細(xì)胞培養(yǎng)基的生產(chǎn)和過程控制

1、細(xì)胞培養(yǎng)基的生產(chǎn)和過程控制細(xì)胞培養(yǎng)基作為生物制品生產(chǎn)的重要原材料之一， 其質(zhì)量對生物制品有重要的影響。 細(xì) 胞培養(yǎng)基的生產(chǎn)工藝和細(xì)胞培養(yǎng)基的原材料選用、 生產(chǎn)過程及檢驗過程中的質(zhì)量控制對于細(xì) 胞培養(yǎng)基的產(chǎn)品質(zhì)量具有直接影響。 其中原材料的成份及其質(zhì)量直接決定了細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品 的質(zhì)量及安全性， 選擇合適的物料是實現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)基功能過程中需要解決的基礎(chǔ)問題。 生產(chǎn) 工藝的選擇 （如原料的研碎、 混合技術(shù)等） 及生產(chǎn)過程中的質(zhì)量控制等直接影響產(chǎn)品的溶解 性、批生產(chǎn)量及批次間差異，進(jìn)而影響產(chǎn)品的質(zhì)量。cGMP 稽查員在對國內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)進(jìn)行 cGMP 審計時指出，細(xì)胞培養(yǎng)基的生 產(chǎn)工藝及設(shè)備應(yīng)經(jīng)過

2、驗證，原材料必須做鑒別試驗，記錄應(yīng)真實反映生產(chǎn)過程的實際情況， 生產(chǎn)過程偏差處理應(yīng)包括對出現(xiàn)偏差之前涉及到的批次均應(yīng)進(jìn)行調(diào)查等等。 這些要求是基于 FDA 對生物制藥用原料的質(zhì)量要求方面提出，遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于國內(nèi)對藥用原料的要求。隨著對人 用和動物保健用生物制品安全性要求的提高， 嚴(yán)格執(zhí)行 GMP 規(guī)范進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)是國 內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基行業(yè)發(fā)展的必然趨勢。1.1 細(xì)胞培養(yǎng)基的原料選擇及質(zhì)量控制1.1.2 原材料的原料選擇由于動物細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品屬于藥用原料， 哺乳類動物細(xì)胞培養(yǎng)基行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)對細(xì)胞培 養(yǎng)基產(chǎn)品的微生物限度、內(nèi)毒素含量進(jìn)行了限定，所以細(xì)胞培養(yǎng)基所用原料宜采用注射級、 藥用級原料。 對于部份沒

3、有注射級和藥用級的原料， 細(xì)胞培養(yǎng)基制造者針對自身產(chǎn)品質(zhì)量要 求，制定一些重要指標(biāo)（微生物限度、內(nèi)毒素、重金屬等）進(jìn)行原材料的質(zhì)量控制。1.1.2 原材料的質(zhì)量控制細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)建立完善的原材料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 對于原材料的來源、 檢驗、使用、及 銷毀等有明確的可追溯記錄。 在質(zhì)量控制過程中， 藥用級原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)參考中國藥典 相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)， 對于非藥用級原材料應(yīng)根據(jù)生產(chǎn)工藝需要與供應(yīng)商一起共同確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)， 質(zhì)量 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)包括如下內(nèi)容： 指定的物料名稱和企業(yè)內(nèi)部使用的物料代碼、 藥典專論的名稱 (如有)、 經(jīng)批準(zhǔn)的供應(yīng)商以及原始生產(chǎn)商、 印刷包裝材料的樣張、 物料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)及其編號、 取樣、

4、檢驗方法或相關(guān)規(guī)程編號、 定性和定量的限度要求、 貯存條件和注意事項、 復(fù)驗前的最長貯 存期。原材料的質(zhì)量檢測主要從材料、人員、方法三個方面進(jìn)行控制：1) 具有必要的檢測試劑、設(shè)備和設(shè)施，如鱟試劑、分析天平、潔凈操作室或取樣柜。2) 擁有相應(yīng)操作資質(zhì)和能力的檢驗人員， 如相應(yīng)檢測人員應(yīng)具備化驗員資質(zhì)并經(jīng)過全 面的技能培訓(xùn)。選擇具有法律效力的檢測方法以及對應(yīng)的操作規(guī)范， 在檢測方法的選擇方面藥用原料應(yīng) 優(yōu)先采用藥典方法， 非藥用原料應(yīng)采用經(jīng)過驗證有效的檢測方法， 在確定檢測方法后應(yīng)制定 相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)操作文件，用于規(guī)范試驗操作。應(yīng)嚴(yán)格控制細(xì)胞培養(yǎng)基的原材料質(zhì)量管理， 并建立相應(yīng)完善的原材料質(zhì)量管理文件

5、體系。 原材料的質(zhì)量管理方面，應(yīng)明確規(guī)定責(zé)任范圍和流程方法，它們是保證原材料質(zhì)量的基礎(chǔ)。 原材料質(zhì)量管理文件體系內(nèi)容通常包括兩個方面， 一方面是明確原材料質(zhì)量責(zé)任應(yīng)歸屬的部 門及人員，以實現(xiàn)分工明確；另一方面是明確原材料的取樣、檢驗、放行、判定不合格、異 常情況、偏差、驗證等事務(wù)具體流程，確保流程正確，方法無誤，為質(zhì)量控制提供依據(jù)。1.2 細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)生產(chǎn)工藝傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)工藝即生產(chǎn)過程通常分為物料配比、 物料干燥、 物料研碎、 物料 混合、物料包裝、 成品的檢驗等 6 個階段，下面結(jié)合過程中的質(zhì)量控制對此工藝進(jìn)行介紹： 1.2.1 物料配比物料配比是根據(jù)配方要求將各種原料按比例配制的

6、過程。 配制需嚴(yán)格執(zhí)行配方， 才能保證細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品功能的實現(xiàn)及降低批間差， 而實現(xiàn)低誤差的物料配比過程需從以下幾個方 面進(jìn)行控制：1) 提供與生產(chǎn)工藝規(guī)程匹配且經(jīng)過審核的、有效力的物料配方，生產(chǎn)部門根據(jù)配方制定 配比操作記錄，經(jīng)質(zhì)量管理部門審核后，方可投入生產(chǎn)作業(yè)使用；2) 具有詳細(xì)明確的經(jīng)過驗證的設(shè)備、設(shè)施、工序操作規(guī)程以及相關(guān)管理規(guī)程，如通過編 制設(shè)備、設(shè)施的驗證、使用、維護(hù)、維修操作規(guī)程來明確操作方法和流程，通過編制相應(yīng)管 理文件，來明確人員責(zé)任；3) 具有足夠的在校驗有效期內(nèi)的精確度合理的計量器具，及與產(chǎn)品質(zhì)量要求相匹配的生 產(chǎn)環(huán)境設(shè)施，如為降低細(xì)胞培養(yǎng)基微生物、內(nèi)毒素限度使用潔凈廠

7、房進(jìn)行生產(chǎn)等；4) 足夠的經(jīng)過合理培訓(xùn)具有上崗資質(zhì)的操作人員和設(shè)備管理人員(操作員上崗證、計量 員證)，各崗位操作人員配備足夠，能夠確保操作過程實現(xiàn)雙人操作雙人復(fù)核；5) 配備足夠的基層管理人員以及現(xiàn)場 QA ，起到指導(dǎo)和監(jiān)督作用。1.2.2 物料干燥基于細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品營養(yǎng)豐富， 且不是無菌制劑的特性， 為避免微生物滋生破壞細(xì)胞培 養(yǎng)基成份， 需控制細(xì)胞培養(yǎng)基中的水分含量， 依據(jù)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)要求， 其干燥減重質(zhì)量分?jǐn)?shù)應(yīng)低 于 5.0% ，而原料干燥是控制其含水量的最重要環(huán)節(jié)。目前常用的干燥方法有常壓干燥和冷凍干燥。 常壓干燥包括烘干干燥、 鼓式干燥、 帶式 干燥， 由于國內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家普遍采

8、用球磨缸進(jìn)行生產(chǎn)， 由于各缸獨立， 無法使用鼓 式干燥、 帶式干燥的方式進(jìn)行連續(xù)烘干作業(yè)， 所以普遍采用烘干干燥的方式按批進(jìn)行物料干 燥。冷凍干燥主要用于不能耐受高溫的貴細(xì)物料的干燥處理。1.2.3 物料研磨細(xì)胞培養(yǎng)基顆粒越細(xì)， 同質(zhì)條件下比表面積越大， 其溶解性越好， 而其成品細(xì)度是由物料的研磨過程直接決定。 對于物料的研磨， 傳統(tǒng)普遍采用藥用球磨機(jī)， 其主要優(yōu)點是結(jié)構(gòu)簡 單、操作方便、易于清潔及使物料混合作用（能夠?qū)崿F(xiàn)缸體內(nèi)各種成份的均勻分布） 。球磨 缸內(nèi)的研磨球材質(zhì)通常有陶瓷、瑪瑙、不銹鋼（304 或 316L ）。但是球磨機(jī)也存在批量小、噪音大、 難以控制溫度、 粉狀物料不易取出且取

9、料過程會產(chǎn)生大量粉塵等缺點。 目前國內(nèi)一 些細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)企業(yè)在球磨缸取料工序裝備了全密閉自動取粉裝置， 較好的解決了粉塵污 染問題，也進(jìn)一步降低了由于物料的裸露可能帶來的引入異物及物料受潮的風(fēng)險。1.2.4 物料混合混合設(shè)備首先必須具備能夠?qū)崿F(xiàn)物料均勻性的功能。 在上述物料研磨過程中， 可能存在 投料微量誤差、 過程參數(shù)細(xì)微差異以及其他不可控因素， 上述因素的累積會導(dǎo)致不同研磨單 元內(nèi)物料可能出現(xiàn)一定的差異（外觀、理化性質(zhì)、培養(yǎng)性能） ，這些差異將直接影響產(chǎn)品的 使用，造成使用者生產(chǎn)效率及產(chǎn)品的批間差異。根據(jù)哺乳類細(xì)胞培養(yǎng)基行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中對于“批” 的定義， 即同一臺混合設(shè)備一次混合量所生產(chǎn)的均

10、質(zhì)產(chǎn)品為一批， 物料經(jīng)研磨單元研磨以后 必須進(jìn)行總混和均勻后才能稱為一批成品進(jìn)行包裝。 目前常用的物料混合設(shè)備以摻和機(jī)、 雙 錐混合機(jī)較為常見。1.2.5 物料包裝物料的包裝分為內(nèi)包裝和外包裝，主要為了實現(xiàn)如下功能：1） 阻隔性功能：即密閉保存（避光、防潮、防污染、防氧化等） ，是指直接與產(chǎn)品接觸的 內(nèi)包裝， 在選擇內(nèi)包裝材料時其阻隔性是關(guān)鍵， 高阻隔性包裝薄膜所采用的阻隔性樹脂主要 有 EVOH 、PA、PET、PVDC 、PC、MXD6 和聚丙烯腈共聚物，其中 PVDC 是開發(fā)較早的 阻隔性能優(yōu)異的材料，而包裝用薄膜材料結(jié)構(gòu)包括：紙塑料、塑料鍍鋁塑料、 紙鋁箔 塑料和塑料鋁箔塑料等幾種【

11、11】；2) 產(chǎn)品信息的提供：產(chǎn)品外包裝上應(yīng)明確標(biāo)識品名、批號、代碼、生產(chǎn)日期、有效期、 使用方法等基礎(chǔ)信息， 并隨附企業(yè)質(zhì)量監(jiān)管部門下發(fā)的產(chǎn)品合格證以及質(zhì)量檢驗報告等質(zhì)量 證明文件；3) 易于運輸?shù)姆雷o(hù)：確保外包裝物能夠抵御運輸過程中裝卸產(chǎn)生撞擊的沖擊，并要具備 一定的堆疊強(qiáng)度， 對于需要遠(yuǎn)途運輸?shù)牟荒苣褪芨邷氐某善窇?yīng)做好低溫保護(hù)工作 (填充保溫 材料，包裝箱內(nèi)混裝冰袋、干冰等蓄冷物) 。1.2.6 成品的檢驗細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品生產(chǎn)完畢后， 由質(zhì)量檢測部門對該批次產(chǎn)品進(jìn)行檢測， 在這一周期內(nèi)， 成品 處于待驗狀態(tài)， 儲存條件應(yīng)與合格成品一致， 應(yīng)專區(qū)存放專人管理，避免混淆和遺漏， 在收 到質(zhì)量檢

12、測部門檢測合格予以放行的通知后，轉(zhuǎn)交成品庫，移入合格品區(qū)備售。1.2.7 細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)的新工藝采用上述傳統(tǒng)的生產(chǎn)工藝 (通常稱作球磨工藝) 生產(chǎn)的產(chǎn)品均一性較好， 物化性能穩(wěn)定 以及細(xì)胞培養(yǎng)效果較好， 但是存在批量小、 研磨過程中的散熱難以控制、 噪音及粉塵污染較 大等缺點。 2005 年新開發(fā)了一種連續(xù)生產(chǎn)的針式研磨系統(tǒng)( pin mill )，集“物料混合針式 研磨研磨后混合”一體， 用于工業(yè)化生產(chǎn)干粉細(xì)胞培養(yǎng)基， 可以用來生產(chǎn)從 10kg 至 4000kg 不等批量的干粉細(xì)胞培養(yǎng)基。Pin mill 研磨系統(tǒng)是一種高速沖擊研磨系統(tǒng)，包括一個進(jìn)料口、兩個同軸帶有研磨針的 轉(zhuǎn)盤以及一個出料

13、口。 當(dāng)原料通過進(jìn)料口投入研磨器后到達(dá)轉(zhuǎn)盤中央， 在轉(zhuǎn)盤旋轉(zhuǎn)離心力的 推動下往徑向外側(cè)運動同時被相互咬合且相對旋轉(zhuǎn)運動的研磨針研細(xì)。 物料在進(jìn)入針式研磨 腔前和完成研磨離開研磨設(shè)備后都使用混合機(jī)進(jìn)行了混合， 以確保進(jìn)入研磨器和最終產(chǎn)品的 成份均勻性，其生產(chǎn)工藝流程見下圖 4-1 。與傳統(tǒng)的球磨生產(chǎn)工藝相比， pin mill 生產(chǎn)系統(tǒng)研磨的顆粒更細(xì)，批次控制范圍大且靈活(0.54000kg ),在研磨及研磨后顆粒輸送的過程中，采用氮氣控制機(jī)體的溫度，使研磨 機(jī)的溫度保持在40 C以下，并且避免了粉塵污染、交叉污染等。該系統(tǒng)機(jī)體的拆分、組裝 及清潔也較為簡單，適合 cGMP生產(chǎn)。關(guān)于使用pin

14、mill系統(tǒng)生產(chǎn)的DPM性能，如生產(chǎn)過程中的成份組成均質(zhì)性、生產(chǎn)的產(chǎn)品性能及是否適合細(xì)胞培養(yǎng)和生物制品生產(chǎn)等，有詳細(xì)的驗證研究，結(jié)果顯示，pin mill生產(chǎn)工藝生產(chǎn)的產(chǎn)品均勻分布性滿足標(biāo)準(zhǔn)，并且均勻性與成份以及批量大小無關(guān)；生產(chǎn)的產(chǎn)品 諸如溶解性、pH、滲透壓等理化性質(zhì)、細(xì)胞培養(yǎng)方面及生物制品生產(chǎn)與球磨生產(chǎn)工藝相同2細(xì)胞培養(yǎng)基的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和檢測方法2.1哺乳類動物細(xì)胞培養(yǎng)基行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)介紹國內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)基使用者一般采用經(jīng)驗法或?qū)嶒灧ㄟx擇培養(yǎng)基，但是這些經(jīng)驗或是來自于以前的傳統(tǒng)方法、或是通過簡單的細(xì)胞培養(yǎng)實驗，因其影響因素較多， 在判定的過程中，不同的使用者判定的標(biāo)準(zhǔn)也不相同， 進(jìn)而可能影響對產(chǎn)品的正

15、確選擇。 因此，采用統(tǒng)一的質(zhì)量 管理規(guī)范是控制產(chǎn)品質(zhì)量的一個基本前提，2007年10月1日國家發(fā)展和改革委員會批準(zhǔn)的哺乳類動物細(xì)胞培養(yǎng)基HG/T3935-2007 ）國家化工行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)正式實施，為國內(nèi)動物細(xì)胞培養(yǎng)基產(chǎn)品質(zhì)量及檢測 方法提供了統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)， 該標(biāo)準(zhǔn)對哺乳類動物細(xì)胞培養(yǎng)基的檢測項目和方法做出了明確的規(guī)定。2.2 細(xì)胞培養(yǎng)基的檢測方法2.2.1 澄清度檢查法該方法依據(jù)中國藥典 2010 版二部附錄 IX B 澄清度檢查法制定。澄清度是檢查藥品溶 液的渾濁程度， 即濁度， 藥品溶液中如存在細(xì)微顆粒，當(dāng)直射光通過溶液時，可產(chǎn)生光散射 和光吸收的現(xiàn)象， 致使溶液微顯渾濁， 所以澄清度可在一定程

16、度上反映藥品的質(zhì)量和生產(chǎn)工 藝水平。 水是培養(yǎng)基的溶劑， 細(xì)胞培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成份只有完全溶解于水才能被細(xì)胞吸收攝 取，細(xì)胞才能生長增殖， 因此培養(yǎng)基是否溶解以及培養(yǎng)液是否透明澄清直接影響培養(yǎng)基使用。 通過對水溶解后的培養(yǎng)基的澄清度檢查， 判斷細(xì)胞培養(yǎng)基的溶解性。 此法是用規(guī)定級號的濁 度標(biāo)準(zhǔn)溶液與供試品溶液比較，以判定細(xì)胞培養(yǎng)液的澄清度或其渾濁程度。2.2.2 pH 值測定法各種細(xì)胞的正常功能及一切生物化學(xué)反應(yīng)， 都是在適當(dāng)和穩(wěn)定的酸堿環(huán)境下進(jìn)行的， 因 此細(xì)胞培養(yǎng)基的 pH 值是細(xì)胞生長的重要參數(shù)， pH 值偏低或偏高都會影響細(xì)胞生長。該法 依據(jù)中國藥典2010年版二部附錄W H pH值的測

17、定法進(jìn)行。由于各酸度計的精度與操作方 法有所不同，應(yīng)嚴(yán)格按各儀器說明書與注意事項進(jìn)行操作，并在使用之前注意校正。在工業(yè)化使用時，由于傳統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)基中含有 pH 指示劑如酚紅等，通常依據(jù)“眼睛” 觀察培養(yǎng)液顏色來判定 pH ，或是簡單的使用 pH 試紙測定，但是上述方法存在較大的主觀 因素， 影響正確判定，并且在配制的過程中， 不同區(qū)域還可能存在一定的水質(zhì)區(qū)別等， 采用 pH 儀器檢測可以消除人的主觀因素，準(zhǔn)確性高。此外，在檢測過程中，添加碳酸氫鈉后的 培養(yǎng)基在測定的過程中，暴露在空氣中的時間也會對所測pH 的準(zhǔn)確性有一定的影響。2.2.3 干燥減量測定方法細(xì)胞培養(yǎng)基具有吸濕性， 在空氣中放置

18、時水份會很快升高， 干燥減量表示產(chǎn)品中的含濕 量。細(xì)胞培養(yǎng)基是有菌制劑， 其豐富的營養(yǎng)成份有利于微生物生長， 保持培養(yǎng)基中的低水份 含量可以防止微生物的繁殖。 檢測細(xì)胞培養(yǎng)基中水份的含量采用的方法是干燥減量法。 該測 定方法是依據(jù)中國藥典 2010年版二部附錄忸 L干燥失重測定法制定，具體是指產(chǎn)品在規(guī) 定條件下干燥后所減失重量的百分率。 減失的重量主要是水分、 結(jié)晶水及其他揮發(fā)性物質(zhì)等。 由減失的重量和取樣量計算供試品的干燥失重。2.2.4 滲透壓通常動物細(xì)胞必須生活在等滲環(huán)境中，借助K +、Na +維持滲透平衡。雖然大多數(shù)細(xì)胞對滲透壓具有有一定的耐受性， 但是培養(yǎng)液滲透壓過高容易使細(xì)胞脫水萎

19、縮， 培養(yǎng)液滲透 壓過低容易使細(xì)胞膨脹破裂， 控制培養(yǎng)基的滲透壓范圍對于細(xì)胞培養(yǎng)具有重要的作用。檢測通常采用冰點滲透壓儀進(jìn)行， 當(dāng)供試品溶液的毫滲透壓摩爾濃度太大或大于儀器的測定范圍 時，用適宜的溶劑稀釋至可測定的毫滲透壓摩爾濃度范圍。2.2.5 細(xì)菌內(nèi)毒素檢測方法細(xì)菌內(nèi)毒素是許多病原性細(xì)菌所產(chǎn)生的毒素。 細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌內(nèi)毒素過高， 對生物制 品的質(zhì)量如純度、引起副反應(yīng)等方面有影響，而且會降低生物制品的產(chǎn)率。細(xì)菌內(nèi)毒素檢查法通常利用鱟試劑來檢測或量化由革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的細(xì)菌內(nèi)毒素，以判斷供試品中細(xì)菌內(nèi)毒素的限量是否符合規(guī)定的一種方法。 其檢查包括凝膠法和光度測定法， 后者包括濁度法和顯色基質(zhì)

20、法。 供試品檢測時， 可使用其中任何一種方法進(jìn)行試驗。 通常當(dāng) 測的結(jié)果有爭議時，以凝膠法結(jié)果為準(zhǔn)。2.2.6 微生物限度細(xì)胞培養(yǎng)基不是無菌產(chǎn)品， 其中的微生物在一定條件下會吸收培養(yǎng)基中的營養(yǎng)物質(zhì)滋生繁殖， 導(dǎo)致培養(yǎng)基變質(zhì)失效。 控制細(xì)胞培養(yǎng)基中細(xì)菌和霉菌， 是延長培養(yǎng)基有效期的方法之 一，也是對生產(chǎn)企業(yè)的產(chǎn)品、原料、輔料、設(shè)備器具、工藝流程、生產(chǎn)環(huán)境和操作者的衛(wèi)生 狀況進(jìn)行衛(wèi)生學(xué)評價的綜合依據(jù)之一，對其的檢測是非常必要的。檢測方法依據(jù)中國藥典 2010年版附錄幻J微生物限度檢查法進(jìn)行，檢查項目為細(xì)菌數(shù)、霉菌數(shù)。2.2.7 細(xì)胞生長試驗細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)時， 失去了機(jī)體的調(diào)節(jié)和控制作用， 因此

21、， 細(xì)胞培養(yǎng)液除滿足細(xì)胞 的營養(yǎng)要求外， 還必須使其生存環(huán)境接近活體的環(huán)境。 其中培養(yǎng)液及外環(huán)境的培養(yǎng)條件如溫 度、滲透壓、 酸堿度等均能影響細(xì)胞的生長。 細(xì)胞培養(yǎng)基的功能就是滿足細(xì)胞體外生長增殖 需求， 因此細(xì)胞培養(yǎng)效果的檢驗是產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)劣的一個直觀表述，是必檢項目， 這也是一個產(chǎn)品性能特性表述的要求。細(xì)胞培養(yǎng)檢測方法是：細(xì)胞在 37 C恒溫條件下，在含體積分?jǐn)?shù)為 3%10 %小牛血清 的細(xì)胞培養(yǎng)液中生長 72h ，觀察細(xì)胞形態(tài)并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)；細(xì)胞生長 72h 后，更換不含小 牛血清的細(xì)胞培養(yǎng)液， 繼續(xù)培養(yǎng) 48h ，觀察細(xì)胞形態(tài)并進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)。 培養(yǎng)過程中加血清培 養(yǎng)主要檢測培養(yǎng)基的培養(yǎng)質(zhì)

22、量，不加血清培養(yǎng)主要檢測培養(yǎng)基的有無毒害物質(zhì)。細(xì)胞生長實驗不但在使用一個新的產(chǎn)品時是必須進(jìn)行的檢測項目，在更換不同批次時， 為檢測是否有批間差也必須進(jìn)行；此外， 即使是同一個批次， 分次購買時， 或是存放擱置較 長時間再次使用時， 也需進(jìn)行該項目檢測， 以防止培養(yǎng)基在貯存、 運輸過程中可能發(fā)生的質(zhì) 量變化。該行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的檢測項目為生物制品廠家控制原材料質(zhì)量提供一定的依據(jù)， 但是隨著生 物制品安全性要求的提高， 其所檢內(nèi)容還有待完善， 如添加一些諸如動物蛋白、 抗生素等的 檢測，為生物制品廠家控制原材料的安全性提供更高的保障。2.3 細(xì)胞培養(yǎng)基安全技術(shù)說明（ MSDS ）MSDS 是化學(xué)品安全技術(shù)說明書，是化學(xué)品生產(chǎn)或銷售企業(yè)按法律要求向客戶提供的 有關(guān)化學(xué)品特征的一份綜合性法律文件。 化學(xué)品安全說明書作為傳遞產(chǎn)品安全信息的最基礎(chǔ) 的技術(shù)文件，其主要作用體現(xiàn)在：1) 提供有關(guān)化學(xué)品的危害信息，保護(hù)化學(xué)產(chǎn)品使用者2) 確保安全操作，為制訂危險化學(xué)品安全操作規(guī)程提供技術(shù)信息3) 提供有助于緊急救助和事故應(yīng)急處理的技術(shù)信息4) 指導(dǎo)化學(xué)