細菌感染的檢查與防治原則

1、第8章: 細菌感染的檢查 方法與防治原則 Diagnosis and control for bacterial infection,病原菌的檢查程序,直接涂片鏡檢,初步診斷,分離培養(yǎng),標本,生化試驗,血清學試驗,動物試驗,藥物敏感試驗,明確診斷,其他檢測法,抗原檢測,一）標本的采集和運送原則,避免雜菌污染,運送注意保存,不同期不同標本,用抗菌藥物以前,采集病變明顯部位,標本必須新鮮,第一節(jié) 細菌感染的檢查,膽囊標本：在外科膽囊摘除手術中，采集膽囊炎患者的膽囊和膽石標本,二）細菌分離培養(yǎng)與鑒定 形態(tài)學檢查: 形態(tài)與染色性具有特征的病原菌可直接染色鏡檢 直接涂片鏡檢 不染色法： 懸滴法,壓滴法

2、暗視野顯微鏡、相差顯微鏡 染色法 革蘭染色 Gram stain 抗酸染色 acid-fast stain 熒光顯微鏡,懸滴法,鏡檢,革蘭陽性菌,革蘭陰性菌,淋病患者尿道分泌物直接涂片鏡檢,2.分離培養(yǎng)(isolation and cultivation): 診斷的金標準，是最可靠的傳統(tǒng)診斷技術,病原菌的分離培養(yǎng)：菌落,大小 形態(tài) 顏色 表面性狀 透明度 溶血性,血瓊脂平板上分離的菌落 取單個菌落，可獲得細菌 的純培養(yǎng)物,3.生化試驗: 針對一個細菌菌落或純培養(yǎng)物進行鑒定,生化反應,糖發(fā)酵試驗 H2S試驗 枸櫞鹽利用試驗,靛基質試驗,4.血清學試驗:用已知抗體檢測未知細菌抗原，進行群和型的鑒別

3、。 最簡易的方法有玻片凝集等試驗,玻片凝集,5.動物實驗,常用動物 小鼠豚鼠家兔 接種途徑 皮內 皮下腹腔靜脈 腦內鼻腔灌胃,豚鼠：適用于白喉棒狀桿菌、鉤端螺旋體、結核分枝桿菌、恙蟲病立克次體等病原體的分離培養(yǎng)或毒力檢測,6.藥物敏感試驗,方法 紙碟法、試管法、小杯法和凹孔法 最低抑菌濃度（MIC) 最低殺菌濃度(MBC,三）病原菌抗原的檢測: 用已知抗體檢測未知抗原 EIA 酶免疫技術 協(xié)同凝集試驗 SPA IF 免疫熒光技術 CIE 對流免疫電泳 免疫印跡技術 WB,ELISA,direct,indirect,Fluorescence Microscopy,四）檢測病原菌核酸 分子生物學技

4、術 molecular biological techniques 1,核酸雜交(nucleotide hybridization) 2,多聚酶鏈反應 (polymerase chain reaction: PCR):一種無細胞的分子克隆技術，能在體外將一個基因或一段DNA 序列經(jīng)過多次循 環(huán)的DNA復制，在數(shù)小時內擴增上百萬倍。既便于基因診斷，又利于 研究。 3,基因芯片(gene chips,PCR儀,DNA的PCR擴增 產物電泳結果 （EB染色,基因芯片（microarray chip,二、血清學診斷 用已知細菌或其Ag檢測相應的Ab及量的多少，作為某些病原菌感染的輔助診斷 急性期和恢復

5、期雙份血清, 若恢復期或一周后血清抗體效價比早期升高 4倍，有診斷價值。 方法：玻片或試管凝集試驗、沉淀試驗、補體結合試驗和冷凝集試驗,細菌感染的實驗診斷方法,獲得性免疫產生的方式,主動免疫 自然免疫 患病、隱性感染 人工免疫 疫苗、類毒素 被動免疫 自然免疫 胎盤、初乳 人工免疫 抗毒素、丙球,人工免疫,基本概念：人工方法給機體接種疫苗、抗血清、淋巴因子等，使機體獲得特異性免疫力。 常用方法：包括：人工主動免疫，人工被動免疫，過繼免疫,細菌感染的特異性預防,一、人工主動免疫:將疫苗或類毒素接種于人體 （一）疫苗:死疫苗.減毒活疫苗.亞單位疫苗.重組載體疫苗.基因工程疫苗.核酸疫苗 （二）類毒素 二、人工被動免疫:注射含有特異性抗體的免疫血清 或純化免疫球蛋白抗體，或細胞因子等免疫制劑. 抗毒素 血清丙種球蛋白 其他免疫制劑：IFN-，CSF等,生物制品：用于人工免疫的疫苗、類毒素、免疫血清、細胞制劑以及診斷用品等的生物性制劑。 疫苗：是利用微生物及其代謝產物，經(jīng)過人工減毒或滅活或基因工程等方法方法制成，用于預防疾病的自動免疫制劑,第一代疫苗： 活疫苗 、死疫苗 第二代疫苗： 亞單位疫苗、基因工程疫苗 第三代疫苗： 核酸疫苗,死疫苗與活疫苗的區(qū)別,人工主動免疫與人工被動免疫的區(qū)別,第三節(jié) 細菌感染的治療,一、抗菌藥物的種類 二、抗菌藥物的主要作用機制,名詞解釋： 疫