 繁苗的生長(zhǎng)具有更明顯的促進(jìn)作用7 。J .J ansa 等 人 將 來(lái) 源 于 杜 鵑 花 科 ( Ericales) 植 物根部的 200 多個(gè)菌根真菌菌株 ,分別接種 到幾 種 杜 鵑 屬 ( R hododen d ron ) 的 微 繁 苗 上 ,發(fā)現(xiàn)僅 10 %的菌株對(duì)幼苗生長(zhǎng)有正效 應(yīng) ,而其余的似乎并無(wú)影響8 。1 . 2接種效應(yīng)的生理機(jī)制 菌根真菌接種對(duì)組培苗生理代謝的影響 ,是菌根促進(jìn)組培幼苗生長(zhǎng)的內(nèi)在反映 。 齊國(guó)輝等人以蘋(píng)果脫毒苗為試驗(yàn)材料 ,低10。C. Her nandez - Sebastia 等 人 報(bào) 道 , 在草莓組培苗 遭 受 水 分 脅 迫 時(shí) , 菌 根 植 株 的C 、N 代謝仍表現(xiàn)得積極而活躍 , 根部的天 冬氨酸 、絲氨酸 、蘇氨酸 、氨基丁酸 、丙氨酸 以及淀粉的含量有所提高 ,而非菌根植株的 情況正好與此相反 。據(jù)此 ,他們推測(cè) ,在遭 受水分脅迫時(shí) ,組培苗的根與葉之間存在一 個(gè)可流動(dòng)的天冬酰氨庫(kù) ,其流動(dòng)方向取決于 菌根 存 在 與 否11 。A . A . Est rada - L una 等人 也 證 實(shí) , 菌 根 化 的 番 石 榴 ( Psi di u m g u aj av a L . ) 微繁植株 , 其莖生長(zhǎng)與葉產(chǎn)量 均顯著高于未進(jìn)行接種處理的 ,與測(cè)得的凈 光 合 速 率 和 氣 孔 傳 導(dǎo) 增 大 的 結(jié) 果 相 呼應(yīng)12。2菌根真菌的接種效應(yīng)及其影響因素2 . 1接種時(shí)機(jī) (組培苗的生長(zhǎng)階段)目前 ,國(guó)內(nèi)外學(xué)者在研究植物組培苗的 菌根真菌接種效應(yīng)時(shí) ,接種時(shí)機(jī)主要集中于2 個(gè)生長(zhǎng)階段 ,即試管苗的生根階段和苗圃 馴化培育階段 。2 . 1 . 1在組培苗的馴化培育階段接種目前 ,多數(shù)研究者仍將菌根真菌的介入 時(shí)間 ,選擇在試管苗生根之后 ,即是在組培王真輝菌根真菌在植物組培苗生產(chǎn)技術(shù)中的應(yīng)用的提 高23 。A . Gaur 等 人 認(rèn) 為 , 菌 根 真 菌接種 、施肥和組培苗的生長(zhǎng)階段差異 ,均可 顯著影響植 株 的 生 理 與 養(yǎng) 分 吸 收 狀 況 , 其 中 ,AM 共生體對(duì)處于馴化階段的 S y n goni2 u m podop hyl l u m 與龍血樹(shù)屬 ( D racea n a ) 植 物微繁苗起到積極 、有利的作用 ,可使幼苗 的馴化過(guò)程縮短了 15 d24 。但是 ,也有人指出 : 盡管菌根真菌的侵 染程度很高 ,但在馴化期間 ,菌根對(duì)微繁植 株的生長(zhǎng)并無(wú)有益的影響25 。2 . 1 . 2在組培苗的生根階段接種 在生根階段對(duì)試管苗接種菌根真菌 ,由于在選擇培養(yǎng)基種類(lèi) 、菌劑制作方法 、培養(yǎng) 條件 ,以及它們之間的相互配合方面 ,仍有 許多亟待解決的問(wèn)題 ,故難度較大 。F. Ravolanirina 等 將 未 萌 發(fā) 和 已 萌 發(fā) 的 VA 菌根真菌孢子接種到試管苗的生根 培養(yǎng)基上 ,經(jīng)過(guò)一段時(shí)間的培養(yǎng)后發(fā)現(xiàn) ,菌 根真菌促進(jìn)了植株生長(zhǎng) ,并在植株皮層細(xì)胞 內(nèi)形成叢枝 。這說(shuō)明 ,在生根階段實(shí)現(xiàn)組培 苗菌根化是可能的 ,而且這種共生關(guān)系在移 栽后仍然存在26 。趙志鵬等最早采用根段培養(yǎng)技術(shù)制備 單一的 VA 菌根菌劑 ,并將其接種到室內(nèi)生 長(zhǎng)的泡桐試管苗上 ,結(jié)果使幼苗根系菌根侵 染率達(dá) 50 % ,試管苗的 N 、P 素含量也有一 定的提高27 。N . Mat hur 等人在改進(jìn)型 M S 培養(yǎng)基 上 ,使菌根真菌 Gl om us const rict u m 與棗屬 ( Zi z i p h us) 的 Z . m a u ri t i a n a 試 管 苗 建 立苗的馴化培育階段接種菌根真菌 。國(guó)內(nèi)外許多研究的結(jié)果表明 : 這時(shí)接種菌根真菌 , 將對(duì)試管苗的生長(zhǎng)與養(yǎng)分吸收具有積極的 促進(jìn)作用 ;另外 ,在減輕移栽對(duì)組培苗造成 的脅迫 、加快馴化進(jìn)程 、提高移栽成活率及 抗病能力等方面 ,也是十分有益的13 16 。 郭秀珍等人的試驗(yàn)結(jié)果顯示 ,移栽時(shí) , 對(duì)泡桐和葡萄組培苗進(jìn)行 VA 菌根真菌的 人 工 接 種 , 均 能 顯 著 促 進(jìn) 其 植 株 的 生長(zhǎng)17 ,18;M . T. Vidal 等的研究結(jié)果表明 ,在馴化階段 , 鱷梨 ( Pe rsea a m e rica n a ) 微繁苗一般生長(zhǎng)較慢 ,但若在試管苗開(kāi)始轉(zhuǎn)入馴 化培養(yǎng)時(shí) ,及時(shí)接種菌根真菌 ,可使幼苗形 成良好的根系統(tǒng) ,促進(jìn)根 、莖生長(zhǎng) ,提高根莖 比 ,增加植物組織中 N 、P 、K 素的含量 , 并 有助于植株抵抗移栽時(shí)所受的脅迫19 。據(jù) 報(bào)道 ,菌根真菌能顯著地促進(jìn)香蕉微繁苗的高生長(zhǎng)20 ,21,明顯增大植株的葉面積 、根和莖的鮮重 、光合速率和呼吸速率21 。R. M . Barbo sa Mato s 等人的研究結(jié)果 顯示 ,帶有菌根的菠蘿 ( A n a n as com os us ) 組 培苗 ,雖在馴化期間的生長(zhǎng)狀況與對(duì)照無(wú)明 顯差異 ,但移栽到大田 6 個(gè)月后 ,其高度明 顯大于對(duì)照 ;12 個(gè)月后 ,這種差異進(jìn)一步增 大 ,而且 ,菌根植株具有相當(dāng)數(shù)量的吸根和 吸芽 ,其葉中積累的 N 與 K 素也較多22 。 P. Fo rt una 等在紅葉李 ( Pr u n us ce rasi f e ra) 組培苗的菌根真菌接種效應(yīng)的研究中發(fā)現(xiàn) , 在馴化開(kāi)始的 6 周內(nèi) ,菌根幼苗與非菌根幼 苗的生長(zhǎng)并無(wú)差異 ,但與未經(jīng)接種處理的幼 苗相比 ,AM 真菌對(duì)植株根系形態(tài)產(chǎn)生很大 影響 ;此后 ,菌根真菌接種在幼苗馴化與生 長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中的重要作用逐步顯現(xiàn)出來(lái) :菌 根植株莖尖頂端生長(zhǎng)較早恢復(fù) ,在馴化結(jié)束 時(shí) ,菌根植株的高生長(zhǎng)量與生物量均有顯著起有效的共生關(guān)系 ,從而使微繁苗的生長(zhǎng) 、養(yǎng)分吸收狀況有顯著改善 ,并加快了移栽后的馴化進(jìn)程28 。S. Winarsih 也 在 改 進(jìn) 型 M S 培 養(yǎng) 基 上 ,對(duì)咖啡無(wú)性系 B P42 外植體接種菌根真菌 Gi gas pora m a r ga ri t a 。但 結(jié) 果 發(fā) 現(xiàn) , 這對(duì)小植株并未產(chǎn)生影響29 。2 . 1 . 3 植物愈傷組織的誘導(dǎo) 、培養(yǎng)與菌根 真菌的培養(yǎng) 、接種同時(shí)進(jìn)行迄今為 止 , 應(yīng) 用 最 廣 泛 的 叢 枝 菌 根 真 菌 ,由于其生 長(zhǎng) 與 發(fā) 育 離 不 開(kāi) 活 體 植 物 根 系 ,因而不能通過(guò)純培養(yǎng)途徑加以繁殖 。因 此 ,人們?cè)谘芯科淝秩炯捌渖硖匦缘鹊倪^(guò) 程中 ,一般通過(guò)菌根離體根段組織培養(yǎng)的方 法 ,建立叢枝菌根真菌菌系 。于是 ,植物組 織培養(yǎng)繁殖技術(shù) ,就自然地與叢枝菌根真菌 聯(lián)系在一起了 。菌根離體根段的組織培養(yǎng) ,為菌根化組 培苗的培養(yǎng)提供了 2 種途徑 :一是如上一節(jié) 內(nèi)容所介紹的 ,將菌根的離體根段或外植體 當(dāng)作叢枝菌根真菌的載體 ,即作為菌劑 ,用 作離體培養(yǎng)系統(tǒng)中菌根真菌的接種菌源 ;二 是將菌根的離體根段或外植體直接作為植 物外植體加以培養(yǎng) ,培育出完全菌根化的組 培苗 。當(dāng)然 ,這類(lèi)研究課題的難度也更大 。2 . 2 組培苗的培養(yǎng)基質(zhì)2 . 2 . 1用于馴化階段的培養(yǎng)基質(zhì) 為使移栽后的試管苗能夠存活并茁壯成長(zhǎng) ,選擇既有利于植物生長(zhǎng) ,又適合于菌 根真菌存活并對(duì)植物進(jìn)行侵染的培養(yǎng)基質(zhì) , 是非常重要的 。這類(lèi)栽培基質(zhì)須具備 4 個(gè) 基本功能 ,即固定作物 、保肥 、保水和透氣 , 同時(shí)還要成本低廉 ,取材和操作的方便 。在 具體的試驗(yàn)中 ,人們一般選用混合基質(zhì) ( 如 泥土與河沙 的 混 合 物) , 也 有 人 將 泥 炭 、蛭 石 、河沙 、有機(jī)肥或其它富含有機(jī)質(zhì)的基質(zhì) , 按適當(dāng)比例混合均勻后使用 。L ee S. S. 等 人 發(fā) 現(xiàn) , 蘭 屬 ( Cy m bi di2u m ) 的 C. k a n ra n 組培幼苗在蘭花土 (當(dāng)?shù)氐奶m花根際土壤) 與松樹(shù)皮堆肥的培養(yǎng)基質(zhì)上生長(zhǎng)良好 ; C . goe ri n gi i 在不滅菌的蘭花 土上生長(zhǎng)良好 ,而在滅菌的蘭花土上則生長(zhǎng) 受到抑制 。這就是說(shuō) ,滅菌后的蘭花土缺少 天然的菌根真菌 ,因而對(duì)幼苗的養(yǎng)分吸收與 生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面影響 。因此 ,他們認(rèn)為 ,可將 當(dāng)?shù)氐奶m花根際土壤看作是帶有豐富蘭科 植物菌根真菌的接種物 ,用作蘭花組培幼苗 的本底育苗基質(zhì)30 。V1 Estaun 等人在河沙與表土混合物 、泥炭 、由泥炭與樹(shù)皮堆肥組成的商品育苗基質(zhì)這 3 種 基 質(zhì) 上 , 對(duì) 桃 與 扁 桃 雜 交 砧 木(peach almo nd) 的組培苗接種菌根真 菌 。3 個(gè)月后的觀測(cè)結(jié)果表明 ,幼苗的生長(zhǎng)量和菌根真菌侵染率 ,均與培養(yǎng)基質(zhì)的種類(lèi)顯著 相關(guān) ,其中 ,單獨(dú)以泥炭為基質(zhì)的處理 ,其幼 苗生長(zhǎng)狀況明顯好于另外 2 種處理 ; 2 個(gè)生 長(zhǎng)季后 ,所有接種菌根真菌的幼苗 ,其根系 的菌根真菌侵染水平基本相同 ,而且其生長(zhǎng) 狀況均好于未經(jīng)接種的31 。B . D . Noval 等人及 R. K. Ver ma 等 人的研究結(jié)果表明 :在表土或河沙與表土的 混合物中加入一定比例的有機(jī)肥 ,可增強(qiáng)菌根真菌的接種效應(yīng) ,從而對(duì)組培苗的生長(zhǎng) 、養(yǎng)分吸收 、菌根真菌的侵染率及孢子產(chǎn)量都產(chǎn)生 明 顯 的 促 進(jìn) 作 用32 ,33 。A . Schubert 等人在 3 種泥炭類(lèi)商品育苗基質(zhì)中加入適 量 P 素 ,接種 112 d 后 ,蘋(píng)果組培幼苗根系 感染菌根真菌的比例極高 ,植株對(duì)養(yǎng)分特別 是對(duì) P 素的吸收量明顯增加 , 生長(zhǎng)也顯著 加快 ;同時(shí) ,基質(zhì)中的 P 素大幅度減少 。這 是因?yàn)?,在這種養(yǎng)分豐富的基質(zhì)中 ,植株根 系與菌根真菌廣泛形成了共生關(guān)系 ,從而促 進(jìn)了植株對(duì)養(yǎng)分的吸收34 。2 . 2 . 2 用于生根階段的培養(yǎng)基質(zhì)王真輝菌根真菌在植物組培苗生產(chǎn)技術(shù)中的應(yīng)用為更早地實(shí)現(xiàn)植物微繁外植體的菌根化 ,已有人進(jìn)行在無(wú)菌條件下直接將菌根真 菌菌劑與植物愈傷組織共同培養(yǎng)的試驗(yàn) ,但 成功者并不多見(jiàn) 。其問(wèn)題在于 ,宿主植物與 菌根真菌對(duì)養(yǎng)分 、通氣狀況及培養(yǎng)條件的需 求有一定的差異 。因此 ,選擇合適的離體培 養(yǎng)基質(zhì) ,使二者的需求得到兼顧 ,這是今后 的研究工作必須解決的關(guān)鍵和重點(diǎn)問(wèn)題 。 G. L . Mar k 等 人 分 別 對(duì) 木 麻 黃 屬( Cas u a ri n a ) 的 C . equiset i f ol i a 已 生 根 的 外植體和愈傷組織外植體進(jìn)行了叢枝菌根 真菌與弗蘭克氏菌的單獨(dú)接種和混合接種 。 他們直接將孢子接到這 2 種外植體的基部 。 其中 ,他們所 用 的 愈 傷 組 織 外 植 體 培 養(yǎng) 基 M4 支持 70 %的叢枝菌根真菌孢子萌發(fā) ,而 已生根外植體培養(yǎng)基 M5 則支持 57 %的孢 子萌發(fā) ;2 種培養(yǎng)基都適合于弗蘭克氏菌的 生長(zhǎng) 。試驗(yàn)結(jié)果顯示 :叢枝菌根真菌與弗蘭 克氏菌對(duì)外植體均未侵染成功 ,但血清學(xué)方 法以及標(biāo)準(zhǔn)的顯微技術(shù)檢測(cè)仍不能排除一 部分感染的可能35 。在這一研究中 , 由于 有弗蘭克氏 菌 的 加 入 , 更 增 添 了 研 究 的 難 度 。2 . 3育苗基質(zhì)中 P 素的含量 在育苗基質(zhì)中加入適量 P 素 , 可增加菌根真菌的感染率 ,促進(jìn)共生體的形成 ,使 微繁植株的各項(xiàng)生長(zhǎng)指標(biāo)得到提高 ;但若加 入的 P 素過(guò)量 ,則往往會(huì)阻礙菌根的形成 ,3菌根真菌與其它微生物混合接種對(duì)微繁植株生長(zhǎng)的影響菌根真菌在土壤中分布廣泛 。在植物 根 、根際以及土壤團(tuán)粒中 ,它們與大量微生 物共同存在 ,并且相互作用38 ,它們之間的 作用 ,往往會(huì)對(duì)植物生長(zhǎng)發(fā)育產(chǎn)生深刻的影 響 。近年來(lái) ,在菌根真菌與有益根際微生物 (其中包括共生固氮細(xì)菌與放線菌 ,以及一 些非共生固氮細(xì)菌和具有解磷作用的細(xì)菌) 混合接種對(duì)植物生長(zhǎng)影響的研究中 ,也包括 有對(duì)組培苗生長(zhǎng)影響的內(nèi)容 。J . Nowak 認(rèn)為 , 有益微生物與植物組 織外植體共同培養(yǎng) ,可以使微繁植株的發(fā)育 與代謝發(fā)生變化 ,并且提高植株對(duì)生物與非 生物脅迫的抵抗能力 。這種由接種物誘導(dǎo) 產(chǎn)生的抵御反應(yīng) ,稱(chēng)之為“生物化”( biotiza2 tio n) ; 對(duì) 于 菌 根 真 菌 引 起 的 反 應(yīng) , 則 稱(chēng) 為 “菌根化”( myco rr hizatio n) 39 。N . S. Naqvi 等人研究了接種 VA 菌根 真菌與根瘤菌 ( Rhizo bium) 對(duì)馴化階段的新 銀合歡微繁苗生長(zhǎng)和成活的影響 。結(jié)果表 明 :混合接種 2 種菌的處理 ,其幼苗根 、莖生 長(zhǎng) ,葉片數(shù)量 ,根瘤數(shù)量與菌根真菌感染率 , 都有較大幅度的增加 ,而且微繁植株的成活 率在 5 個(gè)月后仍達(dá) 100 % ; 單獨(dú)接種其中一 種菌的處理 ,其幼苗成活率分別為 91 . 66 % 與 65 . 21 % ;對(duì)照幼苗則生長(zhǎng)緩慢 ,而且在 5 個(gè)月后幾乎全部死亡40 。J . T. Put hur 等人對(duì)新銀合歡先在生 根階段進(jìn)行根瘤菌接種 ,待組培苗生根并形 成根瘤后再進(jìn)行馴化培育 ,同時(shí)接種 VA 菌 根真菌 。其結(jié)果是 : 混合接種的處理 ,組培 苗的成活率和生長(zhǎng)速度都比較高 ;單獨(dú)接種從而抑制植株的生長(zhǎng)14 ,26 ,36 ,37。這與以往在普通植物的菌根真菌接種效應(yīng)的研究結(jié)論相同 。此外 ,有人報(bào)道說(shuō) ,相對(duì)而言 ,施用單一 磷源時(shí) ,微繁植株的菌根比例較高 ; 施用復(fù) 合磷源時(shí) ,組培苗的菌根比例較低29 。根瘤菌的處理 , 植株成活 率 僅 為 20 %41 。M . Keller 等人的研究也證明 ,對(duì)豆科樹(shù)種組培苗進(jìn)行 VA 菌根真菌與根瘤菌的混合接種 ,能夠提高苗木的移栽成活率42 。R1 Alo nso - Reyes 等人在移栽香蕉組 培苗時(shí) ,同時(shí)接種了內(nèi)生菌根真菌與解磷細(xì) 菌 Pseu dom on as f l uorescens , 結(jié)果使植株的 高生長(zhǎng)量明顯增加20 。C. Karabaghli 等人 在挪威云杉幼嫩枝段的誘導(dǎo)生根試驗(yàn)中發(fā) 現(xiàn) ,當(dāng) 培 養(yǎng) 基 中 添 加 了 IAA 的 合 成 前 體色氨酸時(shí) ,下胚軸單獨(dú)接種外生菌根真 菌 L acca ri a bicolor , 可 提 高 培 養(yǎng) 體 的 生 根 率 ; 混 合 接 種 L . bicolor 與 Pseu dom on asf l uorescens , 可增加培養(yǎng)體根的數(shù)量 。這與 加入外源 IAA 的效果相同43 。M . Vo sat ka 等人指出 : 在選擇混合 接 種的組合時(shí) ,必須同時(shí)考慮菌根真菌 、有益 細(xì) 菌 以 及 它 們 的 宿 主 三 者 之 間 的 親 和vesicular arbuscular mycorr hizae o n tissue cult ure- derived plant s of st rawberry. Hort Science ,1990 , 25 (8) : 903905Azco n A C , Encina C L , Azco n R , et al . Effect of arbuscular mycor hiza o n t he growt h and devel2 op ment of microp ropagated A n non a cheri m ol a plant s. Agricult ural Science in Finland , 1994 , 3(3) : 281288Reddy M S , Sat yanarayana T. 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