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1、基因工程及其應(yīng)用,轉(zhuǎn)基因超級(jí)鼠,藍(lán)色妖姬,水母,能發(fā)熒光的熱帶斑馬魚(yú),普通熱帶斑馬魚(yú)是不發(fā)熒光的,如何讓普通熱帶斑馬魚(yú)也發(fā)熒光,第 2 節(jié) 基因工程及其應(yīng)用,第一步:獲取目的基因,三、基因工程基本步驟,1、人工合成基因 2、從某生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA中直接分離基因,一、獲取目的基因,專(zhuān)一性(eg:EcoRI限制酶,GAGACTGATTGGCCTTAAGCTCGAG CTCTGACTAACCGGAATTCGAGCTC,GAGACTGATTGGCCTTAA CTCTGACTAACCGG,GCTCGAG AATTCGAGCTC,限制性內(nèi)切酶,除了某些病毒以外,限制性內(nèi)切酶只在原核生物中發(fā)現(xiàn) 識(shí)別位點(diǎn)和
2、切割位點(diǎn),黏性末端,平末端,3、基因的運(yùn)輸工具運(yùn)載體,常用的運(yùn)載體:質(zhì)粒、噬菌體和動(dòng)植物病毒,標(biāo)記基因,便于進(jìn)行檢測(cè),運(yùn)載體必須同時(shí)滿足三個(gè)要求:能與目的基因結(jié)合;能進(jìn)入受體生物細(xì)胞并在受體生物細(xì)胞內(nèi)復(fù)制并表達(dá);比較容易得到,用與提取目的基因相同的限制酶切割質(zhì)粒使之出現(xiàn)一個(gè)切口,將目的基因插入切口處,讓目的基因的黏性末端與切口上的黏性末端互補(bǔ)配對(duì)后,在連接酶的作用下連接形成重組DNA分子,第二步、目的基因與運(yùn)載體結(jié)合,被同一種限制酶切斷的幾個(gè)DNA是否具有相同的黏性末端,基因的針線:DNA連接酶,目的基因,質(zhì)粒,基因的針線DNA連接酶,連接酶的作用是:將互補(bǔ)配對(duì)的兩個(gè)黏性末端連接起來(lái),使之成為
3、一個(gè)完整的DNA分子,重播,第三步:將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞,常用的受體細(xì)胞:菌類(lèi)和動(dòng)植物細(xì)胞,Eg:可以分泌人胰島素 的細(xì)菌,第四步、目的基因的表達(dá)和檢測(cè),大量的受體細(xì)胞接受不多的目的基因。處理的受體細(xì)胞中真正攝入了目的基因的很少,必須將它從中檢測(cè)出來(lái)。 將每個(gè)受體細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)形成菌落,檢測(cè)菌落中是否有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。淘汰無(wú)表達(dá)產(chǎn)物的菌落,保留有表達(dá)產(chǎn)物的進(jìn)一步培養(yǎng)、研究,第一課時(shí)知識(shí)點(diǎn),基因工程的概念 基因工程的基本步驟(四步驟) 目的基因的運(yùn)載體有哪些? 質(zhì)粒(存在于細(xì)菌和酵母菌中)、噬菌體、 動(dòng)植物病毒 基因的剪刀、針線分別是? 限制性核酸內(nèi)切酶(200多種)、DNA連接酶,四、基因
4、工程的應(yīng)用,一、基因工程與作物育種,抗蟲(chóng)害的玉米,轉(zhuǎn)黃瓜抗青枯病基因的甜椒,獲得高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)和具有優(yōu)良品質(zhì)的農(nóng)作物和具有抗逆性的作物新品種,抗蟲(chóng)的基因來(lái)自蘇云金桿菌。蘇云金桿菌形成的伴胞晶體是一種毒性很強(qiáng)的蛋白晶體,能使棉鈴蟲(chóng)等鱗翅口害蟲(chóng)癱瘓致死??茖W(xué)家將編碼這個(gè)蛋白質(zhì)的基因?qū)俗魑铮棺魑镒陨砭哂械钟x(chóng)害的能力,生長(zhǎng)快、肉質(zhì)好的轉(zhuǎn)基因魚(yú)(中國(guó),乳汁中含有人生長(zhǎng)激素的轉(zhuǎn)基因牛(阿根廷,2、基因工程與藥物研制,我國(guó)生產(chǎn)的部分基因工程疫苗和藥物,許多藥品的生產(chǎn)是從生物組織中提取的。受材料來(lái)源限制產(chǎn)量有限,其價(jià)格往往十分昂貴,微生物生長(zhǎng)迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基
5、因?qū)胛⑸锛?xì)胞內(nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問(wèn)題,還能大大降低生產(chǎn)成本,胰島素從豬、牛等動(dòng)物的胰腺中提取,100Kg胰腺只能提取4-5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價(jià)格之高可想而知,將合成的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌,每2000L培養(yǎng)液就能產(chǎn)生100g胰島素!使其價(jià)格降低了30%-50,3、環(huán)境保護(hù)基因工程做成的“超級(jí)細(xì)菌”能吞食和分解多種污染環(huán)境的物質(zhì),通常一種細(xì)菌只能分解石油中的一種烴類(lèi),用基因工程培育成功的“超級(jí)細(xì)菌”卻能分解石油中的多種烴類(lèi)化合物。有的還能吞食轉(zhuǎn)化汞、鎘等重金屬,分解DDT等毒害物質(zhì),轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性,你認(rèn)為應(yīng)該如何對(duì)待轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性問(wèn)題
6、,2.3轉(zhuǎn)基因生物和轉(zhuǎn)基因食品的安全性,轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉、耐貯藏番茄、抗病毒甜椒及基因工程疫苗等已獲得生產(chǎn)應(yīng)用安全證書(shū),練習(xí),要使目的基因與對(duì)應(yīng)的載體重組,所需的兩種酶是( ) 限制酶連接酶解旋酶還原酶 實(shí)施基因工程的第一步的一種方法是把所需的基因從供體細(xì)胞內(nèi)分離出來(lái),這要利用限制性內(nèi)切酶。一種限制性內(nèi)切酶能識(shí)別分子的順序,切點(diǎn)在和之間,這是利用了酶的() 高效性專(zhuān)一性 多樣性催化活性易受外界影響,基因工程的正確操作步驟是()使目的基因與運(yùn)載體結(jié)合將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞檢測(cè)目的基因的表達(dá)是否符合特定性狀要求提取目的基因 采用基因工程的方法培育抗蟲(chóng)棉,下列導(dǎo)入目的基因的作法正確的是()(理綜第題)將毒素蛋白注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的序列,注射到棉受精卵中
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