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1、免疫學(xué)重點(diǎn):1. 免疫學(xué):免疫是機(jī)體識(shí)別和排除抗原性異物的生理或病理性應(yīng)答過程。2. 半抗原:又稱為不完全抗原, 有些物質(zhì)具有抗原性但不具有免疫原性的小分子稱為 半抗原 。3. 共同抗原:含共同的抗原表位的不同抗原為交叉抗原。4. 異嗜性抗原:指存在于人體 . 動(dòng)物及微生物等不同種屬之間的共同抗原5. 抗原決定簇 ;抗原分子中決定抗原特異性的特殊化學(xué)基團(tuán)。T 細(xì)胞表位:蛋白質(zhì)分子中能夠被MHC分子遞呈并被TCR識(shí)別的部位。B細(xì)胞表位:抗原分子中能夠 被BCR和抗體識(shí)別的部位。6. 淋巴細(xì)胞再循環(huán):是指定居在外周免疫器官的淋巴細(xì)胞,由輸出淋巴管經(jīng)淋巴干,胸導(dǎo)管或右淋巴導(dǎo)管進(jìn)入血液循環(huán), 經(jīng)過血液

2、循環(huán)到達(dá)外周免疫器官后, 穿越 HEV, 重新分布于全身淋巴器官或組織的過程。(參與的細(xì)胞主要是T細(xì)胞)7. 佐劑:指預(yù)先或與抗原同時(shí)注入體內(nèi),可增強(qiáng)機(jī)體對(duì)抗原的免疫應(yīng)答或改變免疫 應(yīng)答類型的非特異性免疫增強(qiáng)性物質(zhì)。8. 超抗原:是一類可直接結(jié)合抗原受體,激活大量T細(xì)胞或B細(xì)胞克隆并誘導(dǎo)強(qiáng)烈免 疫應(yīng)答的物質(zhì)。9. MCAb由一個(gè)B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的、針對(duì)某一特定抗原決定簇的高度特異性抗體10. CK:即細(xì)胞因子是有免疫細(xì)胞及組織細(xì)胞分泌的在細(xì)胞間發(fā)揮相互調(diào)控作用 的一類小分子可溶性多肽蛋白, 通過結(jié)合相應(yīng)受體調(diào)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)和效應(yīng), 調(diào)控 免疫應(yīng)答。11. CD:即分化群 將來自不同實(shí)驗(yàn)室的單克隆抗體

3、所識(shí)別的同一種分化抗原歸為分化 群。12. CAM: 黏附分子:是介導(dǎo)細(xì)胞間或細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)間相互結(jié)合的分子13. MHC: 主要組織相容性復(fù)合體 : 是一組決定移植組織是否相容,與免疫應(yīng)答密切 相關(guān),緊密連鎖的基因群。14. APC:即抗原提呈細(xì)胞,是能夠加工抗原并以抗原肽-MHC分子復(fù)合物的形式將 抗原肽提呈給T細(xì)胞的一類細(xì)胞.15. 免疫耐受 : 生理?xiàng)l件下 , 機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)外來的抗原刺激產(chǎn)生的一系列應(yīng)答以 清除抗原物質(zhì) , 但對(duì)體內(nèi)組織細(xì)胞表達(dá)的自身抗原卻表現(xiàn)為免疫無應(yīng)答 , 從而 避免自身免疫病 , 機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)特定抗原的這種免疫無應(yīng)答的狀態(tài)稱為免疫 耐受 .16. 超敏反應(yīng)

4、: 是機(jī)體受到某些抗原刺激后 , 出現(xiàn)生理功能紊亂或組織細(xì)胞損傷等 異常的適應(yīng)性免疫應(yīng)答 .17. 自身免疫 :. 在某些情況下 , 自身耐受遭到破壞 , 機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)自身成分發(fā)生 免疫應(yīng)答的這種現(xiàn)象稱為自身免疫 .18. 自身免疫?。河勺陨砻庖咭鹱陨斫M織器官損傷和臨床癥狀的疾病稱為自身 免疫性疾病。19. 免疫缺陷?。?IDD) : 是指由遺傳因素或其他原因造成的免疫系統(tǒng)發(fā)育或免疫 應(yīng)答障礙而導(dǎo)致的一種或多種免疫功能缺陷或不全所致的臨床綜合征。20. 腫瘤抗原:是指細(xì)胞癌變過程中新出現(xiàn)的或異常表達(dá)的抗原物質(zhì),在腫瘤的 發(fā)生發(fā)展及誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗腫瘤免疫應(yīng)答中具有重要作用。簡(jiǎn)單題:1. 免疫

5、系統(tǒng)有哪些功能?異常表現(xiàn)(有害)超敏反應(yīng)、易受感染或免疫缺陷病 自身免疫疾病腫瘤或持續(xù)性病毒感染功能正常表現(xiàn)(有利)免疫防御 抗病原微生物的侵襲免疫自穩(wěn)對(duì)自身組織成分的耐受免疫監(jiān)視 防止細(xì)胞癌變或持續(xù)性感染2. 固有免疫和適應(yīng)性免疫的比較?區(qū)別點(diǎn)固有免疫適應(yīng)性免疫獲得形式固有性無需抗原激發(fā):獲得性免疫需抗原激發(fā)發(fā)揮作用時(shí)相早期,快速4-5天后發(fā)揮效應(yīng)免疫原識(shí)別受體模式識(shí)別受體特異性抗原識(shí)別受體,免疫記憶無有產(chǎn)生記憶細(xì)胞舉例抑菌殺菌物質(zhì)補(bǔ)體等T細(xì)胞B細(xì)胞3骨髓和胸腺的功能?A骨髓:各類血細(xì)胞的發(fā)源地,也是 B細(xì)胞的發(fā)育成熟的場(chǎng)所。 各類血細(xì)胞和免疫細(xì)胞的場(chǎng)所。 B細(xì)胞和NK細(xì)胞分化成熟的場(chǎng)所。、

6、 體液免疫應(yīng)答的場(chǎng)所。b.胸腺:T細(xì)胞分化.發(fā)育.成熟的場(chǎng)所。由皮質(zhì)和髓質(zhì)組成)1)T細(xì)胞分化,成熟的場(chǎng)所。2)免疫調(diào)節(jié)作用3)自身耐受的建立和維持4. 抗原有哪些分類?根據(jù)誘生抗體是否需要TH細(xì)胞參與分類;TD-Ag和Tl-Ag根據(jù)抗原與機(jī)體的親緣關(guān)系:異嗜性抗原異種抗原同種異型抗原自身抗原.獨(dú)特 型抗原根據(jù)抗原的來源:內(nèi)源性抗原和外源性抗原其他分類5. 免疫球蛋白的功能有哪些?(v去主要功能是特異性結(jié)合抗原,從而阻斷病原入侵,發(fā)揮中和作用,C區(qū)則在V區(qū)與特異性抗原結(jié)合后,通過激活補(bǔ)體及靶細(xì)胞表面FC受體結(jié)合后,發(fā)揮調(diào)理作用,產(chǎn)生ADC(效應(yīng),介導(dǎo)超敏反應(yīng)和穿越胎盤等。) 識(shí)別抗原:執(zhí)行該功

7、能的為抗體的 V區(qū),在體內(nèi)結(jié)合病原微生物及其產(chǎn)物, 具有中和毒素,阻斷病原微生物入侵等免疫防御功能。 激活補(bǔ)體 結(jié)合Fc受體 調(diào)理作用;抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用( ADCC 效應(yīng));介導(dǎo)I型超敏反應(yīng) 穿過胎盤和黏膜(lgG是唯一能透過胎盤的免疫球蛋白)天然的被動(dòng)免疫機(jī) 制,對(duì)于新生兒抗感染有重要作用)6. 五種免疫球蛋白的基本特征有哪些? IgG:血清中的主要抗體成分(75-80%);半壽期長(zhǎng)( 20-23 天); 出生后 3個(gè)月開始合成, 3-5 歲接近成人水平; 多數(shù)抗菌、抗病毒、抗毒素抗體均屬 IgG 類; 是唯一能通過胎盤的 Ig ,發(fā)揮自然被動(dòng)免疫功能; 具有活化補(bǔ)體經(jīng)典途徑的

8、能力( IgG3IgG1IgG2); 具有調(diào)理作用、ADC(作用和結(jié)合SPA等;參與U型、川型超敏反應(yīng),某些自身免疫病的抗體也屬IgG; IgM: 為五聚體,分子量最大,稱為巨球蛋白( macroglobulin ); 個(gè)體發(fā)育中最先出現(xiàn)的 Ig ,胚胎晚期即能產(chǎn)生,臍帶血 IgM 增高提示胎內(nèi)感染(如 風(fēng)疹病毒、巨細(xì)胞病毒感染等) ; 抗原初次刺激機(jī)體時(shí),是體內(nèi)最先產(chǎn)生的 Ig ; 血清 IgM 升高說明有近期感染; 有強(qiáng)大激活補(bǔ)體能力和調(diào)理作用,在機(jī)體早期免疫防御中具有重要作用; 天然血型抗體是 IgM;未成熟B細(xì)胞僅表達(dá)mIgM記憶B細(xì)胞mIgM IgA: 分為單體的血清型和二聚體的分泌

9、型 IgA;分泌型 IgA 主要由黏膜相關(guān)淋巴組織產(chǎn)生,存在于唾液、淚液、乳汁及呼吸道、消 化道、泌尿道的分泌液中和黏膜表面,是機(jī)體黏膜局部抗感染免疫的重要因素 ; 初乳中的 sIgA 可對(duì)嬰幼兒發(fā)揮自然被動(dòng)免疫作用 ; 調(diào)理吞噬、中和毒素 . IgD:血清中含量低( 1%),其生物學(xué)作用尚不清楚 . mIgD可作為B細(xì)胞分化成熟標(biāo)記,成熟 B細(xì)胞同時(shí)表達(dá)mIgM和mlgD IgE: 是血清中含量最低的 Ig ; 主要由呼吸道、胃腸道粘膜固有層的漿細(xì)胞產(chǎn)生 .7. 細(xì)胞因子的共同特點(diǎn)及分類? 分類 (1)白細(xì)胞介素 IL(2)集落刺激因子CSF是指能夠刺激多功能造血干細(xì)胞和不同發(fā)育分化階 段的

10、造血祖細(xì)胞分化 . 增殖的細(xì)胞因子。(3)干擾素INF:能夠干擾病毒復(fù)制的細(xì)胞因子 型和II型(4)生長(zhǎng)因子GF指一類可促進(jìn)相應(yīng)細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的細(xì)胞因子。(5)腫瘤壞死因子TNF能造成腫瘤組織壞死的細(xì)胞因子(6)趨化因子:由多種細(xì)胞分泌的對(duì)不同細(xì)胞具有趨化作用的細(xì)胞因子 特點(diǎn):小分子蛋白質(zhì) 可溶性 高效性,在較低濃度下即有生物學(xué)活性 通過結(jié)合細(xì)胞表面相應(yīng)受體發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng) 可誘導(dǎo)產(chǎn)生半衰期短 效應(yīng)范圍小,絕大多數(shù)為近距離發(fā)揮作用單體形式存在,多細(xì)胞來源8. HLAI類分子的組織分布和功能?I類分子由重鏈和B2m組成,分布于所有有核細(xì)胞表面。II類分子由a鏈和B鏈組成,分布于淋巴組織中一些特定的

11、細(xì)胞表面。功能:參與抗原加工和提呈參與T細(xì)胞限制性識(shí)別參與T細(xì)胞在胸腺的發(fā)育誘導(dǎo)同種移植排斥反應(yīng)參與對(duì)免疫應(yīng)答的遺傳控制9. B細(xì)胞和T細(xì)胞的功能?B淋巴細(xì)胞的功能:產(chǎn)生抗體介導(dǎo)體液免疫應(yīng)答提呈抗原免疫調(diào)節(jié)功能B1細(xì)胞參與非特異性免疫:抗感染,自身免疫性疾病有關(guān)T細(xì)胞的功能:輔助T細(xì)胞(ThO)不同細(xì)胞因子和共刺激分子對(duì)ThO的分化方向發(fā)揮調(diào)節(jié)作用。Th1主要分泌Th1型細(xì)胞因子,包括IFN- 丫 TNF IL-2等,能促進(jìn)Th1的 進(jìn)一步增殖,進(jìn)而發(fā)揮免疫細(xì)胞免疫效應(yīng),同時(shí)能抑制Th2增殖。主要效應(yīng)是分泌細(xì)胞因子增強(qiáng)細(xì)胞介導(dǎo)的抗感染免疫,特別是抗胞內(nèi)病原體感染。Th2細(xì)胞主要分泌Th2型細(xì)胞

12、因子,包括IL-4 IL-5 IL-10 IL-13等,能促進(jìn)Th2細(xì)胞增殖,進(jìn)而輔助B細(xì)胞的活化,發(fā)揮體液免疫的作用,同時(shí)抑制 Th1增 殖。細(xì)胞毒性T細(xì)胞(CTL)通常所稱的CD8鈿胞:主要功能是特異性識(shí)別內(nèi)源性抗 原肽-MHC類分子復(fù)合物,進(jìn)而殺傷靶細(xì)胞(病原體感染細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞)殺傷機(jī)制:分泌穿孔素,顆粒酶,顆粒溶素及淋巴毒素的物質(zhì)直接殺傷靶細(xì)胞通過Fas/FasL途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(了解)10. B細(xì)胞和T細(xì)胞激活的第一第二信號(hào)?B細(xì)胞活化:第一信號(hào):抗原刺激信號(hào),由 BCR-CD79a/b和 CD19/CD21/CD8共同傳遞。第二信號(hào):共刺激信號(hào),由th細(xì)胞與B細(xì)胞表

13、面多對(duì)共刺激分子相互作用產(chǎn)生,其 中最重要的是 CD40/CD40L.T細(xì)胞活化;第一信號(hào):抗原刺激信號(hào),BCR識(shí)別你、并結(jié)合抗原,形成抗原抗體復(fù)合物,抗原 被加工形成抗原肽后與MHCII類分子形成復(fù)合物,提呈給T細(xì)胞活化的第一信號(hào)。 第二信號(hào):抗原后表達(dá)B7分子,與T細(xì)胞表面CD28結(jié)合形成T細(xì)胞活化的第二信 號(hào)?;罨腡細(xì)胞表達(dá)CD40L與B細(xì)胞表面組成性表達(dá)CD40結(jié)合,產(chǎn)生B細(xì)胞活 化的第二信號(hào)。11. 初次免疫應(yīng)答和再次免疫應(yīng)答的區(qū)別有哪些?區(qū)別點(diǎn)初次應(yīng)答再次應(yīng)答潛伏期長(zhǎng)(約5-10天)短(1-3天);產(chǎn)生抗體的量少多在體內(nèi)維持的時(shí)間短長(zhǎng)抗體與抗原的親和力低高主要的抗體以LgM為主以

14、LgG為主12.巨噬細(xì)胞表面有哪些受體?補(bǔ)體受體,F(xiàn)C受體,清道夫受體,模式識(shí)別受體等13. NK細(xì)胞的殺傷作用機(jī)制?NK細(xì)胞不表達(dá)特異性抗原識(shí)別受體,而是通過表面活化受體和抑制性受體對(duì)自身 與非己進(jìn)行識(shí)別,并直接殺傷某些腫瘤和病毒感染的靶細(xì)胞。作用機(jī)制;1. 孔素/顆粒酶作用途徑2. Fas與FasL作用途徑3. TNF- a與TNFR-I作用途徑:TNF-a 與 TNFR-I 結(jié)合14. 四型超敏反應(yīng)的臨床疾病有哪些?I型;藥物過敏性休克,血清過敏性休克,呼吸道過敏反應(yīng),消化道過敏反應(yīng),皮 膚過敏反應(yīng)。II 型:輸血反應(yīng),新生兒溶血,自身免疫性溶血性貧血,藥物過敏性血細(xì)胞減少 癥,肺出血腎

15、炎綜合征,甲亢。III 型:Arthus反應(yīng)和類Arthus反應(yīng),血清病,鏈球菌感染后的腎小球腎炎,類 風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎,系統(tǒng)性紅斑狼瘡四型:感染性遲發(fā)型超敏反應(yīng),接觸性皮炎,移植排斥反應(yīng)。15. 自身免疫病有哪些特征?1)多數(shù)病因不明,可以有誘因,也可以無誘因。2)患者以女性居多,發(fā)病率隨年齡的增長(zhǎng)而增加。3)有遺傳傾向。4)體內(nèi)有自身抗體和針對(duì)自身組織細(xì)胞的致敏T細(xì)胞。自身抗體在不同的自身免疫性疾病中有交叉和重疊現(xiàn)象,部分疾病有相關(guān)的特征性自身抗體。5)疾病有重疊現(xiàn)象,即一個(gè)患者同時(shí)患兩種或兩種以上自身免疫性疾病。6)病程一般較長(zhǎng),多遷延不愈。7)損傷局部可發(fā)現(xiàn)有淋巴細(xì)胞,漿細(xì)胞,中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)

16、。8)免疫抑制劑治療多可取得較好的療效。9)在某些實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中免疫相關(guān)抗原或輸注自身抗體或輸注自身反應(yīng)性T細(xì)胞可復(fù)制出相似的疾病模型。16. AIDS的主要免疫學(xué)特征有哪些?目前傳播途徑有什么變化? 主要特征:a)CD4+T細(xì)胞數(shù)量顯著減少,功能嚴(yán)重障礙,CD4+/CD8比例倒置,低于0.5.b)TH1細(xì)胞與th2細(xì)胞平衡失調(diào),在感染的無癥狀階段以th1細(xì)胞占優(yōu),分泌IL-2刺激CD4鈿胞增殖,至AIDS期則以th2細(xì)胞占優(yōu),分泌IL-4和IL-10 抑制th1細(xì)胞分泌IL-2,從而消弱CTL的細(xì)胞毒效應(yīng)。c)抗原提呈細(xì)胞功能降低。d)B細(xì)胞功能異常。主要傳播途徑:性傳播,血液傳播,垂直傳播。變

17、化:性傳播途徑已成為主要傳播途徑,男男同性性傳播比例上升明顯;部地特定人群疫情嚴(yán)重;感染者陸續(xù)進(jìn)入發(fā)病期,死亡人數(shù)增加。17. 免疫缺陷病有哪些臨床特點(diǎn)?a)反復(fù)感染患者對(duì)各種病原體的易感性增加b)腫瘤IDD患者尤其是 T細(xì)胞免疫缺陷者,惡性腫瘤的發(fā)生率比正常人高 100-300倍。以白血病和淋巴系統(tǒng)腫瘤居多。c)自身免疫病IDD患者有高度伴發(fā)自身免疫病的傾向,其自身免疫病的發(fā)生率 比正常人高約1000倍,以類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎和惡性貧血多見。d)遺傳傾向e)臨床表現(xiàn)和病理損傷復(fù)雜多樣18. 人工主動(dòng)免疫和人工被動(dòng)免疫的區(qū)別和聯(lián)系?比較項(xiàng)目人工主動(dòng)免疫人工被動(dòng)免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等免疫產(chǎn)生的

18、時(shí)間較慢,2-4周快,立即免疫維持時(shí)間長(zhǎng),數(shù)月至數(shù)年短,2-3周主要用途預(yù)防,治療治療或緊急預(yù)防常用制劑疫苗,類毒素抗毒素,丙種球蛋白,細(xì)胞因子19. 抗原抗體反應(yīng)原理和特點(diǎn)?反應(yīng)的原理:抗原與抗體的特異性結(jié)合是基于抗原表位與抗體超變區(qū)的結(jié)構(gòu)互補(bǔ)性 和親和性(由抗原抗體分子的空間構(gòu)型決定)(1)抗原抗體結(jié)合力:靜電引力,范德華力,氫鍵,疏水作用力(2)抗原抗體的親和性與親和力(3)親水膠體轉(zhuǎn)化疏水膠體特點(diǎn):特異性,可逆性,比例性,和階段性。20. 雜交瘤技術(shù)的基本原理?答:利用聚乙二醇為細(xì)胞融合劑,使免疫后能產(chǎn)生抗體的小鼠脾細(xì)胞與能在體外長(zhǎng)期繁殖的小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合產(chǎn)生雜交瘤細(xì)胞,通過次黃嘌呤

19、,氨基蝶呤和胸腺嘧啶核苷選擇性培養(yǎng)基(HAT融合成功的雜交瘤細(xì)胞生長(zhǎng),經(jīng)反復(fù)的免疫學(xué)檢測(cè)篩選和 單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)(克隆化),最終獲得既產(chǎn)生所需單克隆抗體又能長(zhǎng)期體外繁殖的雜交 瘤細(xì)胞系。21. 對(duì)流免疫電泳的原理?答:是將雙向免疫擴(kuò)散與電泳相結(jié)合在直流電場(chǎng)中的定向加速的免疫擴(kuò)撒技術(shù),在 PH8.6的緩沖液中,大部分蛋白質(zhì)抗原等電點(diǎn)低,帶較強(qiáng)的負(fù)電荷,分子量小,受到 電滲作用下,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng),而抗體絕大多數(shù)IgG,等電點(diǎn)偏高,在ph8.6時(shí)帶負(fù)電荷少,且分子量大,移動(dòng)速度慢,它向正極移動(dòng)緩慢甚至不移動(dòng),而在電滲作 用下,隨水流向負(fù)極移動(dòng),電滲引向負(fù)極移動(dòng)的速度超過了 IgG向正極的移動(dòng)速度,

20、因此抗體移向負(fù)極,在抗原抗體濃度最適比處形成沉淀線,根據(jù)沉淀線相對(duì)兩孔的位 置可大致判斷抗原抗體的比例關(guān)系。22. 電化學(xué)發(fā)光的基本原理?答:在電化學(xué)發(fā)光免疫分析系統(tǒng)中,磁性微粒為固相載體包被抗體(抗原),用三聯(lián)吡啶釘標(biāo)記抗體(抗原),在反應(yīng)體系內(nèi)待測(cè)標(biāo)本與相應(yīng)的抗原(抗體)發(fā)生免疫 反應(yīng)后,形成磁性微粒包被抗體-待測(cè)抗原一三聯(lián)吡啶釘標(biāo)記抗體復(fù)合物,這時(shí)上述 復(fù)合物吸入流動(dòng)室,同時(shí)加入 TPA緩沖液。當(dāng)磁性微粒流經(jīng)電極表面時(shí),被安裝在電極下面的電磁鐵吸引住,而未結(jié)合的標(biāo)記抗體和標(biāo)本被緩沖液沖走,與此同時(shí)電極加壓,啟動(dòng)電化學(xué)發(fā)光,使三聯(lián)吡啶釘和 TPA在電極表面進(jìn)行電子轉(zhuǎn)移,產(chǎn)生電化學(xué)發(fā) 光,光

21、的強(qiáng)度與待測(cè)抗原的濃度呈正比。23. Ficoll分離液分離外周血單個(gè)核細(xì)胞的原理和示意圖?原理:是利用聚蔗糖-泛影葡胺分層液進(jìn)行單個(gè)核細(xì)胞的分離技術(shù),主要成分為聚 蔗糖,分子量40KD具有高密度,低滲透壓,無毒性的特點(diǎn)。高濃度的Ficoll溶液粘性高,易使細(xì)胞聚集,故常用6%勺溶液,其密度為1,020,比重為1.200的泛影葡 胺可增加溶液密度,因此在 Ficoll溶液中加入不同量的濃度為 34%勺泛影葡胺即可 制成不同密度的分層液。分離人外周血單個(gè)核細(xì)胞以密度為1.077+/-0.0001的分層液為最佳。將分層液加入試管底層,肝素抗凝靜脈血用Hanks液或PBS液作適當(dāng)稀釋 后,輕輕疊加在

22、分層液上面,使兩者形成一個(gè)清晰的界面,水平離心后,離心管中會(huì) 出現(xiàn)幾個(gè)不同層次的液體和細(xì)胞帶,從而實(shí)現(xiàn)PBMC勺分離。分層(從上到下):血小板血漿,單個(gè)核細(xì)胞,粒細(xì)胞,紅細(xì)胞 問答題:24. 補(bǔ)體的生物學(xué)意義有哪些?p46一)補(bǔ)體的生物功能:(二)補(bǔ)體的病理生理意義:溶菌、溶細(xì)胞作用a.機(jī)體抗感染的主要機(jī)制免疫調(diào)理作用b.參與適應(yīng)性免疫應(yīng)答清除免疫復(fù)合物c.補(bǔ)體系統(tǒng)與血液中其他級(jí)聯(lián)反應(yīng)系介導(dǎo)炎癥反應(yīng)統(tǒng)的相互作用。參與免疫調(diào)節(jié)25. ELISA的基本原理?雙抗體夾心法原理操作和結(jié)果觀察,臨床常用于哪些標(biāo)本的 檢測(cè)?ELISA的基本原理:是把抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性, 也

23、就是形成固相抗原或抗體,將抗原或抗體與酶連接成酶標(biāo)記的抗原或抗體,它既保留了免疫活性,又保留了酶的活性,測(cè)定時(shí)將受檢樣品(含有待測(cè)抗原或抗體)和酶 標(biāo)記抗原或抗體按一定程序與結(jié)合在固相載體上的抗原或抗體反應(yīng)形成固相化抗原 抗體-酶復(fù)合物;用洗滌的方法將固相載體上形成的抗原抗體-酶復(fù)合物與其他成分分 離,結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的的量成一定比例,加入底物后,底物被固相載體上的酶催化生成有色產(chǎn)物,通過定性或定量檢測(cè)有色產(chǎn)物的量即可確 定樣品中待測(cè)物質(zhì)的含量。雙抗體夾心法操作: 固相抗體 加入待測(cè)樣品溫育一段時(shí)間 洗板,去除其他游離成分加入酶標(biāo)抗體并溫育一段時(shí)間洗板形成固相抗體-待測(cè)抗

24、原-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物加底物固相載體結(jié)合的酶催化底物成為有色產(chǎn)物。根據(jù)產(chǎn)物的顯色程度進(jìn)行抗原的定性和定量的檢測(cè)。(考試可畫圖表示)結(jié)果觀察:產(chǎn)生有色產(chǎn)物,其顏色的深淺以待測(cè)抗原的量成正相關(guān)。臨床常用于乙肝表面抗原的檢測(cè),取血漿或血清。26免疫層析試驗(yàn)競(jìng)爭(zhēng)法的原理和雙抗體夾心法檢測(cè)HBsAg原理和結(jié)果觀察?AGTCB競(jìng)爭(zhēng)法原理:G處為金標(biāo)特異性抗體(兔型),T處包被了標(biāo)準(zhǔn)抗原,C處包被了羊抗 兔免疫球蛋白抗體。測(cè)試時(shí)待測(cè)標(biāo)本加于 A端,若標(biāo)本中含有待測(cè)抗原,流經(jīng) G處時(shí) 結(jié)合金標(biāo)特異性抗體,當(dāng)混合物移至T處時(shí),因無足夠游離的金標(biāo)特異性抗體與膜上 標(biāo)準(zhǔn)抗原結(jié)合,T處無棕色紅色線條出現(xiàn),實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陽性,游離金標(biāo)特異性抗體或 金標(biāo)特異性抗體復(fù)合物流經(jīng) C處,與該處的羊抗兔免疫球蛋白抗體結(jié)合出現(xiàn)棕紅色的 保證帶;或標(biāo)本中不含待測(cè)抗原,金標(biāo)特異性抗體則與 T處膜上的標(biāo)準(zhǔn)抗原結(jié)合,在 T處出現(xiàn)棕紅色的線條,實(shí)驗(yàn)結(jié)果為陰性,而

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