2017 2018高中生物 第一章 無菌操作技術(shù)實踐 第2課時 分離特定的微生物并測定其數(shù)量同步備課 蘇教版選

1、第,2,課時,分離特定的微生物并測定其數(shù)量,第一章,無菌操作技術(shù)實踐,學(xué)習(xí)導(dǎo)航,1,認(rèn)識各種微生物形成的菌落特征,2,學(xué)會利用涂布平板法分離、培養(yǎng)微生物，并能測定其數(shù)量,3,掌握利用選擇培養(yǎng)基分離特定微生物的方法,重難點擊,簡述分離、培養(yǎng)微生物的方法及數(shù)量測定,一、微生物分離和培養(yǎng)的基本理論,二、以尿素為唯一氮源的土壤微生物的分離,培養(yǎng)與數(shù)量測定,內(nèi)容索引,當(dāng)堂檢測,三、分離土壤中能分解纖維素的微生物,一、微生物分離和培養(yǎng)的基本理論,1,純培養(yǎng)物培養(yǎng),在實驗室中利用,培養(yǎng)基可以篩選和分離某種微生物，然后在,_,的條件下，在,培養(yǎng)基上培養(yǎng)該微生物形成單個菌落，即由一個微生物,如某種細(xì)菌,形成的單

2、個菌落,即為純培養(yǎng)物，可用于科學(xué)研究,2,分離特定的微生物,1,平板分離法,概念：能將,微生物分離和固定在固體培養(yǎng)基表面或里面，每個孤立,的活微生物體經(jīng)過生長、繁殖均可形成,分離、培養(yǎng)微生物最常用的培養(yǎng)基是,培養(yǎng)基,基礎(chǔ)梳理,選擇,高度稀釋,固體,單個菌落,單個,單個菌落,瓊脂固體,類型：平板分離法有多種，如,平板法,平板法等,a,涂布平板法分離細(xì)菌：將待分離的樣品進(jìn)行,10,倍系列,取一定稀,釋度的樣品,0.1 mL,倒入預(yù)先制備好的培養(yǎng)基平板中，用無菌,_,將樣品,均勻，恒溫培養(yǎng)一段時間，以獲得單個菌落的方法,b,混合平板法分離細(xì)菌：將待分離的樣品進(jìn)行,10,倍系列稀釋，取一定稀,釋度的樣

3、品,0.1 mL,與,的培養(yǎng)基,將混合液,倒入無菌培養(yǎng)皿中制成平板，培養(yǎng)一段時間，以獲得單個菌落的方法,涂布,混合,稀釋,玻璃涂布器,涂布,熔化冷卻至,50,左右,混合均勻,2,選擇培養(yǎng)分離,概念：科學(xué)家針對某種微生物的,設(shè)計一個特定的環(huán)境，使之,這種微生物的生長，而,其他微生物的生長。這種通過,進(jìn)行微生物純培養(yǎng)分離的技術(shù)稱為選擇培養(yǎng)分離,依據(jù)原理：不同的微生物有不同的,或?qū)?有,不同的敏感性,特別適合,抑制,選擇培養(yǎng),特性,營養(yǎng)需求,某種化學(xué)物質(zhì),舉例,a,要分離耐高溫菌，可在,條件下進(jìn)行培養(yǎng),b,要分離對某種抗生素具有抗性的菌種，可在加有,如鏈霉素或,青霉素,的平板上進(jìn)行分離,c,在培養(yǎng)基

4、中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為,10,的酚，可以抑制,的生長,d,運用將,作為唯一碳源和能源的培養(yǎng)基，可以有效地分離能分解,纖維素的細(xì)菌,e,運用,培養(yǎng)基,培養(yǎng)基完全不含氮元素,可選擇能固氮的細(xì)菌,f,運用只含尿素而不含其他氮元素的培養(yǎng)基，可以選擇,_,的微生物,能合成脲酶的微生物可以分解尿素,高溫,該抗生素,細(xì)菌和霉菌,纖維素,無氮,能分解尿素以獲取氮,3,觀察各種微生物形成的菌落,1,菌落：指,微生物在適宜的,表面或內(nèi)部生長、繁殖到,一定程度，形成,有一定,的子細(xì)胞生長群體,2,菌落特征,微生物在,培養(yǎng)基上生長形成的,一般都具有,穩(wěn)定的特征，如菌落的大小、形狀、邊緣特征、隆起程度、顏色等，這些,可以作為

5、對微生物進(jìn)行,的重要依據(jù),單個,固體培養(yǎng)基,肉眼可見的,形態(tài)結(jié)構(gòu),不同,特定,菌落,分類,鑒定,問題探究,1,如何從眾多微生物中分離某種微生物，所利用的原理是什么,答案,答案,根據(jù)微生物所需營養(yǎng)物質(zhì)、氧氣,pH,不同利用選擇培養(yǎng)基,選擇,2,結(jié)合教材完善下圖中兩種分離和純化微生物的平板分離法并思考,涂布,涂布均勻,混合,表面,表面和,內(nèi)部,培養(yǎng)基,1,涂布平板法的實質(zhì)是什么,答案,在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成,單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落,答案,2,試比較兩種分離和純化方法,項目,操作,特點,結(jié)果,涂布,平板法,取一定稀釋度的樣品,平板,用無菌玻璃涂布器將樣

6、品涂布,均勻,_,_,細(xì)菌菌落通常僅,在,生長,混合,平板法,取一定稀釋度的樣品與熔化的,培養(yǎng)基混合,將與樣品混合后的培養(yǎng)基倒入,無菌培養(yǎng)皿,_,_,_,細(xì)菌菌落出現(xiàn)在,_,涂布,先制作平板后,加入菌液,平板表面,菌液與培養(yǎng)基,混合，共同倒,平板,平板表面和內(nèi)部,3,選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是什么培養(yǎng)基？它利用的原理是什么,答案,選擇培養(yǎng)分離所利用的培養(yǎng)基是選擇培養(yǎng)基。它利用的原理是,不同的微生物有不同的營養(yǎng)需求或?qū)δ撤N化學(xué)物質(zhì)有不同的敏感性,4,通常以菌落的哪些表觀特征來對微生物進(jìn)行分類、鑒定等,答案,菌落的大小、形狀、邊緣特征、隆起程度、顏色等,答案,歸納總結(jié),1,菌落的特征：菌落形態(tài)包

7、括菌落的大小、形狀、邊緣、光澤、質(zhì)地,顏色和透明程度等。每一種細(xì)菌在一定條件下形成固定的菌落特征,這些特征對菌種識別、鑒定有一定意義,2,選擇培養(yǎng)基篩選微生物的方法,在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),改變培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分,改變微生物的培養(yǎng)條件,3,平板劃線法和涂布平板法的比較,項目,優(yōu)點,缺點,平板劃線法,可以觀察菌落特征,對混合菌進(jìn)行分離,不能計數(shù),涂布平板法,可以計數(shù)，可以觀察,菌落特征,吸收量較少，較麻煩，平板,不干燥效果不好，容易蔓延,拓展應(yīng)用,1,下列有關(guān)涂布平板法，敘述錯誤的是,A,首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,B,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,C,在適宜條件

8、下培養(yǎng),D,結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落,答案,解析,一題多變,1,移液時需要注意哪些問題,答案,移液管也需經(jīng)過滅菌。操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰,1,2 cm,處，吸管頭不要接觸任何其他物體,2,如何處理涂布器,答案,將涂布器浸在盛有,70,酒精的燒杯中，取出時，讓多余的酒,精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,答案,2,從自然菌樣中篩選較理想生產(chǎn)菌種的一般步驟是：采集菌樣,富集培養(yǎng),純種分離,性能測定,1,不同微生物的生存環(huán)境不同，獲得理想微生物的第一步是從適合的,環(huán)境采集菌樣，然后再按一定的方法分離、純化。培養(yǎng)嗜鹽菌的菌樣應(yīng),從,填,高鹽,或,低鹽,環(huán)境采集，

9、培養(yǎng)厭氧菌的菌樣應(yīng)從,填,有氧,或,無氧,環(huán)境采集,解析,在長期自然選擇的作用下，生物與其生活環(huán)境相適應(yīng)，培養(yǎng)嗜鹽菌,的菌樣應(yīng)從高鹽環(huán)境中采集，培養(yǎng)厭氧菌應(yīng)從無氧環(huán)境中采集,答案,解析,高鹽,無氧,2,富集培養(yǎng)指創(chuàng)設(shè)僅適應(yīng)于該條件的微生物旺盛生長的特定的環(huán)境條件,使待分離微生物在群落中的數(shù)量大大增加，從而達(dá)到從自然界中分離到,所需的特定微生物目的的微生物培養(yǎng)方法。對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基,應(yīng)是,培養(yǎng)基；對含耐高溫淀粉酶的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇,_,的培養(yǎng)基，并在,條件下培養(yǎng),解析,對嗜鹽菌富集培養(yǎng)的培養(yǎng)基應(yīng)是加鹽培養(yǎng)基，對含耐高溫淀粉酶,的微生物富集培養(yǎng)應(yīng)選擇以淀粉為唯一碳源的培養(yǎng)基且在高溫條件

10、下,培養(yǎng),答案,解析,加鹽,以淀粉,為唯一碳源,高溫,3,實驗室最常用的滅菌方法是利用高溫處理達(dá)到殺菌的效果。高溫滅菌,的原理是高溫使微生物的蛋白質(zhì)和核酸等物質(zhì)發(fā)生,滅菌,法是微生物研究和教學(xué)中應(yīng)用最廣、效果最好的濕熱滅菌法,解析,高溫能使蛋白質(zhì)和核酸發(fā)生不可逆轉(zhuǎn)的變性，高壓蒸汽滅菌法是,應(yīng)用最廣、效果最好的濕熱滅菌法,答案,解析,變性,高壓蒸汽,4,如圖是采用純化微生物培養(yǎng)的兩種接種方法接種后培養(yǎng)的效果圖解,請分析接種的具體方法,獲得圖,A,效果的接種方法是,獲得圖,B,效果的接種方法是,解析,從培養(yǎng)基中菌落分布看，獲得圖,A,用的是涂布平板法，獲得圖,B,用,的是平板劃線法,答案,解析,涂

11、布平板法,平板劃線法,二、以尿素為唯一氮源的土壤微生物,的分離、培養(yǎng)與數(shù)量測定,基礎(chǔ)梳理,1,原理,采用唯一氮源為,的選擇培養(yǎng)基來培養(yǎng)。分離出能在此培養(yǎng)基,中生長、繁殖的微生物,2,實驗流程,采集土壤，制備懸液：制備系列稀釋液,選擇培養(yǎng)：采用選擇培養(yǎng)基培養(yǎng),接種：涂布平板,培養(yǎng)與觀察,計數(shù)菌落：選取菌落數(shù)為,的一組為樣本進(jìn)行統(tǒng)計,尿素,30,300,3,顯微鏡直接計數(shù)法,1,原理,此法利用血球計數(shù)板，在顯微鏡下計算,的樣品中微生物數(shù)量,但不能區(qū)分細(xì)菌的,血球計數(shù)板是一塊特制的載玻片，上面有一個特定的容積為,mm,3,的計數(shù)室。計數(shù)室的規(guī)格有,兩種，分別是,25,16,個小方,格或,16,25,

12、個小方格。但兩,種規(guī)格的計數(shù)室都是由,個,小格組成的。具體如右圖,一定容積,死活,1,1,0.1,400,2,操作,將清潔干燥的血球計數(shù)板蓋上蓋玻片，用無菌的毛細(xì)滴管吸取搖勻的土,壤微生物培養(yǎng)液，在,滴一小滴，讓培養(yǎng)液沿著縫隙通過毛細(xì),滲透作用自動進(jìn)入計數(shù)室,加樣后靜置,min,然后將血球計數(shù)板置于顯微鏡載物臺上，先用,_,找到計數(shù)室所在位置，再換成,進(jìn)行觀察和計數(shù),3,計數(shù),若規(guī)格為,16,25,型的血球計數(shù)板，則在計數(shù)室內(nèi)選,個中方格,如圖中加,黑點的左上、右上、左下、右下四個角,中的菌體進(jìn)行計數(shù),蓋玻片的邊緣,5,低倍鏡,高倍鏡,4,若使用規(guī)格為,25,16,型的血球計數(shù)板，則在計數(shù)室內(nèi)

13、選,個中方格,四個角和中央的方格,中的菌體進(jìn)行計數(shù),對位于格線上的菌體，一般只統(tǒng)計,格線上的,求出每個,所含細(xì)菌的平均數(shù)，再按下面公式求出,樣品中,所含的細(xì)菌數(shù)。計算公式如下,每,mL,原液所含細(xì)菌數(shù),400,10,4,4,使用完畢后，將血球計數(shù)板用水反復(fù)沖洗干凈，切勿用硬物洗刷,洗完后自然,即可,5,上方和右邊,小格,每毫升,每小格平均細(xì)菌數(shù),稀釋倍數(shù),晾干,問題探究,1,篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基,下面是篩選分解尿素的細(xì)菌使用的培養(yǎng)基的配方，請分析,KH,2,PO,4,1.4 g,Na,2,HPO,4,2.1 g,MgSO,4,7H,2,O,0.2 g,葡萄糖,10.0 g,尿素,1.

14、0 g,瓊脂,15.0 g,將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到,1 000 mL,1,在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么,物質(zhì),答案,碳源是葡萄糖，氮源是尿素,2,分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基是如何進(jìn)行選擇的,答案,該選擇培養(yǎng)基的配方中，尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，因此,只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長,3,為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長,答案,分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而,為微生物生長提供氮源,答案,2,下面是土壤中尿素分解菌的分離與計數(shù)的實驗流程示意圖，請結(jié)合教材,提供的資料分析回答下列問題,1,試寫出分離土壤中分解尿素

15、,的細(xì)菌的實驗流程,答案,答案,土壤取樣,樣品稀釋,取樣涂布,微生物培養(yǎng),觀察并記錄結(jié)果,細(xì)菌計數(shù),2,統(tǒng)計菌落數(shù)目,甲、乙兩位同學(xué)用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對應(yīng),稀釋倍數(shù)為,10,6,的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計結(jié)果,甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)為,230,該同學(xué)的,統(tǒng)計結(jié)果是否真實可靠？為什么,答案,不真實,為增加實驗的說服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實驗，在同一,稀釋度下涂布,3,個平板，統(tǒng)計結(jié)果后計算平均值,答案,乙同學(xué)在該濃度下涂布了,3,個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別為,21,212,256,該同學(xué)將,21,舍去，然后取平均值。該同學(xué)對實驗結(jié)果的處理是否,合理？

16、為什么,答案,不合理。微生物計數(shù)時，如果實驗中出現(xiàn)重復(fù)實驗的結(jié)果不一致,的情況，應(yīng)分析實驗過程中可能的影響因素，找出差異的原因，而不能,簡單地舍棄后進(jìn)行計數(shù),答案,某同學(xué)在三種稀釋度下吸取,0.1,mL,的菌液涂布平板，統(tǒng)計菌落數(shù),得到以下的數(shù)據(jù)，試計算,1 g,樣品的活菌數(shù),平板,稀釋度,平板,1,平板,2,平板,3,10,4,320,360,356,10,5,212,234,287,10,6,21,23,18,答案,10,5,的稀釋度下取,0.1,mL,涂布的三個平板上的菌落數(shù)在,30,300,之間，計算其平均值為,212,234,287)/3,244,進(jìn)一步可以換算出,1,g,樣,品中活

17、菌數(shù)為,244,0.1,10,5,2.44,10,8,答案,為什么統(tǒng)計的菌落數(shù)比活菌的實際數(shù)目低,答案,當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落,答案,歸納總結(jié),分離尿素分解菌操作中的注意事項,1,在實驗操作中，每個步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響,實驗效果,2,樣品稀釋液的最佳濃度為獲得每個平板上有,30,300,個菌落，這個稀釋度,細(xì)菌一般為,10,4,10,5,10,6,倍稀釋液，放線菌一般為,10,3,10,4,10,5,倍稀釋液,真菌一般為,10,2,10,3,10,4,倍稀釋液,3,為排除非測試因素,培養(yǎng)基,的干擾，實驗需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行,空白對

18、照,4,每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布,3,個平板，作為重復(fù)實驗，求其平均值,若其中有菌落數(shù)與其他平板懸殊過大的，需要對該平板重新制作,拓展應(yīng)用,3,下列有關(guān)微生物篩選的敘述中，不正確的是,A,用全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基篩選大腸桿菌,B,用高,NaCl,的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株,C,含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株,D,利用高溫條件篩選耐熱的,Taq,細(xì)菌,答案,解析,解析,若對大腸桿菌進(jìn)行計數(shù)，則需要用涂布平板法接種樣品,4,自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時一般要將,它們分離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定,的實驗，請回答下列有關(guān)問題,1,

19、實驗步驟,制備稀釋倍數(shù)為,10,2,10,3,10,4,10,5,10,6,的系列稀釋液,為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)選用,法接種樣品,適宜溫度下培養(yǎng),答案,解析,涂布平板,2,結(jié)果分析,測定大腸桿菌數(shù)目時，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為,10,6,的培養(yǎng)基中，得到以下,幾種統(tǒng)計結(jié)果，與事實更加接近的是,A,一個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是,230,B,兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是,220,和,260,取平均值,240,C,三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是,400,212,和,256,取平均值,289,D,四個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是,210,260,240,和,250,取平均值,240,答案,解析,解析,應(yīng)選取多個菌落數(shù)相

20、差不大的平板進(jìn)行計數(shù)，取其平均值,一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為,10,6,的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為,212,那么每毫升樣品中的菌落數(shù)約是,涂布平板時所用的稀釋液體積為,0.2 mL,用這種方法測定菌體密度時，實際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量,填,多,或,少,因為,_,答案,解析,解析,212,0.2,10,6,1.06,10,9,個,1.06,10,9,個,多,當(dāng)兩個或多個細(xì)菌連在一起時，平板上觀察到的只是一個,菌落,解析,因為一個菌落可能由兩個或多個細(xì)菌連在一起生長而成，所以實際,活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多,1,如果某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為,10,4,則測定的數(shù)值要比題中測定的數(shù)值高,還是低？為什么,

21、答案,低。因為稀釋倍數(shù)太低，則大部分菌落是由多個細(xì)菌繁殖而成,所以測定的菌落的數(shù)值要偏低,2,第,2,問第小題,C,項中菌落數(shù)為,400,的平板不符合要求，試分析該平板,中菌落數(shù)目多于其他平板的可能的原因,答案,a,培養(yǎng)基被污染，一些菌落是由雜菌繁殖而成的,b,接種過程中由于操作不當(dāng)感染了雜菌,c,取菌液時沒有搖晃，導(dǎo)致所取菌液中細(xì)菌個體濃度偏大等,答案,一題多變,方法鏈接,用涂布平板法計數(shù)微生物的注意事項,1,涂布平板操作要求：按照平行重復(fù)的原則，每一稀釋度的菌液涂布,3,個,或,3,個以上的平板,2,計數(shù)的時機(jī)：當(dāng)各平板上菌落數(shù)目穩(wěn)定時進(jìn)行計數(shù),3,選擇可用于計數(shù)的平板：選擇菌落數(shù)在,30

22、,300,之間的平板,相同稀釋度,的平板均符合該特點,進(jìn)行計數(shù)，然后取平均值,三、分離土壤中能分解纖維素的微生物,基礎(chǔ)梳理,1,原理,1,土壤中能分解纖維素的微生物，都能分泌,將纖維素分解成,小分子糖類物質(zhì)以滿足自身生命活動的需要,2,培養(yǎng)基：以,為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基,2,纖維素分解菌的鑒定,剛果紅染色法，即通過是否產(chǎn)生,來說明,菌落是由能分解纖維素的細(xì)菌形成的。其原理是,纖維素分解菌,剛果紅,纖維素,紅色消失，出現(xiàn),_,纖維素酶,纖維素酶,纖維素,透明圈,紅色復(fù)合物,透明圈,1,鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基,1,鑒別纖維素分解菌時需在培養(yǎng)基中添加什么物質(zhì),答案,剛果紅染色劑,2,鑒別培養(yǎng)基和選

23、擇培養(yǎng)基在目的和物理性質(zhì)方面的區(qū)別是什么,答案,鑒別培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些特定的作用底物和指示劑,觀察微生物生長過程中分解底物所釋放的不同產(chǎn)物，通過指示劑的反應(yīng),不同來鑒別微生物；選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)，以促進(jìn)目的,菌的生長繁殖，同時抑制其他雜菌的生長繁殖,選擇培養(yǎng)的培養(yǎng)基中沒有加入瓊脂，所以屬于液體培養(yǎng)基，而鑒別培養(yǎng),基一般為固體培養(yǎng)基,問題探究,答案,2,透明圈的形成,1,對分離的纖維素分解菌作進(jìn)一步的鑒定的原因是什么,答案,產(chǎn)生透明圈的菌落可能是能產(chǎn)生纖維素酶的微生物，也可能是能,降解剛果紅的菌種，所以需要進(jìn)一步鑒定,2,簡要概述篩選纖維素分解菌時透明圈是如何形成的,答案

24、,纖維素分解菌分解纖維素產(chǎn)生的纖維二糖和葡萄糖，不能與剛果紅,形成紅色復(fù)合物，而出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈,3,向含有分解尿素的細(xì)菌的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，會出現(xiàn)類似的圈嗎,答案,分解尿素的細(xì)菌能夠?qū)⒛蛩胤纸獬砂?，加入酚紅指示劑后會變紅,也會形成以尿素分解菌為中心的紅色的圈,答案,5,分析下表培養(yǎng)基的配方，請回答下面的問題,纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基,將物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到,1 000 mL,1,此培養(yǎng)基配方中為微生物提供碳源的主要是,氮源是,2,此配方為,培養(yǎng)基,根據(jù)物理狀態(tài),配方,3,此培養(yǎng)基選擇出的微生物主要是,_,拓展應(yīng)用,組分,含量,纖維素粉,5 g,NaNO,3,1 g

25、,Na,2,HPO,4,7H,2,O,1.2 g,KH,2,PO,4,0.9 g,MgSO,4,7H,2,O,0.5 g,KCl,0.5 g,酵母膏,0.5 g,水解酪素,0.5 g,答案,解析,纖維素粉,NaNO,3,酵母膏、水解酪素,液體,纖維素,分解菌,問題導(dǎo)析,一題多變,1,從土壤中分離纖維素分解菌時，哪種情況下可以省略選擇培養(yǎng),答案,當(dāng)土壤中纖維素分解菌的濃度很高時，可以省略選擇培養(yǎng)這一步驟,2,本題中的培養(yǎng)基配方中的酵母膏可以為微生物提供什么成分,答案,可以提供碳源、氮源和生長因子,3,該培養(yǎng)基中纖維素是否為唯一的碳源,答案,不是，纖維素是主要的碳源，另外，酵母膏和水解酪素也可以提

26、供,少量的碳源,答案,解析,剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入，也可以在菌落形成,后加入，若在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入剛果紅，則所加剛果紅要進(jìn),行滅菌，以防雜菌的侵入，影響纖維素分解菌菌落的形成；若在菌落形,成后加入剛果紅，則不需要滅菌,6,下列有關(guān)剛果紅染色法的敘述，不正確的是,A,剛果紅可以在細(xì)菌菌落形成前倒平板時加入,B,剛果紅可以在菌落形成后加入,C,剛果紅在菌落形成前倒平板時加入，加入的剛果紅不需要滅菌,D,在菌落形成后加入剛果紅時，剛果紅不需要滅菌,答案,解析,易錯易混,關(guān)于纖維素分解菌篩選的三個易錯警示,1,纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中的碳源并不只有纖維素，其中酵母膏和,水解

27、酪素也可起碳源的作用,2,在纖維素分解菌的選擇培養(yǎng)基中生長的不只有纖維素分解菌。因此,選擇培養(yǎng)后要進(jìn)行鑒別培養(yǎng)，才能獲得纖維素分解菌,3,出現(xiàn)透明圈的菌落也不一定是纖維素分解菌,課堂小結(jié),涂布平板,當(dāng)堂檢測,1,菌種鑒定的重要依據(jù)是,A,細(xì)菌的大小、形狀和顏色,B,菌落的大小、形狀和顏色,C,有無鞭毛,D,培養(yǎng)基的不同,2,3,4,1,解析,不同種類的微生物所形成的菌落在大小、形狀、邊緣特征,隆起程度、顏色等方面具有一定的差異。所以，在一定條件下所形,成的菌落，可以作為微生物鑒定的重要依據(jù)。單個的細(xì)菌用肉眼是,看不見的，故細(xì)菌的個體特征不能作為菌種鑒定的依據(jù),答案,解析,解析,在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少,3,個平板，作為重復(fù)組，才能增強(qiáng),實驗結(jié)果的說服力與準(zhǔn)確性,C,項雖涂布了三個平板，但是，其中一個平,板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差太遠(yuǎn)，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤。因,此，不能簡單地將三個平板的計數(shù)值用來求平均值,2,用涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在加入,10,5,g/mL,土壤懸液,的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的