淺論氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠炎癥因子的影響

1、淺論氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠炎癥因子的影響 作者：莫亞宏 張贏予 王羅卿 郭俊芳 王好 陳建華 張國輝【摘要】 目的： 探討氟伐他汀對高血壓大鼠腎臟皮質炎癥因子表達的影響。方法： 給予左旋硝基精氨酸甲酯(LNAME)建立氧化亞氮缺乏性高血壓腎臟硬化大鼠模型。觀察氟伐他汀對高血壓腎臟硬化大鼠24 h尿蛋白、尿微白蛋白、組織病理學及IL6，IL1，Ang 的影響。結果： 氟伐他汀可減少高血壓腎臟硬化大鼠24 h尿蛋白、尿微白蛋白的排泄，減輕腎臟硬化，降低IL6，IL1，Ang 的分泌。結論： 氟伐他汀能改善腎臟硬化，降低炎癥因子水平是其機制之一。 【關鍵詞】 高血壓腎臟硬化； 氟伐他?。?炎癥

2、因子 Abstract Objective: To assess the inflammation occurring in the kidney of SpragueDawley rats induced by lnitroargininemethylester(LNAME)over time and investigate the effects of fluvastatin treatment.Methods： Male SpragueDawley rats were administered by LNAME to form hypertensive nephropathy,then

3、the rats were administered by fluvastatin. After 16 weeks the rats had their kidneys removed to be measured angiotensin (Ang)，interleukin6（IL6） and interleukin1（IL1）.Pathologic measurement was detected. Results： In comparison with the group of hypertensive nephropathy,the urinary of 24 hours protein

4、 and microalbunminuria were much lower in the group of fluvastatin(P0.01),and the level of Ang，IL6 and IL1 were much lower,too. Conclusion： Fluvastatnin prevents or retards hypertensioninduced renal nephropathy via inhibition of renal nephropathy fibrosis and proteinuria，the inflammation might be on

5、e of the mechanisms. Key words hypertensive nephropathy；fluvastatin；inflammatory cytokine 高血壓腎臟硬化(hypertensive nephropathy)即腎臟小動脈硬化，其主要特征是管壁增厚，管腔變窄，進而繼發(fā)腎實質缺血性損害。近年來，高血壓患者日益增多，在終末期腎衰竭患者中，高血壓所導致的終末期腎衰發(fā)生率呈上升趨勢。隨著他汀類藥物在心血管方面的廣泛應用，其抗炎、改善內皮功能等非降脂作用有了新的進展，但他汀類藥物用于高血壓腎臟硬化的研究較少，機制尚不明確。本實驗通過觀察氟伐他汀對左旋硝基精氨酸甲酯(L

6、NAME)誘導的高血壓腎臟硬化大鼠的尿蛋白、炎癥因子等的影響，探討其可能的作用機制。 1 材料與方法 1.1 材 料 1.2 方 法 2 結 果 2.1 各組大鼠收縮壓的變化 LNAME灌胃后，造模大鼠2周血壓即升高，到第4周時形成穩(wěn)定的高血壓模型，4周時收縮壓140 mmHg,均達到高血壓診斷標準。8周時正常對照組收縮壓為（102.66.48）mmHg，高血壓腎臟硬化組為（213.813.44）mmHg，氟伐他汀組為（216.611.44）mmHg，高血壓腎臟硬化組與氟伐他汀組比較,差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）。 16周時正常對照組收縮壓為(106.77.26)mmHg、高血壓腎臟硬化組為

7、(207.311.53)mmHg，氟伐他汀組為(199.311.61)mmHg, 高血壓腎臟硬化組與氟伐他汀組比較,差異無統(tǒng)計學意義（P0.05）,氟伐他汀對血壓沒有影響，見圖1。 2.2 尿液的檢測結果 高血壓腎臟硬化組和氟伐他汀組24 h尿蛋白從第2周起即明顯增加，到第8周時達到高峰，使用氟伐他汀以后，氟伐他汀組從12周后逐步下降，到16周時，高血壓腎臟硬化組為(51.152.72)mg/d，氟伐他汀組為(37.544.79)mg/d，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（P0.01），見圖2。 2.3 腎臟皮質IL6，IL1，Ang的檢測結果 氟伐他汀干預8周以后測量腎皮質中的濃度，氟伐他汀組IL6

8、濃度（415.040.76）pg/mg與高血壓腎臟硬化組（481.740.03）pg/mg比較顯著降低（P0.01）。氟伐他汀組IL1濃度（747.5132.87）pg/mg與高血壓腎臟硬化組（862.8104.37）pg/mg比較顯著降低（P0.05）。氟伐他汀組Ang濃度(33.867.82)pg/mg與高血壓腎臟硬化組（48.024.51）pg/mg比較顯著降低，（P0.01），差異均有統(tǒng)計學意義。 2.4 腎臟病理變化 與正常對照組相比，高血壓腎臟硬化組多數(shù)腎小球存在嚴重硬化，腎小球萎縮，囊腔縮小，球囊明顯黏連，重度系膜細胞增生，基底膜增厚明顯，單個腎小球內細胞數(shù)增多，HE染色可見系膜

9、旁及系膜區(qū)嗜紅物質基質沉積，見圖4。Masson染色可見腎小球內有較強的基質膠原陽性染色(藍色)，見圖5。腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內細胞數(shù)有統(tǒng)計學意義。氟伐他汀組與高血壓腎臟硬化組相比明顯好轉，腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內細胞數(shù)見表1。表1 腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內細胞數(shù) 3 討 論 NO是在血壓長期調節(jié)中起著重要作用的自由基性質的氣體分子，給予氧化亞氮合酶(NOS)抑制劑LNAME可引起慢性高血壓和腎臟硬化,是目前普遍認可的一種造模方法。在我們的實驗中，給予LNAME后，大鼠血壓第2周起即明顯升高,血壓的改變可能與NO的合成減少等內皮功能紊亂有關。因為內皮細胞可以維持毛細血

10、管結構完整，同時通過自分泌和（或）旁分泌方式產(chǎn)生一系列的體液因子，如NO等，所以對腎臟的血流動力學起著重要的調節(jié)作用。伴隨著血壓升高和毛細血管結構受損，出現(xiàn)了24 h尿蛋白和尿微白蛋白的升高，以及炎癥因子IL6，IL1升高。腎小球毛細血管內皮細胞損害是高血壓腎臟硬化的重要始動因素，一旦毛細血管內皮細胞受損后，血小板就黏附、聚集，從而形成微血栓，內皮細胞釋放炎癥介質IL6，IL1。而炎癥介質之間又可相互促進，產(chǎn)生其他的炎癥介質，最后形成粥樣斑塊，引起高血壓腎臟硬化組腎臟血管狹窄、缺血，導致囊腔縮小，球囊明顯黏連，重度系膜細胞增生，腎小球嚴重硬化，腎小球硬化指數(shù)評分、單個腎小球內細胞數(shù)明顯高于正常

11、對照組。 在我們的實驗中發(fā)現(xiàn)高血壓腎臟硬化組和氟伐他汀組的Ang明顯高于正常對照組，提示LNAME導致腎臟硬化主要與RAS的激活有關。一方面Ang可能通過腎臟局部的自分泌、旁分泌作用,使腎血管收縮，導致腎臟血管內皮細胞功能紊亂甚至損傷，誘導腎臟局部炎癥反應；另一方面Ang可使自由基增多，細胞增生，炎癥因子和成纖維因子增多，Ang的這種非血流動力學作用導致腎臟炎癥，纖維化，組織瘢痕形成，造成腎臟硬化1。 隨著羥甲基戊二酸單酰輔酶還原酶抑制劑他汀類藥物作為降血脂藥物在臨床的廣泛應用，近年來其非調脂作用日益受到重視。在最近有9 000名心臟病和腎臟病患者參與的臨床試驗中發(fā)現(xiàn)羅蘇伐他汀能對慢性腎臟病患

12、者起保護作用2。在慢性腎臟病中他汀類藥物可以抑制腎臟細胞增殖、巨噬細胞的聚集以及下調炎癥因子3。在本實驗中，使用氟伐他汀后，氟伐他汀組與高血壓腎臟硬化組相比，血壓變化沒有統(tǒng)計學意義，故其作用不是通過改變血壓來實現(xiàn)的。與高血壓腎臟硬化組相比，氟伐他汀組腎臟皮質的IL6，IL1水平明顯下降，是因為氟伐他汀可以減輕對內皮細胞NO合酶表達的影響，保護毛細血管內皮細胞免受損傷，減少內皮細胞釋放IL6，IL1。而NO還能抑制N乙基順丁烯二酰亞胺敏感因子(NSF)，對炎癥細胞遷移具有一定的抑制作用4。同時他汀類藥物尚可通過改善內皮細胞的功能，抑制平滑肌細胞的增殖，發(fā)揮直接的抗凝作用，穩(wěn)定已經(jīng)形成的粥樣斑塊，

13、減少炎癥反應5。氟伐他汀組24 h尿蛋白、尿微白蛋白的下降是通過他汀對炎癥因子的抑制來實現(xiàn)的，同時他汀可通過減少受體介導的細胞內吞噬來增加蛋白的排泄，減緩腎臟纖維化6。 他汀類藥物抑制Ang的作用機制可能是多途徑的，他汀類藥物能減少細胞內甲羥戊酸等合成,使其下游的類異戊二烯化作用產(chǎn)物焦磷酸法尼酯(FPP)和焦磷酸牛兒基牛兒酯(GGPP)減少，阻礙小GTP蛋白類異戊二烯化，影響細胞膜受體和胞質蛋白的脂化,抑制Ang的異常表達、受體結合以及受體后信號轉導。但其機制仍需進一步證實。 綜上所述，內皮細胞功能紊亂和炎癥因子在高血壓腎臟硬化的發(fā)生、進展中起了重要作用，氟伐他汀可通過保護內皮功能抑制炎癥因子

14、的表達，減少炎癥反應，從而減少蛋白尿，減輕腎臟硬化，對高血壓腎臟硬化的發(fā)生、進展起保護作用?！緟⒖嘉墨I】 1 Diep QN, Amiri F, Benkirane K，et al. Longterm effects of the PPAR gamma activator pioglitazone on cardiac inflammation in strokeprone spontaneously hypertensive ratsJ.Can J Physiol Pharmacol，2004，82(11):976-985.2 Strippoli GF, Navaneethan SD, Jo

15、hnson DW,et al. Effects of statins in patients with chronic kidney disease: metaanalysis and metaregression of randomised controlled trials J.BMJ,2008，336(7645):645-651.3 Campese VM, Nadim MK, Epstein M. Are 3hydroxy3methylglutarylCoA reductase inhibitors renoprotective? J.J Am Soc Nephrol，2005，16(1):S11-S17.4 Yamakuchi M, Greer JJ, Cameron SJ,et al. HMGCoA reductase inhibitors inhibit endothelial exocytosis and decrease myocardial infarct sizeJ.Circ Res,2005,96(11):1185-1192.5 Robinson JG, Sm