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文檔簡介
1、濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測技術(shù)規(guī)程目 錄1.范圍32.規(guī)范性引用文件33.術(shù)語和定義33.1 湖泊濕地33.2 沼澤濕地43.3 濕地生態(tài)43.4 濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測44.通則44.1 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測基本條件44.2 質(zhì)量控制44.3 儀器設(shè)備檢定45.監(jiān)測方案的結(jié)構(gòu)內(nèi)容55.1 采樣點布設(shè)55.2 監(jiān)測時間和頻率55.2.1 背景調(diào)查55.2.2 自然指標65.2.3 生物指標65.3 監(jiān)測指標65.3.1 宏觀指標65.3.2 水環(huán)境指標65.3.3 土壤指標75.3.4 生物多樣性指標75.4 監(jiān)測方法75.4.1 宏觀指標監(jiān)測方法75.4.2 水環(huán)境指標監(jiān)測方法85.4.3 土壤指標監(jiān)測方法
2、95.4.4 生物多樣性指標監(jiān)測方法106.評價技術(shù)與方法186.1 水質(zhì)質(zhì)量評價186.2 土壤質(zhì)量評價186.3 生物多樣性評價196.4 濕地面積退化評價196.5 植被現(xiàn)狀與趨勢評價196.6 濕地生態(tài)綜合評價197.監(jiān)測報告與數(shù)據(jù)資料207.1文本格式207.1.1 文本規(guī)格217.1.2 封面格式217.1.3 封里-內(nèi)容217.2 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測報告編寫內(nèi)容217.3 監(jiān)測數(shù)據(jù)資料22附錄231. 范圍 本規(guī)程給出了濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的技術(shù)規(guī)定,適用于我國湖、沼濕地的生態(tài)動態(tài)監(jiān)測。2. 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過本規(guī)程的引用而成為本規(guī)程的條款。凡是注日期的引用文件
3、,其隨后所有的修改單或修訂版均不適用于本規(guī)程,然而,鼓勵根據(jù)本規(guī)程達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本適用于本規(guī)程。HJ495-2009 水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)定HJ493-2009 水質(zhì)采樣樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定HJ/T166-2004 土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范GB 3838-2002 地表水環(huán)境質(zhì)量標準GB15618-1995 土壤環(huán)境質(zhì)量標準GB 17378.7-2007 海洋監(jiān)測規(guī)范 第7部分:近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測3. 術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本標準。3.1 湖泊濕地湖泊岸邊或淺湖發(fā)生沼澤化過程而形成的濕地。按拉姆薩爾國際公約,湖
4、泊濕地還包括湖泊水體本身。3.2 沼澤濕地地表有薄層積水或經(jīng)常過濕并生長濕生植物或沼澤植物,土層有泥炭的濕地,包括沼澤和沼澤化草甸(簡稱沼澤濕地),是最主要的濕地類型。3.3 濕地生態(tài)介于水、陸生態(tài)系統(tǒng)之間的一類生態(tài)單元。濕地生物群落與其相互作用的地理環(huán)境所構(gòu)成的自然系統(tǒng)。其生物群落由水生和陸生種類組成,物質(zhì)循環(huán)、能量流動和物種遷移與演變活躍,具有較高的生態(tài)多樣性、物種多樣性和生物生產(chǎn)力。3.4 濕地生態(tài)動態(tài)監(jiān)測應(yīng)用多平臺、多時相、多波段和多源數(shù)據(jù)對濕地生態(tài)資源與環(huán)境各要素時空變化進行動態(tài)的監(jiān)視與探測,是濕地生態(tài)系統(tǒng)對自然變化及人類活動所作出反應(yīng)的觀測以及評價,是濕地生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的時空格
5、局變化的度量。4. 通則4.1 濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測基本條件 為保證濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的科學(xué)性、有效性,濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測應(yīng)具備必要的采樣、實驗條件和儀器設(shè)備,具有樣品采集、分析、鑒定和數(shù)據(jù)分析處理的基本能力。暫無條件和能力完成的監(jiān)測實驗項目,須委托已通過國家計量質(zhì)量認證并具備監(jiān)測能力的監(jiān)測機構(gòu)承擔(dān)相應(yīng)的監(jiān)測工作。 4.2 質(zhì)量控制 從事濕地生態(tài)環(huán)境動態(tài)監(jiān)測的機構(gòu)須具備全程質(zhì)量保證和質(zhì)量控制的運行機制,執(zhí)行監(jiān)測質(zhì)量控制與保證的規(guī)定和要求,對監(jiān)測的全過程進行質(zhì)量控制。 4.3 儀器設(shè)備檢定 所有在監(jiān)測過程中使用的計量檢測器、設(shè)備和計量器具必須在有效檢定期內(nèi)使用,并在規(guī)定的檢定周期內(nèi)進行檢定。
6、可自檢的計量檢測器、設(shè)備和計量器具應(yīng)按期進行自檢。5. 監(jiān)測方案的結(jié)構(gòu)內(nèi)容5.1 采樣點布設(shè)1)采樣點應(yīng)能覆蓋所需的生態(tài)環(huán)境監(jiān)測和評價范圍,除特殊需要(因地形、水深和監(jiān)測目標所限制)外,所有采樣點應(yīng)在監(jiān)測范圍內(nèi)均勻布設(shè),可采用網(wǎng)格式、斷面或梅花式等布設(shè)方式,以便確定監(jiān)測要素的分布趨勢;2)水樣采用斷面式的布設(shè)方法,土壤樣布設(shè)點與水樣保持一致,分別根據(jù)水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)定(HJ4952009)和土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ/T166-2004采集水樣和土壤樣;3)水生浮游植物和水生浮游動物監(jiān)測點一般盡量與水化學(xué)監(jiān)測采樣點一致;4)挺水植物、浮葉植物、沉水植物的樣方面積應(yīng)不小于群落最小面積,可根據(jù)
7、種-面積曲線來確定。挺水和浮葉植物樣方面積一般采用1m×1m或0.5m×0.5m,沉水植物樣方面積為0.5m×0.5m或0.2m×0.2m;采樣點的布設(shè)可采用斷面法,根據(jù)湖泊的形狀、水文情況、植物的分布等設(shè)置斷面,斷面最好是平行排列,或為“之”字形。斷面與斷面的距離一般為50米-100m,(可根據(jù)實際情況而定)。斷面上定點數(shù)目最好為奇數(shù),即斷面中間應(yīng)設(shè)一個點,沒有大型水生植物的地區(qū)可不必設(shè)定。5)鳥類監(jiān)測樣點布設(shè)見鳥類監(jiān)測方法;6)采樣一經(jīng)確定,不應(yīng)輕易更改,不同時期的采樣點應(yīng)保持不變。5.2 監(jiān)測時間和頻率5.2.1 背景調(diào)查針對濕地生態(tài)環(huán)境監(jiān)測的具體
8、范圍,在正式開展生態(tài)環(huán)境監(jiān)測以前,應(yīng)進行濕地生態(tài)環(huán)境的背景調(diào)查監(jiān)測,以便確定常規(guī)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測指標體系及生態(tài)環(huán)境評價的背景值。背景值主要包括濕地地理位置,濕地面積,水域面積,植被面積,水體總量,地表徑流量,年排入量,降雨量,蒸發(fā)量,湖、沼濕地與地下水的交換量,供給水量等。背景調(diào)查監(jiān)測應(yīng)在一個年度內(nèi)完成,調(diào)查頻率應(yīng)不少于4次,分別在春、夏、秋、冬四季各開展一次調(diào)查監(jiān)測。5.2.2 自然指標為保證采樣的連續(xù)性和周期性,通常水環(huán)境和土壤環(huán)境中的自然指標中可在線連續(xù)監(jiān)測的指標如水量、水溫、電導(dǎo)率、pH、DO等可通過在線自動監(jiān)測系統(tǒng)進行實時連續(xù)監(jiān)測,其它指標的監(jiān)測時間設(shè)置為豐水期,平水期,枯水期各采樣一到
9、兩次。5.2.3 生物指標1)植物監(jiān)測時要選擇植物開花或結(jié)實的時期,分不同季節(jié)進行調(diào)查,以獲得全面而準確的資料和典型的標本。由于全國各地氣候差異懸殊,各監(jiān)測區(qū)應(yīng)根據(jù)本地氣候和植物生長發(fā)育特點具體確定最佳監(jiān)測時期。2)鳥類鳥類數(shù)量監(jiān)測分為繁殖季和越冬季兩次進行,繁殖季一般為每年的5月-7月,越冬季為12月-次年2月。各地應(yīng)根據(jù)本地的午后特點確定最佳檢測時間,其原則是:監(jiān)測時間應(yīng)選擇監(jiān)測區(qū)域內(nèi)的水鳥種類和數(shù)量均保持相對穩(wěn)定的時期;監(jiān)測應(yīng)在較短時間內(nèi)完成,以減少重復(fù)記錄。遷徙情況監(jiān)測主要在春、秋鳥類遷徙季節(jié)進行。3)魚類捕撈法通常應(yīng)在每個季度調(diào)查監(jiān)測一次,一般以5月、8月、11月和2月代表春季、夏季
10、、秋季和冬季。也可以通過與水產(chǎn)部門、漁民及相關(guān)管理人員溝通,獲得相應(yīng)資料 4)兩棲動物、爬行動物等其它獸類獸類監(jiān)測主要在冬季,與冬季鳥類監(jiān)測同時進行,在繁殖季節(jié)對鳥類進行數(shù)量監(jiān)測時,也應(yīng)兼顧對獸類的監(jiān)測。5.3 監(jiān)測指標5.3.1 宏觀指標濕地地理位置,濕地面積,水域面積,植被面積。5.3.2 水環(huán)境指標水體總量,地表徑流量,年排入量,降雨量,蒸發(fā)量,湖、沼濕地與地下水的交換量,供給水量,水溫,電導(dǎo)率,懸浮物,鹽度,堿度, pH,DO,COD,TN,TP,NH4+-N,NO3-N,CO32-,Cl-,SO42,Na+,K+, Ca2+,Mg2+及重金屬Cu2+,Zn2+,Pb4+,Cd2+等。
11、5.3.3 土壤指標土壤含水量,pH,電導(dǎo)率,堿度,有機質(zhì)含量,TDS,N,P,K含量,CO32-,HCO3-,Cl-,SO42-,Na+,K+,Ca2+,Mg2+。5.3.4 生物多樣性指標1)動物指標:鳥類、魚類、浮游動物和底棲動物的種類組成和生物數(shù)量,瀕危野生動物數(shù)量、動態(tài)及遷徙規(guī)律。2)植物指標:浮游植物、沉水植物、挺水植物和浮游植物的數(shù)量、生物量及群落面積,珍稀植物及其分布特征。3)微生物指標:細菌、真菌、藻類、原生動物和糞大腸菌群。5.4 監(jiān)測方法5.4.1 宏觀指標監(jiān)測方法濕地地理位置,濕地面積,水域面積,植被面積等指標利用遙感衛(wèi)星圖片進行解析,結(jié)合地形圖、野外調(diào)查以及現(xiàn)有資料查
12、詢獲得。1)衛(wèi)星遙感資料的獲取根據(jù)不同實際需求及各種數(shù)據(jù)源的優(yōu)缺點選擇適合的衛(wèi)星遙感數(shù)據(jù)。2)遙感圖像的校正(以SPOT為例)SPOT圖像在地形圖上選擇地面控制點(DCP),采用一般齊次多項式方法進行幾何校正,再用GPS實地采集DCP作為補充進行二次校正,經(jīng)幾何校正后的SPOT圖像采用最鄰近內(nèi)插法進行重采樣。3)圖像增強與圖像復(fù)合方法在圖像中選擇感興區(qū),分析濕地的圖像特征,然后用直線拉伸法對圖像進行三線性變換分段拉伸,使?jié)竦刂脖?、水域與和周圍地域的光譜間差異增大。采用銳化HIS變換的方法,分別將各SPOT圖像與相應(yīng)的ETM+圖像進行融合,得到包含了SPOT和ETM+兩種數(shù)據(jù)信息的復(fù)合圖像。然后
13、采用經(jīng)過融合的圖像數(shù)據(jù)進行RGB真彩色合成,并加入公里格網(wǎng),以TIFF格式保存。4)濕地信息提取進行濕地信息提取,首先進行分類系統(tǒng)的確定。一個分類系統(tǒng)具有兩個關(guān)鍵組成部分:即一套解譯標志和一套分類規(guī)則。在各種不同濕地區(qū)及其它土地利用類型選取觀察點,確定各點坐標,然后利用GPS儀在野外對各選擇點進行定位考察,確定其類型、地物景觀狀況,并作好記錄,結(jié)合影像上對應(yīng)點進行判讀,分析各濕地類型的圖譜特征,建立相應(yīng)的解譯標志。然后采用常用的監(jiān)督分類、非監(jiān)督分類和NDVI植被指數(shù)法進行信息提取。5)結(jié)果計算采用GIS對修正后的圖像進行空間分析,計算濕地面積、水域面積和不同植被面積。5.4.2 水環(huán)境指標監(jiān)測
14、方法1)樣品采集和保存根據(jù)水質(zhì)采樣方案設(shè)計技術(shù)規(guī)定(HJ4952009)采集水樣,并參照水質(zhì)采樣樣品的保存和管理技術(shù)規(guī)定(HJ4932009)進行水樣的保存。 2)水文、水質(zhì)指標監(jiān)測方法(1) 背景值水體總量,地表徑流量,年排入量,降雨量,蒸發(fā)量,湖、沼濕地與地下水的交換量,供給水量通過資料調(diào)查獲得。(2) 溫度、電導(dǎo)率、pH、DO(3) 通過布置在現(xiàn)場的在線自動監(jiān)測系統(tǒng)進行實時連續(xù)監(jiān)測。其它監(jiān)測指標測定方法如表1:表1. 水環(huán)境指標的監(jiān)測方法監(jiān)測指標監(jiān)測方法引用標準COD快速消解分光光度法HJ/T 399-2007BOD稀釋與接種法HJ 505-2009NH4+-N水楊酸分光光度法HJ 53
15、6-2009NO3-N離子色譜法NO2-N離子色譜法TN堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法GB/T 11894-89TP鉬酸銨分光光度法GB/T 11893-89濁度濁度儀GB/T 13200-91懸浮物重量法GB/T 11901-89CO32-和HCO3-滴定法DZ/T 0064.49-93Cl-、SO42-、NO3-、NO2-離子色譜法Na+、K+、Ca2+、Mg2+Cu2+、Zn2+、Pb4+、Cd2+原子吸收分光光度法GB 11907-89監(jiān)測結(jié)果按附錄表一填寫數(shù)據(jù)報表。5.4.3 土壤指標監(jiān)測方法1)樣品采集和保存土壤樣品根據(jù)土壤環(huán)境監(jiān)測技術(shù)規(guī)范HJ/T166-2004采集樣品并保存。2
16、)土壤指標監(jiān)測方法(1)預(yù)處理方法 土壤樣的處理土壤樣制備過程需要經(jīng)過風(fēng)干、磨細、過篩、混勻、裝瓶,以備各項測定之用。風(fēng)干:將采回的土壤樣,放在木盤或塑料布上,攤成薄薄的一層,置于室內(nèi)通風(fēng)陰干,土壤樣半干時,須將大泥塊捏碎,風(fēng)干場所力求干燥通風(fēng),樣品風(fēng)干后應(yīng)揀去動植物殘體和泥塊。過篩:將風(fēng)干后的土壤樣用木棍研細,使之全部通過2 mm孔徑的篩子?;靹蚝螅姆址ǚ殖蓛煞?,一份作為物理分析用,一份作為化學(xué)分析用,化學(xué)分析用的土壤樣還必須進一步研細,使之全部通過1 mm孔徑篩子。保存:一般樣品用塑料瓶保存半年或一年,以備必要時查核之用,樣品瓶上標簽須注明樣號、采樣地點、泥類名稱、試驗區(qū)號、深度、采樣日
17、期、篩孔。 浸提液的制備將風(fēng)干土壤樣過2 mm篩后,按照1:5的水(無二氧化碳水)泥比置于500毫升三角瓶中,加入干凈的玻璃珠加塞震蕩,每隔30分鐘震蕩一次,每次持續(xù)一分鐘,共震蕩5次,經(jīng)抽濾獲得土壤樣的浸出液。(2)土壤樣品電導(dǎo)率的測定可稱取4 g風(fēng)干泥放在25 mm×200 mm的大試管中,加水20 mL,蓋緊皮塞,振蕩3 min,靜置澄清后,不必過濾,直接測定。(3)土壤其它指標的測定使用土壤浸提液測定,測定方法同水樣測定,如下:表2. 土壤指標的監(jiān)測方法監(jiān)測指標監(jiān)測方法方法來源TDS稱量法或八大離子總和相加法(鹽堿性湖泊)TN堿性過硫酸鉀消解紫外分光光度法GB/T 11894
18、-89TP鉬酸銨分光光度法 GB/T 11894-89CO32-, HCO3-滴定法 GB/T 11893-89Cl-, SO42-, NO3-, NO2-離子色譜法DZ/T 0064.49-93Na+, K+, Ca2+, M g2+, Cu2+, Zn2+, Pb4+, Cd2+原子吸收分光光度法 GB 11907-89監(jiān)測結(jié)果按附錄表二填寫數(shù)據(jù)報表。5.4.4 生物多樣性指標監(jiān)測方法1)樣品采集和保存(1)采樣設(shè)備: 采水器a)顛倒采水器b)卡蓋式采水器 拖網(wǎng):規(guī)格如表3表3. 網(wǎng)具名稱及規(guī)格網(wǎng)具名稱網(wǎng)長(cm)網(wǎng)口內(nèi)徑(cm)網(wǎng)口面積(m2)孔寬近似值( mm)適用對象淺水I型浮游生物
19、網(wǎng)145500.20.5050.507大型浮游動物淺水型浮游生物網(wǎng)14531.60.080.1600.169中、小型浮游動物淺水型浮游生物網(wǎng)140370.10.077浮游植物 水草夾:規(guī)格如表4表4. 水草夾規(guī)格型號網(wǎng)口面積(m2)外形尺寸(cm)(合攏時)外形尺寸(cm)(展開時)適用對象適用范圍(m)CCYQ-20.270×45×6590×45 ×50挺水、浮葉、沉水植物0.520 采泥器a)抓斗式呆泥器:由兩個可活動的瓢瓣構(gòu)成,兩瓣的張口面積為0. l m2。兩顎瓣頂部由一條鐵鏈連接,當(dāng)鐵鏈被掛到鋼絲繩末端的掛鉤上時,兩顎瓣成開放狀態(tài)。采泥器一經(jīng)觸
20、及底泥,掛鉤錘即下垂與鐵鏈脫鉤。當(dāng)采泥器上提時,通過掛鉤對橫梁的拉力,連接麗顎瓣的鋼絲繩拉緊,使兩顎瓣閉合,將沉積物取入。 b) 彈簧采泥器:該采泥器主要靠彈簧作用使左右顎插入沉積物內(nèi)取樣。兩瓣的張口面積為0.1m2。操作時,把采泥器放在木制框架上,將負載板插入導(dǎo)管中,在負載板的下孔中插入鐵銷,上孔中插入一長鐵桿,另外鐵桿下方基架臺放一塊三角鐵。然后,用鐵桿將負載板撬起,左右掛分別鉤住兩顎瓣限動臂上的眼環(huán),使彈簧被壓縮受力。這時再把左右顎瓣臂向上推,使之與釋放桿上的制動栓卡在一起,兩顎瓣即成開放狀態(tài)。當(dāng)采泥器平穩(wěn)地降至底泥時,由兩個啟動板的觸底帶動釋放將導(dǎo)管周圍的環(huán)托起,掛鉤即脫落,在彈簧的作
21、用下顎瓣捕入底質(zhì)內(nèi)。此時,制動栓互相脫離。當(dāng)鋼絲繩上提時,兩瓣閉臺將沉積物取入。c)“大洋-50”型采泥器:結(jié)構(gòu)基本與抓斗式采泥器相同,取樣面積為0.05 m2。適于無動力設(shè)備的小船取樣。(2)樣品采集及保存浮游植物一般只調(diào)查水樣,水樣采集應(yīng)按以下要求進行:a) 用顛倒采水器或卡蓋式采水器或淺水型浮游生物網(wǎng),其使用方法及操作步驟與水質(zhì)項目采樣相同;b) 采樣層次視調(diào)查需要、計劃規(guī)定和濕地水域?qū)嶋H水深而定;c) 水樣采集務(wù)必與水質(zhì)項目的采水同步進行;d) 所需水樣量一般為500 mL;e) 采樣后,應(yīng)及時按每升水樣加6 mL8 mL碘液固定。浮游動物使用拖網(wǎng)采樣,樣品采集應(yīng)按以下要求進行:a)
22、分別用淺水I、型浮游生物網(wǎng)自底至表垂直拖曳采集浮游動物;b) 每次下網(wǎng)前應(yīng)檢查網(wǎng)具有否破損,發(fā)現(xiàn)破損應(yīng)及時修補或更換網(wǎng)衣;檢查網(wǎng)底管和流量計是否處于正常狀態(tài),并把流量計指針撥至指零;放網(wǎng)入水,當(dāng)網(wǎng)口貼近水面時,需調(diào)整計數(shù)器指針于零的位置;網(wǎng)具到達水底后可立即起網(wǎng);c) 把網(wǎng)升至適當(dāng)高度,用沖水設(shè)備自上而下反復(fù)沖洗網(wǎng)衣外表面(切勿使沖洗水進入網(wǎng)口),使粘附于網(wǎng)上的標本集中于網(wǎng)底管內(nèi);將網(wǎng)收于船上,開啟網(wǎng)底管活門,把標本裝入標本瓶,再關(guān)閉網(wǎng)底管活門,用洗耳球吸水沖洗篩絹套,如此反復(fù)多次,直至殘留標本全部收入標本瓶中;d) 按樣品體積的5%,加入甲醛溶液進行固定。挺水植物、浮葉植物以及沉水植物適用水
23、草夾采樣,樣品采集按以下要求進行:a)將水草夾的鐵夾完全打開,投入水中,到達水底后可關(guān)閉鐵夾,勻速上拉;b)將水草夾收入船板之上,打開鐵夾,去除枯死的枝葉及雜質(zhì),放入編號袋中;c)當(dāng)浮葉植物中有個體較小的植物(如紫萍、滿江紅等)時,應(yīng)用帶柄手抄網(wǎng)進行采集,采集時,慢慢地將帶柄手抄網(wǎng)斜插入漂浮植物群叢的下方,等待水面恢復(fù)平靜之后,慢慢提起,待水濾完,去除枯死的枝、葉及雜質(zhì),將樣品裝入采集袋,編號。網(wǎng)具每次使用后要清理,可將網(wǎng)翻過來,用沒有水生植物的湖水進行清洗。底棲動物使用采泥器采樣,樣品采集按以下要求進行:a) 投放:將采泥器掛在掛鉤上,拉緊鋼絲繩,兩顎瓣自動張開。然后將采泥器慢速放至水面,緩
24、慢下降,入水后再快速下降。b) 提升:開始用慢速,離底后改用快中速,接近水面時,再用慢速,將采泥器放在預(yù)先準備好的白鐵盤中。先打開采泥器兩顎瓣上方的活門,然后將活門打開,使土壤樣落入盤中。c) 淘洗及分離樣本:將采到的沉積物樣品移入漩渦分離器中,打開分流器的閥門進水,里用激光水流通過漩渦發(fā)生器攪動樣品,浮選出比重輕的生物,比重大的生物連同余渣沉底。從出水口溢出的水體和生物留到篩子上,將截留在篩網(wǎng)內(nèi)的動物按形態(tài)大小及軟硬程度分別揀入盛水的器皿中,然后按照類別或軟硬分別裝瓶,并注意勿使小動物遺漏。d) 采泥標本一律用5%的甲醛溶液固定保存。微生物樣品采集及保存按以下要求進行:a) 采樣容器:通常采
25、用以耐用玻璃制成的,帶螺旋帽或磨口玻塞的500 mL廣口瓶,也可用適當(dāng)大小、廣口的聚乙烯塑料瓶或聚丙烯耐熱塑料瓶。要求在滅菌和樣品存放期間,該材料不應(yīng)產(chǎn)生和釋放出抑制細菌生存能力或促進繁殖的化學(xué)物質(zhì)。螺旋帽必須配以氯丁橡膠襯墊。b) 采樣瓶的洗滌:一般可用加入洗滌劑的熱水洗刷采樣瓶,用清水沖洗干凈,最后用蒸餾水沖洗l2次。新的采樣瓶必須徹底清洗,先用水和洗滌劑清潔塵埃和包裝物質(zhì),再用鉻酸和硫酸洗滌液洗滌,然后用稀硝酸溶液沖洗,以除去重金屬或鉻酸鹽的殘留物,最后用自來水沖洗干凈,再用蒸餾水淋洗。對于聚乙烯容器,可先用約1 mol/L鹽酸溶液清洗,再依次用稀硝酸溶液浸泡,蒸餾水沖洗干凈。c) 采樣
26、瓶的滅菌:將洗滌干凈的采樣瓶蓋好瓶塞(蓋),用牛皮紙等防潮紙將瓶塞、瓶頂和瓶頸處包裹好,置干燥箱160170干熱滅菌2h,或用高壓蒸汽滅菌器,121經(jīng)15 min滅菌。不能使用加熱滅茵的塑料瓶則應(yīng)浸泡在0.5%的過氧乙酸溶液中l(wèi)0 min或用環(huán)氧乙烷氣體進行低溫滅菌。聚丙烯耐熱塑料瓶,可用121高壓蒸汽滅菌15 min。d) 去氯:采集加氯處理的水樣時,余氯的存在會影響待測水樣在采集時所指示的真正細菌含量,因此須經(jīng)去氯處理。可在洗滌干凈的樣品瓶內(nèi),于滅菌前按500 mL采樣瓶加入0.3 mL 10%Na2S2O3溶液。然后蓋好瓶蓋(塞),如上所述的滅菌方法進行滅菌。當(dāng)被測水樣含有高濃度重金屬時
27、,則須在采樣瓶內(nèi),于滅菌前加入螯合劑以減少金屬毒性,采樣點位置較遠,須長距離運輸?shù)倪@類水樣更為重要??砂?00 mL采樣瓶加入1 mL15%的乙二胺四乙酸二鈉鹽(EDTA-Na2)溶液。e) 采好的水樣,應(yīng)迅速運往實驗室,進行細菌學(xué)檢驗。一般從取樣到檢驗不宜超過2h,否則應(yīng)使用10以下的冷藏設(shè)備保存樣品,但不得超過6h。實驗室接到送檢樣后,應(yīng)將樣品立即放入冰箱,并在2h內(nèi)著手檢驗。如果因路途遙遠,送檢時間超過6h者,則應(yīng)考慮現(xiàn)場檢驗或采用延遲培養(yǎng)法。2)生物多樣性指標監(jiān)測方法 浮游生物a) 浮游生物(包括浮游動物和浮游植物)計數(shù)時,須將標本置入計數(shù)框內(nèi),在顯微鏡下進行計數(shù)。常用計數(shù)框容量有0.
28、1和1 mL兩種。計數(shù)前要將樣品充分搖勻,然后用滴管在水樣中部吸液移入計數(shù)框內(nèi)。移入之前要將蓋玻片斜蓋在計數(shù)框上,樣品按準確定量注入,在計數(shù)框中一邊進樣,另一邊出氣,這樣可避免氣泡產(chǎn)生。注滿后把蓋玻片移正。計數(shù)片子制成后,稍候幾分鐘,讓浮游生物沉至框底,然后計數(shù)。不易下沉到框底的生物,則要另行計數(shù),并加到總數(shù)之內(nèi)。b) 藻類和原生動物的計數(shù):吸取0.1 mL樣品注入0.1 mL計數(shù)框。在10×40或8×40倍顯微鏡下計數(shù),藻類計數(shù)100個視野,原生動物全片計數(shù)。輪蟲則取1 mL注入1 mL計數(shù)框內(nèi),在10×8倍顯微鏡下全片計數(shù)。以上各類均計數(shù)兩片取其平均值。如兩片
29、計數(shù)結(jié)果個數(shù)相差15%以上,則進行第三片計數(shù),取其中個數(shù)相近的兩片平均值。c) 計算(a) 把計數(shù)所得結(jié)果按下式換算成每升水中浮游植物的數(shù)量:式中:N每升水中浮游植物的數(shù)量(個/L); A計數(shù)框面積( mm2); AC計數(shù)面積( mm2),即視野面積×視野數(shù)或長條計數(shù)時長條長度×參與計數(shù)的長條寬度×鏡檢的長條數(shù):VW1L水樣經(jīng)沉淀濃縮后的樣品體積( mL);V計數(shù)框體積( mL);n計數(shù)所得的浮游植物的個體數(shù)或細胞數(shù)。按上述方法進行采樣、濃縮、計數(shù)。A為400 mm2,VW為30 mL,V為0.1 mL,故VW/V=300。(b) 每升內(nèi)某計數(shù)類群浮游動物個體數(shù)N
30、可按下式計算:N=nV1V2V3式中:n計數(shù)所得個體數(shù);V1濃縮樣體積( mL);V2計數(shù)體積( mL);V3采樣量(L)。原水樣中每升內(nèi)浮游動物總數(shù)等于各類群個體數(shù)之和。 底棲動物一般鑒定到科即可,技術(shù)系在鑒定的基礎(chǔ)上進行數(shù)量統(tǒng)計。用采泥器取樣采的底棲動物,應(yīng)該算出每平方米的數(shù)量,生物重量通常以濕重法,用天平,稱出屬、種的重量,每個個體的重量和平均重量。 挺水、浮葉及沉水植物a) 將每個樣方內(nèi)的全部植物鑒定到種,測量植物株高和株重,并記錄。b) 某植物單位面積數(shù)量為所有樣方內(nèi)的植株數(shù)量除以樣方數(shù)目,再乘以植被面積即為該植物的植株總數(shù)量;c) 某植物單位面積數(shù)量乘以株重即為該植物單位面積生物量
31、。 魚類采用專門的捕撈工具進行捕撈,全部魚類要鑒定到種,并統(tǒng)計數(shù)量。測定每尾魚的體重和全長。 鳥類a) 直接計數(shù)法,監(jiān)測以步行為主,在比較開闊、生境均勻的大范圍區(qū)域可借助汽車、船只進行調(diào)查,有條件的地方還可以開展航調(diào);計數(shù)可以借助單筒或雙筒望遠鏡進行,如果群體數(shù)量極大,或群體處于飛行、取食、行走等運動狀態(tài)時,可以5、10、20、50、100等為計數(shù)單元來估計群體的數(shù)量;春秋候鳥遷徙情況的監(jiān)測以種類調(diào)查為主,記錄鳥類遷來的時間、高峰期、居留期、停歇時間、遷離時間以及主要停歇地。b) 在群體密度很高或是難于進行直接技術(shù)的地區(qū)可以采用樣方法,即通過隨機取樣來估計水鳥種群的數(shù)量。樣方大小一般不小于20
32、 m×20 m;同一監(jiān)測區(qū)域的樣方數(shù)量應(yīng)不低于8個,記錄方法同直接計數(shù)法。 兩棲動物、爬行動物等其它獸類動物a) 可采用野外調(diào)查、走訪和利用近期的野生動物調(diào)查資料相結(jié)合的方法,記錄到種和亞種;b) 數(shù)量狀況可用常見、可見、罕見三個等級進行估測;c) 野外調(diào)查也可采用樣方法,通過計數(shù)在設(shè)定的樣方中所見到的動物實體,然后通過頻度分析來推算動物種群數(shù)量的調(diào)查方法,其中樣方盡可能設(shè)置為方形、圓形等規(guī)則幾何圖形,樣方面積不小于100 m×100 m 微生物a) 培養(yǎng)(a) 細菌總數(shù):培養(yǎng)異養(yǎng)細菌采用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,稀釋度為104108,37培養(yǎng)24h,重復(fù)數(shù)為3,平板法計數(shù);(b
33、) 真菌:酵母菌采用馬鈴薯培養(yǎng)基,霉菌采用查氏培養(yǎng)基,稀釋度分別為103106、102105,25培養(yǎng)57天,重復(fù)數(shù)均為3,平板法計數(shù);(c) 放線菌:采用高氏淀粉培養(yǎng)基,稀釋度為101104,25培養(yǎng)7天,重復(fù)數(shù)均為3,平板法計數(shù);(d) 聚磷菌:采用培養(yǎng)基為:無水乙酸鈉5.0g,KH2PO4 0.25g,MgSO4·7H2O培0.5g,CaCl2 0.2g,(NH4)2SO4 2.0g,微量元素1ml,水1000ml,在28,培養(yǎng)天數(shù)為23天,重復(fù)數(shù)3,平板法計數(shù)(e) 亞硝化菌:采用改良斯蒂芬遜(Stephenson)培養(yǎng)基,多管發(fā)酵法培養(yǎng)基,稀釋度為102107,每個稀釋度接
34、種3管,培養(yǎng)溫度為28,培養(yǎng)1014天觀察,MPN法計數(shù);(f) 反硝化菌:采用檸檬酸鈉硝酸鉀培養(yǎng)基,多管發(fā)酵法培養(yǎng)基,稀釋度為103109,重復(fù)數(shù)3,28培養(yǎng)14天后觀察,MPN法計數(shù);(g) 硝化菌采用如下的培養(yǎng)基:NaNO2 1.0g,Na2CO3 1.0g, NaH2PO4 0.25g,CaCO3 1.0g,K2HPO4 0.75g,MnSO4·4H2O 0.01g,MgSO4·7H2O 0.03g,蒸餾水1000ml,pH7.2,在121滅菌30min。稀釋度為102109,每個稀釋度接種3管,培養(yǎng)溫度為28,培養(yǎng)1014天觀察,MPN法計數(shù);(h) 氨化菌采用的
35、培養(yǎng)基:蛋白胨10g,MgSO4 0.5g,K2HPO4 1g,NaCl 0.5g, FeSO4 0.001g,微量元素液 1.0ml(微量元素液:硼酸0.5g,鉬酸鈉0.5g溶于100ml蒸餾水中),蒸餾水1000ml,用10%碳酸鈉調(diào)pH7.27.4,121滅菌20min。稀釋度為102109,每個稀釋度接種3管,培養(yǎng)溫度為28,培養(yǎng)715天觀察,MPN法計數(shù)。操作方法:1)平板法:以無菌操作方法用1 mL滅菌吸管吸取充分混勻的水樣或適宜濃度的稀釋水樣1 mL,注入滅菌平皿中,傾注約15 mL已融化并冷卻到45左右的培養(yǎng)基,并立即旋搖平皿,使水樣與培養(yǎng)基充分混勻。待瓊脂冷卻凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿
36、,使底面向上,置于恒溫箱內(nèi)培養(yǎng);2)MPN法:以無菌操作方法用1 mL滅菌吸管吸取充分混勻的水樣或適宜濃度的稀釋水樣1 mL注入標有不同濃度梯度的試管中,使水樣與培養(yǎng)基充分混勻,放入恒溫箱培養(yǎng)。b) 計數(shù)(a) 平板法培養(yǎng)之后,立即進行平皿菌落計數(shù)。如果計數(shù)必須暫緩進行,平皿需存放于510冰箱內(nèi)。作平皿菌落計數(shù)時,可用菌落計數(shù)器或放大鏡檢查,以防遺漏,在記下各平皿的菌落數(shù)后,應(yīng)求出同稀釋度的平均菌落數(shù)。在求同稀釋度的平均數(shù)時,如果其中一個平皿有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應(yīng)以無片狀菌落生長的平皿作為該稀釋度的菌落數(shù)。若片狀菌落不到平皿的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,則可將此半皿計數(shù)
37、后乘以2代表全皿菌落數(shù),然后再求該稀釋度的平均菌落數(shù)。對那些看來相似,距離相近但卻不相觸的菌落,只要它們之間的距離不小于最小菌落的直徑,便應(yīng)一一予以計數(shù)。那些緊密接觸而外觀(例如形態(tài)或顏色)相異的菌落,也應(yīng)該一一予以計數(shù)。微生物總數(shù)以每個平皿菌落的總數(shù)或平均數(shù)乘以稀釋倍數(shù)而得出。(b) MPN法根據(jù)各種菌種的檢查方法依次鑒定是否為陽性,以出現(xiàn)陽性結(jié)果的數(shù)目從MPN表中查得相應(yīng)的MPN指數(shù),從而計算各菌種的MPN值。監(jiān)測結(jié)果按附錄表三、表四、表五及表六填寫數(shù)據(jù)報表。6. 評價技術(shù)與方法6.1 水質(zhì)質(zhì)量評價1)評價方法:單因子評價指數(shù)法2)單因子評價指數(shù)計算公式:Pi= CiCio式中:Pi某污染
38、因子的污染指數(shù)即單因子污染指數(shù);Ci某污染因子的實測濃度;Cio某污染因子的評價標準。3)水質(zhì)指標評價標準依據(jù)為地表水環(huán)境質(zhì)量標準( GB 3838-2002)。6.2 土壤質(zhì)量評價1)評價方法:單因子評價指數(shù)法2)單因子評價指數(shù)計算公式:Pi= CiCio式中:Pi某污染因子的污染指數(shù)即單因子污染指數(shù);Ci某污染因子的實測濃度;Cio某污染因子的評價標準。3)土壤指標評價標準依據(jù)為土壤環(huán)境質(zhì)量標準( GB15618-1995)6.3 生物多樣性評價1)評價方法:生物多樣性指數(shù)法2)生物多樣性指數(shù)計算公式:H = -i=1sPilo g2Pi式中:H植物的種類多樣性指標;S植物種類數(shù);Pi種的
39、個體數(shù)與總個體數(shù)的比值。6.4 濕地面積退化評價濕地面積退化以退化率來表示,即減少的面積占原始面積的百分比,計算公式:e=S-S'S×100%式中:e濕地退化率;S濕地現(xiàn)有面積;S濕地原始面積。6.5 植被現(xiàn)狀與趨勢評價1)植被面積變化趨勢;2)植被利用和破壞情況;3)植物種類數(shù)量變化趨勢,有無外來物種分布。6.6 濕地生態(tài)綜合評價濕地生態(tài)綜合評價采用綜合指數(shù)法,選取多樣性、代表性、稀有性、自然性、適宜性和生存威脅六項標準作為一級標準,并各自分解成多層次的下一級指標,構(gòu)成濕地生態(tài)綜合評價的指標體系。邀請多位相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域的專家直接對指標的權(quán)重進行評分,然后統(tǒng)計平均值和均方差綜合各位專家的意見,再將統(tǒng)計結(jié)果反饋給各位專家進行咨詢,最后確定各指標的權(quán)重。表5 濕地生態(tài)綜合評價指標一級指標二級指標三級指標多樣性物種多樣性-生境多樣性-代表性-稀有性物種瀕危程度-物種地區(qū)分布情況-生境稀有性-自然性-適宜性面積適應(yīng)性-植被覆蓋度-水質(zhì)條件-水體鹽度-生存威脅穩(wěn)定性物種生活力種群穩(wěn)定性生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性人類威脅直接威脅間接威脅濕地生態(tài)綜合評價以100分為滿分,對每個子體系中最低一級的評價指標進行分極化處理并賦值標準,然后可以根據(jù)濕地生態(tài)的實際監(jiān)測和調(diào)查結(jié)果對照賦值標準逐項打分,將各級評價指標所得分數(shù)累加,即得到濕地生態(tài)評
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