食品微生物檢驗(yàn)室技術(shù)操作要求

1、（一）（一）無菌操作要求無菌操作要求 （二）（二）無菌室使用要求無菌室使用要求 （三）（三）消毒滅菌要求消毒滅菌要求 食品微生物檢驗(yàn)室工作人員，食品微生物檢驗(yàn)室工作人員， 必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗(yàn)必須有嚴(yán)格的無菌觀念，許多試驗(yàn) 要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因：要求在無菌條件下進(jìn)行，主要原因： 1.1.接種時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。接種時(shí)必須穿工作服、戴工作帽。 2.2.進(jìn)行接種食品樣品時(shí)，必須穿專業(yè)工作服、進(jìn)行接種食品樣品時(shí)，必須穿專業(yè)工作服、 帽及拖鞋，它們應(yīng)放在無菌室緩處間，工作帽及拖鞋，它們應(yīng)放在無菌室緩處間，工作 前經(jīng)紫外線消毒后使用。應(yīng)在進(jìn)無菌室前用前經(jīng)紫外線消毒后使用。應(yīng)在進(jìn)

2、無菌室前用 肥皂洗手，然后用肥皂洗手，然后用75%75%酒精棉球?qū)⑹植粮蓛簟＞凭耷驅(qū)⑹植粮蓛簟?3.3.進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須進(jìn)行接種所用的吸管、平皿及培養(yǎng)基等必須 經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不經(jīng)消毒滅菌，打開包裝未使用完的器皿，不 能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用能放置后再使用，金屬用具應(yīng)高壓滅菌或用 95%95%酒精點(diǎn)燃燒灼酒精點(diǎn)燃燒灼3 3次后使用。次后使用。 4.4.從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及從包裝中取出吸管時(shí)，吸管尖部不能觸及 外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)，外露部位，使用吸管接種于試管或平皿時(shí)， 吸管尖不能觸及試管或平皿邊。吸管尖不

3、能觸及試管或平皿邊。 5.5.接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作，接種樣品、轉(zhuǎn)種細(xì)菌必須在酒精燈前操作， 接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后接種細(xì)菌或樣品時(shí)，吸管從包裝中取出后 及打開試管塞都要通過火焰消毒。及打開試管塞都要通過火焰消毒。 6.6.接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒接種環(huán)或接種針在接種細(xì)菌前應(yīng)經(jīng)火焰燒 灼全部金屬絲，必須時(shí)還要燒到環(huán)和針與灼全部金屬絲，必須時(shí)還要燒到環(huán)和針與 桿的連接處。桿的連接處。 7.7.吸管吸取菌液或樣品時(shí)，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮吸管吸取菌液或樣品時(shí)，應(yīng)用相應(yīng)的橡皮 頭吸取，不得直接用口吸。頭吸取，不得直接用口吸。 無菌室通向外面的窗戶應(yīng)為雙層玻無菌室通向外

4、面的窗戶應(yīng)為雙層玻 璃，并要密封，不得隨意打開，并璃，并要密封，不得隨意打開，并 設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及設(shè)有與無菌間大小相應(yīng)的緩沖間及 推拉門，另設(shè)有小窗，以備進(jìn)入無推拉門，另設(shè)有小窗，以備進(jìn)入無 菌間后傳遞物品。菌間后傳遞物品。 無菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用無菌室內(nèi)應(yīng)保持清潔，工作后用 2%-3%2%-3%煤酚皂溶液消毒，拭擦工作煤酚皂溶液消毒，拭擦工作 臺(tái)面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。臺(tái)面，不得存放與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的物品。 無菌室使用前后應(yīng)將門關(guān)緊，打開紫無菌室使用前后應(yīng)將門關(guān)緊，打開紫 外線，如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時(shí)，外線，如采用室內(nèi)懸吊紫外燈消毒時(shí)， 需需30w30w紫外燈，距離在

5、紫外燈，距離在1.0m1.0m處，照射時(shí)處，照射時(shí) 間不少于間不少于30min30min，使用紫外燈，應(yīng)注意，使用紫外燈，應(yīng)注意 不得直接在紫外線下操作，以免引起不得直接在紫外線下操作，以免引起 損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕損傷，燈管每隔兩周需用酒精棉球輕 輕拭擦，除去上面灰塵和油垢，以減輕拭擦，除去上面灰塵和油垢，以減 少紫外線穿透的影響。少紫外線穿透的影響。 處理和接種食品標(biāo)本時(shí)，進(jìn)入無菌處理和接種食品標(biāo)本時(shí)，進(jìn)入無菌 室操作，不得隨意出入，如需要傳室操作，不得隨意出入，如需要傳 遞物品，可通過小窗傳遞。遞物品，可通過小窗傳遞。 在無菌室內(nèi)如需要安裝空調(diào)時(shí)，則在無菌室內(nèi)如需要安裝空調(diào)時(shí)

6、，則 應(yīng)有過濾裝置。應(yīng)有過濾裝置。 ( (三三) )消毒滅菌要求消毒滅菌要求 微生物檢測(cè)用的玻璃器皿、金屬微生物檢測(cè)用的玻璃器皿、金屬 用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng)用具及培養(yǎng)基、被污染和接種的培養(yǎng) 物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。物等，必須經(jīng)滅菌后方能使用。 1 1干熱和濕熱高壓蒸汽鍋滅菌干熱和濕熱高壓蒸汽鍋滅菌 (1)(1)滅菌前準(zhǔn)備滅菌前準(zhǔn)備 (2)(2)裝放干熱滅菌器裝放干熱滅菌器 (3)(3)設(shè)備檢查設(shè)備檢查 (4)(4)干熱滅菌法干熱滅菌法 (5)(5)手提式高壓鍋或立式壓力蒸汽滅手提式高壓鍋或立式壓力蒸汽滅 菌器的使用步驟菌器的使用步驟 (6)(6)臥式壓力鍋蒸汽滅菌器的使用步臥式

7、壓力鍋蒸汽滅菌器的使用步 驟驟 2 2間歇滅菌方法間歇滅菌方法 (1)(1)滅菌方法滅菌方法 (2)(2)血清凝固器使用方法血清凝固器使用方法 (3)(3)煮沸消毒煮沸消毒 (4)(4)滅菌后處理滅菌后處理 (4)干熱滅菌法 此法適應(yīng)于在干熱情況下，不損壞、此法適應(yīng)于在干熱情況下，不損壞、 不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品，較常用于玻璃不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品，較常用于玻璃 器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。 器械、器皿應(yīng)清洗后再干烤，以器械、器皿應(yīng)清洗后再干烤，以 防附著在表面的污物碳化。防附著在表面的污物碳化。 滅菌時(shí)安放物品不能過擠，不要滅菌時(shí)安放物品不能過擠，不要 直

8、接接觸底和箱壁，物品之間留直接接觸底和箱壁，物品之間留 有空隙。有空隙。 滅菌時(shí)將箱門關(guān)緊，接上電源，滅菌時(shí)將箱門關(guān)緊，接上電源， 先將排氣孔打開約先將排氣孔打開約30min30min，排除，排除 滅菌器中的冷空氣，溫度升至滅菌器中的冷空氣，溫度升至 160160調(diào)節(jié)指示燈，維持調(diào)節(jié)指示燈，維持1.51.52h2h。 滅菌完畢后或升溫過程中，須在滅菌完畢后或升溫過程中，須在 6060以下才能打開箱門。以下才能打開箱門。 (5)手提式高壓鍋或立式壓力 蒸汽滅菌器的使用步驟 手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入手提式高壓鍋在主體內(nèi)加入3l3l 清水，立式高壓鍋加水清水，立式高壓鍋加水16l(16l(重復(fù)重復(fù)

9、使用時(shí)應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁使用時(shí)應(yīng)將水量補(bǔ)足，水變混濁 需更換需更換) ) 。 手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣手提式壓力鍋將頂蓋上的排氣 管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中管插入消毒桶內(nèi)壁的方管中( (無無 軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不軟管或軟管銹蝕破裂的滅菌器不 得使用得使用) ) 。 蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；置蓋好頂蓋擰緊，勿使漏氣；置 滅菌器于火源上加熱，立式壓滅菌器于火源上加熱，立式壓 力鍋通上電源，并打開頂蓋上力鍋通上電源，并打開頂蓋上 的排氣閥放出冷氣的排氣閥放出冷氣( (水沸騰后水沸騰后 排氣排氣101015min) 15min) 。 關(guān)閉排氣閥，使蒸汽壓上升到關(guān)閉排氣閥，使蒸汽壓上升到 規(guī)

10、定要求，并維持規(guī)定時(shí)間規(guī)定要求，并維持規(guī)定時(shí)間 ( (按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況按滅菌物品性質(zhì)與有關(guān)情況 而定而定) ) 。 達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，對(duì)需干燥的達(dá)到規(guī)定時(shí)間后，對(duì)需干燥的 物品，立即打開排氣閥排出蒸物品，立即打開排氣閥排出蒸 汽，待壓力恢復(fù)到零時(shí)，自然汽，待壓力恢復(fù)到零時(shí)，自然 冷卻至冷卻至6060后開蓋取物，如為后開蓋取物，如為 液體物品，不要打開排氣閥，液體物品，不要打開排氣閥， 而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自而應(yīng)立即將鍋去除熱源，待自 然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度然冷卻，壓力恢復(fù)至零，溫度 降到降到6060以下再開蓋取物，以以下再開蓋取物，以 防突然減壓，液體劇烈沸騰或防突然減壓，液體劇

11、烈沸騰或 容器爆破。容器爆破。 (6)臥式壓力鍋蒸汽滅菌器的 使用步驟 關(guān)緊鍋門，打開進(jìn)氣閥，將蒸關(guān)緊鍋門，打開進(jìn)氣閥，將蒸 汽引入夾層進(jìn)行預(yù)熱，夾層內(nèi)冷汽引入夾層進(jìn)行預(yù)熱，夾層內(nèi)冷 空氣經(jīng)阻氣器自動(dòng)排出。空氣經(jīng)阻氣器自動(dòng)排出。 夾層達(dá)到預(yù)定溫度后，打開鍋夾層達(dá)到預(yù)定溫度后，打開鍋 室進(jìn)氣閥，將蒸汽引入鍋室，鍋室進(jìn)氣閥，將蒸汽引入鍋室，鍋 室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動(dòng)排室內(nèi)冷空氣經(jīng)鍋室阻氣器自動(dòng)排 出出. . 待鍋室達(dá)到規(guī)定的壓力與溫度待鍋室達(dá)到規(guī)定的壓力與溫度 時(shí)，調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥，保持時(shí)，調(diào)節(jié)進(jìn)氣閥，保持 103.4kpa103.4kpa、121151211530min30min滅滅 菌。菌。 自

12、然或人工降溫至自然或人工降溫至6060再開門再開門 取物，不得使用快速排出蒸汽取物，不得使用快速排出蒸汽 法，以防突然降壓，液體劇烈法，以防突然降壓，液體劇烈 沸騰或容器爆破。沸騰或容器爆破。 使用自動(dòng)程序控制式壓力蒸汽使用自動(dòng)程序控制式壓力蒸汽 滅菌器，在放好物品關(guān)緊門后，滅菌器，在放好物品關(guān)緊門后， 應(yīng)根據(jù)物品類別按動(dòng)相應(yīng)開關(guān)，應(yīng)根據(jù)物品類別按動(dòng)相應(yīng)開關(guān)， 以便按要求程序自動(dòng)進(jìn)行滅菌，以便按要求程序自動(dòng)進(jìn)行滅菌， 滅菌時(shí)必須利用附設(shè)儀表記錄滅菌時(shí)必須利用附設(shè)儀表記錄 溫度與時(shí)間以備查，操作要求溫度與時(shí)間以備查，操作要求 應(yīng)嚴(yán)格按照廠家說明書進(jìn)行。應(yīng)嚴(yán)格按照廠家說明書進(jìn)行。 2間歇滅菌方法

13、(1)(1)滅菌方法滅菌方法 是利用不加壓力的蒸汽滅菌，某是利用不加壓力的蒸汽滅菌，某 些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸汽滅菌容易破壞，可些物質(zhì)經(jīng)高壓蒸汽滅菌容易破壞，可 用此法滅菌。用此法滅菌。 (2)(2)血清凝固器使用方法血清凝固器使用方法 培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成培養(yǎng)基中含有血清或雞蛋特殊成 分時(shí)，因高熱會(huì)破壞其營養(yǎng)成分，故分時(shí)，因高熱會(huì)破壞其營養(yǎng)成分，故 用低溫，可使用血清凝固，又可達(dá)到用低溫，可使用血清凝固，又可達(dá)到 滅菌目的，在使用該法滅菌的血清等滅菌目的，在使用該法滅菌的血清等 分裝時(shí)，需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，試管、分裝時(shí)，需嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作，試管、 平皿也經(jīng)滅菌后使用。平皿也經(jīng)滅菌后使用。 (3) (3) 煮沸消毒煮沸消毒 (4)(4)滅菌后處理滅菌后處理 滅菌后物品，按正常情況已屬滅菌后物品，按正常情況已屬 無菌，從滅菌器中取出應(yīng)仔細(xì)檢查無菌，