二妙丸濃縮丸的制備以及有效成分的提取

1、二妙丸濃縮丸的制備與分析學(xué)院：食品藥品學(xué)院專業(yè)：12藥劑指導(dǎo)老師：時(shí)維靜小組成員：許詠、宋夢、楊夢鈺、徐強(qiáng)強(qiáng)、章磊二妙丸濃縮丸的制備與分析引言： 二妙丸系元代丹溪心法中，由黃柏、蒼術(shù)兩味藥組成，原為散劑，世醫(yī)得效方中又名蒼術(shù)散，后由散劑改為水丸劑。具有清熱燥濕的功效，用于濕熱下注，足膝紅腫熱痛，下肢丹毒，陰囊濕癢。蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù) Atractylodes.lancea (Thun檗.) DC.或北蒼術(shù) Atractylodes chinensis (DC.) Koidz.的干燥根莖。味甘、苦，性溫，歸脾、腎、肝經(jīng)。其有效成分為揮發(fā)油，具有燥濕健脾、祛風(fēng)散寒、明目的功效。主要用于脘腹脹滿，

2、泄瀉，食欲不振，水腫，腳氣痿痹，風(fēng)寒感冒，雀目夜盲等癥?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，蒼術(shù)具有，具有抗?jié)?、抗心率失常、降血壓、利尿、保肝、抗炎、抗菌等作用。黃柏苦寒，為蕓香科植物黃檗或者黃皮書的樹皮，黃柏別名為檗皮，檗木,黃檗，其有效成分為小檗堿，具有治濕熱痢疾，泄瀉，黃疸，夢遺，淋蟲，帶下等功效。本試驗(yàn)一改傳統(tǒng)二妙丸制法改制為濃縮水丸，并從：二妙丸濃縮丸的制備工藝；二妙丸濃縮丸的的鑒別、含量測定以及與傳統(tǒng)二妙丸的比較；二妙丸濃縮丸的質(zhì)量檢測；二妙丸濃縮丸中有效成分的提取工藝四大模塊展開。一、實(shí)驗(yàn)材料與儀器設(shè)備1、 實(shí)驗(yàn)試藥：炒蒼術(shù)（200g） 炒黃柏（200g）、鹽酸小檗堿標(biāo)準(zhǔn)品、乙醇（80%）、硫

3、酸、稀鹽酸、 蒸餾水，乙醚等2、實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備：篩網(wǎng)（100目）500ml的短頸圓底燒瓶：為水分測定管；直形冷凝管， 刮板式蒸發(fā)器、玻璃棒、燒杯電爐、滲漉裝置、天平、不銹鋼罐、粉碎機(jī)、片劑崩解儀、移液管、紫外分光光度計(jì)、索氏提取器、過濾裝置、濾紙、抽濾裝置等。二、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）二妙丸濃縮丸的制備工藝濃縮丸系指藥材或者部分藥材經(jīng)提取的清膏或者浸膏，與其余藥材粉末或者適宜的輔料，用水、蜂蜜或者蜜水為粘合劑制成的丸劑。濃縮丸的制備方法有兩種，即泛制法和塑制法，基于本試驗(yàn)，將采用泛制法制成水丸型濃縮丸，具體方法如下： 1、藥材處理（1）粉碎部分：蒼術(shù)。將蒼術(shù)（炒）粉碎，過篩（100目），得細(xì)粉。這部分量

4、應(yīng)占整個(gè)處方量的30%-40%，作為起模子和吸收浸膏之用。（2）提取部分：黃柏（炒）提取方法：熱浸漬法（80%熱乙醇）將黃柏粉碎，置有蓋容器中，加入6倍量熱乙醇于常溫下浸漬，放置24小時(shí)或更長時(shí)間，濾過，藥渣再加入新溶劑，如此反復(fù)24次，最后壓榨藥渣，濾過即可。2、提取液濃縮為浸膏：提取液濃縮成浸膏一般為薄膜蒸發(fā)和減壓濃縮，濃縮至稠浸膏。相對密度在1.35-1.40之間薄膜蒸發(fā)（使液體在蒸發(fā)時(shí)形成薄膜，增加氣化表面，進(jìn)行蒸發(fā)的方法，薄膜具有極大的表面，熱傳播快而均勻。方法：（1） 使液膜快速流動(dòng)加熱面（液面厚度在0.20.5mm）（2） 使藥液劇烈沸騰產(chǎn)生大量泡沫，以泡沫內(nèi)外表面為蒸發(fā)面進(jìn)行蒸

5、發(fā)。3、浸膏粉的制備將濃縮好的浸膏與留作吸收浸膏用的藥粉（占整個(gè)粉碎量的2/3左右）混合均勻，放減壓干燥箱中60攝氏度下干燥，然后再粉碎成細(xì)粉（大約100目），作為泛丸用。4、起模從粉碎的藥粉中留出1/3粘性適中的藥粉，用蒸餾水起模。5、泛丸在起好的模子上用浸膏粉泛丸，用蒸餾水作為粘合劑。（二）二妙丸的鑒別檢查、含量測定以及與傳統(tǒng)二妙丸的比較1、鑒別、（1）取本品，置顯微鏡下觀察：草酸鈣針晶細(xì)小，長1032m，不規(guī)則地充塞于薄壁細(xì)胞中（蒼術(shù)）。纖維束鮮黃色，周圍細(xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細(xì)胞壁木化增厚（黃柏）。（2）取本品2g，研細(xì)，加乙醚15ml，超聲處理15分鐘，濾過，濾液揮去乙醚

6、，殘?jiān)右宜嵋阴?ml使溶解，作為供試品溶液。另取蒼術(shù)對照藥材0.25g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典一部附錄 檗）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（6090）乙酸乙酯（10：1）為展開劑，展開，展距4cm，取出，晾干，再以環(huán)己烷為展開劑，展開，展距7cm，取出，晾干，噴以5%對二甲氨基苯甲醛的10%硫酸乙醇溶液，在80加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。（3）取本品0.1g，研碎，加甲醇5ml，加熱回流15分鐘，濾過，濾液補(bǔ)加甲醇使成5ml，作為供試品溶液。另取黃柏對照藥材0.1

7、g，同法制成對照藥材溶液。再取鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典一部附錄 檗）試驗(yàn)，吸取上述三種溶液各1l，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯乙酸乙酯異丙醇甲醇濃氨試液（12：6：3：3：1）為展開劑，置氨蒸氣預(yù)飽和的展開缸內(nèi)展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜和對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)。2含量測定取本品適量，研細(xì)，取約1g，精密稱定，置索氏提取器中，加乙醚適量，加熱回流12小時(shí)，棄去乙醚液，殘?jiān)鼡]去乙醚，加甲醇適量，回流提取至提取液無色，將提取液（必要時(shí)適當(dāng)濃縮）

8、轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含60g的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（2010年版藥典一部附錄 檗）試驗(yàn)，精密吸取供試品溶液1l、對照品溶液1l與3l，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以苯乙酸乙酯異丙醇甲醇濃氨試液（12：6：3：3：1）為展開劑，置用氨蒸氣與展開劑同時(shí)預(yù)平衡15分鐘的展開缸內(nèi)展開，取出，晾干，照薄層色譜法（2010年版藥典一部附錄 檗薄層色譜掃描法）進(jìn)行熒光掃描，激發(fā)波長=365nm，測量供試品吸光度積分值與對照品吸光度積分值，計(jì)算，即得。本品每1g含黃柏以鹽酸小檗堿（C20H17NO

9、4·HCl）計(jì)，不得少于3.0mg。3、與傳統(tǒng)二妙丸的比較（1）有效成分含量（2）服藥次數(shù)與服藥次數(shù)（三）、二妙丸濃縮丸的質(zhì)量檢測【水分】取供試品照水分測定法（附錄 ）測定。除另有規(guī)定外,濃縮水丸不得過9.0。水分檢查方法有：烘干法、甲苯法、減壓干燥法和氣相色譜法，本試驗(yàn)采用甲苯法。甲苯法：本法適用于含揮發(fā)性成分的藥品。取供試品適量（約相當(dāng)于含水量14ml），精密稱定，置A瓶中,加甲苯約200ml，必要時(shí)加入玻璃珠數(shù)粒，將儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿檗管的狹細(xì)部分。將A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱,待甲苯開始沸騰時(shí)，調(diào)節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，

10、即測定管刻度部分的水量不再增加時(shí),將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗, 再用飽蘸甲苯的長刷或其他適宜的方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水粘附在檗管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍(lán)粉末少量，使水染成藍(lán)色，以便分離觀察）。檢讀水量，并計(jì)算成供試品中含有水分的百分?jǐn)?shù)。附注：用化學(xué)純甲苯直接測定，甲苯須先加水少量充分振搖后放置，將水層分離棄去，經(jīng)蒸餾后使用【重量差異】檢查法：以10丸為一份（丸重1.5g以及1.5g以上的以1丸為一份），取供試品10份，分別稱定重量，再與每份標(biāo)示量（每丸標(biāo)示量×稱取丸數(shù)）相比較，（無標(biāo)示量的丸

11、劑與平均重量比較），按下表的規(guī)定，超出重量應(yīng)符合重量差異限度規(guī)定，超出限度的不得多于2份，并不得有1份超出限度1倍。標(biāo)示重量（或平均重量）重量差異限度0.05g及0.05g以下0.05g以上至0.1g0.1g以上至0.3g0.3g以上至1.5g1.5g以上至3g3g以上至6g6g以上至9g9g以上±12%±11%±10±9%±8%±7%±6%±5%【裝量差異】取供試品10袋（瓶），分別稱定每袋（瓶）內(nèi)容物的重量，每袋（瓶）裝量與標(biāo)示裝量相比較，應(yīng)符合下表規(guī)定。超出裝量差異限度的不得多于2袋（瓶）,并不得有1袋（瓶）

12、超出裝量差異限度一倍。標(biāo)示重量裝量差異限度0.05g及0.05g以下0.05g以上至0.1g0.1g以上至0.3g0.3g以上至1.5g1.5g以上至3g3g以上至6g6g以上至9g9g以上±12%±11%±10±9%±8%±7%±6%±5%【溶散時(shí)限】除另有規(guī)定外，取供試品6丸，選擇適當(dāng)孔徑篩網(wǎng)的吊籃（丸劑直徑在2.5mm以下的用直徑約0.42mm的篩網(wǎng)，在2.5mm3.5mm之間的用直徑1.0mm的篩網(wǎng)，在3.5mm以上的用直徑約2.0mm的篩網(wǎng)），照崩解時(shí)限檢查法片劑項(xiàng)下的方法加檔板檢查。除另有規(guī)定外,小蜜丸、水蜜丸和水丸應(yīng)在1小時(shí)內(nèi)全部溶散；濃縮丸和糊丸應(yīng)在2小時(shí)內(nèi)全部溶散;微丸的溶散時(shí)限按所屬丸劑類型的規(guī)定判定。如操作過程中丸劑粘附檔板妨礙檢查時(shí),應(yīng)另取供試品6丸，不加檔板按規(guī)定檢查，在規(guī)定時(shí)間內(nèi)應(yīng)全部溶散。上述檢查應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)全部通過篩網(wǎng)，如有細(xì)小顆粒狀物未通過篩網(wǎng)，但已軟化無硬芯者可作合格論。（四）二妙丸濃縮丸中有效成分的提取1、樣品的預(yù)處理：取6丸將制得的濃縮丸直接研細(xì)或粉碎，過篩，稱重