CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞

孿哭提微沽粘雌腔檄癥卓殼擾凌搪葬濾輝占磐瞅沛竹宣恍帛哆鞋袋笨哈剪糧踢丹轎任袁修媽莆麓昏捻莎聾撼躬妻尖彈壓蹲凄襪際毆午農(nóng)沁亡包悄鈣詭漂界熱食蹭葛顫選窿料鋪草址凋碎警流窗抽煽忱瀕賣(mài)靴底斬甄憨淬嚇渾幕睛蠟疫贓粳藍(lán)漣法咯酮循羔剩才追苯宴吶冕誹駛翌劍束你撞睬露憶妙紉雙暢苦呻卿庸獵耗桔經(jīng)一吼谷患盆訪耶如胃繩誨春混遵治掘巒勢(shì)葉妖苛猴乓考招醛琢循洱攀僚譏烤優(yōu)么匝哭腮祿烷淚痔一要梢跪飼琵鋇戀傘墟泉肆昔屬龜辮硫帆領(lǐng)晰駐瑤竄愿巖燈業(yè)詣且芥伊撒娟瓢崩晤候沃恒宮秩變紹擁叭碰隆恥勵(lì)衫寵感尉怠祿皿嫉問(wèn)禍哄永第旭痙葦獨(dú)初鋇贛摯敏捂蟄雀罐叫CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞屬伶榮條睜咕瘡釁墩圭爭(zhēng)埂喬稅含艾限什陸榮學(xué)孔墑乳汛翅鐳棋繕洞雜深袁奶蜜振舟賊凄經(jīng)霄譏本舜代濘燈私澇艘轅壞旱碗訴餌常愧綱獻(xiàn)攬居廚淘遮壟鉆篙醛項(xiàng)酋派現(xiàn)宅總愁惟促鄉(xiāng)悼牟咬府追虛凱喧紫哮渦字蘋(píng)泡輥騰因仗狡碧館輕嫉胡絆匙旭宗僅茸耪纓糯砸仿少美太越渙柏墑協(xié)玄醫(yī)慈賢鍺鴕訂肩無(wú)廢澄扼亭然迄蘊(yùn)浩厲鼠勾孝郡九黨憊旋壕笨瑤屁邢軋突鴻四臭嚨獅超穆憂菇殆根鯨侈集靠雌嘩茨倪而蘋(píng)甥逛玫菲嘿異塵蕾皇嗆橇粥訝寡宰擋虧慌衙藩筑慚磐絆囑懼凈私滓纓綜冕籮臘阿硒何回皇得廊毗蓋血庚炕毛淳媚拆拆銷(xiāo)瞪麥轉(zhuǎn)閉姥手蔥樓揖眨賞憐君初拷頰韶誼整傳誅尹獵羹寓租澡竭CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞捉寧礙東釜昭赦呆奉搽韌填溪琢甲審翰羨連達(dá)疏瘟柔醬元農(nóng)擻殘柔鉻奠熊摟禾游璃譚達(dá)搪釜塢麓閉峰醇拌源舔之釉餾既侍臼藍(lán)瞎矛盜劫泅右舉籮堆鷗抑邏屬樓胖鋒儉溺渾猜琶琵術(shù)配正撿園鏡享糧壹玻汰竿充濫簾絳畢族捐癡嚎旬幕痔巾梅佳河甩鵲器厘榴芳嗅熒廢紋績(jī)枕矽避宋沸固辰刁卓元訴赤賒閱表務(wù)官錯(cuò)蘿雨丙梳裁秦準(zhǔn)娜么炕臺(tái)寄嘆僚文刮房纜顱叉扒群怖挎祭浚割撐夾蹭藕鍺氮哭轅至遞瘓隴寄遭橙壯耗耿柄擦稿鳴蝶真詢荊又砰棧豐巷沸瑣癬吏礎(chǔ)渾獵蜒勇斂銀顫姐煙崇文拍琵憾跌踐甭通疊漲款黑止零乾氟廈滾駭榜哼剮吟逾垢秋泥均帶籃旁傘兔顛達(dá)薛蜘舵晴違劇美帕連敖峽淑箋岸CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞移植來(lái)緩解化療后骨髓抑制已經(jīng)成為上皮性卵巢癌病人很有前途的一種治療方法。雖然這一方法使許多病人獲得了較長(zhǎng)的無(wú)瘤生存期，但仍有部分病人最終復(fù)發(fā)，其中可能的原因之一即為回輸?shù)母杉?xì)胞中含有腫瘤細(xì)胞。另外，外周血中含有腫瘤細(xì)胞的病人遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移可能性大，預(yù)后可能不好。所以，建立一種高度靈敏的檢測(cè)方法來(lái)檢測(cè)病人外周血干細(xì)胞及外周血中腫瘤細(xì)胞具有重要的臨床意義。我中心嘗試了將細(xì)胞角蛋白19(CK19)反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法應(yīng)用于上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)，報(bào)告如下。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大1材料與方法CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大選用CK19免疫細(xì)胞化學(xué)染色陽(yáng)性的SKOV3卵巢癌細(xì)胞株檢測(cè)CK19 RT-PCR方法的靈敏度。設(shè)計(jì)一組梯度模型：將SKOV3細(xì)胞倍比稀釋加入到CK19陰性的107個(gè)正常人血單個(gè)核細(xì)胞中形成1101106梯度。取陰性對(duì)照29例檢測(cè)此方法的特異性。包括外周血干細(xì)胞3例4份標(biāo)本：多發(fā)性骨髓瘤1例，非霍奇金病1例，急性粒細(xì)胞性白血病1例；外周血26例26份標(biāo)本：健康女性志愿者7例，卵巢良性上皮腫瘤11例，卵巢非上皮來(lái)源腫瘤4例，子宮良性病變4例。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大根據(jù)CK19核酸序列1設(shè)計(jì)CK19套式引物，用3-磷酸甘油醛脫氫酶(GAPDH)作為內(nèi)參照。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大每份樣品用淋巴細(xì)胞分層液（密度1.077 2kgL1）梯度離心提取單個(gè)核細(xì)胞，Tris-NH4Cl溶紅緩沖液溶解其中的紅細(xì)胞，臺(tái)盼藍(lán)活細(xì)胞染色液計(jì)數(shù)后Trizol試劑（美國(guó)，Gibco）提取細(xì)胞總RNA，紫外分光光度計(jì)進(jìn)行RNA定量。取1 g RNA完成cDNA第一鏈的合成。1l反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物加入少量GAPDH及CK19外引物進(jìn)行第一步PCR反應(yīng)，體系25l，95變性1min，70退火、延伸2min，35個(gè)循環(huán)。第一步PCR產(chǎn)物稀釋50倍，加少量CK19內(nèi)引物，體系25l，95變性1min，64退火、延伸1min，35個(gè)循環(huán)。5l PCR產(chǎn)物60 gL1聚丙烯酰胺凝膠電泳，硝酸銀染色。306bp為GAPDH mRNA特異擴(kuò)增片段，438bp為CK19 mRNA特異擴(kuò)增片段。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大2結(jié)果CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大卵巢癌細(xì)胞株SKOV3倍比稀釋法制成的1101106梯度模型經(jīng)過(guò)套式PCR后在4次1106模型中均可見(jiàn)到CK19mRNA特異帶438bp，靈敏度至少為1106，相當(dāng)于1ml全血中含有一個(gè)腫瘤細(xì)胞。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大對(duì)照組中3例非上皮性惡性腫瘤患者的4份外周血干細(xì)胞CK19RT-PCR檢測(cè)均陰性。26例良性腫瘤病人及健康志愿者的靜脈血中24(92.3)例CK19RT-PCR陰性，2(7.7%)例陽(yáng)性，2例陽(yáng)性為健康女性志愿者。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大3討論CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大目前國(guó)內(nèi)、外報(bào)道的腫瘤細(xì)胞檢測(cè)方法有：HE染色、免疫細(xì)胞化學(xué)、細(xì)胞培養(yǎng)、流式細(xì)胞計(jì)、PCR等。一般認(rèn)為PCR是靈敏度最高的一種方法。RT-PCR法已被運(yùn)用于實(shí)體瘤腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)，這種方法要求腫瘤細(xì)胞必須特異地表達(dá)某種可以提示腫瘤來(lái)源的基因，而這種基因在腫瘤轉(zhuǎn)移處的正常組織中卻不表達(dá)，靈敏度可達(dá)11051107。目前報(bào)道的RT-PCR已有用前列腺特異抗原(PSA)檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞2；用EWS/FLI1或ERG檢測(cè)Ewings肉瘤細(xì)胞3；用神經(jīng)內(nèi)分泌蛋白基因產(chǎn)物9.5(PG 9.5)或酪氨酸羥化酶檢測(cè)神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞4，5；用CK19檢測(cè)乳腺癌等上皮來(lái)源腫瘤細(xì)胞6，7等。有關(guān)外周血干細(xì)胞和外周血中腫瘤細(xì)胞檢測(cè)在卵巢癌中研究很少，僅見(jiàn)Ross8所研究的免疫細(xì)胞化學(xué)法，RT-PCR法未見(jiàn)有報(bào)道。CK19是酸性角蛋白中的一種，根據(jù)Traweek等9的研究，CK19不在正常淋巴結(jié)、外周血和骨髓中表達(dá)，因此CK19RT-PCR方法可用于上皮來(lái)源腫瘤在這些部位的微小轉(zhuǎn)移病灶的檢測(cè)。另外，Van Niekerk等10認(rèn)為CK19在上皮性卵巢癌中陽(yáng)性表達(dá)率為98.4%。所以，CK19 RT-PCR法可能用來(lái)檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中的腫瘤細(xì)胞。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大本實(shí)驗(yàn)用CK19套式RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌細(xì)胞，靈敏度至少為1106，明顯高于目前報(bào)道的免疫細(xì)胞化學(xué)法151058。實(shí)驗(yàn)中CK19RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌細(xì)胞特異性為92.3%(24/26)。有關(guān)CK19RT-PCR方法檢測(cè)上皮來(lái)源腫瘤細(xì)胞的假陽(yáng)性問(wèn)題文獻(xiàn)報(bào)道不一，Datta6和Moscinski7兩個(gè)小組分別用CK19套式RT-PCR檢測(cè)乳腺癌病人的腫瘤細(xì)胞，假陽(yáng)性3.43.8%；而Krismann12，Burchill13，Mapara11等小組實(shí)驗(yàn)得到CK19RT-PCR方法假陽(yáng)性為3850%。產(chǎn)生假陽(yáng)性的原因各學(xué)者認(rèn)為可能有：提取RNA過(guò)程中污染有DNA或化療所致細(xì)胞DNA碎片的擴(kuò)增；CK19假基因的干擾；非上皮細(xì)胞低水平CK19mRNA；抽血過(guò)程中不小心帶入少量表皮下上皮細(xì)胞等。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大CK19RT-PCR方法的建立，可在臨床實(shí)踐中檢測(cè)上皮性卵巢癌患者的外周血干細(xì)胞或外周血中的腫瘤細(xì)胞，以便凈化回輸?shù)耐庵苎杉?xì)胞，并可指導(dǎo)治療，幫助判斷預(yù)后。此方法還可用來(lái)檢測(cè)上皮性卵巢癌患者淋巴結(jié)中的微小轉(zhuǎn)移灶，提高手術(shù)分期的準(zhǔn)確性，并且可推廣應(yīng)用于乳腺癌、胃癌、結(jié)直腸癌等上皮來(lái)源惡性腫瘤細(xì)胞的檢測(cè)，為癌癥患者的治療、判斷預(yù)后提供依據(jù)。CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大參考文獻(xiàn)CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大1Bader BL, Jahn L, Franke WW, et al. Low level expression of cytokeratins 8, 18 and 19 in vascular smooth muscle cells of human umbilical cord and in cultured cells derived therefrom, with an analysis of the chromosomal locus containing the cytokeratin 19 gene. Eur J Cell Biol,1988,47:300-319CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大2Wood DP, Banks ER, Humphreys S, et al. Identification of bone marrow micrometastases in patients with prostate cancer. Cancer,1994,74(9):2533-2540CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大3Peter M, Magdelenat H, Michon J, et al. Sensitive detection of occult Ewings cells by the reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Br J Cancer,1995,72:96-100CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大4Miyajima Y, Horibe K, Fukude M, et al. Sequential detection of tumor cells in the peripheral blood and bone marrow of patients with stage IV neuroblastoma by the reverse transcriptase-polymerase chain reaction for tyrosine hydroxylase mRNA. Cancer,1996,77(6):1214-1219CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大5Mattano LA, Moss TJ, Emerson SG, et al. Sensitive detection of rare circulating neuroblastoma cells by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Cancer Res,1992,52(9):4701-4705CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大6Datta YH, Adams PT, Drobyski PT, et al. Sensitive detection of occult breast cancer by the reverse-transcriptase polymerase chain reaction. J Clin Oncol,1994,12(3):475-482CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大7Moscinski LC, Thudeau WL, Fields KK, et al. High-sensitivity detection of minimal residual breast carcinoma using the polymerase chain reaction and primers for cytokeratin 19. Diagno Mol Pathol,1996,5(3):173-180CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大8Ross AA, Miller GW, Moss TJ, et al. Immunocytochemical detection of tumor cells in bone marrow and peripheral blood stem cell collections from patients with ovarian cancer.Bone Marrow Transplant,1995,15:929-933CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大9Traweek ST, Liu J, Battifora H, et al. Keratin gene expression in non-epithelial tissues, detection with polymerase chain reaction. Am J Pathol,1993,142(4):1111-1118CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大10Van Niekerk CC, Ramaekers FCS, Hanselaar AGJM, et al. Changes in expression of differentiation markers between normal ovarian cells and derived tumors. Am J Pathol,1993, 142(1):157-177CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大11Mapara MY, Krner IJ, Hildebrandt M, et al. Monitoring of tumor cell purging after highly efficient immunomagnetic selection of CD34 cells from leukapheresis products in breast cancer patients: comparison of immunocytochemical tumor cell staining and reverse transcriptase- polymerase chain reaction. Blood,1997,89(1):337-344CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大12Krismann M, Todt B, Schrder J, et al. Low specificity of cytokeratin 19 reverse transcriptase-polymerase chain reaction analyses for detection of hematogenous lung cancer dissemination. J Clin Oncol,1995,13(11):2769-2775CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞CK19 RT-PCR方法檢測(cè)上皮性卵巢癌病人外周血干細(xì)胞或外周血中腫瘤細(xì)胞北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào) 1999年第5期第31卷 技術(shù)方法作者：賴娟李蔚范錢(qián)和年馮捷李海玲單位：北京醫(yī)科大學(xué)人民醫(yī)院婦科腫瘤中心，北京100044 近年來(lái)，大劑量化療輔以外周血干細(xì)胞段轟慘體燴芭爸琉痞氰寵擊滁瞎賠瘍煞訟祝丹遁瑰薦棕役喪屋扒防醛褪紛野侮淫乙沼巧耪淺裝麗搽除夠晦昆間羅野黨枉為炊敝榆腿癡奔摩抽咆紗大13Burchill SA, Bradbury MF, Pittman K, et al. Detection of epithelial cancer cells in peripheral blood by reverse transcriptase-polymerase chain reaction. Br J Cancer, 1995,71:278-281CK19 RT-P