川臍血庫2008版介紹孕婦講座參考PPT

1、1,四川省臍帶血造血干細胞庫建設情況匯報,2,一. 發(fā)展過程二. 技術依托及目前現(xiàn)狀三. 國內(nèi)外臍帶血庫發(fā)展情況四. 臍帶血干細胞的臨床應用及前景,3,發(fā)展過程,四川省臍血干細胞中心”作為過渡機構 19992001,衛(wèi)生部批準設置 四川省臍帶血造血干細胞庫 2001年2007年,2007年獲得衛(wèi)生行政部門執(zhí)業(yè)許可,省廳重點課題立項19951999,4,技術依托:中國醫(yī)學科學院輸血研究所,5,目前現(xiàn)狀： 在四川建立了一個規(guī)范化的臍帶血造血干細胞庫，專門從事臍帶血的采集、制備、保存和供應，其最終目標是為四川乃至全國的患者提供高質(zhì)量的臍帶血造血干細胞，用于臨床治療。同時我們也為將來更為廣泛的細胞治療

2、儲備了生物資源，建設了一個很好的技術平臺，搭建起基礎研究與臨床應用的橋梁，將造福于更多的患者,6,技術來源：國內(nèi)的技術規(guī)范,衛(wèi)生部 1999年頒布 臍帶血造血干細胞庫管理辦法（試行） 衛(wèi)生部2001年頒布 臍帶血造血干細胞庫設置管理規(guī)范(試行) 臍帶血造血干細胞庫技術規(guī)范（試行,7,主要參照的國際標準,NHLBI (NIH): Cord Blood Transplantation Study Cord Blood Bank Standard Operating Procedures NetCord-FACT: International Standards For Cord Blood Col

3、lection, Processing, Testing, Banking, Selection, and Release,8,臍血庫建設的內(nèi)容,供者的動員/篩查/知情同意 臍帶血的采集、制備、檢測和低溫凍存 臍帶血的檢疫期與發(fā)放 臍帶血的長期保存 提供臨床使用 移植結果分析 質(zhì)量管理, 總體有效性評價,9,四川省臍帶血造血干細胞庫總的技術路線,10,產(chǎn)院:供者篩選/知情同意/臍帶血采集,四川省臍帶血造血干細胞庫,收血室:臍帶血初篩,臍帶血制備實驗室 去除多余RBC及血漿,深低溫凍存,轉(zhuǎn)入檢疫期臨時保存,轉(zhuǎn)入公共庫,長期保存,查詢庫,臨床移植,移植后隨訪,經(jīng)血液垂直傳播的病原體檢測: HIV抗

4、體、HBsAg、 HCV抗體、梅毒抗體,細菌及霉菌檢測： 厭氧菌/需氧菌/霉菌,血型檢測： ABO血型檢測 RhD血型檢測,造血干/祖細胞檢測 TNC、活細胞及CFU集落培養(yǎng),流式細胞檢測： CD34+細胞絕對計數(shù),臨床移植醫(yī)院 主管醫(yī)生/患者及其家屬,四川省臍帶血造血干細胞庫 臨床移植小組,復核工作： （1）資料全面復核 （2）HLA、NC、細胞活率、CFU等 補充實驗： （1）CMV抗體檢測 （2）CD34+細胞檢測 新生兒健康隨訪： （1）排除本地區(qū)常見遺傳病 （2）減少輸血傳播病原體（窗口期,廢棄并及時銷毀,TNC及活細胞檢測,組織配型 HLA-A/B/DR基因分型,資料轉(zhuǎn)入移植庫,新

5、生兒半年健康隨訪,留樣,初篩合格,各種檢測結果合格,初次查詢,資料反饋,發(fā)放,凍存前留樣,研究庫,廢棄庫,不合格,不合格,制備前留樣,11,目前，我?guī)煲驯４?754份單位臍帶血（其中公共庫2138份，自體庫5616份），共接受臨床查詢 454人次。 作為造血干/祖細胞用于臨床8種疾病的27位患者的移植治療（同胞8份，非血緣23份）。 先后與國內(nèi)20余家臨床移植醫(yī)院建立合作關系，并在其中13家開展臍帶血臨床移植。植入率和存活率與國際國內(nèi)同類報導相當，截止2008年9月，移植后無病存活者最長已有8年半,12,13,14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,國內(nèi)外臍帶血庫發(fā)展情況,

6、24,臍帶血保存和臍帶血移植,臍帶血移植已經(jīng)成為治療血液系統(tǒng)腫瘤和遺傳性疾病的一種手段，它不僅可用于兒童，也可用于無HLA匹配的成人患者。 目前全球臍帶血公共庫（Public Cord Blood Bank)保存的臍帶血已超過350，000份，其中15，000多份臍帶血進行了臍帶血移植。(06/2008, ISBT, 澳門,25,26,1991: 第一個非血緣的公共臍帶血庫建立 Pablo Rubinstein NY Blood Center 1993:第一個非血緣的臍帶血造血干細胞移植開展 Duke University,27,從 1993以來, 全球開展的臍帶血干細胞移植病例數(shù)已超過15，

7、000 例； (06/2008, ISBT, 澳門） 臍帶血移植已廣泛應用于不能找到匹配的骨髓供者的患者； HLA匹配的限制更低； 更低的GvHD 發(fā)生率； 移植物被相關病毒污染的機會更低,28,中性粒細胞和血小板的植入延遲； 總的DFS 與匹配的非血緣成人供者提供的骨髓移植結果相當,29,美國的臍帶血庫,分3類：公共庫/自體庫/公共庫與自體庫并存 加入NMDP的臍血庫就有18個，獨立于NMDP的臍血庫5個，不包括自體臍血庫。 從骨髓供者世界聯(lián)網(wǎng)（BMDW）的數(shù)據(jù)看，僅公共庫就保存144，670份（2008/08/26,30,美國各州臍帶血立法,每年，超過35,000名患有危及生命的疾病的美國

8、兒童和成人需要干細胞移植治療。對配型相符的干細胞不斷增長的需求引起了各州立法者的注意。作為對選民的回應，全國的立法官正在引入法律以幫助醫(yī)生和準父母，告知其有捐獻或儲存新生兒臍帶血干細胞的知情權。目前，在美國的17個州（涵蓋61的出生人數(shù)），已經(jīng)設立了相應法律,31,目前有臍帶血立法的州,亞利桑那州 阿肯色州 加利福尼亞州 喬治亞州 伊利諾州 賓夕法尼亞州 馬里蘭州 馬薩諸塞州 新澤西州 密西根州 得克薩斯州 弗吉尼亞州 新墨西哥州 紐約州 田納西州 華盛頓 威斯康辛州,32,紐約州,2007年8月，紐約州修訂州公共衛(wèi)生法，設立公共和個體庫臍帶血儲存計劃，該計劃旨在促使公眾意識到公共及個人儲存臍

9、帶血的益處，促進臍帶血應用方面的研究，以及推動公共庫和個體庫的產(chǎn)前捐贈。該計劃通過當?shù)匦l(wèi)生局、保健醫(yī)生、醫(yī)院、診所及其他組織為懷孕婦女提供公共庫和個體庫儲存的教育材料和手冊，并保證普及到大眾和潛在捐獻者。此外，該法案要求在衛(wèi)生保健人員中同步發(fā)放教育材料,33,華盛頓,2008年，華盛頓州立法院簽署HB2431法案，該法案鼓勵保健人員更好地為病人解釋臍帶血干細胞的價值和儲存干細胞的選擇方案。法案確保準父母們在妊娠晚期之前可以更方便地了解臍帶血儲存信息，從而幫助其更容易準備自體儲存臍帶血干細胞或捐獻給公共庫，而不是把臍帶血當作醫(yī)療廢物丟棄掉。新法案還要求臍帶血庫辦理許可證、資質(zhì)鑒定以及聯(lián)邦政府和華

10、盛頓州法律所規(guī)定的其他許可,34,美國最大的公共臍帶血庫-NCBP,1989年提出建庫設想； 1992年獲得第一筆為期3年的建庫經(jīng)費； 1993年正式建庫，并于同年提供臨床2份單位臍帶血，用于白血病患兒的移植治療； 1996年FDA批準其采集、制備和臨床應用； 2000年從Starr 基金會獲得為期2年的$2，000，000建庫研究經(jīng)費,35,NCBP,2001年提出要保存少數(shù)民族的臍帶血； 2002年再從Starr 基金會獲得為期2年的$5，000，000建庫研究經(jīng)費； 2003年出現(xiàn)轉(zhuǎn)折，美國政府出臺法規(guī)，出資$10,000,000在全美支持臍帶血庫建設，其目標是保存150，000份高質(zhì)量

11、的人種分布合理的單位臍帶血其中$1,000,000給了NCBP,36,NCBP,2005年美國總統(tǒng)布什簽署了“Stem Cell Therapeutic and Research Act of 2005”法案，批準以新的聯(lián)邦基金($79,000,000)在全美建立一個公共臍帶血網(wǎng)； 2006年HRSA RFP 資助6個CBB建設。 Duke - Peuget Sound MD Anderson - Stemcyte NY Blood Center - U Colorado,37,目前已保存超過41，903份臍帶血（08/26/2008） 向臨床2504位病人提供了單位臍帶血（08/31/200

12、7） 用于79種疾病的移植治療,38,39,美國最大的自體臍帶血庫- CBR,40,美國最大的自體臍帶血庫- CBR,CBR (Cord Blood Registry )是世界上最大的一家自體臍帶血庫，目前已保存230，000余份自體臍帶血，用于臨床臍帶血移植82例，同胞臍帶血移植42例，自體臍帶血移植39例，1例用于母親CML治療。 備注：分別于07/08和07/29在美國Duke大學移植中心進行了2例自體臍帶血移植治療腦癱，因此病例數(shù)從上周78例增至82例,41,CBR,CBR 臍帶血移植已用于22種疾病的治療，2005年以前，主要是同胞臍帶血移植治療血液系統(tǒng)疾病，包括CML, MDS,A

13、LL,ANLL,AML,ABL,重型再障等。2005年以后，特別是07年以后，主要是自體臍帶血移植治療腦損傷和青少年糖尿病,42,CBR移植適應癥,43,日本臍帶血庫,1994年開始臍血及其移植領域的研究； 1997年成立東京臍血庫； 1998年第一例非血緣成人臍血移植成功； 1999年，日本政府決定將地方臍血庫聯(lián)網(wǎng)并給予經(jīng)濟支持，11個地區(qū)的公共臍血庫建立了日本臍血庫聯(lián)盟（JCBBN）。 2004年日本教育科學部批準成立了研究用臍血庫協(xié)助組，該類研究將為再生醫(yī)學的發(fā)展和進步起到重要的推動作用,44,日本臍帶血移植,目前，日本有11家臍帶血庫，庫存臍帶血已有33，000多份，其中4，000多份

14、臍帶血已用于移植。 日本的成人臍帶血移植發(fā)展迅速，移植效果較好,45,46,日本UD-UCBT經(jīng)驗,UCBT(n=68) BMT(n=45) 植入率 92% 100% ANC/PLT 22/40 18/25 aGVHD 7% 26% cGVHD TRM (1年） 9% 29% 復發(fā)率 16% 25% 感染/GVHD 0% 42% 死亡率 DSF(2年） 74% 49,47,臍帶血干細胞的臨床應用及前景,48,人們認識臍帶血的歷史,上世紀30年代，人們就已經(jīng)知道臍帶血可以替代外周血用于輸注治療； 1972年人們開始嘗試把臍帶血作為一種造血干細胞來源，用于小兒急性淋巴細胞白血病化療后造血恢復治療。

15、 1988年，法國醫(yī)生Gluckman教授首次采用臍帶血造血干細胞移植治愈了一位范可尼貧血患兒，開創(chuàng)了臍帶血造血干細胞移植新紀元,49,臨床應用,進入21世紀，全世界至少已進行了15，000例以上的臍帶血造血干細胞移植，治療了多種血液系統(tǒng)疾病，某些遺傳病，實體瘤和免疫系統(tǒng)疾病，并已應用于成人患者,50,主要適應癥,癌癥 Cancer 骨髓衰竭 Bone Marrow Failure Syndromes 血液病癥/血紅蛋白病 Blood Disorders /Hemoglobinpathies 代謝性疾病 Metabolic Disorders 免疫缺陷 Immunodeficiencies 再

16、生醫(yī)學 Regenerative Medicine,51,Above: Katherine on her second transplant birthday, and below: on her third transplant birthday. She brought cupcakes into school to celebrate,52,53,54,55,56,57,58,59,自體干細胞在再生醫(yī)學上的應用,心臟病 Heart Disease 眼科疾病 Eye Disease 糖尿病 Diabetes 腦和脊髓損傷 Brain/Spinal cord injury： 中風恢復 Str

17、oke recovery Parkinsons 病 Parkinsons Disease 肌萎縮硬化癥 Amyotrophic lateral sclerosis 肌營養(yǎng)障礙 Muscular Disease 矯形外科 Orthopedic Disease,60,神經(jīng)損傷修復實驗研究,臍帶血干細胞為腦損傷患者帶來希望 新加坡國防研究院和國家癌癥研究中心的聯(lián)合研究項目 實驗顯示；在注射了人類臍帶血干細胞后， 腦組織損傷的大鼠的神經(jīng)功能 得到了改善，包括聽、應急反 應和運動能力,61,神經(jīng)損傷修復實驗研究,美國醫(yī)學雜志干細胞發(fā)展報道：日美聯(lián)合研究小組研究發(fā)現(xiàn)注射臍帶血有助于預防阿爾茨海默氏癥（俗稱

18、早老性癡呆癥）。 10只患早老性癡呆癥實驗鼠注射人臍帶血（每隔2周注射一次，共注射8次），結果發(fā)現(xiàn)實驗鼠與對照鼠相比，其腦內(nèi)積聚的淀粉樣蛋白減少了70,62,神經(jīng)損傷修復實驗研究,BMC神經(jīng)科學：人類臍帶血可 “喚醒”動物衰老大腦。 美國南佛羅里達大學衰老與大腦修復研究中心的科學家發(fā)現(xiàn)：將人類臍帶血注射入老齡大鼠后，它們大腦海馬區(qū)的微環(huán)境會得到改善，同時神經(jīng)干細胞或前體細胞也得到相應的恢復。 專家推測：臍帶血干細胞可能是通過減少衰老大鼠的神經(jīng)炎癥，從而部分挽救由衰老引發(fā)的神經(jīng)發(fā)生減少，并改善大腦的認知功能。 這一成果開啟了利用細胞療法應對大腦衰老的可能性,63,神經(jīng)損傷修復實驗研究,肌萎縮側(cè)索

19、硬化的G93A小鼠模型中人臍血單核細胞可促進神經(jīng)組織成功再生，并提高存活率。 大腦中動脈閉塞的大鼠中風模型中，臍血細胞的注入顯著提高實驗動物的行為恢復，通過被動回避測試發(fā)現(xiàn)任務學習能力也有所改善,64,神經(jīng)損傷修復實驗研究,以色列耶路撒冷希伯來大學的Philip教授從人的臍帶血單個核細胞中分離和鑒定到神經(jīng)祖細胞群落，具有神經(jīng)外胚層源性細胞的典型特征。 通過Western blot 和RT-PCR檢測，證實這些祖細胞可以表達共同的神經(jīng)元標記，如微管相關蛋白2（MAP-2),神經(jīng)營養(yǎng)因子受體（TrkA), 微管蛋白和神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE)等,65,神經(jīng)損傷修復實驗研究,明尼蘇達州大學醫(yī)學院

20、的研究人員也在臍帶血中發(fā)現(xiàn)了具有原始干細胞特征的一個新細胞群，能夠產(chǎn)生多種不同類型的細胞； 研究人員將這些臍帶血干細胞移植給患中風的實驗鼠，結果發(fā)現(xiàn)實驗鼠的大腦損傷范圍顯著縮小，并且改善了這些動物的肢體活動狀況,66,神經(jīng)損傷修復實驗研究,2006年美國休斯頓Rice大學的Hartgerink教授的實驗證實：臍帶血中存在多組織分化潛能的胚胎樣干細胞（CBEs)，能持續(xù)表達與胚胎干細胞一致的標記物； 同時他們在冷凍的臍帶血標本中重復了上述實驗，獲得了相同的CBE； 臍帶血來源的胚胎樣干細胞具備向神經(jīng)分化的潛能,67,神經(jīng)損傷修復實驗與臨床研究總結,越來越多的文獻表明：臍帶血干細胞在中樞神經(jīng)系統(tǒng)損

21、傷修復中發(fā)揮重要作用； 已有缺氧性腦損傷，外傷性腦損傷和腦癱的患者進行自體細胞治療； 自體輸注是安全的； 在生命之初治療是最佳的時機,68,心臟損傷修復實驗研究,臍帶血干細胞能產(chǎn)生新的心臟血管 瑞士聯(lián)邦技術研究所與德國心臟中心的聯(lián)合研究 實驗顯示： 臍帶血干細胞能夠用于產(chǎn)生新的組織以修復受損的心血管，并伴有細胞外基質(zhì)出現(xiàn) 由可吸收的生物多聚物構架和臍帶血細胞形成的組織是有活力的，強大的，并伴有關鍵的肌肉蛋白出現(xiàn),69,心臟損傷修復實驗研究,日本東京慶應大學醫(yī)學院的研究人員觀察到在體外，將近一半的人臍帶血間充質(zhì)干細胞成功分化為心肌細胞； 作者推測：臍帶血間充質(zhì)干細胞可能成為以干細胞為基礎的心臟治

22、療中有前途的細胞資源,70,心臟損傷修復實驗研究,Hirata等人成功證實全身給予人臍血CD34+細胞可以提高大鼠的左心室射血分數(shù)（LVEF）。 去胸腺大鼠注入臍血來源的CD133+細胞可提高心臟收縮能力和左心室射血分數(shù)，同時可以抑制心室重塑，這是導致心梗后心力衰竭的主要原因之一。 在冠狀動脈阻塞的豬模型中，注入體外擴增的臍血干細胞顯著提高局部心肌血流灌注、室壁運動和LVEF,71,心臟損傷修復實驗研究,美國科學家Hirata成功地證實接受系統(tǒng)注射人臍帶血CD34細胞的實驗鼠左心室射血分數(shù)（LVEF)有明顯提高； 結論是：人臍帶血細胞可改善心肌梗死發(fā)生以后的心臟功能,72,肝損傷修復實驗研究,

23、修復損傷肝 美國圣路易斯華盛頓醫(yī)學院Nolta博士 實驗表明：源于骨髓和臍帶血的人類干細胞是潛在的肝細胞源,73,肝損傷修復實驗研究,臍血干細胞還被證實可修復四氯化碳所致的肝損傷模型中小鼠的肝組織 Fas配體介導的肝硬化模型研究表明：臍帶血來源的細胞能分化為肝細胞樣細胞，從而使肝硬化的肝組織得到修復,74,實驗研究,發(fā)現(xiàn)一種Delta-1蛋白分子，可以擴增臍帶血干/祖細胞100倍 預示臍血干細胞移植有望廣泛應用于成人治療 美國西雅圖Fred Hutchinson 癌癥研究中心與華盛頓大學的研究結果,75,目前進行的部分臨床試驗,美國Duke University開展的自體臍帶血移植治療兒童腦癱

24、 美國Shands University of Florida開展的自體臍帶血移植治療型糖尿病,76,自體臍帶血移植個案,1999年自體CBT治療成神經(jīng)細胞瘤 2004年自體CBT治療重型再生障礙性貧血 2007年美國兒科學雜志報道自體CBT治療小兒ALL 2007年自體CBT治療11歲的型糖尿病患者Darla 2007-08自體CBT治療腦損傷: Dallas案例 Patti Chloe Levine案例,77,Jesse2000年7月出生時就患有視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤； 4個月大時開始接受大劑量化療治療，但不久醫(yī)生在他的腦脊液中發(fā)現(xiàn)了癌細胞，癌細胞已經(jīng)轉(zhuǎn)移； 2001年4月，醫(yī)生用他出生時父母為

25、他保存的臍帶血進行自體臍帶血干細胞移植，改善化療破壞的免疫系統(tǒng)； 手術非常成功，2001年6月康復出院，至今他就是1名普通健康的8歲男孩,78,自體臍血移植治療白血病兒童患者的首次報道,2007年1月，美國專業(yè)期刊Pediatrics雜志發(fā)表了一篇文章，報道了美國伊利諾斯州的一家醫(yī)院，用自體臍血移植治療一名患急性淋巴細胞白血?。ˋLL）的兒童，獲得了成功，這也是有關此方面內(nèi)容的首次報道,79,患者是一名女孩，今年6歲，3歲時被確診為白血病。醫(yī)院首先采取了化療，患者得到緩解后中樞神經(jīng)系統(tǒng)復發(fā)，又通過系統(tǒng)化療獲得第二次緩解。醫(yī)生對她進行了清髓性放化療后，輸注了她出生時保存的臍帶血。臍血移植后，小女孩沒有出現(xiàn)嚴重的感染、 GVHD和其他并發(fā)癥。4個月后，她的血細胞計數(shù)恢復了正常，一年以后，骨髓檢查顯示了正常的造血恢復。到作者寫這篇文章時，這名患兒已經(jīng)保持了20個月的完全緩解狀態(tài)，情況良好,80,在這個病例中，醫(yī)生們將免疫球蛋白重鏈（IgH）受體基因和T- Jg受體基因的重排作為白血病克隆的分子標記，運用聚合酶鏈式反（PCR）技術進行檢測，在患