瘧疾血片制作

1、 血片的制作 血片的染色 影響血片制作質(zhì)量的因素及 注意事項(xiàng) 瘧疾血片厚、薄血膜的制作要領(lǐng)。 瘧疾血片制作注意事項(xiàng)。 掌握血片制作技巧、反復(fù)練習(xí)。 （一）采血： 1、使用的器材準(zhǔn)備： 一次性采血針 75%酒精 棉棒（球） 載玻片 推片 記號(hào)筆或鉛筆。 2、采血時(shí)間：癥狀發(fā)作后數(shù) 小時(shí)至10小時(shí)之內(nèi)。 3、采血部位消毒：采血部位消毒：用沾有碘 酒的棉棒在患者手指末端、 耳垂、拇趾或足跟（嬰幼 兒）從內(nèi)向外畫(huà)同心圓。 4、采血：、采血：將采血針迅速刺入 取血部位12mm深，用大 拇指、食指協(xié)同擠出血滴。 第一滴血因含有酒精，用 棉簽擦去。再擠出第二滴 血用于制作血片。 （二）涂制血片 1、取血取血

2、: 將載玻片平均劃分為2等份，用推片的一 角從患者刺血部位沾取血樣放在載玻片上，或用 載玻片直接沾取血樣。于載玻片中央偏右3mm處 粘取45ul（相當(dāng)于一個(gè)火柴頭大?。┭河糜谕?制厚血膜，在玻片中央偏左3-5mm處粘取11.5 ul血液（相當(dāng)于1/4火柴頭大?。┯糜谕恐票⊙ぁ?要求要求:先沾取厚血膜血樣，再沾取薄血膜血先沾取厚血膜血樣，再沾取薄血膜血 樣。樣。 2、制片：左手拇指和食指托住載玻片的兩個(gè)短邊， 右手拇指和食指同時(shí)捏住推片和載玻片，使推片 保持25度35度角，用推片短邊的下緣平抵血樣 前3-5mm處，然后推片順著載玻片緩慢地向后退， 邊退邊觀察血液在推片的擴(kuò)展情況，當(dāng)血液向兩

3、側(cè)擴(kuò)展至距載玻片邊緣2mm時(shí)，停止后退，然后 勻速向前推，直至推片抵到拿載玻片的手指。推 片時(shí)，右手拇指和食指要貼緊載玻片，避免推歪。 薄血膜要成舌狀，厚度應(yīng)以紅細(xì)胞之間互相接觸 而不重疊為佳。 薄 血 膜 制 作 注意： 血滴大，速度快、角度大 血膜厚 血滴小，速度慢、角度小 血膜薄 血涂片質(zhì)量評(píng)價(jià)： 血膜均勻、厚薄度合適、無(wú)空泡、無(wú)劃痕 薄血膜頭體尾位置和形狀好、無(wú)停頓起伏、 兩側(cè)留出空間 推好薄血膜后，再 用推片一角由內(nèi)向 外劃圈涂制直徑 0.81cm的圓形厚 血膜（厚度以一個(gè) 油鏡視野內(nèi)可見(jiàn)到 510個(gè)白細(xì)胞為 宜）。 3、編號(hào)： 每張載玻片 上可做1個(gè)薄血膜和1個(gè)厚 血膜，如圖： 標(biāo)

4、準(zhǔn)血片標(biāo)準(zhǔn)血片 門(mén)診發(fā)熱病人血片門(mén)診發(fā)熱病人血片 居民普查血片居民普查血片 4、干燥：干燥：可自然干燥，也可在手掌大魚(yú)際肌 上摩擦干燥?；蛘呤褂镁凭珶艋螂姶碉L(fēng)加 熱干燥，但需當(dāng)心過(guò)度加熱，烤傷血片。 而且，加熱后必須待冷卻至室溫方能染色 或固定，否則染色沖片血膜會(huì)脫落。 5、固定：、固定：干燥后的血片用甲醇固定薄血膜。 固定時(shí)，注意薄血膜一端朝下，避免固定 厚血膜。 血片染色在血片的制作過(guò)程中是 一個(gè)重要的環(huán)節(jié)，染色質(zhì)量的好壞， 直接影響到瘧原蟲(chóng)的檢出率，也是 直接影響瘧疾病例確診與否的關(guān)鍵。 瘧疾血片的染色有瑞氏染液和吉 氏染液兩種，我們現(xiàn)在重點(diǎn)介紹吉 姆薩染液染色法。 染液為省寄生蟲(chóng)病防治

5、所統(tǒng)一配制的吉 姆薩染液；為方便開(kāi)展工作，經(jīng)省寄生蟲(chóng) 病防治所反復(fù)試驗(yàn)，緩沖液選擇市面上供 應(yīng)的娃哈哈礦泉水為佳（在條件允許時(shí)配 制pH7.07.2的緩沖液為最佳選擇）。 注：珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的 Baso姬姆薩染液： A液為染液 B液為稀釋液 染色方法：染色方法： 1.標(biāo)準(zhǔn)染色方法 1滴原液+1ml緩沖液，染2030分鐘 2.快速染色方法 2滴原液+1ml緩沖液，染1015分鐘 染色時(shí)，用吸管吸取配好的染液，以一定高度自 由滴下染液。禁止用吸管攪拌玻片上的染液或者 接觸血膜。染色結(jié)束后將玻片浸入盆水中，使玻 片保持水平并左右輕輕移動(dòng)，至干凈時(shí)從水中輕 輕抽出?；蛘呤褂米詠?lái)水沖洗，沖

6、洗時(shí)，水平拿 起載玻片（不要先倒掉染液），從載玻片無(wú)血膜 區(qū)域（磨邊處）用無(wú)沖擊力的緩慢流水輕柔地把 染液沖掉，在確保厚血膜不掉的前提下，從玻片 另外一邊再?zèng)_洗，直到確認(rèn)沖洗干凈。晾干時(shí)注 意薄血膜一端向下放置（用晾片板晾干）。 未染色血片的保存未染色血片的保存 未染色的血膜放置時(shí)間，夏季不 宜超過(guò)48小時(shí)，冬季不宜超過(guò)72 小時(shí)。若送省級(jí)或國(guó)家檢測(cè)，應(yīng)待 厚血膜干后，先用蒸餾水溶血，再 用甲醇固定薄血膜，晾干包好后放 入干燥的容器或自封袋中送檢。 采血針一人一針； 載玻片臟：有油脂、污跡； 推片不規(guī)格； 取血不適度； 薄血膜過(guò)厚； 厚血膜制作不均勻； 染液雜質(zhì)； 染液PH值不合適（適宜：7.0-7.2）； 過(guò)度染色