植物克隆與動物克隆

1、第二節(jié)第二節(jié) 植物的克隆植物的克隆 不能不能 動物細(xì)胞有無全能性動物細(xì)胞有無全能性? ? 特點(diǎn)？特點(diǎn)？ 隨著細(xì)胞分化程度的提高而全能性逐漸受到限隨著細(xì)胞分化程度的提高而全能性逐漸受到限 制，分化潛能變窄。制，分化潛能變窄。 細(xì)胞核仍具有全能性。細(xì)胞核仍具有全能性。 動物細(xì)胞的全能性受到限制，到現(xiàn)在為止將離動物細(xì)胞的全能性受到限制，到現(xiàn)在為止將離 體的動物細(xì)胞直接克隆成個(gè)體還很困難，所以體的動物細(xì)胞直接克隆成個(gè)體還很困難，所以動物動物 細(xì)胞和組織不能進(jìn)行細(xì)胞和組織不能進(jìn)行與植物一樣的與植物一樣的個(gè)體克隆個(gè)體克隆。 動物器官培養(yǎng)：動物器官培養(yǎng)： 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng) P2829 （2 2）適宜的環(huán)境條

2、件）適宜的環(huán)境條件 無菌、無毒環(huán)境：無菌、無毒環(huán)境：加抗生素，定期更換培養(yǎng)液加抗生素，定期更換培養(yǎng)液 適宜的溫度和適宜的溫度和pHpH值：值：溫度：溫度：36.536.50.5 0.5 pH pH值：值：7.2-7.47.2-7.4 適宜的氣體環(huán)境：適宜的氣體環(huán)境：O O2 2和和COCO2 2（95%95%空氣和空氣和5%CO5%CO2 2） 適宜的滲透壓等適宜的滲透壓等 1 1、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)條件 動物細(xì)胞培養(yǎng)過程動物細(xì)胞培養(yǎng)過程 成分：成分：無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、維生素和動物血清等無機(jī)鹽、葡萄糖、氨基酸、維生素和動物血清等 （1）含全部營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)液）含全部營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)液 2 2、

3、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)過程 從動物從動物胚胎或幼齡動物組織胚胎或幼齡動物組織 切片中取小片樣品切片中取小片樣品 轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液 原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) 分裝到多個(gè)卡氏瓶中分裝到多個(gè)卡氏瓶中 傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) 單個(gè)單個(gè)細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)箱中 保溫培養(yǎng)保溫培養(yǎng) 機(jī)械消化或胰酶消化機(jī)械消化或胰酶消化 （胰蛋白酶）（胰蛋白酶） 原代培養(yǎng)物原代培養(yǎng)物 2 2、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)過程 如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？為什么要傳代培養(yǎng)？如何界定原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)？為什么要傳代培養(yǎng)？ 細(xì)胞懸細(xì)胞懸 浮液浮液 轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液 首次培養(yǎng)首次培養(yǎng) 換瓶后培養(yǎng)換瓶后培養(yǎng) 原代培養(yǎng)原代培養(yǎng)

4、傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) 為什么？為什么？ 從動物從動物胚胎或幼齡動物組織胚胎或幼齡動物組織 切片中取小片樣品切片中取小片樣品 轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液轉(zhuǎn)入特殊培養(yǎng)液 原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) 分裝到多個(gè)卡氏瓶中分裝到多個(gè)卡氏瓶中 傳代培養(yǎng)傳代培養(yǎng) 單個(gè)單個(gè)細(xì)胞懸浮液細(xì)胞懸浮液 CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)箱中 保溫培養(yǎng)保溫培養(yǎng) 細(xì)胞系細(xì)胞系 機(jī)械消化或胰酶消化機(jī)械消化或胰酶消化 （胰蛋白酶）（胰蛋白酶） 原代培養(yǎng)物原代培養(yǎng)物 選擇或純化選擇或純化 選擇或純化選擇或純化 細(xì)胞株細(xì)胞株 細(xì)胞株細(xì)胞株 2 2、培養(yǎng)過程、培養(yǎng)過程 原代培養(yǎng)原代培養(yǎng) 傳傳 代代 培培 養(yǎng)養(yǎng) 原代培養(yǎng)物原代培養(yǎng)物 細(xì)胞系：細(xì)胞系：可連續(xù)傳代的細(xì)胞可連續(xù)傳

5、代的細(xì)胞 原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就原代培養(yǎng)物在首次傳代時(shí)就 成為細(xì)胞系。成為細(xì)胞系。 能連續(xù)能連續(xù) 培養(yǎng)的培養(yǎng)的 連續(xù)細(xì)胞系連續(xù)細(xì)胞系 不能連續(xù)不能連續(xù) 培養(yǎng)的培養(yǎng)的 有限細(xì)胞系有限細(xì)胞系 細(xì)胞系、細(xì)胞株細(xì)胞系、細(xì)胞株 （二倍體細(xì)胞）（二倍體細(xì)胞） （異倍體核型細(xì)胞）（異倍體核型細(xì)胞） （遺傳物質(zhì)改變，不死性）（遺傳物質(zhì)改變，不死性） 2、細(xì)胞株：、細(xì)胞株： 細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型細(xì)胞株一般具有恒定的染色體組型、同功酶類型 、病毒敏感性和生化特性等。、病毒敏感性和生化特性等。 連續(xù)細(xì)胞株：可連續(xù)連續(xù)細(xì)胞株：可連續(xù)多次傳代多次傳代的細(xì)胞株。的細(xì)胞株。 有限細(xì)胞株：傳代有限細(xì)胞