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1、會(huì)計(jì)學(xué)1ApoE基因的檢測(cè)方法基因的檢測(cè)方法112158cyscyscysargarg234 TGC，cys CGC，argcodon：112/158TGCTGCTGCCGCCGCargCGCE2(T/T)E3(T/C)E4(C/C)E2(T/T)E2/E2(TT/TT)E2/E3(TT/TC)E2/E4(TC/TC)E3(T/C)E3/E3(TT/CC)E3/E4(TC/CC)E4(C/C)E4/E4(CC/CC)第1頁(yè)/共15頁(yè)第2頁(yè)/共15頁(yè)T/CT/C112158TCCTP1P2P3P453上游引物P5下游引物A管：P1、P3、P5 B管：P2、P4、P5 1 2 3 4 5 6 1

2、2 3 4 5 6 11、22、33、44、55、66分別代表基因型E2/E2、 E2/E3 、E2/E4 、E3/E3 、E3/E4 、E4/E4 ARMS-PCR第3頁(yè)/共15頁(yè) PCR-SSCP 單鏈構(gòu)象多態(tài)性(SSCP) 是在非變性聚丙烯酰胺凝膠上，根據(jù)短的單鏈DNA 或RNA 分子堿基序列不同形成的不同構(gòu)象；一個(gè)堿基的改變將影響其構(gòu)象而導(dǎo)致其在凝膠上的移動(dòng)速度改變, 形成多態(tài)性。E2/E2：A,A1E2/E3：A,A1,B,B1E2/E4：A,A1,C,C1E3/E3：B,B1E3/E4：B,B1,C,C1E4/E4：C,C1第4頁(yè)/共15頁(yè) PCR-RFLPGCGCCGCGABCD

3、EE2： TT 片段AE3： TC 片段E、DE4： CC 片段B、C、D112位：GT/CGC158位：GC/TGCE2/E2：AE2/E3：A,D,EE2/E4：A,B,C,DE3/E3：E,DE3/E4：B,C,D,EE4/E4：B,C,D第5頁(yè)/共15頁(yè) Q-PCRFRprobeprobeTTTCCCTTE2/E2(TT/TT)E2/E3(TT/TC)E2/E4(TC/TC)TC-E3/E3(TT/CC)E3/E4(TC/CC)CC-E4/E4(CC/CC)第6頁(yè)/共15頁(yè)第7頁(yè)/共15頁(yè)第8頁(yè)/共15頁(yè)Roche SNP Genotyping Introduction第9頁(yè)/共15頁(yè)融解曲線分析的原理第10頁(yè)/共15頁(yè)融解曲線分析的結(jié)果判讀第11頁(yè)/共15頁(yè)單色熒光對(duì)ApoE分型第12頁(yè)/共

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