實(shí)驗(yàn)10鄰二氮菲分光光度法測鐵

1、實(shí)驗(yàn)十 鄰二氮菲分光光度法測定鐵一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解分光光度計的結(jié)構(gòu)和使用方法；2.掌握用吸光光度法測定鐵的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)原理在可見光區(qū)進(jìn)行吸光光度測量，如果被測組分本身很淺，或者無色，那么就要用顯色劑與其反應(yīng)，生成有色化合物，然后進(jìn)行測量。用光度法測定鐵，顯色劑種類較多，鄰二氮菲光度法測鐵，由于靈敏度較高，穩(wěn)定性較好，干擾容易消除，因而目前普遍采用的一種測定方法。在pH為29的溶液中，鄰二氮菲與Fe2+反應(yīng)生成穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物：在pH=29范圍內(nèi)，該反應(yīng)能夠迅速完成，生成的紅色配位離子在510nm波長附近有一吸收峰，摩爾吸收系數(shù)為1.1104，反應(yīng)十分靈敏，F(xiàn)e2+ 濃度與吸光度符合

2、光吸收定律，適合于微量鐵的測定。實(shí)驗(yàn)中，采用pH=4.5-5的緩沖溶液保持標(biāo)準(zhǔn)系列溶液及樣品溶液的酸度；采用鹽酸羥胺還原標(biāo)準(zhǔn)儲備液及樣品溶液中的Fe3+并防止測定過程中Fe2+被空氣氧化。三、試劑和儀器試劑：1.0010-3ug/mL 的鐵標(biāo)液、1mol/L的NaAc溶液、100g/L的鹽酸羥胺溶液、1mol/L的NaAc溶液。儀器：50mL容量瓶、2.00mL、10mL、25.00mL吸量管、通用滴定管 、玻璃比色皿、分光光度計四、實(shí)驗(yàn)過程1、吸收曲線的繪制用吸量管吸取10mL 1.0010-3ug/mL 的鐵標(biāo)準(zhǔn)溶液于50mL容量瓶中，加入1ml 100g/L的鹽酸羥胺溶液，搖勻，再加入2

3、mL 1.5g/L鄰二氮菲溶液、5mL 1mol/L的NaAc溶液，以蒸餾水稀釋至刻度，搖勻。放置十分鐘。在可見光分光光度計上，用1cm的比色皿，以蒸餾水為參比溶液，從450nm至550nm每改變10 nm 測定一次吸光度。繪制A吸收曲線。找出最大吸收波長。2、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 標(biāo)準(zhǔn)溶液及樣品溶液的配制：編號0123456(補(bǔ)血鹽)10g/mL標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液0.00ml2.00ml4.00ml6.00ml8.00ml10.00ml5.00mL100g/L鹽酸羥胺溶液1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.00ml1.5g/L鄰二氮菲溶液2.00ml2.00ml2.

4、00ml2.00ml2.00ml2.00ml2.00mlNaAC緩沖溶液5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml5.00ml說明以上溶液均用移液管移取至50ml容量瓶中，用蒸餾水稀釋至刻度并搖勻。放置10min.在選定最大吸收波長處，用1cm比色皿，以0號溶液作為參比溶液，分別測定1至5號溶液的吸光度，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。并在最大吸收波長處測定未知樣品的吸光度，根據(jù)吸光度找出相應(yīng)的鐵含量。五、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果表1 吸收曲線的繪制（蒸餾水作參比）波長/nm吸光度/A4500.0654600.0714700.0774800.0794900.0815000.0845020.0

5、855040.0865060.0875080.0875100.0875120.0875140.0865160.0855180.0835200.0805300.0645400.0435500.026圖1 吸收曲線表1 吸收曲線的繪制（試劑空白作參比）波長/nm吸光度/A4500.0634600.0684700.0744800.0764900.0785000.0815020.0825040.0835060.0835080.0845100.0845120.0835140.0825160.0815180.0805200.0765300.0605400.0405500.023圖2 吸收曲線從吸收曲線圖1

6、可以看出鄰二氮菲-亞鐵配合物在波長510nm處吸光度最大，因此測定鐵時宜用波長為510nm。表2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制及鐵含量測定編號12345補(bǔ)血鹽鐵的濃度/gmL-10.40.81.21.62.01.575吸光度/A0.0790.1620.2450.3220.4040.317圖3 標(biāo)準(zhǔn)曲線從該曲線的線性方程可以算出未知液中鐵的含量為1.575gmL-1，0.5002g補(bǔ)血鹽含鐵量為78.75g，即補(bǔ)血鹽中鐵的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.016%。六 實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)要點(diǎn)1.比色皿在換裝不同濃度的溶液時，必須用待測的溶液潤洗至少三次。2.比色皿放入分光光度計樣品室錢，必須用吸收紙將表面擦拭干凈。3.在換用不同波長測吸光度時必須重新調(diào)節(jié)透射比為100%。4.主要試劑使用說明100 gL-1鹽酸羥胺溶液：保證將溶液中的三價鐵離子全部還原成二價的鐵離子。1.5 gL-1鄰二氮菲溶液：進(jìn)行顯色，在pH29的溶液中，鄰二氮菲和Fe2+可以生成一種穩(wěn)定的橙紅色絡(luò)合物Fe(phen)