血管內(nèi)皮生長因子受體在骨髓增生異常綜合征中的作用研究

1、血管內(nèi)皮生長因子受體在骨髓增生異常綜合征中的作用研究                         作者：尤學(xué)芬，羅瓊，丁潤生，謝玉娟，陸德炎【摘要】 目的：探討血管內(nèi)皮生長因子受體（VEGFR）在骨髓增生異常綜合征（MDS）發(fā)病機(jī)制中的作用。方法：用流式細(xì)胞儀測(cè)定MDS患者及正常人骨髓單個(gè)核細(xì)胞VEGFR（VEGFR1和VEGFR2）表達(dá)率。結(jié)果：VEG

2、FR1陽性表達(dá)率結(jié)果顯示：MDS高危組MDS低危組正常組（P0.01）；MDS組和正常組的VEGFR2表達(dá)結(jié)果無差異（P0.05）。結(jié)論：MDS患者 VEGFR1陽性表達(dá)增高，VEGFR1陽性表達(dá)增高與MDS病程進(jìn)展有關(guān)，提示在MDS轉(zhuǎn)化為白血病過程中VEGFR1起重要作用。 【關(guān)鍵詞】 骨髓增生異常綜合征 血管內(nèi)皮生長因子受體 血管生成Abstract Objective: To investigate the pathogenetic role of the VEGFR in MDS. Methods: The expression of VEGFR was determined by f

3、low cytometry(FCM). Results: All bone marrow mononuclear cells had higher expression of VEGFR1 in MDS than that in the control group（P0.01）. But as to the expression of VEGFR2, there was no difference between these two groups（P0.05）. Conclusion: These data suggest that VEGFR1 is increased in MDS and

4、 may play a role in the leukemogenic process.Key word Myelodysplasyic syndrome； Vascular endothelial growth factor receptor； Angiogenesis近年來越來越多的證據(jù)表明：多種血液系統(tǒng)惡性腫瘤患者骨髓中存在血管新生現(xiàn)象，血管新生及其調(diào)控因子與血液系統(tǒng)惡性腫瘤的發(fā)生、進(jìn)展和預(yù)后有密切的關(guān)系。骨髓增生異常綜合征（myelodysplasyic syndrome）是造血干細(xì)胞異質(zhì)性的克隆性疾病，在疾病發(fā)展過程具有高風(fēng)險(xiǎn)轉(zhuǎn)化為急性髓細(xì)胞白血病（AML）的特點(diǎn)，其確切的發(fā)病機(jī)制

5、迄今不明。我們檢測(cè)了MDS患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞血管內(nèi)皮生長因子受體（vascular endothelial growth factor receptor）水平，以探討其在MDS發(fā)病機(jī)制、病情進(jìn)展中的作用。1 材料與方法1.1 骨髓單個(gè)核細(xì)胞VEGFR檢測(cè) 2002年6月2005年10月我院門診或住院患者，符合1997年WHO標(biāo)準(zhǔn)1。將MDS患者12例根據(jù)病情分成兩組，難治性貧血（RA）、環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞增多性難治性貧血（RAS）為低危組，原始細(xì)胞增多性難治性貧血（RAEB）為高危組，男8例，女4例，年齡785歲，平均45 歲。正常對(duì)照組12例，均來自2004年7月2005年12月本院住院患者及門

6、診患者。無菌采集骨髓液,枸櫞酸鈉抗凝,人淋巴細(xì)胞分離液常規(guī)分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞，調(diào)整細(xì)胞密度至4×109/L，流式細(xì)胞儀（FCM，BD公司）分析骨髓單個(gè)核細(xì)胞表面VEGFR（VEGFR1和VEGFR2）表達(dá)。VEGFR檢測(cè)試劑為BD公司產(chǎn)品。1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 用Stata7.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析。檢測(cè)結(jié)果，以x±s表示，兩兩比較采用q檢驗(yàn)，以=0.05作為檢驗(yàn)水準(zhǔn)。VEGFR家族中有3種不同的酪氨酸激酶受體：VEGFR1（Flt1）、VEGFR2（KDR）和VEGFR3，其中VEGFR1和VEGFR2是血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性酪氨酸激酶蛋白受體，VEGFR3主要分布于淋巴管。VEG

7、FR1和VEGFR2在脈管系統(tǒng)的形成中起至關(guān)重要的作用，已證實(shí)兩者的破壞可導(dǎo)致胚胎死亡。 VEGFR2可能促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的進(jìn)一步分化、增殖、遷移，在介導(dǎo)細(xì)胞增殖和遷移信號(hào)傳導(dǎo)的途徑中發(fā)揮主要作用2；而VEGFR1則作用于內(nèi)皮細(xì)胞終末分化，傳遞分化信號(hào)，形成血管的管腔結(jié)構(gòu)。兩者在時(shí)間與空間上相互協(xié)作，共同調(diào)控血管新生的進(jìn)行。我們用流式細(xì)胞儀檢測(cè)MDS患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞VEGFR的結(jié)果表明，VEGFR1表達(dá)陽性率：MDS高危組MDS低危組正常組，而在介導(dǎo)細(xì)胞增殖和遷移信號(hào)傳導(dǎo)途徑中發(fā)揮主要作用的VEGFR2與正常人的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與Bellamy等3的研究結(jié)果基本一致。Bellamy等報(bào)道急

8、性白血病和MDS患者的髓系原始細(xì)胞和單核系前體細(xì)胞主要高水平表達(dá)VEGFR1，特別是在未成熟細(xì)胞區(qū)域（ALIP）。                             VEGFR1是最早被發(fā)現(xiàn)的VEGF的受體4，一些學(xué)者通過不同的實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：VEGFR1在某些環(huán)境中也可以發(fā)揮短暫的促內(nèi)皮細(xì)胞生存作用5；如Lutt

9、um等6發(fā)現(xiàn)VEGFR1參與單核細(xì)胞介導(dǎo)的促進(jìn)心肌缺血的模型側(cè)枝血管的形成。LeCouter等7研究表明，VEGFR1的激活引起肝臟竇狀隙內(nèi)皮細(xì)胞旁分泌HGF、IL-6等細(xì)胞因子。我們的研究結(jié)果表明：VEGFR1表達(dá)陽性率MDS高危組MDS低危組正常組，提示VEGFR1陽性表達(dá)增高與MDS病程進(jìn)展有關(guān)，在MDS轉(zhuǎn)化為白血病過程中VEGFR1可能起重要作用?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】 1 Harris NL, Jaffe ES, Diebol D, et al. The World Health Organization classification of neoplastic diseases of the

10、 heamatopoietic and lymphoid tissuesJ. Histopathology,2000,36(1):69-92.2 Marchand GS, Noiseux N, Tanguay JF, et al. Blockade of in vivo VEGF-mediated angiogenesis by antisense gene therapy:role of Flk-1 and Flt-1 receptorsJ. Am J Physiol Heart Circ,2002,282(1):H194-204.3 Bellamy WT, Richter L, Sirja

11、ni D, et al. Vascular endothelial cell growth factor is autocrine promoter of abnormal localized immature myeloid precursors and leukemia progenitor formation in myelodysplastic syndromesJ. Blood, 2001,97(5):1427-1434.4 Infanger M, Faramarzi S, Grosse J, et al. Expression of vascular endothelial gro

12、wth factor and receptor tyrosine kinases in cardiac ischemia/reperfusion injuryJ. Cardiovasc Pathol, 2007,16(5):291-299.5 Adini A, Kornage T, Firoozbakht F, et al. Placental growth fator is a survival factor for tumor endothelial cell and macrophagesJ. Cancer Res,2002,62(10):2749-2752.6 Luttun A, Tj

13、wa M, Moons L, et al. Revascularization of ischemic tissue by PLGF treatment, and inhibition of tumor angiogenesis, arthritis and atherosclerosis by anti-Flt-1J. Nat, 2002,8(3):831-840.7 LeCouter J, Moritz DR, Li B, et al. Angiogenesis-independent endothelial protection of liver: role of VEGFR1J. Science, 2003, 299(4):890-893.2 結(jié) 果上述各組VEGFR1陽性表達(dá)結(jié)果顯示：MDS患者組VEGFR1表達(dá)顯著高于正常對(duì)照組（P0.01）； MDS低危組表達(dá)顯著高于正常組而低于MDS高危組（P0.01），見表1。對(duì)上述各組VEGFR2陽性表達(dá)率進(jìn)行兩兩均數(shù)比較，均發(fā)現(xiàn)P0.05，見表1。3 討 論MDS是造血系統(tǒng)異質(zhì)性克隆增殖性疾病，其基本病變是克隆性造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞發(fā)育異常導(dǎo)致無效造血以及高度轉(zhuǎn)化為AML。近年來，骨髓血管新生在各種惡性血液病中的意義日益受到重視，一些臨床研究證實(shí)惡性血液病骨髓微血管密度增加。人類血管新生受促血管和抗血管生長因子的嚴(yán)密調(diào)控，即“