細(xì)胞分子生物學(xué)基礎(chǔ)

1、細(xì) 胞 分 子 生 物 學(xué)第一章1、細(xì)胞學(xué)說(shuō)：德國(guó)植物學(xué)家M.J.Schleidon(1838)和動(dòng)物學(xué)家T.Schwann(1839)根據(jù)前人的工作和自己的研究成果，結(jié)論性地提出關(guān)于生物結(jié)構(gòu)的學(xué)說(shuō)，主張：一切生物都是由一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞構(gòu)成；細(xì)胞是生命的結(jié)構(gòu)單位；細(xì)胞只能由細(xì)胞分裂而來(lái)。第二章1、福爾根反應(yīng)的原理：由Feulgen和Rossenbeck (1924)發(fā)明，對(duì)DNA的反應(yīng)具有高度專(zhuān)一性。其原理是: 標(biāo)本經(jīng)稀鹽酸水解后，DNA分子中的嘌呤堿基被解離，從而在核糖的一端出現(xiàn)了醛基。Schiff試劑中的無(wú)色品紅與醛基反應(yīng)，形成含有醌基的化合物，醌基為發(fā)色團(tuán)，呈現(xiàn)出紫紅色。2、免疫細(xì)胞化學(xué)的

2、原理：免疫細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)免疫學(xué)原理，利用抗體同特定抗原結(jié)合，對(duì)抗原進(jìn)行專(zhuān)一定位測(cè)定的技術(shù)。 如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。3、免疫熒光技術(shù)：如果將抗體結(jié)合上標(biāo)記物，再與組織中的抗原發(fā)生反應(yīng)，即可在光鏡或電鏡下顯示出該抗原存在于組織中的部位。標(biāo)記熒光素的稱(chēng)為免疫熒光法(immunofluorescent technique)，常用的螢光素有異硫氰酸熒光素(FITC)、羅丹明(rhodamine)等。 4、放射自顯影技術(shù)：放射性同位素發(fā)射出的各種射線能使照相乳膠中的溴化銀晶體還原(感光) 。利用放射性物質(zhì)使照相乳膠膜產(chǎn)生該物質(zhì)自

3、身影像的技術(shù)，稱(chēng)為放射自顯影術(shù)。 5、細(xì)胞培養(yǎng)、原代培養(yǎng)、細(xì)胞株的概念： 細(xì)胞培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(cell culture)或稱(chēng)組織培養(yǎng)技術(shù)即是選用各種最佳生存條件對(duì)活細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)和研究的技術(shù)。原代培養(yǎng)：從動(dòng)物機(jī)體取出的進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞群。原代培養(yǎng)的細(xì)胞生長(zhǎng)比較緩慢，而且繁殖一定的代數(shù)后（一般10代以?xún)?nèi)）停止生長(zhǎng)，需要從更換培養(yǎng)基。 細(xì)胞株：從原代培養(yǎng)細(xì)胞群中篩選出的具有特定性質(zhì)或標(biāo)志的細(xì)胞群，能夠繁殖50代左右，在培養(yǎng)過(guò)程中其特征始終保持。 6、細(xì)胞融合的方法：真核細(xì)胞通過(guò)介導(dǎo)和培養(yǎng)，兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞合并成一個(gè)雙核或多核細(xì)胞的過(guò)程稱(chēng)為細(xì)胞融合(cell fusion)或細(xì)胞雜交(cell hyb

4、ridization)。 目前誘導(dǎo)細(xì)胞融合的方法有三種：1. 病毒介導(dǎo)的細(xì)胞融合（如仙臺(tái)病毒） 2. 化學(xué)介導(dǎo)的細(xì)胞融合（如PEG） 3. 電激介導(dǎo)的細(xì)胞融合第三章1、細(xì)胞進(jìn)行生命活動(dòng)的應(yīng)具備的最基本的要素：（1) 具有一套基因組； (2) 具有一層細(xì)胞質(zhì)膜； (3) 具有一套完整的代謝機(jī)構(gòu)。2、細(xì)胞區(qū)別于無(wú)機(jī)界的最主要的特征： 在結(jié)構(gòu)上具有自我裝配的能力； 在生理活動(dòng)中具有自我調(diào)節(jié)的能力； 2 / 29 在增殖上具有自我復(fù)制的能力。3、原核細(xì)胞與真核細(xì)胞的主要區(qū)別：要 點(diǎn)原 核 細(xì) 胞真 核 細(xì) 胞大小大多數(shù)很?。?10）大多數(shù)較大（10100）細(xì)胞核 無(wú)膜包圍，稱(chēng)為擬核有雙層膜包圍染色體形

5、狀數(shù)目組成DNA序列環(huán)狀DNA分子一個(gè)基因連鎖群DNA裸露或結(jié)合少量蛋白質(zhì)無(wú)或很少重復(fù)序列核中的為線性DNA分子; 線粒體和葉綠體中的為環(huán)狀DNA分子兩個(gè)或多個(gè)基因連鎖群核DNA同組蛋白結(jié)合; 線粒體和葉綠體中的DNA裸露有重復(fù)序列運(yùn)動(dòng)細(xì)胞器由鞭毛蛋白絲構(gòu)成簡(jiǎn)單鞭毛由微管構(gòu)成鞭毛和纖毛細(xì)胞壁肽聚糖、蛋白質(zhì)、脂多糖、脂蛋白植物細(xì)胞具有纖維素壁營(yíng)養(yǎng)方式吸收，有的行光合作用吸收、光合作用、內(nèi)吞基因表達(dá) RNA和蛋白質(zhì)在同一區(qū)間合成RNA在核中合成和加工; 蛋白質(zhì)在細(xì)胞質(zhì)中合成細(xì)胞分裂二分或出芽有絲分裂或減數(shù)分裂內(nèi) 膜無(wú)獨(dú)立的內(nèi)膜有, 分化成細(xì)胞器細(xì)胞骨架無(wú)普遍存在呼吸作用和光合作用酶的分部質(zhì) 膜線粒

6、體和葉綠體（植物）核糖體70S（50S30S）80S（60S40S）4、朊病毒：1982年S.B. Prusiner在患羊搔癢病的羊體內(nèi)發(fā)現(xiàn)了一種蛋白質(zhì)因子，是羊搔癢病的致病因子，它將其命名為prion(pr, protein; i, infectious; on, 基本單位)。蛋白質(zhì)感染因子)，也有人譯為朊病毒。5、核酶： RNA催化劑，具有催化性能的RNA。第四章1、流動(dòng)鑲嵌模型如何描述細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)：脂類(lèi)雙分子層構(gòu)成了膜的網(wǎng)架，脂類(lèi)分子在膜中的位置并非固定不變，具有動(dòng)態(tài)流動(dòng)性；蛋白質(zhì)分子不同程度地鑲嵌在脂雙層網(wǎng)架中，根據(jù)鑲嵌程度不同可將膜蛋白分為膜整合蛋白和邊周蛋白。整合蛋白靠-螺旋或

7、1538;-折疊構(gòu)象插入到脂雙層中，而邊周蛋白靠化學(xué)鍵或吸附結(jié)合到膜的內(nèi)表面或外表面。膜蛋白在膜中的位置并非固定不變，也具有動(dòng)態(tài)流動(dòng)性。2、支持細(xì)胞膜流動(dòng)性的實(shí)驗(yàn)： （怎么證明的）（1）.細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)； （2）.淋巴細(xì)胞的成斑和成帽反應(yīng)； （3）.凝集素的凝集作用。3、質(zhì)膜的特征： （1）流動(dòng)性； (2) 鑲嵌性； （3）不對(duì)稱(chēng)性； （4）蛋白質(zhì)極性4、脂質(zhì)體的概念：脂質(zhì)體（liposome）是一種人工膜。在水中磷脂分子親水頭部插入水中，疏水尾部伸向空氣，攪動(dòng)后形成雙層脂分子的球形脂質(zhì)體，直徑251000nm不等。脂質(zhì)體可用于轉(zhuǎn)基因，或制備的藥物，利用脂質(zhì)體可以和細(xì)胞膜融合的特點(diǎn)，將藥物送入細(xì)

8、胞內(nèi)部。5、質(zhì)膜的物質(zhì)運(yùn)輸一節(jié)：第五章1、蛋白質(zhì)降解的泛素依賴(lài)性途徑：2、微粒體：微粒體不是細(xì)胞內(nèi)的一種固有結(jié)構(gòu), 而是細(xì)胞勻漿在差速離心過(guò)程中所分離出的一種膜泡成分, 它由內(nèi)膜系統(tǒng)中各組分的膜斷片自然卷曲而成，如內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基復(fù)合體的膜等。 3、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的功能：粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：1. 蛋白質(zhì)的合成 2. 蛋白質(zhì)的修飾與加工3. 膜的生成 4. 物質(zhì)的運(yùn)輸 5. 貯積鈣離子滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)：1. 脂類(lèi)的合成 2. 解毒作用 3. 糖原代謝4、核糖體與蛋白質(zhì)合成有關(guān)的活性位點(diǎn)：A位點(diǎn)(氨?；稽c(diǎn))：亦稱(chēng)氨基酸受位, 位于大亞單位上, 為接受新氨酰-tRNA的結(jié)合位點(diǎn)；P位點(diǎn)(肽酰基位點(diǎn))：亦稱(chēng)

9、肽基部位或釋放部位, 位于小亞單位上, 為延伸中肽酰-tRNA的結(jié)合位點(diǎn)；E位點(diǎn)：于大亞單位上, 肽基轉(zhuǎn)移后將釋放的tRNA的位點(diǎn)；T因子（肽基轉(zhuǎn)移酶的催化位點(diǎn)）：于小亞單位上, 可催化氨基酸間形成肽鍵；G因子（GTP酶結(jié)合位點(diǎn)）：EF-G結(jié)合位點(diǎn)，有GTP酶活性，可催化肽酰-tRNA從A位點(diǎn)轉(zhuǎn)移到P位點(diǎn)，促使肽鏈延伸；mRNA結(jié)合部位：于小亞單位上，16S rRNA的3端有一段序列能識(shí)別并結(jié)合mRNA的起始端。5、核糖體的成分：6、蛋白質(zhì)的合成定位與合成后去向：（一）蛋白質(zhì)合成的定位： 一類(lèi)是由細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)內(nèi)游離核糖體合成的蛋白質(zhì)：其從核糖體上合成后釋放出來(lái)再行轉(zhuǎn)運(yùn)，為翻譯后轉(zhuǎn)移 ! 另一類(lèi)是

10、由附著在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的核糖體合成的蛋白質(zhì)：其合成與轉(zhuǎn)運(yùn)同時(shí)進(jìn)行，此運(yùn)轉(zhuǎn)方式稱(chēng)為共翻譯轉(zhuǎn)移 !（二）蛋白質(zhì)合成后的去向： 游離核糖體上合成的蛋白質(zhì)：(1) 非定位性的細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)蛋白：駐留在細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)中； (2) 定位性的細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)蛋白：定位于細(xì)胞質(zhì)的特定位置，如中心粒和中心粒周物質(zhì)； (3) 核定位蛋白； (4) 半自主性細(xì)胞器組成蛋白。 糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上核糖體所合成的蛋白質(zhì)：(1) 運(yùn)往細(xì)胞外的分泌蛋白； (2) 進(jìn)入溶酶體腔形成溶酶體酶等； (3) 留在或運(yùn)回RER腔中的網(wǎng)質(zhì)蛋白; (4) 插入到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中，并隨膜流進(jìn)入內(nèi)膜系統(tǒng)各區(qū)和質(zhì)膜，形成它們的結(jié)構(gòu)成分。7、信號(hào)學(xué)說(shuō)：信號(hào)假說(shuō)認(rèn)為，分泌蛋白、溶

11、酶體蛋白和膜整合蛋白的翻譯穿膜活動(dòng)同以下幾種因素有關(guān)：(1)、信號(hào)肽（由信號(hào)密碼子編碼）：為分泌蛋白編碼的mRNA普遍帶有信號(hào)序列，即mRNA核苷酸鏈在緊接起始密碼子之后有一段編碼疏水性氨基酸的序列，稱(chēng)為信號(hào)密碼子。信號(hào)密碼子序列的翻譯產(chǎn)物是信號(hào)肽(signal peptide)，長(zhǎng)度為1030個(gè)氨基酸不等。 (2)、信號(hào)識(shí)別顆粒 / 信號(hào)識(shí)別顆粒受體：在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中存在著一種蛋白質(zhì)翻譯耦聯(lián)易位系統(tǒng)，它與合成分泌蛋白的核糖體結(jié)合到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上密切相關(guān)。已發(fā)現(xiàn)在這個(gè)系統(tǒng)中有兩種成分：信號(hào)識(shí)別顆粒 (signal recognition particle, SRP)和信號(hào)識(shí)別顆粒受體(SRP

12、receptor)。SRP存在于細(xì)胞質(zhì)中，它的一端分別有與多肽鏈上信號(hào)肽結(jié)合的部位以及與SRP受體結(jié)合的部位；另一端則可與核糖體(A site)結(jié)合。SRP受體實(shí)際上是插在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的一種停泊蛋白(docking protein, DP)，由嵌入膜內(nèi)的疏水部分和暴露于細(xì)胞質(zhì)的親水部分兩部分組成。 (3)、核糖體受體（核糖體親和蛋白）：在RER膜上還存在有核糖體受體，為插在RER膜上的一種整合蛋白。核糖體通過(guò)與核糖體受體結(jié)合而結(jié)合到RER膜上。 核糖體與核糖體受體結(jié)合后，SRP與SRP受體脫離， SRP參與再循環(huán)。肽鏈合成又可繼續(xù)進(jìn)行。(4)、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)通道 / 信號(hào)肽引導(dǎo)新生肽鏈穿過(guò)通道：

13、信號(hào)肽穿膜并整合到RER膜上，介導(dǎo)新生肽鏈沿蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)體穿膜進(jìn)入RER腔內(nèi)。(5)、信號(hào)肽酶（合成結(jié)束后切除信號(hào)肽）：ER膜內(nèi)表面的信號(hào)肽酶將信號(hào)肽切除，使整個(gè)肽鏈游離于RER腔中。8、分子伴侶的概念： 凡是能夠促進(jìn)其它蛋白質(zhì)正確折疊和組裝的一類(lèi)蛋白質(zhì)分子統(tǒng)稱(chēng)為分子伴侶。 9、可溶性蛋白的合成與轉(zhuǎn)移：1) 多肽鏈合成的起始：游離核糖體上，起始因子協(xié)助；2) 多肽鏈合成的延伸：肽鍵形成，延伸因子協(xié)助；3) 暴露出N-端信號(hào)肽，1530個(gè)疏水性氨基酸組成；4) 信號(hào)識(shí)別顆粒：與信號(hào)肽和核糖體結(jié)合，牽引核糖體移向RER；5) RER膜上有跨膜的核糖體受體：結(jié)合核糖體，將核糖體固定在RER膜上；6)

14、信號(hào)識(shí)別顆粒被釋放：釋放后的信號(hào)識(shí)別顆粒參與再循環(huán)，核糖體繼續(xù)合成多肽鏈；7) 信號(hào)肽引發(fā)RER膜上的通道開(kāi)放，使新生肽鏈穿膜進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔；8) 糖基化修飾：預(yù)先合成好的寡糖鏈經(jīng)焦磷酸鍵連在跨膜的磷酸多萜醇上；ASN，一次性轉(zhuǎn)移，N-連接寡糖鏈分核心區(qū)與末端區(qū)； 9) 肽鏈合成結(jié)束后，信號(hào)肽為信號(hào)肽酶切除； 10) 修飾好的新生蛋白以膜泡形式被運(yùn)往Golgi 復(fù)合體；11) 在Golgi 復(fù)合體上繼續(xù)進(jìn)行糖基化修飾，切去末端區(qū)，由順面至反面依次逐個(gè)添加新糖基，一般為O-連接寡糖，最末一個(gè)往往是唾液酸； 12) 反面Golgi網(wǎng)膜上分泌蛋白被包裝到分泌泡中；13) 含有分泌蛋白的分泌泡被運(yùn)往質(zhì)膜

15、，經(jīng)與膜融合被分泌到細(xì)胞外。10、膜整合蛋白的定位機(jī)制：1) 膜整合蛋白是來(lái)自糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上核糖體所合成的蛋白質(zhì)，有些合成后嵌入到膜中成為跨膜蛋白，其肽鏈中一些片段穿過(guò)脂雙層，而另外的一些則保留在膜中。2) 具有單一跨膜片段的跨膜蛋白，像可溶性蛋白一樣，轉(zhuǎn)移的開(kāi)始，由肽鏈氨基末端的信號(hào)肽序列發(fā)動(dòng)。但是，這一轉(zhuǎn)移過(guò)程被肽鏈中的另一段疏水氨基酸序列所阻斷，使肽鏈不能再繼續(xù)進(jìn)入膜中。這第二個(gè)疏水氨基酸片段就稱(chēng)為停止-轉(zhuǎn)移序列(stop-transfer sequence)，此序列在進(jìn)入轉(zhuǎn)移通道后即被釋放，從轉(zhuǎn)移通道橫移到脂雙層中，并形成一個(gè)a螺旋狀的跨膜片段，把蛋白質(zhì)鎖定在膜內(nèi)。同時(shí)，氨基端的信號(hào)序列

16、也從通道釋放到脂雙層內(nèi)并被切除。結(jié)果，轉(zhuǎn)移的蛋白質(zhì)便被作為一個(gè)跨膜蛋白定向插入膜中。3) 有些跨膜蛋白，是由一個(gè)內(nèi)部信號(hào)序列而不是氨基末端的信號(hào)信序來(lái)起動(dòng)轉(zhuǎn)移，但這些內(nèi)部信號(hào)序列并不被切除。這些跨膜蛋白中的這種組成形式使肽鏈來(lái)回反復(fù)穿過(guò)脂雙層。這種情況下，疏水的信號(hào)序列是成對(duì)行動(dòng)，一個(gè)內(nèi)部信號(hào)序列用來(lái)起始轉(zhuǎn)移，另一個(gè)是停止轉(zhuǎn)移序。起始轉(zhuǎn)移序列與轉(zhuǎn)移器結(jié)合后，一直等到一個(gè)停止轉(zhuǎn)移序列進(jìn)入轉(zhuǎn)移器時(shí)，這兩個(gè)a螺旋的疏水序列才被釋放到脂雙層中，形成兩次穿膜的跨膜蛋白。4) 在多次穿膜蛋白中有更多成對(duì)的起始和停止轉(zhuǎn)移序列在起作用，多個(gè)疏水的a螺旋橫跨脂雙層。如此往返穿梭，使跨膜蛋白在合成完成之前，多次橫

17、移入膜，成為多次跨膜蛋白。插入到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜中的蛋白，隨膜流進(jìn)入內(nèi)膜系統(tǒng)各區(qū)和質(zhì)膜，形成它們的的組構(gòu)成分。第六章1、高爾基復(fù)合體的結(jié)構(gòu)及其極性：結(jié)構(gòu)：高爾基復(fù)合體由光滑膜構(gòu)成。在三維空間上，由一摞封閉的緊密疊置在一起的碟形膜圍扁囊構(gòu)成。其最基本的成分就是由膜圍成的扁囊，這種充滿(mǎn)液體的扁囊稱(chēng)為潴泡(cisternae)，渚泡的直徑約為1mm，上有窗孔；潴泡成摞存在，潴泡與潴泡之間的距離僅為2530nm，潴泡的邊緣部分有許多大小不等的表面光滑的分枝狀小管和圓泡。成摞存在的潴泡組成了分散高爾基體(dictyosome)。分散的高爾基體構(gòu)成了高爾基復(fù)合體的主體結(jié)構(gòu)，若干個(gè)分散的高爾基體相互連接成復(fù)雜的網(wǎng)狀

18、, 便組成了高爾基復(fù)合體(Golgi complex)。極性：分散的高爾基體本身在結(jié)構(gòu)上具有極性，它多呈弓形，亦有的呈半球形或球形。在近核的一側(cè), 潴泡彎曲呈凸面，稱(chēng)為形成面(forming face)，又稱(chēng)順面(Cis面)，膜較薄, 只有6nm，且“暗-明-暗”三層式的單位膜結(jié)構(gòu)不明顯。在遠(yuǎn)核的一側(cè)，渚泡呈凹面，稱(chēng)為成熟面(maturing face)，又稱(chēng)反面(Trans面)，膜較厚，約為10nm，并具有典型的單位膜結(jié)構(gòu)，似質(zhì)膜。隨著由形成面向成熟面逐漸分化，膜的厚度逐漸增加。位于形成面和成熟面之間的幾個(gè)潴泡稱(chēng)為中間潴泡，由扁囊和管道組成，其膜的厚度也介于形成面和成熟面之間。2、高爾基復(fù)合

19、體各部潴泡的細(xì)胞化學(xué)反應(yīng)區(qū)： 嗜鋨反應(yīng)區(qū)：順面12個(gè)潴泡(的標(biāo)志反應(yīng))； NADP酶反應(yīng)區(qū)：中間幾層潴泡(的標(biāo)志反應(yīng))； 胞嘧啶單核苷酸酶( CMP酶)反應(yīng)區(qū)：近成熟面的一些潴泡和管狀結(jié)構(gòu)(的標(biāo)志反應(yīng)) (CMP酶也是溶酶體的標(biāo)志酶：溶酶體的形成部位)。 硫胺素焦磷酸酶(TPP酶)反應(yīng)區(qū)：反面12個(gè)潴泡(的標(biāo)志反應(yīng))。3、高爾基復(fù)合體的功能： 形成和包裝分泌物 蛋白質(zhì)和脂類(lèi)的糖基化 蛋白質(zhì)的加工改造 細(xì)胞內(nèi)的膜泡運(yùn)輸 膜的轉(zhuǎn)化4、蛋白質(zhì)糖基化類(lèi)型及其功能：類(lèi)型：N-連接、O-連接功能：保護(hù)蛋白質(zhì)：不被水解酶降解；起運(yùn)輸信號(hào)作用：引導(dǎo)蛋白質(zhì)被包裝進(jìn)運(yùn)輸泡，抵達(dá)目的細(xì)胞器；在細(xì)胞表面形成糖萼：細(xì)胞

20、識(shí)別，保護(hù)質(zhì)膜。第七章1、溶酶體的基本特性：?jiǎn)螌幽ぐ鼑?多種酸性水解酶； 異質(zhì)性囊泡狀。2、溶酶體的功能：（1）細(xì)胞內(nèi)消化（通過(guò)內(nèi)吞作用）（2）防御功能（3）細(xì)胞內(nèi)衰老和多余細(xì)胞器的清除(通過(guò)自體吞噬作用）（4）發(fā)育過(guò)程中細(xì)胞的清除功能-自溶作用（5）受精中的功能3、溶酶體與疾病：目前已知的與溶酶體有關(guān)的疾病有30余種:（1）肺結(jié)核：結(jié)核桿菌蠟質(zhì)外被(2）矽肺：SiO2顆粒硅酸肺組織彈性呼吸功能（3）貯積?。憾酁橄忍煨匀苊阁w酶缺失和異常（4）類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎：膜脆性釋酶到關(guān)節(jié)處侵蝕骨組織炎癥（5）型肝糖病(glycogenosis)：缺少a -糖苷酶無(wú)法把糖原降解為葡萄糖，造成糖原在溶酶體內(nèi)大量

21、積累（6）黑蒙性先天愚型病(Tay-Sachs disease)：溶酶體中缺少b-氨基己糖酯酶，不能降解神經(jīng)節(jié)苷脂，而呈同心圓狀被貯積在溶酶體中；如果發(fā)生在神經(jīng)細(xì)胞中，便造成精神癡呆, 26歲會(huì)死亡4、微體的概念與溶酶體的比較：微體(microbody)專(zhuān)指含有氧化酶、過(guò)氧化物酶，或過(guò)氧化氫酶活性的細(xì)胞器特 征溶 酶 體微 體 體形態(tài)大小多呈球形, F0.20.5mm,無(wú)酶晶體球形, F0.150.25mm,有酶晶體酶的種類(lèi)酸性水解酶氧化酶類(lèi)pH 值5.07.0需氧與否不需要需要功 能細(xì)胞內(nèi)消化主要與糖異生有關(guān)發(fā) 生酶在RER上合成,經(jīng)Golgi體出芽形成酶在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中合成,經(jīng)分裂和組裝形成

22、標(biāo) 志 酶酸性水解酶過(guò)氧化氫酶5、溶酶體酶是如何合成并傳輸至溶酶體的：(1) 多肽鏈合成的起始：細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中，在起始因子協(xié)助下，mRNA、核糖體小亞單位與Met-tRNA形成翻譯起始復(fù)合物；(2) 多肽鏈合成的延伸：在延伸因子協(xié)助下，新肽鍵形成，肽鏈延長(zhǎng)；(3) 肽鏈延長(zhǎng)至一定長(zhǎng)度（ 50-70個(gè)氨基酸），暴露出由1530個(gè)疏水性氨基酸組成的N-端信號(hào)肽；(4) 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的信號(hào)識(shí)別顆粒（SRP），靠特異性結(jié)合位點(diǎn)分別與信號(hào)肽和核糖體A位結(jié)合，肽鏈合成暫停，并牽引核糖體移向RER；(5) RER膜上的SRP受體特異性結(jié)合SRP ，將核糖體定位至RER膜上；(6) RER膜上的核糖體受體特異性

23、結(jié)合核糖體 ，將核糖體固定在RER膜上 ；(7) 信號(hào)識(shí)別顆粒從信號(hào)肽、核糖體A位和SRP受體釋放出來(lái)，參與再循環(huán)利用，核糖體重新開(kāi)始肽鏈合成；(8) 信號(hào)肽引發(fā)RER膜上的蛋白質(zhì)通道開(kāi)放，插入至一通道中，使新生肽鏈邊合成邊經(jīng)另一通道穿膜進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔；(9) 糖基化修飾：預(yù)先合成好的寡糖鏈經(jīng)焦磷酸鍵連在跨膜的磷酸多萜醇上；一旦出現(xiàn)Asn時(shí)，便可利用焦磷酸鍵的能量將寡糖鏈一次性轉(zhuǎn)移至Asn的-NH2上，形成N-連接寡糖鏈（核心區(qū)與末端區(qū)；(10) 遇到終止密碼子后，在釋放因子的協(xié)助下，肽鏈合成結(jié)束，核糖體解離成大、小亞單位，從RER膜脫離至細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中；(11) 信號(hào)肽被RER腔的信號(hào)肽酶切除，

24、新生肽鏈游離于RER腔中；(12) 新生蛋白以膜泡（有被小泡）形式被運(yùn)往Golgi 復(fù)合體；(13) 在Golgi 復(fù)合體上繼續(xù)進(jìn)行糖基化修飾，切去末端區(qū) ，由順面至反面依次在核心區(qū)寡糖鏈上逐個(gè)添加新的糖基，最末一個(gè)一般是唾液酸 ；某些溶酶體酶還會(huì)發(fā)生乙酰化或羥基化等加工修飾；(14) Golgi復(fù)合體的順面潴泡中GlcNAc磷酸轉(zhuǎn)移酶可特異性識(shí)別溶酶體酶的信號(hào)斑，并催化其寡糖鏈上的甘露糖殘基發(fā)生磷酸化形成了甘露糖-6-磷酸（M6P）；(15) Golgi復(fù)合體反面潴泡和網(wǎng)膜上的M6P受體與M6P特異性結(jié)合，便可把溶酶體酶從其它蛋白中分揀出來(lái)，局部濃縮后以出芽方式被包裝成有被小泡；(16) 有

25、被小泡與內(nèi)體融合，在酸性環(huán)境下, M6P受體與M6P分離，重新返回到高爾基復(fù)合體反面，再去參與其它溶酶體酶的分揀及溶酶體的形成；(17) 載有溶酶體酶的膜泡與溶酶體融合，溶酶體酶進(jìn)入溶酶體中，M6P去磷酸化。第八章1、細(xì)胞骨架：細(xì)胞骨架（cytoskeleton）是指真核細(xì)胞中的蛋白纖維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)2、微絲、微管的組裝特點(diǎn)及其特異性藥物：微絲（microfilament，MF）是由肌動(dòng)蛋白(actin)組成的直徑約7nm的實(shí)心骨架纖維，又稱(chēng)肌動(dòng)蛋白纖維actin filament,它可以成束、成網(wǎng)或以纖維狀分散存在。微絲組裝特點(diǎn)： 在適宜的溫度，存在ATP、K+、Mg2+離子的條件下，肌動(dòng)蛋白單體

26、可自組裝為纖維。 微絲組裝分為兩個(gè)階段：種子形成（成核）和延長(zhǎng)階段。G-actin的二聚體不穩(wěn)定，三聚體時(shí)穩(wěn)定，成為種子。 延長(zhǎng)階段：ATP-actin（結(jié)合ATP的肌動(dòng)蛋白)對(duì)微絲纖維末端的親和力高，ADP-actin對(duì)纖維末端的親和力低，容易脫落。當(dāng)溶液中ATP-actin濃度高時(shí)，微絲快速生長(zhǎng)，在微絲纖維的兩端形成ATP-actin“帽子”，這樣的微絲有較高的穩(wěn)定性。伴隨著ATP水解，微絲結(jié)合的ATP就變成了ADP，當(dāng)ADP-actin暴露出來(lái)后，微絲就開(kāi)始去組裝而變短。微絲特異性藥物：細(xì)胞松弛素（cytochalasin）可切斷微絲纖維，并結(jié)合在微絲末端抑制肌動(dòng)蛋白加合到微絲纖維上，特

27、異性的抑制微絲功能。鬼筆環(huán)肽（phalloidin）與微絲能夠特異性的結(jié)合，使微絲纖維穩(wěn)定而抑制其功能。熒光標(biāo)記的鬼筆環(huán)肽可特異性的顯示微絲。微管(microtubule, MT) 由13條原纖維（protofilament）構(gòu)成的中空管狀結(jié)構(gòu),每一條原纖維由微管蛋白二聚體線性排列而成。微管的成分是微管蛋白（a-微管蛋白、b-微管蛋白）。微管的特性：自我裝配、微管組織中心、極性、動(dòng)態(tài)不穩(wěn)定性微管的特異性藥物：抑制微管組裝：秋水仙素、秋水酰胺、鬼臼素、長(zhǎng)春花堿、美登本、氯丙榛、1-苯胺基-8-磺酸萘 穩(wěn)定微管的藥物：紫杉酚、重水3、微絲、微管的功能：微絲的功能：（1）肌肉收縮 （2）胞質(zhì)環(huán)流 （

28、3）變形運(yùn)動(dòng)（4）形成微絨毛 （5）形成應(yīng)力纖維 （6）胞質(zhì)分裂微管的功能：（1）支持和維持細(xì)胞的形態(tài) （2）細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸 （3) 細(xì)胞運(yùn)動(dòng) （4）紡錘體與染色體運(yùn)動(dòng)（5）植物細(xì)胞壁形成 （6）纖毛和鞭毛運(yùn)動(dòng)4、微管構(gòu)成的細(xì)胞器： 中心體、纖毛和鞭毛、有絲分裂器、軸足第九章1、線粒體超微結(jié)構(gòu)：線粒體的三維結(jié)構(gòu)：外膜、膜間隙、內(nèi)膜和基質(zhì)2、線粒體酶的定位：部 位酶 的 名 稱(chēng)外 膜單胺氧化酶*犬尿氨酸羧化酶 NADH-細(xì)胞色素c還原酶脂肪酸輔酶A連接酶膜 間 隙腺苷酸激酶*核苷二磷酸激酶內(nèi) 膜細(xì)胞色素氧化酶*ATP合成酶NADH脫氫酶 b-羥丁酸脫氫酶 琥珀酸脫氫酶等呼吸鏈酶系丙酮酸氧化酶肉毒

29、堿脂肪酸?；D(zhuǎn)移酶b-羥丙酸脫氫酶線粒體基質(zhì)蘋(píng)果酸脫氫酶*脂肪酸氧化酶系 蛋白質(zhì)和核酸合成酶系谷氨酸脫氫酶檸檬酸循環(huán)酶系3、電子傳遞與氧化磷酸化及其偶聯(lián)機(jī)制：4、線粒體的半自主性：半自主性細(xì)胞器的概念： 自身含有遺傳表達(dá)系統(tǒng)(自主性)；但編碼 的遺傳信息十分有限，其RNA轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)翻譯、 自身構(gòu)建和功能發(fā)揮等必須依賴(lài)核基因組編碼的遺傳信息(自主性有限)。線粒體的生長(zhǎng)和增殖是受核基因組和線粒體基因組兩套遺傳系統(tǒng)的共同控制半自主性的細(xì)胞器。5、細(xì)胞內(nèi)各種膜與細(xì)胞器的特征性酶：第十章1、葉綠體的超微結(jié)構(gòu)： 葉綠體外被：雙層單位膜，每層約厚68nm，外膜的通透性大，內(nèi)膜選擇性強(qiáng)（特殊載體）； 膜間隙

30、：內(nèi)、外兩層膜之間厚約1020nm的空隙； 類(lèi)囊體：由膜圍成的圓盤(pán)狀扁囊； 包括： 基粒類(lèi)囊體：基粒； 基質(zhì)類(lèi)囊體：基質(zhì)片層； 基質(zhì)：可溶性成分：各種酶類(lèi)； 有形成分：70S核糖體、DNA、RNA、淀粉粒、質(zhì)體小球、植物鐵蛋白和RuBPcase顆粒。2、光合色素和電子傳遞鏈成分： 光合色素：葉綠素和橙黃色的類(lèi)胡蘿卜素 ，與蛋白質(zhì)以非共價(jià)鍵結(jié)合 集光復(fù)合體（light harvesting complex）由大約200個(gè)葉綠素分子和一些肽鏈構(gòu)成 ，大部分色素分子起捕獲光能的作用，并將光能以誘導(dǎo)共振方式傳遞到反應(yīng)中心色素。因此這些色素被稱(chēng)為天線色素。葉綠體中全部葉綠素b和大部分葉綠素a都是天線色素

31、。 光系統(tǒng)（PS）吸收高峰為波長(zhǎng)680nm處，又稱(chēng)P680。至少包括12條多肽鏈。包括一個(gè)集光復(fù)合體（light-hawesting comnplex ，LHC ）、一個(gè)反應(yīng)中心和一個(gè)含錳原子的放氧的復(fù)合體（oxygen evolving complex）。D1和D2為兩條核心肽鏈，結(jié)合中心色素P680、去鎂葉綠素(pheophytin)及質(zhì)體醌(plastoquinone)。 細(xì)胞色素b6/f復(fù)合體(cyt b6/f complex)可能以二聚體形成存在，每個(gè)單體含有四個(gè)不同的亞基。細(xì)胞色素b6（b563）、細(xì)胞色素f、鐵硫蛋白、以及亞基（被認(rèn)為是質(zhì)體醌的結(jié)合蛋白）。光系統(tǒng)（PSI）能被波長(zhǎng)

32、700nm的光激發(fā)，又稱(chēng)P700。由集光復(fù)合體和作用中心構(gòu)成。結(jié)合100個(gè)左右葉綠素分子、除了幾個(gè)特殊的葉綠素為中心色素外外，其它葉綠素都是天線色素。三種電子載體分別為A0（一個(gè)chla分子)、A1(為維生素K1)及3個(gè)不同的4Fe-4S。3、光合作用的基本過(guò)程：光合作用包括:1) 光反應(yīng)：根據(jù)反應(yīng)的先后順序又可分三個(gè)階段：原初反應(yīng)，電子傳遞，光合磷酸化釋放出O2，產(chǎn)生NADPH和ATP；2) 暗反應(yīng)：在無(wú)光條件下，利用光反應(yīng)所產(chǎn)生的ATP和NADPH，將CO2還原合成碳水化合物的過(guò)程，有C3和C4兩種途徑。4.、光合作用單位： 捕光色素 作用中心：1個(gè)中心色素分子，1個(gè)電子供體，1個(gè)電子受體

33、。5、光合磷酸化，非循環(huán)式、循環(huán)式： 在有光的條件下，當(dāng)電子沿電子載體鏈傳遞時(shí)，亦合成了ATP，這一過(guò)程稱(chēng)為光合磷酸化(photophosphorylation)光合磷酸化專(zhuān)指由光照所引起的電子傳遞與磷酸化偶聯(lián)在一起形成ATP過(guò)程, 又可分為循環(huán)式和非循環(huán)式兩種形式。 所謂非循環(huán)式是指P680從水獲得電子，電子沿連接PSI和PSII兩個(gè)光系統(tǒng)的線形電子載體鏈傳遞，傳至P700，最后并入到NADPH中。在電子由H2O向NADPH傳遞的過(guò)程中，同時(shí)釋放出自由能，使ADP+Pi合成ATP。其中，電子的傳遞經(jīng)兩個(gè)光系統(tǒng)，形成的產(chǎn)物為ATP和NADPH，磷酸化的發(fā)生部位是在質(zhì)體醌到質(zhì)體藍(lán)素之間。因而，每

34、一光合磷酸化過(guò)程均需供體分子提供新的電子，電子能量最后貯存于NADPH和ATP分子中。 在循環(huán)式光合磷酸化中，為電子再循環(huán)，勿需外部供體補(bǔ)充電子。P700在光能激發(fā)下所發(fā)出的電子通過(guò)鐵氧化還原蛋白、質(zhì)體醌、細(xì)胞色素b6，細(xì)胞色素f和質(zhì)體藍(lán)素，又返回P700。在返回過(guò)程中形成的產(chǎn)物只有ATP。其電子的傳遞只經(jīng)過(guò)PSI一個(gè)光系統(tǒng)，與PSII無(wú)關(guān)。6、RUBD羧酸酶： RUBP羧化酶，也就是核酮糖二磷酸羧化酶（ribulose diphosphatecarboxylase）催化1，5-二磷酸核酮糖和CO2生成二分子甘-3-磷酸甘油酸反應(yīng)的酶。亦稱(chēng)羧基歧化酶?？捎捎贛g離子的存在被激活。植物中非常多，

35、大約占總?cè)~綠蛋白的一半。 在高等植物中，它是一個(gè)雜多聚體（88），由八個(gè)相同的大亞基和八個(gè)小亞基組成。大亞基是酶的催化單位，它能結(jié)合底物CO2和RuBP以及鎂離子（二價(jià)）。小亞基是調(diào)節(jié)酶活性的單位，它能使催化速度常數(shù)增加100倍以上。大亞基是由葉綠體DNA的一個(gè)基因編碼的，小亞基是由核DNA的一個(gè)多基因家族編碼的。第十一章1、核孔復(fù)合體，結(jié)構(gòu)與功能： 核孔復(fù)合體是胞質(zhì)與核質(zhì)之間進(jìn)行物質(zhì)運(yùn)輸?shù)耐ǖ馈?結(jié)構(gòu)：在電鏡下觀察，核孔是呈圓形或八角形，一般認(rèn)為其結(jié)構(gòu)如fish-trap，主要包括以下幾個(gè)部分：胞質(zhì)環(huán)（cytoplasmic ring），位于核孔復(fù)合體胞質(zhì)一側(cè)，環(huán)上有8條纖維伸向胞質(zhì)；核質(zhì)環(huán)

36、（nuclear ring），位于核孔復(fù)合體核質(zhì)一側(cè)，上面伸出8條纖維，纖維端部與端環(huán)相連，構(gòu)成籠子狀的結(jié)構(gòu)；轉(zhuǎn)運(yùn)器（transporter），核孔中央的一個(gè)栓狀的中央顆粒；輻（Spoke）：核孔邊緣伸向核孔中央的突出物。 功能：核孔復(fù)合體是核質(zhì)與胞質(zhì)之間進(jìn)行物質(zhì)交換的通道，經(jīng)過(guò)核孔復(fù)合體的運(yùn)輸具有雙向選擇性，因此, 可視它為一種特殊的跨膜運(yùn)輸?shù)鞍讖?fù)合體，主要參與被動(dòng)運(yùn)輸(自由擴(kuò)散)和主動(dòng)運(yùn)輸兩種運(yùn)輸方式。 包括：核蛋白的運(yùn)進(jìn) 和RNA和核糖體亞單位的運(yùn)出。2、核纖維層的結(jié)構(gòu)、功能： 結(jié)構(gòu)：核纖層是由三種核纖層蛋白交織而成的網(wǎng)絡(luò)狀結(jié)構(gòu)，核纖層一方面通過(guò)與核纖層蛋白受體與內(nèi)層核膜緊密結(jié)合在一起，

37、另一方面為染色質(zhì)纖維提供附著位點(diǎn)。 功能：維持核孔的位置和核被膜的形狀;為間期染色質(zhì)提供附著位點(diǎn)，是染色質(zhì)的結(jié)構(gòu)支架;在有絲分裂過(guò)程中，還與核被膜的解體和重建有關(guān)。3、染色質(zhì)的化學(xué)組成： 染色質(zhì)由DNA、組蛋白、非組蛋白及少量RNA組成，比例為1：1：（1-1.5）：0.05?？梢?jiàn)DNA與組蛋白的含量比較恒定，非組蛋白的含量變化較大，RNA含量最少。4、基因組： 細(xì)胞內(nèi)一套形態(tài)大小各不相同、協(xié)調(diào)工作的染色體（即單倍染色體組）及其上的全部基因，稱(chēng)為染色體組或基因組（genome)。5、染色質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)、念珠模型、核小體： 染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)單位核小體 念珠模型：染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)是由DNA和蛋白質(zhì)組

38、成的重復(fù)單位，每個(gè)亞單位由200bpDNA鏈結(jié)合9個(gè)蛋白質(zhì)分子組成，這種組蛋白DNA亞單位稱(chēng)為核小體。核小體的核心為8個(gè)組蛋白分子，染色質(zhì)絲由很多核小體連接而成，形似念珠。相鄰核小體間的DNA鏈，類(lèi)似關(guān)節(jié)，可使染色質(zhì)纖維進(jìn)一步折疊盤(pán)曲。 核小體是一種串珠狀結(jié)構(gòu)，由核心顆粒和連結(jié)線DNA兩部分組成，可描述如下：每個(gè)核小體單位包括約200bp的DNA、一個(gè)組蛋白核心和一個(gè)H1；由H2A、H2B、H3、H4各兩分子形成八聚體，構(gòu)成核心顆粒；DNA分子以左手螺旋纏繞在核心顆粒表面，每圈80bp，共1.75圈，約146bp，兩端被H1鎖合；相鄰核心顆粒之間為一段60bp的連接線DNA。6、常染色質(zhì)和異染

39、色質(zhì)： 常染色質(zhì)的DNA序列主要為單一序列和一些重復(fù)序列，堿基組成富含G、C，遺傳活性大，復(fù)制較早。異染色質(zhì)通常具有3個(gè)特點(diǎn)：(1)在間期中處于凝縮狀態(tài)；(2)是遺傳惰性區(qū)，只含有極少數(shù)不表達(dá)的基因；(3)復(fù)制時(shí)間晚于其它染色質(zhì)區(qū)域。 異染色質(zhì)可分為兩種類(lèi)型：一種是在各種在細(xì)胞中總處于凝縮狀態(tài)，最后進(jìn)行復(fù)制的稱(chēng)為恒定型異染色質(zhì)；另一種，只是在幾種細(xì)胞中或在一定的發(fā)育時(shí)期和生理?xiàng)l件下可變?yōu)槌Ｈ旧|(zhì)的，則稱(chēng)為兼性異染色質(zhì)。7、著絲粒： 著絲粒為有絲分裂時(shí)紡錘絲附著的部位，位于染色體主縊痕處。 在電鏡下可以看出，紡錘絲并不直接和著絲粒相連，而是連接在著絲粒一側(cè)的一個(gè)盤(pán)狀蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)上，這一結(jié)構(gòu)稱(chēng)為動(dòng)粒

40、或著絲盤(pán)。 將哺乳動(dòng)物細(xì)胞中染色體的主縊痕區(qū)域稱(chēng)為著絲粒-動(dòng)粒復(fù)合體，著絲粒-動(dòng)粒復(fù)合體的結(jié)構(gòu)模型：該復(fù)合體可分為動(dòng)粒結(jié)構(gòu)域(kinetochore domain)、中心結(jié)構(gòu)域(central domain)和配對(duì)結(jié)構(gòu)域(pairing domain)三個(gè)結(jié)構(gòu)域。8、端粒：由端粒DNA與端粒蛋白構(gòu)成。功能：維持染色體的穩(wěn)定性；保證DNA的完全復(fù)制；參與染色體在核內(nèi)的分布。端粒的表達(dá)：端粒長(zhǎng)：細(xì)胞分裂和存活；端粒短：不能分裂甚至不能存活。9、染色體DNA的關(guān)鍵序列，酵母的人工染色體： 自主復(fù)制DNA序列(autonomously replicating sequence, ARS)： 具有一復(fù)制

41、起點(diǎn)，能確保染色體在細(xì)胞周期中能夠自我復(fù)制，從而保證染色體在世代傳遞中具有穩(wěn)定性和連續(xù)性。 著絲粒DNA序列(centromere DNA sequence, CEN)：DNA的平均分配；著絲粒DNA序列均含有兩個(gè)緊密相連的核心區(qū)，一個(gè)是8090bp的AT區(qū)，另一個(gè)是11bp的保守區(qū)。一旦改變這兩個(gè)核心區(qū)中的序列，著絲粒DNA序列便會(huì)喪失其生物學(xué)功能。端粒DNA序列 (telomere DNA sequence, TEL)： DNA復(fù)制的完整性。10、特殊染色體： (1) 多線染色體：多存在于雙翅目昆蟲(chóng)(如果蠅)幼蟲(chóng)的唾腺細(xì)胞、腸細(xì)胞、氣管細(xì)胞、馬爾比基小管細(xì)胞以及植物的胚珠細(xì)胞中。其特點(diǎn)是：

42、體積巨大，比其它體細(xì)胞染色體長(zhǎng)100-200倍，體積大1000-2000倍，這是由于核內(nèi)有絲分裂的結(jié)果，即染色體多次復(fù)制而不分離多線性，每條多線染色體由500-4000條解旋的染色體合并在一起形成。體細(xì)胞聯(lián)會(huì)，同源染色體緊密配對(duì)，并合并成一個(gè)染色體。橫帶紋，染色后呈現(xiàn)出明暗相間的帶紋。膨突和環(huán)，在幼蟲(chóng)發(fā)育的某個(gè)階段，多線染色體的某些帶區(qū)疏松膨大，形成膨突（puff），或巴氏環(huán)（Balbiani ring）。 (2) 燈刷染色體：這種染色體最早發(fā)現(xiàn)于魚(yú)類(lèi)、兩棲類(lèi)和爬行類(lèi)卵母細(xì)胞減數(shù)分裂的雙線期。雙線期是卵黃合成的旺盛期。由于染色體主軸兩側(cè)有側(cè)環(huán)，狀如燈刷，故名燈刷染色體。由兩條同源染色體組成，在

43、交叉處結(jié)合，每條同源染色體含2條染色單體。軸上有一些染色粒，代表染色質(zhì)緊密螺旋化的部位。同時(shí)兩條染色單體向兩邊伸出許多側(cè)環(huán)，側(cè)環(huán)是RNA活躍轉(zhuǎn)錄的區(qū)域。11、核糖體組裝：第十二章1、信號(hào)分子： (signaling cells)通過(guò)外排分泌和穿膜擴(kuò)散釋放出信號(hào)分子。包括：旁分泌信號(hào)：信號(hào)細(xì)胞分泌的信號(hào)分子只能影響到周?chē)彽募?xì)胞。突觸信號(hào)：神經(jīng)末梢分泌神經(jīng)遞質(zhì)，作用于突觸后靶細(xì)胞，傳遞信號(hào)。內(nèi)分泌信號(hào)：激素(hormone)：可遠(yuǎn)距離傳遞，隨血流或汁液（植物）散布全身。 自分泌信號(hào)：細(xì)胞分泌的信號(hào)分子只作用于同種細(xì)胞及自身；具有 “信號(hào)細(xì)胞” 和“靶細(xì)胞”的雙重身份 。2、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)：靶細(xì)胞依靠

44、受體識(shí)別專(zhuān)一性的細(xì)胞外信號(hào)，并把細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榧?xì)胞內(nèi)信號(hào)，這一轉(zhuǎn)變過(guò)程稱(chēng)為信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。3、靶細(xì)胞反應(yīng)特征：概念： 信號(hào)分子作用的效應(yīng)細(xì)胞。特征： 專(zhuān)一識(shí)別信號(hào)、反應(yīng)差異、靶細(xì)胞中的受體。4、表面受體型： 包括：離子通道關(guān)聯(lián)受體、G-蛋白關(guān)聯(lián)受體、酶關(guān)聯(lián)受體。5、信號(hào)傳遞級(jí)聯(lián)反應(yīng)： 胞外信號(hào)分子并不是直接對(duì)基因活動(dòng)發(fā)生作用，而是要經(jīng)過(guò)一個(gè)復(fù)雜的反應(yīng)過(guò)程。過(guò)程的第一步是靶細(xì)胞的受體與配體的專(zhuān)一結(jié)合，受體同信號(hào)分子結(jié)合后被激活，把細(xì)胞外信號(hào)轉(zhuǎn)變?yōu)榘麅?nèi)信號(hào)，最后信號(hào)才被傳遞到核，影響專(zhuān)一基因的表達(dá)。在此過(guò)程中要涉及到一系列信號(hào)傳遞蛋白，像階梯一樣經(jīng)歷一環(huán)扣一環(huán)的連鎖中繼步驟。我們把細(xì)胞以這種方式傳遞信

45、號(hào)的連鎖稱(chēng)為信號(hào)傳遞級(jí)聯(lián)反應(yīng)(signaling cascade)。6、G蛋白關(guān)聯(lián)受體和G蛋白這一節(jié)，包括第二信使：7、酪氨酸激酶性受體：為跨膜蛋白，其跨膜部分為螺旋，尾部深入細(xì)胞質(zhì)溶質(zhì)。尾部含由酪氨酸激酶區(qū)。第十三章1、細(xì)胞周期概述： 指從一次細(xì)胞分裂結(jié)束開(kāi)始，到下一次細(xì)胞分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個(gè)過(guò)程。分為：物質(zhì)積累期（間期或靜止期）和細(xì)胞分裂期。 細(xì)胞周期時(shí)相組成：G1SG2M。2、細(xì)胞周期長(zhǎng)短的測(cè)定： 標(biāo)記有絲分裂百分?jǐn)?shù)法 原理：是對(duì)測(cè)定細(xì)胞進(jìn)行脈沖標(biāo)記、定時(shí)取材、利用放射自顯影技術(shù)顯示標(biāo)記細(xì)胞，通過(guò)統(tǒng)計(jì)標(biāo)記有絲分裂細(xì)胞百分?jǐn)?shù)的辦法來(lái)測(cè)定細(xì)胞周期。優(yōu)點(diǎn)：可以測(cè)定細(xì)胞周期的總時(shí)間和各階段的時(shí)間

46、，結(jié)果明了易分析。缺點(diǎn)：操作技術(shù)有一定的難度；具有一定的危險(xiǎn)性；同位素的放射性逐漸衰減，誤差較大。 流式細(xì)胞分選儀測(cè)定法 縮時(shí)攝像技術(shù)3、細(xì)胞周期同步化的概念與方法： 概念： 細(xì)胞同步化是指在自然過(guò)程中發(fā)生的，或經(jīng)人為處理造成的細(xì)胞周期的同步化。 類(lèi)型： 自然同步化 選擇同步化： 有絲分裂選擇法 人工同步化： 細(xì)胞沉降分離法 誘導(dǎo)同步化： DNA合成阻斷法 中期阻斷法4、染色單體分離及其向兩級(jí)移動(dòng)：后期A，指染色體向兩極移動(dòng)的過(guò)程。這是因?yàn)槿旧w著絲點(diǎn)微管在著絲點(diǎn)處去組裝而縮短，在分子馬達(dá)的作用下染色體向兩極移動(dòng)。染色體的移動(dòng)機(jī)制 1： 染色體向兩極移動(dòng)及動(dòng)粒微管(+)端逐漸解聚的動(dòng)力來(lái)自AT

47、P驅(qū)動(dòng)的馬達(dá)蛋白。染色體的移動(dòng)機(jī)制 2：染色體向兩極移動(dòng)的動(dòng)力來(lái)自動(dòng)粒微管(+)端的逐漸解聚。5、胞質(zhì)分裂： 動(dòng)物細(xì)胞的胞質(zhì)分裂是以形成收縮環(huán)的方式完成的，收縮環(huán)在后期形成，由大量平行排列的肌動(dòng)蛋白和結(jié)合在上面的myosin II等成分組成，用細(xì)胞松馳素及肌動(dòng)蛋白和肌球蛋白抗體處理均能抑制收縮環(huán)的形成。動(dòng)物胞質(zhì)分裂的另一特點(diǎn)是形成中體。末期紡錘體開(kāi)始瓦解消失，但在紡錘體的中部微管數(shù)量增加，其中摻雜有高電子密度物質(zhì)和囊狀物，這一結(jié)構(gòu)稱(chēng)為中體。在胞質(zhì)分裂中的作用尚不清楚。6、減數(shù)分裂期： 前期、前中期、中期、后期、末期和胞質(zhì)分裂期等6個(gè)階段。 7、早熟染色體凝集： Rao和Johnson(1970

48、、1972、1974)將Hela細(xì)胞同步于不同階段，然后與M期細(xì)胞融合，發(fā)現(xiàn)與M期細(xì)胞融合的間期細(xì)胞產(chǎn)生了形態(tài)各異的早熟凝集染色體(prematurely condensed chromosome，PCC)，這種現(xiàn)象叫做早熟染色體凝集(premature chromosome condensation)。G1期PCC為單線狀，因DNA未復(fù)制。S期PCC為粉末狀，因DNA由多個(gè)部位開(kāi)始復(fù)制。G2期PCC為雙線染色體，說(shuō)明DNA復(fù)制已完成。這就意味著M期細(xì)胞具有某種促進(jìn)間期細(xì)胞進(jìn)行分裂的因子，即成熟促進(jìn)因子(maturation promoting factor，MPF)。 8、細(xì)胞周期中的檢驗(yàn)點(diǎn)： 細(xì)胞周期中的檢驗(yàn)點(diǎn)：由感受異常事件的感受器、信號(hào)傳導(dǎo)通路和效應(yīng)器構(gòu)成 。細(xì)胞周期調(diào)控的一種機(jī)制,主要是確保周期每一時(shí)相事件的有序、全部完成并與外界環(huán)境因素相聯(lián)系 。