血防作業(yè)指導書

1、沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院分 發(fā) 號：受控狀態(tài)：受控非受控作 業(yè) 指 導 書 （第一版） 依據(jù)ws261-2006、實驗室資質(zhì)認定評審準則 及實驗室建設指導手冊編制2014年08月01日發(fā)布 2014年09月01日實施批準: 審核：編寫：沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作 業(yè) 指 導 書依據(jù)ws261-2006、實驗室資質(zhì)認定評審準則 及實驗室建設指導手冊編制版本號：第一版實施日期：二一四年九月一日批準人（技術(shù)負責人）： 批準日期：二一四年八月一日編 號： 持有者簽字： 沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QC2014前 言第一版 第0次修訂第1頁 共1頁實施日期：2014年09月01日診斷

2、在血吸蟲病的防治工作中發(fā)揮重要作用，可為防治活動的計劃、實施和效果評價等各個環(huán)節(jié)提供必要的信息和科學依據(jù)，具體可用于化療對象的篩查、調(diào)查、流行病學調(diào)查、防治效果考核及監(jiān)測，為加強本室血吸蟲病診斷工作的監(jiān)測及管理，促進血吸蟲病防治工作質(zhì)量的提高，我們堅持科學、合理、實用、節(jié)約的原則，在保證工作質(zhì)量和檢測水平同時，體現(xiàn)標準化、智能化、人性化的特點。為了規(guī)范儀器設備的操作，方便檢測技術(shù)人員的工作，我們對儀器設備的使用編制了儀器操作類的作業(yè)指導書，同時我所在申請血吸蟲病診斷網(wǎng)絡檢驗科建設中一直堅持使用血吸蟲病防治手冊第三版和血吸蟲病預防控制工作規(guī)范標準檢驗方法，組織檢驗科撰寫了相應的方法類的作業(yè)指導書

3、，在檢驗科程序制度方面，同樣編寫了適合各項檢測操作的通用類作業(yè)指導書。由于時間倉促，水平有限，難免有一些缺點錯誤，望廣大同仁在使用過程中批評指正，以便再版時修正。 作業(yè)指導書編寫組 二一四年八月一日沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QC2014修訂頁第一版 第0次修訂第1頁 共1頁實施日期：2014年09月01日 序號對應的章、節(jié)、條號修 訂 內(nèi) 容批準人批準日期沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QC2014目 錄第一版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日SSXF/QCYQ0012014 生物顯微鏡操作規(guī)程-1SSXF/QCYQ0022

4、014 恒溫水浴箱操作規(guī)程-6SSXF/QCYQ0032014 臺式低速自動平衡離心機操作規(guī)程- 9SSXF/QCYQ0042014 微量振蕩器操作規(guī)程-10SSXF/QCYQ0052014 移液器操作規(guī)程-13SSXF/QCFF0012014 間接血凝試驗（IHA）-15SSXF/QCFF0022014 膠體金滲濾法（DIGFA）-16SSXF/QCFF0032014 尼龍絹集卵孵化法-19SSXF/QCFF0042014 改良加藤厚涂片法（Kato-Katz）-21SSXF/QCFF0052014 釘螺解剖方法-23SSXF/QCFF0062014 檢驗科消毒液配制方法-24SSXF/QC

5、QT0012014 檢驗科安全管理制度-26SSXF/QCQT0022014 檢驗科工作制度-27SSXF/QCQT0032014 檢驗科工作人員工作交接制度-28SSXF/QCQT0042014 檢驗原始記錄填寫及數(shù)據(jù)更改制度-30SSXF/QCQT0052014 職業(yè)暴露預防處理-34沙市區(qū)血吸蟲病專科醫(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0012014生物顯微鏡操作規(guī)程第一版 第0次修訂第1頁 共3頁實施日期：2014年09月01日1.目的建立生物顯微鏡的統(tǒng)一操作規(guī)程，保證檢測結(jié)果準確可靠。2.適用范圍用于組織學、生物學、細菌學、病理學、藥物化學等研究領(lǐng)域及大專院校的教學工作和醫(yī)學界

6、的臨床分析與實驗等。3.職責未授權(quán)人員不得操作該儀器，授權(quán)操作人均要執(zhí)行本規(guī)程，質(zhì)量監(jiān)督員實施日常監(jiān)督，檢驗科定期或不定期進行檢查。4.儀器技術(shù)指標4.1儀器名稱：生物顯微鏡4.2型號：XSP-2C4.3工作原理將兩個凸透鏡系統(tǒng)適當?shù)亟M合在儀器上對標本進行放大，經(jīng)物鏡形成的倒立實像，經(jīng)目鏡放大成虛像。4.4操作環(huán)境溫度：041濕度：最大濕度85，不結(jié)露高度：海拔2000m以下大氣壓力：86kpa106 kpa污染度：2級過壓類別：類5.儀器操作步驟5.1取鏡：左手托住鏡座，右手握住鏡臂 放置：距離桌沿不少于17cm。 5.2 物鏡調(diào)至最低倍，載物臺調(diào)至最高的位置。5.3 兩眼張開，左眼對準目鏡

7、，右眼看桌面，調(diào)整反光鏡和光圈以獲得最適當?shù)墓饩€5.4 將要觀察標本放在載物臺上，并用玻片夾固定。5.5向外轉(zhuǎn)動粗準焦螺旋，使載物臺下降至看到清晰的影像，可調(diào)節(jié)細準焦螺旋，使物象更清晰如果需要使用高倍鏡觀察，轉(zhuǎn)動裝換器，換高倍鏡，調(diào)整光圈或反光鏡以取得適當?shù)墓饩€，此時不能再調(diào)粗準焦螺旋，只能調(diào)節(jié)細準焦觀察的物體在視野右下角，將玻片向右下沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0012014生物顯微鏡操作規(guī)程第一版 第0次修訂 第2頁 共3頁實施日期：2014年09月01日角移動螺旋，顯微鏡下的影像:上下左右相反，如：要觀察的物體在視野右下角，將玻片向右下角移動。5.6 觀察

8、完將物鏡轉(zhuǎn)換，不要對著通光孔，顯微鏡套上塑膠套放好。6.授權(quán)操作人郭賢莎7. 保養(yǎng)與年度維護方法7.1保養(yǎng)與年度維護校準頻率：7.1.1每次使用后對儀器進行常規(guī)清潔保養(yǎng)7.1.2每年對儀器進行一次全面保養(yǎng)7.2維護與保養(yǎng)的方法：7.2.1清潔各種玻璃部件是，有紗布輕輕擦拭。除掉指紋或油漬，要用紗布沾少量的混合液（乙醚70和酒精30混合）擦拭。7.2.2不要使用有機溶劑擦拭顯微鏡的非光學部件。如果要清潔這些部件，請用無毛柔軟的紗布沾少量中性清洗劑擦拭。7.2.3不要拆開顯微鏡的任何部分，這會導致性能降低或損壞顯微鏡。7.2.4貯存顯微鏡時，請用防塵罩蓋好，并存放在干燥地地方，放入干燥劑，以免鏡頭

9、發(fā)霉。7.2.5顯微鏡應放在無震動的地方。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0012014生物顯微鏡操作規(guī)程第一版 第0次修訂 第3頁 共3頁實施日期：2014年09月01日沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0022014恒溫水浴箱操作規(guī)程第一版 第0次修訂第1頁 共3頁實施日期：2014年09月01日1. 目的 建立恒溫水浴箱的統(tǒng)一操作規(guī)程，保證檢測結(jié)果準確可靠。2. 適用范圍用于醫(yī)療衛(wèi)生、醫(yī)學院檢查化驗病理血清和工礦企業(yè)及科研單位作精密恒溫和輔助加熱之用3. 職責未授權(quán)人員不得操作該儀器，授權(quán)操作人均要執(zhí)行本規(guī)程，質(zhì)量監(jiān)督員實施日常監(jiān)督，

10、檢驗科定期或不定期進行檢查。4. 儀器技術(shù)指標4.1 儀器名稱 電子恒溫水浴箱4.2 型號 WMK26型4.3 工作原理 傳感器將水槽內(nèi)水的溫度轉(zhuǎn)換為電阻值，經(jīng)過集成放大器的放大、比較后，輸出控制信號，有效地控制電加熱管的平均加熱功率，使水槽內(nèi)的水保持恒溫。4.4技術(shù)性能4.4.1 工作環(huán)境：常溫常壓條件下正常工作。4.4.2 技術(shù)指標：溫度調(diào)節(jié)范圍：37654.4.3 溫度波動：±14.4.4 溫度均勻性：±15. 儀器操作步驟5.1 接通電源，打開電源開關(guān)，儀表上排顯示工作室溫度，下排顯示設定溫度。按動SET鍵，使上排顯示50，按上下設定所需溫度，再按SET保存設定值5

11、.2 打開電源開關(guān)，電源指示燈亮表示電源接通儀表自整定功能：按下鍵5秒自整定結(jié)束后AT燈滅，得出一組能克服超溫德PID參數(shù)。在自整定過程中按下鍵5秒后AT燈滅，自整定停止，儀表按原來的PID參數(shù)進行控制。5.3 設定定時功能：按SET鍵10秒，出現(xiàn)第二菜單。下排設定時間分鐘，測量溫度達到設定的時間后，下排顯示熄滅輸出功能停止，如果要恢復設定控制時間應先關(guān)機再通電開機。設定為0時儀表取消定時功能，連續(xù)輸出。6. 授權(quán)操作人 郭賢莎7. 保養(yǎng)與年度維護校準要求7.1 保養(yǎng)與年度維護校準頻率：7.1.1 每次使用后對儀器進行常規(guī)清潔保養(yǎng)沙市區(qū)血吸蟲病專科醫(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ00

12、22014恒溫水浴箱操作規(guī)程第一版 第0次修訂第2頁 共3頁實施日期：2014年09月01日7.1.2 每半年對儀器進行一次全面保養(yǎng)7.2 保養(yǎng)與注意事項7.2.1 本儀器外殼必須可靠接地，以保證安全使用7.2.2 儀器應放置在具有良好通風條件的室內(nèi)，室內(nèi)相對濕度不大于85%，其周圍不要放置易燃易爆及腐蝕性物品7.2.3 注水不可將水流入或溢入電器控制箱內(nèi)以防發(fā)生危險，不用時及時把水放掉，并將箱內(nèi)擦干凈，保持清潔。7.2.4 控制系統(tǒng)沒有專業(yè)設備和技術(shù)人員不能隨意調(diào)動及拆卸機內(nèi)元器件，以免影響控溫精度，縮短使用壽命。7.2.5 要經(jīng)常檢查工作室內(nèi)的水位，不能缺水，更不能無水干燒，以免損壞加熱管

13、8. 期間核查8.1 期間核查頻次：兩次檢定的中期8.2 期間核查方法8.2.1 接通電源，加熱升溫到37攝氏度；8.2.2 取20支管壁均勻的試管，分別加入2毫升液體石蠟；沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0022014恒溫水浴箱操作規(guī)程第一版 第0次修訂第3頁 共3頁實施日期：2014年09月01日8.2.3 把這些試管隨機插在水浴中的試管架上，加熱20分鐘；8.2.4 用國家計量部門檢定合格的溫度計測量并記錄每管溫度。方法要求精度為37±0.5。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0032014臺式低速自動平衡離心機操作規(guī)程第一

14、版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1. 目的 建立離心機的統(tǒng)一操作規(guī)程，保證檢測結(jié)果準確可靠。2. 適用范圍用于臨床醫(yī)學、生物化學、免疫學等領(lǐng)域，是檢驗科中用于離心沉淀的常規(guī)儀器。3. 職責未授權(quán)人員不得操作該儀器，授權(quán)操作人均要執(zhí)行本規(guī)程，質(zhì)量監(jiān)督員實施日常監(jiān)督，檢驗科定期或不定期進行檢查。4. 儀器技術(shù)指標4.1 儀器名稱 TDZ4-WS臺式低速自動平衡離心機4.2 型號 TDZ4-WS4.3 工作原理采用直流無刷電機驅(qū)動，特殊減振器減振，自動平衡效果好，轉(zhuǎn)子采用高強度塑膠壓成型，轉(zhuǎn)子裝卸方便。智能控制，轉(zhuǎn)速及時間控制精確。4.4 性能參數(shù)4.4.1 最高轉(zhuǎn)速40

15、00r/min 4.4.2 最大離心加速度2380*g4.4.3 定時范圍099 min5. 儀器操作步驟5.1 主機右上角推桿向里推壓，打開門蓋，將加樣區(qū)的離心管對稱置于轉(zhuǎn)子中。5.2 接通電源開關(guān)，預置轉(zhuǎn)速和工作時間。5.3 按下啟動鍵，開始工作。5.4 時間至零或按停止鍵，自動停機，蜂鳴器叫警。5.5 按停止鍵進行復位，叫警停，各窗口顯示上次設定值。5.6 如不需以改變設定值，按啟動鍵即可，需改變時重新操作。5.7 不使用時，關(guān)閉電源。6. 授權(quán)操作人 郭賢莎7. 安裝要求與注意事項沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0032014臺式低速自動平衡離心機操作規(guī)程第

16、一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日7.1 安裝要求7.1.1 臺面堅實、平整，防止儀器在工作時產(chǎn)生振動或儀器移動。7.1.2 電源具有獨立地線，嚴禁零線與地線共用，防止電擊傷人。7.1.3 儀器四周應無腐蝕氣體及電磁場干擾，防止儀器外表保護層過早失效和對電氣元件的干擾。7.1.4 儀器放置水平，確保四個橡膠機腳均勻受力。7.2 注意事項7.2.1 離心機在運轉(zhuǎn)時不得移動，也不要打開門蓋；7.2.2 若離心機有玻璃試管破裂，會引起較大震動，應立即停機更換試管；7.2.3 若發(fā)生報警聲，請關(guān)閉電源開關(guān)，重新操作；7.2.4 若電源亮，檢查保險是否燒壞；7.2.5 出現(xiàn)異

17、常情況，不得擅自拆機維修，必須與廠家聯(lián)系。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0042014微量振蕩器操作規(guī)程第一版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1.目的建立振蕩器統(tǒng)一的操作規(guī)程，保證檢測結(jié)果準確可靠。2.適用范圍臨床分析作各種血凝試驗，被動血球凝集試驗，補體結(jié)合試驗，乳膠凝集試驗等不可缺少的儀器，本儀器可供科研單位衛(wèi)生部門及生化檢驗科作微量樣品、生物細菌、病毒免疫、臨床檢驗及常規(guī)化驗分析之用。3.職責未授權(quán)人員不得操作該儀器，授權(quán)操作人均要執(zhí)行本規(guī)程，質(zhì)量監(jiān)督員實施日常監(jiān)督，檢驗科定期或不定期進行檢查。4.儀器技術(shù)指標4.1儀器名稱：微量振

18、蕩器4.2型號：WZ-2A型4.3. 微量振蕩器的特點造型美觀、體積小、操作簡單、敏感度高、用藥量及用血量少、檢測速度快5. 儀器操作步驟5.1 插上電源插頭5.2 將需振蕩的藥品放入儀器相應位置，打開電源5.3 根據(jù)實驗要求調(diào)節(jié)所需振蕩速度5.4 調(diào)節(jié)所需振蕩時間或常開(ON)即可。本儀器操作簡單，使用方便，振蕩效果明顯。6. 授權(quán)操作人 郭賢莎7. 注意事項7.1 為了確保人身安，使用時必須妥善接地；沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0042014微量振蕩器操作規(guī)程第一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日7.2 初次使用儀器前請先仔細閱讀說

19、明書7.3 振蕩器的適宜溫度為040,相對濕度為80%以下7.4 長時間不使用應切斷電源 - 35 -沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0052014移液器操作規(guī)程第一版 第0次修訂第1頁 共3頁實施日期：2014年09月01日1. 目的為了規(guī)范移液器操作程序，維護儀器正常運行，特制定本規(guī)定2.適用范圍適用于本所免疫學測檢驗科移液器操作程序。3. 職責檢驗人員應嚴格執(zhí)行本規(guī)定，質(zhì)量監(jiān)督員對執(zhí)行情況進行監(jiān)督。4. 儀器技術(shù)指標4.1 儀器名稱：移液器4.2 規(guī)格：0.5-50ul，10-100ul，5. 儀器操作步驟5.1 吸頭安裝：正確的安裝方法叫旋轉(zhuǎn)安裝法，具體的做

20、法是，把移液器頂端插入吸頭，在輕輕用力下壓的同時，把手中的移液器按逆時針方向旋轉(zhuǎn)180度。切記用力不能過猛，更不能采取剁吸頭的方法來進行安裝，因為那樣做會對您手中的移液器造成不必要的損傷。 5.2 容量設定：正確的容量設定分為兩個步驟，一是粗調(diào)，即通過排放按鈕將容量值迅速調(diào)整至接近自己的預想值；二是細調(diào)，當容量值接近自己的預想值以后，應將移液器橫置，水平放至自己的眼前，通過調(diào)節(jié)輪慢慢地將容量值調(diào)至預想值，從而避免視覺誤差所造成的影響。一個需要特別注意的地方是，當我們從大值調(diào)整到小值時，剛好就行；但從小值調(diào)整到大值時，就需要調(diào)超三分之一圈后再返回，這是因為計數(shù)器里面有一定的空隙，需要彌

21、補。  5.3 預洗吸頭：在安裝了新的吸頭或增大了容量值以后，應該把需要轉(zhuǎn)移的液體吸取、排放兩到三次，這樣做是為了讓吸頭內(nèi)壁形成一道同質(zhì)液膜，確保移液工作的精度和準度，使整個移液過程具有極高的重現(xiàn)性。其次，在吸取有機溶劑或高揮發(fā)液體時，揮發(fā)性氣體會在移液器室內(nèi)形成負壓，從而產(chǎn)生漏液的情況，這時就需要我們預洗四到六次，讓移液器室內(nèi)的氣體達到飽和，負壓就會自動消失。 5.4 吸液：先將移液器排放按鈕按至第一停點，再將吸頭垂直浸入液面，浸入的深度為：P2、P10小于或等于1毫米，P20、P100、P200小于或等于2毫米，P1000小于或等于3毫米，P5mL、P10mL小于或等于

22、4毫米（浸入過深的話，液壓會對吸液的精確度產(chǎn)生一定的影響，當然，具體的浸入深度還應根據(jù)盛放液體的容器大小靈活掌握），平穩(wěn)松開按鈕，切記不能沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0052014移液器操作規(guī)程第一版 第0次修訂第2頁 共3頁實施日期：2014年09月01日過快。 5.5 放液：放液時，吸頭緊貼容器壁，先將排放按鈕按至第一停點，略作停頓以后，再按至第二停點，這樣做可以確保吸頭內(nèi)無殘留液體5.6 卸去吸頭：卸掉的吸頭放入污物盒內(nèi)，按廢棄物的規(guī)定進行消毒處理。 6. 授權(quán)操作人 郭賢莎7. 保養(yǎng)與年度維護校準要求7.1 保養(yǎng)與年度維護校準頻率：每半年維護一

23、次7.2 保養(yǎng)與年度維護校準方法：移液器標定方法包括吸取有色溶液進行光譜分析、吸取蒸餾水稱量校準、吸取放射性同位素計數(shù)校準，以及使用配套校準盒等。范例：用蒸餾水稱量標定移液器方法（參考芬蘭Labsystems移液器標定方案）在一室溫為22的小型工作室（無風）中，在萬分之一級別天平上放置一個小三角燒瓶，用待標定的移液器吸取蒸餾水（隔夜存放）加入小三角燒瓶內(nèi)局部，每次稱重后計量，去應重后再加蒸餾水，連續(xù)加蒸餾水10次。加蒸餾水的量根據(jù)待標定的移液器不同規(guī)格而不同，見下表。移液器標定合格后，在移液器上貼上合格標簽，標明日期。在移液器標定記錄中寫。8. 期間核查8.1 期間核查頻次：兩次檢定的中期8.

24、2 期間核查方法8.2.1 準備檢查前記錄當時室溫；8.2.2 接通分析天平電源，預熱15分鐘；8.2.3 在天平上放置一干凈小燒杯，扣除空重；8.2.4 用被檢加樣器量取一定體積去離子水，加入燒杯中，讀取并記錄重量；8.2.5 扣除燒杯空重，重復稱量20次并記錄結(jié)果。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCYQ0052014移液器操作規(guī)程第一版 第0次修訂第3頁 共3頁實施日期：2014年09月01日附：不同室溫下水的密度溫度(ºC)水的密度(g/ml)溫度(ºC)水的密度(g/ml)150.99913230.99756160.99897240.99732

25、170.99880250.99707180.99862260.99681190.99843270.99654200.99823280.99626210.99802290.99597220.99780300.99567沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0012014間接血凝試驗 （IHA）第一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1適用范圍1.1 可作為血吸蟲病的輔助診斷。對無血吸蟲病病史和距末次治療3年以上的血吸蟲病把你個人，IHA1：10時可予以治療。1.2 在血吸蟲病流行區(qū)，該法可作為過篩或綜合查病的方法。確定化療靶人群。1.3 可用該法進行

26、血清流行病學檢查。2原理：將可溶性血吸蟲卵抗原（SEA）吸附于紅細胞載體上，使成為致敏紅細胞。這種紅細胞與病人血清中的抗體相遇是，在適宜條件下，由于紅細胞表面吸附的抗原和特異性抗體相結(jié)合，紅細胞也被動地凝結(jié)起來，肉眼可見，稱陽性反應。3試劑、材料：生理鹽水、V型微量血凝反應板 、凍干血球、微量加樣器4樣品：新鮮無污染血清5檢測方法：5.1 啟用安瓿，每支以1ml蒸餾水稀釋混勻備用。5.2 用微量加樣器加100ul生理鹽水于V型微量血凝反應板第一排第二孔內(nèi)，第三孔空白，第四孔加25ul。5.3 第一孔內(nèi)儲存待檢血清，并從中吸取血清25ul加入第二孔內(nèi)，充分混勻后，分別吸出25ul加入第三孔和第四

27、孔，使第三孔和第四孔血清稀釋度為1：5和1：10.5.4 用微量加樣器吸取致敏紅細胞懸液，于第三孔和第四孔內(nèi)各加1滴，立即旋轉(zhuǎn)震搖2min，37下靜置半小時后觀察結(jié)果。5.5 每次試驗均應有陽性血清作陽性對照，陰性血清（生理鹽水）作陰性對照。6結(jié)果判斷6.1 本實驗陽性對照出現(xiàn)凝集反應，陰性對照不出現(xiàn)凝集反應，結(jié)果方可成立。6.2 陰性反應為紅細胞全部沉入孔底，肉眼見一邊緣光滑，致密的小圓點。6.3 陽性反應： + 紅細胞形成薄層凝集，邊緣呈現(xiàn)不規(guī)則的皺褶。 + 紅細胞形成薄層凝集，充滿整個孔底。 + 紅細胞形成薄層凝集，面積較“+”者小。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/Q

28、CFF0012014間接血凝試驗 （IHA）第一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日 + 紅細胞大部分沉積于孔底，形成一圓點，周圍有少量凝集的紅細胞，肉眼見周邊模糊（或中間出現(xiàn)較為明顯的空白點）。6.4 反應標準：以血清1:10稀釋，出現(xiàn)凝集反應判為陽性。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0022014膠體金滲濾法 （DIGFA）第一版 第0次修訂第1頁 共1頁實施日期：2014年09月01日1 適用范圍1.1 可作為血吸蟲病的輔助診斷。對無血吸蟲病病史和距末次治療3年以上的血吸蟲病把你個人，IHA1：10時可予以治療。1.2 在血吸蟲病流行區(qū)

29、，該法可作為過篩或綜合查病的方法。確定化療靶人群。2 原理：預先包被血吸蟲抗原空白反應板，可特異性結(jié)合人血清中相應的抗體，形成抗原抗體結(jié)合物。然后，紅色膠體金顆粒標記的第二抗體歲形成的金標探針，與復合物中的抗體結(jié)合，滯留在反應板上，形成肉眼可見的紅色斑點。3 試劑：（1）預處理空白反應板（2）洗滌液（3）金標抗體液4 器材：50-100ul移液器5 樣品：新鮮無污染血清6 檢測方法：6.1 將試劑盒去取出，置于室溫下回暖，編號待用。6.2 在反應孔中間加入2滴洗滌液，待液體完全滲透。6.3 在反應孔正中央加入50ul新鮮待檢血清，待血清完全滲透。6.4 加入2滴洗滌液，待液體完全滲透。6.5

30、加入2滴金標抗體液，待液體完全滲透。6.6 加入2滴洗滌液，待液體完全滲透，觀察結(jié)果。7. 結(jié)果判斷7.1 檢測點和質(zhì)控點都出現(xiàn)紅色，即為陽性反應。7.2 質(zhì)控點出現(xiàn)紅色帶，檢測點無顯色為陰性反應7.3 檢測點和質(zhì)控點都未出現(xiàn)紅色表示結(jié)果無效。8. 注意事項8.1 檢測血清必須新鮮，否則會影響檢測結(jié)果，陳舊血清應常規(guī)離心5分鐘，取其清亮透明。8.2 結(jié)果判定，以即時觀察為準，若長期保存，將反應板正面朝下放置即可。8.3 反應板開封后應盡快使用，未用的要立即放入自封袋中密閉冷藏。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0032014尼龍絹集卵孵化法第一版 第0次修訂第1頁 共

31、3頁實施日期：2014年09月01日1. 器材準備4060目/英寸銅絲篩、260目/英寸尼龍絹袋、250ml三角燒杯、搪瓷杯、竹筷、尼龍絹袋支架、淋水用橡皮管、水桶、明礬、漂白粉等。2. 操作步驟2.1 取受檢者糞便約30g，先置于4060目/英寸的銅絲篩中，銅絲篩置于下口夾有鐵夾的尼龍絹(260目/英寸)袋口上，淋水調(diào)漿，使糞液直接濾入尼龍絹袋中，然后移去銅絲篩，繼續(xù)淋水沖洗袋內(nèi)糞渣，并用竹筷在袋外輕輕刮動助濾，直到濾出液變清。取下夾于袋底下口的鐵夾，將袋內(nèi)沉渣淋洗入三角燒瓶中。2.2將盛有糞便沉渣的三角燒瓶加去氯水至離瓶口1cm處，放入孵化室(箱)或在室溫下孵化，最適宜的孵化溫度

32、為2226。2.3毛蚴觀察：溫度高時毛蚴孵出早；溫度低時毛蚴孵出遲。氣溫超出30時，第一次觀察可在0.51h后進行，陰性者可在4h后觀察第2次，8h后觀察第3次，3次均為陰性者，判作陰性結(jié)果；氣溫在2630時，可在孵化后4h開始觀察，陰性者可在8h及12h后，再各觀察1次；氣溫在2025時，則可在8h后觀察第1次，12h后觀察第2次；如利用自然氣溫孵化，一晝夜之間的氣溫懸殊，可在操作后的次晨再觀察1次；氣溫在20時，則在孵化后12h和24h后，各觀察1次。一般室溫在20上下時，可利用自然氣溫孵化，無須加溫，觀察時要注意毛蚴與水中原生動物的區(qū)別，如有懷疑，需有2位專業(yè)人士共同確認。3. 質(zhì)量控制

33、3.1標本要求3.1.1村本盒：切勿用包過農(nóng)藥、化肥或其他化學品的紙張包糞便。3.1.2留取標本：采集的糞樣必須新鮮，每個糞樣在30g以上，夏季不宜超過l2h，冬季不宜超過24h，糞量不足30g的應退回再送。3.1.3 標本保存和運輸：注意防高溫、干燥和暴曬，糞便外層蟲卵多于內(nèi)層，因黏附易丟失蟲卵。3.1.4取才的部位：糞便中蟲卵的分布以外層多于內(nèi)層，頭段多于尾段。3.1.5被檢的糞量：3050克糞卵（100克含10個卵）檢出率為100，20克檢出率為80，10克檢出率為40。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0032014尼龍絹集卵孵化法第一版 第0次修訂第2頁 共

34、3頁實施日期：2014年09月01日3.2孵化用水3.2.1自來水：一般要放缸內(nèi)過夜，讓其自然脫氯或在水中加入小量硫代硫酸鈉（每50kg水中，加硫代硫酸鈉0.20.4g）除去余氯，0.5h后使用。3.2.2河水或井水：可將水加熱至60或經(jīng)過濾，經(jīng)除去水蟲。也可用漂白粉殺蟲，（每50kg水中加含氯石灰0.35 g或次氯酸鈣0.17 g）混勻揭開缸蓋，讓氯自然逸散，夏季6h,氣溫低時經(jīng)24h，余氯全部逸去。3.2.3孵化用水適宜酸堿度：PH7.27.6,即弱堿性。3.3適宜溫度：5左右是適宜的孵化溫度，室溫低于20以下或更低時，必須加溫。4. 方法學評價4.1優(yōu)點4.1.1毛蚴計數(shù)高。4.1.2可

35、縮短操作時間、節(jié)約用水、減輕勞動強度。4.1.3由于不需換水，所經(jīng)23min即可入瓶孵化。4.1.4器材輕巧，攜帶方便。4.1.5在調(diào)漿、灌瓶實現(xiàn)管道化和形成操作流水線的基礎(chǔ)上，還可進一步提高檢出率或提高工效。4.2缺點4.2.1工作量大、操作繁瑣。4.2.2觀察結(jié)果的流程時間較長。4.2.3在現(xiàn)場受溫度、水質(zhì)或操作者技術(shù)方面的影響，具有一定的局限性。5. 注意事項5.1清洗工作5.1.1一切用具每次用后都必須洗刷3次以上，盆中洗刷用水要經(jīng)常調(diào)換5.1.2用6080 熱水浸泡殺卵5.1.3尼龍絹袋每次使用后，需以清水沖洗和將尼龍絹袋正反面多次反復洗刷，經(jīng)防尼龍絹孔粘有蟲卵。5.1.4用80 熱

36、水浸泡23min，經(jīng)達到殺卵的目的，避免交叉污染。5.2尼龍絹袋的更新：用過的尼龍絹袋要經(jīng)常檢查，凡是使用過久，孔目變形或破損者要及時剔除，以免影響效果。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0032014尼龍絹集卵孵化法第一版 第0次修訂第3頁 共3頁實施日期：2014年09月01日5.3廢物處理：殘余的糞便、糞渣、糞水、和沉渣必須集中在糞桶里用藥物殺卵然后倒入指定的沉淀糞池中貯存，防止病原擴散沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0042014改良加藤厚涂片法（KatoKatz)第一版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1.

37、 意義 本法對血吸蟲卵等多種蠕蟲卵定量檢查具有滿意效果，適宜檢測常見蠕蟲的感染度、患病率和開展對日本血吸蟲病病人糞便蟲卵計數(shù)，在流行病學調(diào)查和防治效果考核中具有實用價值。2. 原理 尼龍絹濾除糞便中的粗渣；定量板獲取定量糞便；利用甘油對糞便、蟲卵等的透明作用；孔雀綠顯微鏡視野光線柔和，減少眼睛疲勞。3. 器材準備 甘油孔雀綠溶液、親水性玻璃紙、定量板、尼龍絹片、載玻片、塑料刮片等。4. 操作步驟4.1置尼龍絹片于受檢糞樣上，用軟性塑料刮片在尼龍絹片上輕刮，糞便細渣即由絹片微孔中露至絹片表面。4.2將定量板(孔中可容糞量41.1mg)放在載玻片中部，以刮片從尼龍絹片上刮取細糞渣填入定量板的中央孔

38、中，填滿刮平。4.3小心提起定量板，糞樣即留在載玻片上。4.4 取一張經(jīng)甘油孔雀綠溶液浸漬24h的親水性玻璃紙（30×30mm），蓋在糞便上，用另一塊載玻片覆于玻璃紙上輕壓，使糞便均勻展開至玻璃紙邊緣。4.5編號后置于室溫25，相對濕度75下過夜，有2位專業(yè)檢測人員進行獨立鏡檢。4.6每份糞樣均做3張涂片，鏡檢陽性者分別記錄每張涂片的蟲卵數(shù)，每張涂片檢出的蟲卵數(shù)的平均值乘以24即為1g糞便中的蟲卵數(shù)(EPG)。計算公式：單孔（EPG）=A×24 雙孔（EPG）=A×12三孔（EPG）=A×85. 質(zhì)量控制5.1親水性透明玻璃紙使用前需全部浸入透

39、明液中，浸泡24h以上，使玻璃紙顯示綠色或藍色。5.2把刮片上的細糞渣填入定量板時，必須填滿中央孔全孔并抹平；壓制涂片時盡量使糞便均勻展開至玻璃紙邊緣，但應避免糞渣溢出。5.3加藤片透明的速度取決于溫、濕度，一般放置室溫過夜即可，冬季溫度較低時則需置25沙市區(qū)血吸蟲病專科醫(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0042014改良加藤厚涂片法（KatoKatz)第一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日溫箱內(nèi)以加快透明，但切忌放置于太陽光直射下加快透明，避免加藤片脫水過度，而影響鏡下蟲卵的觀察。5.4將透明后的加藤片置于光學顯微鏡的載物臺上，在低倍鏡（10×）下

40、進行鏡檢，鏡檢時仔細檢查每一視野，并特別注意與未受精蛔蟲卵的鑒別。5.5蟲卵計數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右,記錄全片血吸蟲卵的數(shù)量。5.6 每張涂片必須有2位專業(yè)檢測人員獨立閱片。蟲卵計數(shù)平均EPG差別大于24時，需雙方再次鏡檢確認。6. 方法學評價6.1應用范圍：在病原學技術(shù)中，kato-katz法是定性、特別是定量檢腸道血吸蟲和土源性蠕蟲感染的相對標準化的方法，適宜檢測常見蠕蟲的感染度、患病率，在流行病學調(diào)查和防治考核中具有實用價值。6.2優(yōu)點6.2.1方法簡便，定性、定量一次性完成。6.2.2操作過程中不像集卵法、孵化法那樣有蟲卵散失的缺陷，因而定量相對準確。6.2.3涂片制作后可長期

41、保持（薄殼蟲卵除外），便于質(zhì)量管理和控制，也便于合理安排查病時間。6.3缺點6.3.1敏感性低，不太適合在低感染（度）地區(qū)查?。簶藴实膋ato-katz涂片取糞便的量是41.7mg，理論上其檢測的下限是24個蟲卵/克糞便（EPG）。但在實際工作中人們發(fā)現(xiàn)EPG小于100（甚至400）時，其漏查率仍很高。6.3.2有時蟲敏感性低，不太適合在低感染（度）地區(qū)查病。6.3.3薄殼蟲卵在涂片中形態(tài)變化非常大，這初學者難以辨認而漏檢。6.3.4kato-katz涂片中蟲卵形態(tài)較直接涂片法中蟲卵變化大，蟲卵不易辨認，造成誤差。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0052014釘螺解

42、剖方法第一版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1. 意義 釘螺解剖不僅是制訂滅螺規(guī)劃和消滅釘螺的依據(jù)，而且是考核滅螺效果，研究血吸蟲病流行病學必須的工作。2. 器材準備 去氯水、吸管、手套、碘酊、載玻片、解剖針、解剖鏡等。3. 釘螺死活的鑒別法3.1溫水法 將釘螺洗凈后放入盛2025 左右溫水的平皿或瓷杯中，觀察15min后發(fā)現(xiàn)凡有開厴活動即為活螺。反之為死螺釘螺3.2敲擊法 將釘螺置于厚玻片或硬物上，用小鐵錘輕擊使之破碎，如未見釘螺有收縮反應，且未見新鮮軟體組織者為死螺。反之為活螺。 3.3爬行法 將草紙鋪于平底瓷盤底部，在草紙中心上畫直徑為5cm的圓圈，瓷盤內(nèi)加入少

43、許脫氯水使草紙濕潤。將釘螺置于草紙上的圓圈內(nèi)，置室溫（2025 ）下放置24小時后，觀察釘螺爬動情況。若釘螺爬到圈外，則為活螺。在原位不動則為死螺。 4. 釘螺檢測方法4.1壓碎法 將待檢釘螺放于兩張載玻片之間壓碎，每只釘螺加1滴水，然后在解剖鏡或顯微鏡下用解剖針撥開外殼，撕碎釘螺肝臟，發(fā)現(xiàn)有血吸蟲尾蚴和（或）子胞蚴者為感染性釘螺4.2逸蚴法 將單只釘螺置于指形試管內(nèi)，加脫氯水至試管口，用尼龍紗蓋好管口。置2025、光照條件下，48 h后用放大鏡或解剖鏡在燈光下觀察指管水面有無血吸蟲尾蚴。5. 感染性釘螺的鑒別5.1如在螺體內(nèi)找到日本血吸蟲的母胞蚴、子胞蚴或尾蚴，即可確定為感染性釘螺。5.2但

44、血吸蟲的母胞蚴比較小，在解剖剖鏡下不容易發(fā)現(xiàn)，所以一般解剖只需要觀察螺體內(nèi)是否有血吸蟲的子胞蚴和尾螺。5.3釘螺是日本血吸蟲的唯一中間宿主，但日本血吸蟲并不是唯一一種寄生于釘螺體內(nèi)吸蟲，釘螺體內(nèi)可以是多種吸蟲的中間宿主，故須認真鑒別，必要時將其吸出，在顯微鏡下鑒別。 6. 注意事項6.1釘螺外殼（尤其是釘螺內(nèi)臟囊部位）要充分壓碎，使釘螺的肝臟等充分暴露，提高觀察的準確性。 沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0052014釘螺解剖方法第一版 第0次修訂第2頁 共2頁實施日期：2014年09月01日6.2解剖鏡要放大倍數(shù)要適當，過小會影響觀察的效果，過大易使解剖者的眼睛產(chǎn)

45、生疲勞，且降低觀察的效率。 6.3操作時做好個人防護，戴好乳膠手套，防止在操作過程中受到感染。 6.4解剖結(jié)束后使用的玻片、鑷子等解剖工具，要用開水等進行徹底的殺蚴消毒，防止可能存在的尾蚴引起他人感染。 沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCFF0062014檢驗科消毒液配制方法第一版 第0次修訂第1頁 共1頁實施日期：2014年09月01日1. 目的 為使實驗工作科學、高效、安全、順利開展，規(guī)范配制使用消毒劑。2. 適用范圍 適用于檢驗科日常工作。3. 職責 檢驗科工作人員必須嚴格配制方法進行配制。4. 配制方法4.1 75%酒精的配制：量取395mL95%的醫(yī)用酒精，加入

46、純水稀釋至500 mL.4.2 含氯消毒劑的配制：4.2.1將8片健之素加入1升純水中配制成終濃度為2000mg/L含氯消毒劑，用于工作臺面的擦拭消毒；將20片健之素加入1升純水中配制成終濃度為5000mg/L含氯消毒劑，用于意外潑濺污染的消毒。4.2.2用84消毒液配制，利用不同84消毒液含氯量的不同，配制成終濃度為5000mg/L的復合含氯消毒劑。沙市區(qū)血吸蟲病?？漆t(yī)院作業(yè)指導書文件代號：SSXF/QCQT0012014檢驗科安全管理制度第一版 第0次修訂第1頁 共2頁實施日期：2014年09月01日1目的 為實驗工作科學、高效、安全、順利開展，保護良好的實驗環(huán)境，杜絕檢驗科污染。2適用范

47、圍 適用于檢驗科日常工作。3職責 檢驗人員應嚴格執(zhí)行本制度。 質(zhì)量監(jiān)督員不定期檢查本制度執(zhí)行情況。4安全管理制度4.1檢驗科要求4.1.1有專用檢驗科，應劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)和污染區(qū)，并有明顯標記，有充足的操作空間；4.1.2檢驗科墻面、地面、臺面材料應耐酸、耐堿，易清潔消毒、不滲漏液體；室內(nèi)應有防蚊、防蠅、防鼠等設備；4.1.3檢驗臺上應裝置紫外燈；4.1.4備有消毒藥品、消毒器材和設備；4.1.5裝有腳踏或感應流水裝置，備有沖眼睛水，足夠的一次性手套、口罩、隔離服和防護眼鏡；4.1.6清潔區(qū)（間）備有存放個人衣服、用品的設施；4.1.7檢驗科應裝置恒溫設備，工作時室溫保持在2025。4.2

48、安全操作4.2.1檢驗科工作人員要熟悉生物安全操作知識和消毒技術(shù)；4.2.2不得在檢驗科內(nèi)喝飲料、吸煙、吃食物和化妝打扮等；不得在檢驗科內(nèi)會客；4.2.3檢驗科用品（包括工作服）不得用于其他用途；不可將私人和無關(guān)的物品帶入檢驗科；4.2.4工作時，要戴手套、穿工作衣，操作時手套破損應立即丟棄、洗手并帶上新手套；4.2.5不要用戴著手套的手觸摸暴露的皮膚、口唇、眼睛、耳朵和頭發(fā)等；4.2.6盡量避免使用尖銳物品和器具；宜用不易破碎材料制品；禁止用口吸任何物質(zhì)；4.2.7工作結(jié)束后，要對工作臺面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分鐘以上；操作時有標本、檢測試劑外濺時應及時消毒；平時要保持環(huán)境整潔；4

49、.2.8工作完畢，脫去手套后洗手，再脫去工作衣，用肥皂和流動水洗手；4.2.9遇有意外事故，應立即處理并分別以口頭和書面報告上級部門，并填寫意外事故登記表。如工作人員皮膚被刺傷，可以用流動水局部清洗或用刺激性較輕的含氯創(chuàng)傷消毒劑浸泡皮膚創(chuàng)口；樣品或檢測試劑濺入眼內(nèi)立即用生理鹽水沖洗，濺入嘴內(nèi)，先吐出殘留的液體后，用水反復漱口；4.2.10遇有高危的意外事故發(fā)生，除進行局部處理外，應立即向上級主管部門報告，組織專家組對意外事故危險度進行評估，按專家組擬定預防措施進行處置。4.3標本、試劑管理和廢棄物品消毒處理4.3.1血液標本置于合適容器內(nèi)，加蓋蓋緊后運送，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。也可將血樣置于有蓋的塑料管內(nèi)，外面套上塑料袋，封口，連同送檢單一并運送，有血液外溢時，立即用消毒液消毒；4.2.2各種試劑和化學品均應貼有標簽，放置于合適的位置，實驗臺上不放置不必要的物品。任何測試用的樣品和試劑不宜置于桌面或架子的邊沿，以防滑落打破，污染環(huán)境。一旦污染，先