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文檔簡介
DNA和蛋白質(zhì)技術(shù) 基礎(chǔ)對點(diǎn)知識點(diǎn)一DNA粗提與鑒定的基礎(chǔ)知識1.在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的差異B根據(jù)各種大分子的理化性質(zhì)的共性C根據(jù)各種大分子在細(xì)胞內(nèi)的功能D根據(jù)各種大分子的結(jié)構(gòu)和在細(xì)胞內(nèi)的位置答案A解析提取生物大分子的基本思路是:選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分子。DNA分子的粗提取是利用DNA與蛋白質(zhì)等其他成分在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異進(jìn)行分離的。2下圖中能正確反映DNA溶解度與NaCl溶液濃度之間關(guān)系的是()答案C解析DNA在NaCl溶液中的溶解度隨著NaCl溶液濃度的升高先減小后增大,在NaCl溶液濃度為0.14 mol/L時(shí)DNA溶解度最小,故選C。3下列有關(guān)DNA的特性的描述,錯(cuò)誤的是()A蛋白酶不能水解DNA,這體現(xiàn)了酶的專一性B大多數(shù)DNA不能忍受6080 的高溫C洗滌劑能夠瓦解細(xì)胞膜,但對DNA沒有影響DDNA不溶于酒精溶液答案B解析蛋白酶能水解蛋白質(zhì),但對DNA沒有影響,這體現(xiàn)了酶的專一性,A正確;大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080 的高溫,而DNA在80 以上才會變性,B錯(cuò)誤;洗滌劑不會影響DNA,但能夠瓦解細(xì)胞膜,C正確;DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精溶液,利用這一原理,可以將DNA與蛋白質(zhì)進(jìn)一步分離,D正確。4DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)()A磚紅色 B橘黃色C紫色 D藍(lán)色答案D解析DNA遇二苯胺(沸水浴)會呈現(xiàn)藍(lán)色,D正確。知識點(diǎn)二DNA粗提與鑒定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)5.下列不宜選作DNA粗提取材料的是()A洋蔥表皮細(xì)胞 B鮮豌豆種子C人成熟的紅細(xì)胞 D豬肝答案C解析用于DNA粗提取的材料應(yīng)具備的條件是細(xì)胞中要含有DNA,且DNA的含量要豐富,A、B、D三項(xiàng)都符合要求。人成熟的紅細(xì)胞無細(xì)胞核,不含DNA,所以不宜選作實(shí)驗(yàn)材料。6下列有關(guān)“DNA的粗提取與鑒定”實(shí)驗(yàn)的敘述,錯(cuò)誤的是()ADNA既溶于2 mol/L的NaCl溶液也溶于蒸餾水B向雞血細(xì)胞液中加蒸餾水是為了釋放出DNAC向溶解DNA的濃鹽溶液中加蒸餾水是為了析出DNAD用菜花替代雞血作為實(shí)驗(yàn)材料,其實(shí)驗(yàn)操作步驟不變答案D解析菜花是植物,用菜花細(xì)胞提取DNA時(shí)首先對植物組織進(jìn)行預(yù)處理,然后用洗滌劑溶解細(xì)胞膜,因此實(shí)驗(yàn)操作步驟與以雞血為材料時(shí)不同,D錯(cuò)誤。7為了純化提取的DNA,可直接在濾液中加入下列哪種物質(zhì),反應(yīng)1015 min,以達(dá)到實(shí)驗(yàn)?zāi)康?)A嫩肉粉 B蒸餾水C2 molL1 NaCl溶液 D酒精答案A解析嫩肉粉中含有木瓜蛋白酶,能催化蛋白質(zhì)水解,從而去除濾液中的部分雜質(zhì)。8下表是關(guān)于DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中所使用的材料、操作及其作用的表述,正確的是()選項(xiàng)試劑操作作用A檸檬酸鈉溶液與雞血混合有利于血液凝固B蒸餾水與雞血細(xì)胞混合保持細(xì)胞形狀C蒸餾水加入溶解有DNA的NaCl溶液中析出DNA絲狀物D冷卻的酒精加入過濾后的NaCl溶液中產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)答案C解析在DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中,檸檬酸鈉可以防止血液凝固;雞血中加入蒸餾水可以使細(xì)胞膜和核膜破裂;DNA在不同濃度的NaCl溶液中溶解度不同,在物質(zhì)的量濃度為0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低,有利于DNA析出;DNA不溶于酒精,而蛋白質(zhì)溶于冷卻的酒精可以獲得較純的DNA,DNA遇二苯胺(沸水浴加熱)呈藍(lán)色。9與析出DNA黏稠物有關(guān)的敘述,不正確的是()A操作時(shí)緩緩滴加蒸餾水,降低DNA的溶解度B在操作時(shí),用玻璃棒輕緩攪拌,以保證DNA分子完整C加蒸餾水可同時(shí)降低DNA和蛋白質(zhì)的溶解度,兩者均可析出D當(dāng)絲狀黏稠物不再增加時(shí),此時(shí)NaCl溶液的濃度為0.14 mol/L答案C解析向含有DNA的溶液中加入蒸餾水后,NaCl溶液的濃度會變小,當(dāng)NaCl溶液的濃度為0.14 mol/L時(shí),DNA的溶解度最小而析出,而蛋白質(zhì)此時(shí)則仍溶解在NaCl溶液中。10DNA的粗提取與鑒定實(shí)驗(yàn)中的三次過濾:(1)過濾用蒸餾水稀釋過的雞血細(xì)胞液;(2)過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液;(3)過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液。以上三次過濾分別為了獲得()A含核物質(zhì)的濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液B含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA黏稠物、含DNA的濾液C含核物質(zhì)的濾液、濾液中的DNA黏稠物、紗布上的DNAD含較純的DNA濾液、紗布上的黏稠物、含DNA的濾液答案A解析用蒸餾水稀釋雞血細(xì)胞液,使血細(xì)胞的細(xì)胞膜、核膜破裂,釋放出核物質(zhì),此時(shí)過濾可得到含核物質(zhì)的濾液;第二次過濾是因DNA在0.14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最小,DNA析出成絲狀黏稠物,經(jīng)過濾留在紗布上;第三次過濾,是將第二次獲得的黏稠物溶解在2 mol/L的NaCl溶液中,過濾除去雜質(zhì)獲得含DNA的濾液。能力提升11下列關(guān)于DNA的粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)過程的敘述,不正確的是()A操作步驟為:制備雞血細(xì)胞破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液溶解核內(nèi)的DNA并過濾析出并濾取含DNA的黏稠物DNA的再溶解并過濾提取較純凈的DNA鑒定DNAB實(shí)驗(yàn)過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2 mol/L,目的是溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNAC實(shí)驗(yàn)過程中,過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液和過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的分別是得到紗布上的黏稠物和含DNA的濾液D向溶有DNA的2 mol/L的NaCl溶液中加入二苯胺試劑即可出現(xiàn)藍(lán)色變化答案D解析DNA的粗提取和鑒定的實(shí)驗(yàn)步驟包括:制備雞血細(xì)胞破碎細(xì)胞,獲取含DNA的濾液溶解核內(nèi)的DNA并過濾析出并濾取含DNA的黏稠物DNA的再溶解和過濾提取較純凈的DNA鑒定DNA,A正確;實(shí)驗(yàn)過程中第一次所用NaCl溶液的濃度是2 mol/L,目的是溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA,B正確;過濾含黏稠物的0.14 mol/L的NaCl溶液的目的是去除溶于0.14 mol/L的NaCl溶液中的雜質(zhì),得到含有DNA的黏稠物,過濾溶解有DNA的2 mol/L的NaCl溶液的目的是得到含DNA的濾液,C正確;只有在沸水浴條件下,DNA才能與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色,D錯(cuò)誤。12.在“DNA的粗提取和鑒定”實(shí)驗(yàn)中,A、B、C、D四個(gè)小組分別選擇不同材料進(jìn)行實(shí)驗(yàn),表中表示不同的操作,請分析回答:組別材料選擇提取核物質(zhì)純化DNA鑒定DNAA雞血B洋蔥C豬血D豬肝(1)實(shí)驗(yàn)材料選擇錯(cuò)誤的組別是_,其原因是_。雞血是理想的實(shí)驗(yàn)材料,理由是_。(2)簡要說明操作的基本過程: _。(3)下列是操作的兩個(gè)方案,請分析其原理。方案一:直接在濾液中加入嫩肉粉,反應(yīng)1015 min。原理:_。方案二:將濾液放在6075 的恒溫水浴箱中保溫1015 min,注意嚴(yán)格控制溫度范圍。原理:_。(4)過程需要用到的試劑是_。答案(1)C哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,不含DNA雞血細(xì)胞中DNA含量豐富,材料易得;雞血細(xì)胞極易吸水漲破(2)先加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過濾后收集濾液即可(3)嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能分解蛋白質(zhì),而對DNA無影響,從而除去蛋白質(zhì)雜質(zhì)DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同,6075 的高溫使蛋白質(zhì)變性,而DNA不受影響,從而將DNA與蛋白質(zhì)分開(4)二苯胺試劑解析(1)哺乳動物成熟的紅細(xì)胞中沒有細(xì)胞核和細(xì)胞器,不含DNA,不適合作為本實(shí)驗(yàn)的材料;雞血細(xì)胞中DNA含量豐富,材料易得,雞血細(xì)胞極易吸水漲破,是理想的實(shí)驗(yàn)材料。(2)采用雞血提取核物質(zhì)的基本操作是:先加入一定量的蒸餾水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,讓紅細(xì)胞吸水漲破,再過濾收集濾液即可。(3)嫩肉粉中含蛋白酶,能分解蛋白質(zhì),不分解DNA,從而純化DNA; DNA和蛋白質(zhì)對高溫耐受性不同,在6075 的條件下,蛋白質(zhì)變性,而DNA不受影響,從而將蛋白質(zhì)與DNA分開。(4)在沸水浴條件下,DNA與二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色,因此,二苯胺可以作為鑒定DNA的試劑。13實(shí)驗(yàn)中對DNA進(jìn)行鑒定時(shí),進(jìn)行如下操作:試管序號AB1加2 mol/L NaCl溶液5 mL加2 mol/L NaCl溶液5 mL2不加加入提取的DNA絲狀物并攪拌3加入4 mL 二苯胺,混勻加4 mL二苯胺,混勻4沸水浴5分鐘沸水浴5分鐘實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)結(jié)論(1)根據(jù)右圖,完成表格空白處的實(shí)驗(yàn)內(nèi)容。(2)對B試管,完成1、2、3的操作后溶液顏色如何?_。(3)在沸水中加熱的目的是_,同時(shí)說明DNA對高溫有較強(qiáng)的_。(4)A試管在實(shí)驗(yàn)中的作用是_。(5)B試管中溶液顏色的變化程度主要與_有關(guān)。答案(1)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象:A.溶液不變藍(lán)色B溶液逐漸變藍(lán)色實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA在沸水浴的條件下遇二苯胺反應(yīng)呈現(xiàn)藍(lán)色(2)溶液顏色基本不變(或不呈淺藍(lán)色)(3)加快顏色反應(yīng)速度 耐受性(4)對照(5)DNA(或絲狀物)的多少解析A、B兩試管形成對照,B試管中含DNA絲狀物,A試管中不含,起對照作用,其他條件均完全相同。本實(shí)驗(yàn)強(qiáng)調(diào)反應(yīng)條件是沸水浴加熱5 min,加快顏色反應(yīng)的速度,觀察對比兩試管的顏色時(shí)要等到冷卻以后。根據(jù)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象A溶液不變色,B溶液逐漸變藍(lán),可知DNA在沸水浴條件下遇二苯胺變藍(lán)。14某生物興趣小組開展DNA粗提取的相關(guān)探究活動。具體步驟如下:材料處理:稱取新鮮的花菜、辣椒和蒜黃各2份,每份10 g。剪碎后分成兩組,一組置于20 、另一組置于20 條件下保存24 h。DNA粗提取:第一步:將上述材料分別放入研缽中,各加入15 mL研磨液,充分研磨。用兩層紗布過濾,取濾液備用。第二步:先向6只小燒杯中分別注入10 mL濾液,再加入20 mL體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液,然后用玻璃棒緩緩地向一個(gè)方向攪拌,使絮狀物纏繞在玻璃棒上。第三步:取6支試管,分別加入等量的2 mol/L NaCl溶液溶解上述絮狀物。DNA檢測:在上述試管中各加入4 mL二苯胺試劑,混合均勻后,置于沸水中加熱5 min,待試管冷卻后比較溶液顏色的深淺,結(jié)果如表。材料保存溫度花菜辣椒蒜黃20 20 注:“”越多表示藍(lán)色越深。分析上述實(shí)驗(yàn)過程,回答下列問題:(1)該探究性實(shí)驗(yàn)課題的名稱是_。(2)第二步中“緩緩地”攪拌,這是為了減少_。(3)根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,得出結(jié)論并分析。結(jié)論1:與20 相比,相同實(shí)驗(yàn)材料在20 條件下保存,DNA的提取量較多。 結(jié)論2:_。針對結(jié)論1,請?zhí)岢龊侠淼慕忉專篲。(4)氯仿密度大于水,能使蛋白質(zhì)變性沉淀,與水和DNA均不相溶,且對DNA影響極小。為了進(jìn)一步提高DNA純度,依據(jù)氯仿的特性,在DNA粗提取第三步的基礎(chǔ)上繼續(xù)操作的步驟:_。然后用體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精溶液使DNA析出。答案(1)探究不同材料和不同保存溫度對DNA提取量的影響(2)DNA分子的斷裂(3)等質(zhì)量的不同實(shí)驗(yàn)材料,在相同的保存溫度下,從蒜黃中提取的DNA量最多低溫抑制了相關(guān)酶的活性,DNA降解速度慢(4)將第三步獲得的溶液與等量的氯仿充分混合,靜置一段時(shí)間,吸取上清液解析(1)據(jù)題意,該探究實(shí)驗(yàn)的自變量有實(shí)驗(yàn)材料的種類和保存溫度,
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