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1、.酵母菌、霉菌常用培養(yǎng)基的配制一、目的要求 了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學習和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。二、基本原理 麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基,馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基,而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。三、實驗材料(一)藥品葡萄
2、搪、蔗糖、NaN03、K2HP04、KCl、MgSO47H2O,F(xiàn)eS04、瓊脂。(二)儀器天平、高壓蒸汽滅菌鍋。(三)玻璃器皿移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。(四)其他物品藥匙、pH試紙、稱量紙、記號筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報紙、新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等。四、實驗內(nèi)容(一)麥芽汁培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分新鮮麥芽汁一般為10-15波林。2配制方法 (1)用水將大麥或小麥洗凈,用水浸泡6-12h,置于15陰涼處發(fā)芽,上蓋紗布,每日早、中、晚淋水一次,待麥芽伸長至麥粒的兩倍時,讓其停止發(fā)芽,曬干或烘干,研磨成麥芽粉,貯存?zhèn)溆谩?(2)取一份麥芽粉加四份水
3、,在65水浴鍋中保溫3-4h,使其自行糖化,直至糖化完全(檢查方法是取0.5ml的糖化液,加2滴碘液,如無藍色出現(xiàn),即表示糖化完全)。 (3) 糖化液用4-6層紗布過濾,濾液如仍混濁,可用雞蛋清澄清(用一個雞蛋清,加水20 m1,調(diào)勻至生泡沫,倒入糖化液中,攪拌煮沸,再過濾)。 (4)用波美比重計檢測糖化液中糖濃度,將濾液用水稀釋到10-15波林,調(diào)pH至64。如當?shù)赜衅【茝S,可用未經(jīng)發(fā)酵,未加酒花的新鮮麥芽汁,加水稀釋到10-15波林后使用。 (5)如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時,加入2瓊脂,加熱融化,補充失水。 (6)分裝、加塞、包扎。 (7)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。(二)馬鈴
4、薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制1、培養(yǎng)基成分馬鈴薯 20g葡萄糖 2 g瓊脂 1.5-2g水 100ml自然pH 2配制方法 (1)配制20馬鈴薯浸汁 取去皮馬鈴薯200g,切成小塊,加水1000m1。80浸泡lh,用紗布過濾,然后補足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20馬鈴薯浸汁,貯存?zhèn)溆?。?)配制時,按每100 m1馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖,加熱煮沸后加入2g瓊脂,繼續(xù)加熱融化并補足失水。 (3)分裝、加塞、包扎。 (4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。 (三)豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分黃豆芽 10g葡萄糖 5g瓊脂 1.5-2g水 100ml自然pH 2配
5、制方法 (1)稱新鮮黃豆芽10g,置于燒杯中,再加入100 m1水,小火煮沸30 min,用紗布過濾,補足失水,即制成10豆芽汁。(2)配制時,按每100 m1 10豆芽汁加入5g葡萄糖,煮沸后加入2 g瓊脂,繼續(xù)加熱融化,補足失水。 (3)分裝、加塞、包扎。 (4)高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。 (四)察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制1培養(yǎng)基成分蔗糖 3gNaN03 0.3gK2HP04 0.1gKCl 0.05gMgSO47H2O 0.05 gFeS04 0.001 g瓊脂 1.5-2g蒸餾水 100ml自然pH 2配制方法 (1)稱量及溶化 量取所需水量約23左右加入到燒杯中,分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1的FeS04溶液。(2)定容 候藥品全部溶解后,將溶液倒入量筒中,加水至所需體積。(3)
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