環(huán)境工程微生物學(xué)第三章污染物的生物效應(yīng)檢測(cè)

1、第三章 污染物的生物效應(yīng)檢測(cè)本章將討論以下內(nèi)容生物測(cè)試及方式一般毒性試驗(yàn)生物的分子和細(xì)胞水平檢測(cè)生物致突變、致畸和致癌效應(yīng)檢測(cè)微宇宙法3.1 生物測(cè)試及方式生物測(cè)試（Bioassay）的概念： 指系統(tǒng)地利用生物的反應(yīng)生物的反應(yīng)測(cè)定一種或多種污染物或環(huán)境因素單獨(dú)或聯(lián)合存在時(shí)所導(dǎo)致的影響或危害。 注釋1：所利用的生物反應(yīng)包括分子、細(xì)胞、組織、器官、個(gè)體、種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)各級(jí)水平上的反應(yīng)。 注釋2：生物測(cè)試不同于常規(guī)的物理、化學(xué)檢測(cè)。前者能夠測(cè)定污染物對(duì)生物機(jī)體的影響，而后者只能測(cè)定污染物的濃度。 例如：通過水污染的生物測(cè)試可獲得以下數(shù)據(jù)：各種環(huán)境因素如DO、pH、溫度、混濁度等對(duì)生命的有利以及

2、不利的濃度或強(qiáng)度；污染物對(duì)受測(cè)生物的毒性；各種水生生物對(duì)污染物的相對(duì)敏感性；廢水所應(yīng)處理的程度；允許的污染物排放濃度等。生物測(cè)試的方式短期生物測(cè)試（Short Term Bioassays） 主要用于測(cè)定LC50、IC50、EC50，用來快速估計(jì)污染物的毒性，評(píng)定幾種不同毒物或廢物對(duì)某種生物的相對(duì)毒性或評(píng)定不同生物對(duì)不同條件如溫度、pH的相對(duì)敏感性等。多數(shù)采用靜止式。中期生物測(cè)試（Intermediate Term Bioassays） 時(shí)間為8d到90d，多數(shù)情況下為流動(dòng)式。長期生物測(cè)試（Long Term Bioassays） 包括全部生活史的生物測(cè)試（Complete Lifecycle

3、 Bioassays）和部分生活史的生物測(cè)試（ Partial Lifecycle Bioassays ） 目的是要測(cè)定出在持續(xù)情況下不造成有害效應(yīng)的毒物最大濃度或最大允許毒物濃度（MATC） 只能采用流動(dòng)式，要保證試驗(yàn)的環(huán)境條件和自然界的季節(jié)變化相符合。受試生物的選擇影響生物測(cè)試結(jié)果的因素 受試生物 試驗(yàn)條件 實(shí)驗(yàn)室差異生物測(cè)試的標(biāo)準(zhǔn)化3.2 一般毒性試驗(yàn)基本概念毒物（Toxicant）的概念 毒物與非毒物之間不存在絕對(duì)的界限，通常一種物質(zhì)只有達(dá)到中毒劑量時(shí)才是毒物。中毒（Intoxication） 中毒是各種毒性作用的綜合表現(xiàn)，包括急性中毒、亞急性中毒、慢性中毒。毒性（Toxicity）

4、指一種物質(zhì)引起機(jī)體損傷的能力。毒性作用或毒效應(yīng)（Toxic Effect） 效應(yīng)（效應(yīng)（Effect） 也稱為作用，指接觸一定劑量化學(xué)物后，使機(jī)體產(chǎn)也稱為作用，指接觸一定劑量化學(xué)物后，使機(jī)體產(chǎn)生的生物學(xué)改變。效應(yīng)是對(duì)個(gè)體而言的，這種改變生的生物學(xué)改變。效應(yīng)是對(duì)個(gè)體而言的，這種改變可用一定的計(jì)量單位表示。可用一定的計(jì)量單位表示。反應(yīng)（反應(yīng)（Response） 指接觸一定劑量化學(xué)物后，產(chǎn)生某種效應(yīng)并達(dá)到一指接觸一定劑量化學(xué)物后，產(chǎn)生某種效應(yīng)并達(dá)到一定強(qiáng)度的個(gè)體在群體中所占的比例。反應(yīng)是對(duì)群體定強(qiáng)度的個(gè)體在群體中所占的比例。反應(yīng)是對(duì)群體而言的，用百分率或比值來表示，如發(fā)病率、死亡而言的，用百分率或比

5、值來表示，如發(fā)病率、死亡率等。率等。劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系 以劑量為橫坐標(biāo)，以表示效應(yīng)強(qiáng)度的計(jì)算單位或表以劑量為橫坐標(biāo)，以表示效應(yīng)強(qiáng)度的計(jì)算單位或表示反應(yīng)的百分率或比值為縱坐標(biāo)繪制散點(diǎn)圖所得到示反應(yīng)的百分率或比值為縱坐標(biāo)繪制散點(diǎn)圖所得到的曲線，即為劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系曲的曲線，即為劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系曲線。線。 不同的化學(xué)物或同一化學(xué)物在不同條件下，其劑量不同的化學(xué)物或同一化學(xué)物在不同條件下，其劑量與效應(yīng)或反應(yīng)的相關(guān)關(guān)系不同，可呈現(xiàn)不同類型的與效應(yīng)或反應(yīng)的相關(guān)關(guān)系不同，可呈現(xiàn)不同類型的曲線。（見圖）曲線。（見圖）劑量效應(yīng)關(guān)系和劑量反應(yīng)關(guān)系曲線圖劑量10

6、050反應(yīng)強(qiáng)度（）圖31劑量反應(yīng)曲線（直線型）劑量10050死亡率（）圖32 劑量反應(yīng)曲線（拋物線型）對(duì)數(shù)劑量10050死亡率（）圖33 劑量反應(yīng)曲線（S形線型）死亡率（概率單位）對(duì)數(shù)劑量10050圖34 劑量反應(yīng)曲線毒性試驗(yàn)常用參數(shù)毒性試驗(yàn)常用參數(shù)致死劑量或致死濃度（致死劑量或致死濃度（Lethal Dose， Lethal Concentration） 絕對(duì)致死劑量或致死濃度（絕對(duì)致死劑量或致死濃度（LD100、LC100） 半數(shù)致死劑量或濃度（半數(shù)致死劑量或濃度（LD50、LC50） 最小致死劑量或濃度（最小致死劑量或濃度（MLD、MLC） 最大耐受劑量或濃度（最大耐受劑量或濃度（LD0

7、、LC0 ）最大無作用劑量（最大無作用劑量（Maximum Noeffect Level） 化學(xué)物在一定時(shí)間內(nèi)，按一定方式與機(jī)體接觸，按化學(xué)物在一定時(shí)間內(nèi)，按一定方式與機(jī)體接觸，按一定的檢測(cè)方式或觀察指標(biāo)，不能觀察到任何損害一定的檢測(cè)方式或觀察指標(biāo)，不能觀察到任何損害作用的最高劑量。作用的最高劑量。 每日容許攝入量（每日容許攝入量（Acceptable Daily Intake） 最高容許濃度（最高容許濃度（Maximum Allowable Concentration）最小有作用劑量最小有作用劑量 化學(xué)物能使機(jī)體發(fā)生某種異常變化所需最小劑量，即能化學(xué)物能使機(jī)體發(fā)生某種異常變化所需最小劑量，即

8、能使機(jī)體開始出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最低劑量，又稱中毒閾劑量。使機(jī)體開始出現(xiàn)毒性反應(yīng)的最低劑量，又稱中毒閾劑量。毒作用帶毒作用帶急性毒作用帶急性毒作用帶=半數(shù)致死量半數(shù)致死量/急性毒性最小有作用劑量急性毒性最小有作用劑量慢性毒作用帶慢性毒作用帶=急性毒性最小有作用劑量急性毒性最小有作用劑量/慢性毒性最慢性毒性最 小有作用劑量小有作用劑量半數(shù)效應(yīng)濃度（半數(shù)效應(yīng)濃度（EC50）和半數(shù)抑制濃度（）和半數(shù)抑制濃度（IC50）急性毒性試驗(yàn)（急性毒性試驗(yàn)（Acute Toxicity Test）急性毒性試驗(yàn)（急性毒性試驗(yàn)（Acute Toxicity Test） 研究化學(xué)物質(zhì)大劑量一次染毒或研究化學(xué)物質(zhì)大劑量一次染

9、毒或24小時(shí)內(nèi)多次染毒小時(shí)內(nèi)多次染毒動(dòng)物所引起的毒性的試驗(yàn)。動(dòng)物所引起的毒性的試驗(yàn)。 其目的是短期內(nèi)了解該物質(zhì)的毒性大小和特點(diǎn)，并其目的是短期內(nèi)了解該物質(zhì)的毒性大小和特點(diǎn)，并為進(jìn)一步開展其他毒性試驗(yàn)提供設(shè)計(jì)依據(jù)。為進(jìn)一步開展其他毒性試驗(yàn)提供設(shè)計(jì)依據(jù)。急性毒性試驗(yàn)類型急性毒性試驗(yàn)類型 哺乳動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)哺乳動(dòng)物急性毒性試驗(yàn) 水生生物急性毒性試驗(yàn)水生生物急性毒性試驗(yàn) 蚯蚓急性毒性試驗(yàn)蚯蚓急性毒性試驗(yàn)動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)（動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)（1）按試驗(yàn)要求選擇受試生物按試驗(yàn)要求選擇受試生物 常用成年大鼠或小鼠，雌雄動(dòng)物同時(shí)試驗(yàn)，對(duì)試驗(yàn)常用成年大鼠或小鼠，雌雄動(dòng)物同時(shí)試驗(yàn)，對(duì)試驗(yàn)動(dòng)物預(yù)先觀察幾天后標(biāo)記編號(hào)

10、并隨機(jī)分組。動(dòng)物預(yù)先觀察幾天后標(biāo)記編號(hào)并隨機(jī)分組。預(yù)備試驗(yàn)和確定劑量組預(yù)備試驗(yàn)和確定劑量組 選用少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)，找出引起動(dòng)物選用少量動(dòng)物進(jìn)行預(yù)備試驗(yàn)，找出引起動(dòng)物90（或全部）死亡的劑量和引起動(dòng)物（或全部）死亡的劑量和引起動(dòng)物10死亡（或不死亡（或不死亡）的劑量。死亡）的劑量。 在最高劑量組劑量和最低劑量組劑量的范圍內(nèi)，按在最高劑量組劑量和最低劑量組劑量的范圍內(nèi)，按等比級(jí)數(shù)插入若干個(gè)中間劑量（一般等比級(jí)數(shù)插入若干個(gè)中間劑量（一般46組），從組），從而確定正式試驗(yàn)的劑量組。而確定正式試驗(yàn)的劑量組。染毒方式和受試物的配制染毒方式和受試物的配制 一般用灌胃法和人工熏氣法。一般用灌胃法和人工熏氣

11、法。 受試物的配制：配制試驗(yàn)所需的最高劑量濃度溶液，受試物的配制：配制試驗(yàn)所需的最高劑量濃度溶液，然后依次稀釋到所需濃度。然后依次稀釋到所需濃度。動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)（動(dòng)物急性毒性試驗(yàn)（2）觀察指標(biāo)觀察指標(biāo) 中毒癥狀：一般觀察中毒癥狀：一般觀察2448小時(shí)，最好觀察到絕大小時(shí)，最好觀察到絕大多數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)典型中毒癥狀。多數(shù)動(dòng)物出現(xiàn)典型中毒癥狀。 動(dòng)物死亡數(shù)目和死亡時(shí)間動(dòng)物死亡數(shù)目和死亡時(shí)間 病理檢查：對(duì)于試驗(yàn)時(shí)立即死亡的動(dòng)物，可解剖，病理檢查：對(duì)于試驗(yàn)時(shí)立即死亡的動(dòng)物，可解剖，分析死亡原因，看是技術(shù)事故還是中毒引起的死亡。分析死亡原因，看是技術(shù)事故還是中毒引起的死亡。確定半數(shù)致死量（確定半數(shù)致死量（

12、LD50）試驗(yàn)結(jié)果分析試驗(yàn)結(jié)果分析 LD50值越小，毒性越大。值越小，毒性越大。 急性毒性試驗(yàn)結(jié)果只能粗略地表示某化學(xué)物質(zhì)的毒急性毒性試驗(yàn)結(jié)果只能粗略地表示某化學(xué)物質(zhì)的毒性，而不能全面反映其毒性。性，而不能全面反映其毒性。 由于動(dòng)物種屬、性別、染毒方式的不同，所表現(xiàn)的由于動(dòng)物種屬、性別、染毒方式的不同，所表現(xiàn)的毒性也不一致，故表示毒性也不一致，故表示LD50應(yīng)注釋明動(dòng)物種類和染應(yīng)注釋明動(dòng)物種類和染毒方式。毒方式。亞慢性毒性試驗(yàn)和慢性毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)和慢性毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn)亞慢性毒性試驗(yàn) 在相當(dāng)于動(dòng)物生命周期的在相當(dāng)于動(dòng)物生命周期的1/301/20的時(shí)間內(nèi)使動(dòng)的時(shí)間內(nèi)使動(dòng)物每日或反復(fù)多

13、次接觸受試物的毒性試驗(yàn)。物每日或反復(fù)多次接觸受試物的毒性試驗(yàn)。慢性毒性試驗(yàn)慢性毒性試驗(yàn) 以低劑量外來化合物，長期與試驗(yàn)動(dòng)物接觸觀察以低劑量外來化合物，長期與試驗(yàn)動(dòng)物接觸觀察試驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)的毒性試驗(yàn)。試驗(yàn)動(dòng)物所產(chǎn)生的生物學(xué)效應(yīng)的毒性試驗(yàn)。 低于中毒閾劑量的外來化合物，反復(fù)多次與機(jī)體低于中毒閾劑量的外來化合物，反復(fù)多次與機(jī)體持續(xù)接觸，經(jīng)一定時(shí)間后使機(jī)體呈現(xiàn)明顯的中毒持續(xù)接觸，經(jīng)一定時(shí)間后使機(jī)體呈現(xiàn)明顯的中毒表現(xiàn)，即為蓄積毒性作用。表現(xiàn)，即為蓄積毒性作用。 蓄積系數(shù)法（蓄積系數(shù)法（Cumulative Coefficient Method）：）：用來評(píng)價(jià)環(huán)境污染物蓄積作用的方法。用來評(píng)價(jià)

14、環(huán)境污染物蓄積作用的方法。 蓄積系數(shù)蓄積系數(shù)K生物半減期生物半減期T50(1)50(n)LDLD21212lglglg)(yytt蓄積毒性試驗(yàn)蓄積毒性試驗(yàn)3.3 生物的分子和細(xì)胞水平檢測(cè)生物的分子和細(xì)胞水平檢測(cè)加合物的測(cè)定加合物的測(cè)定 DNA加合物的測(cè)定加合物的測(cè)定 蛋白加合物的測(cè)定蛋白加合物的測(cè)定一般代謝酶的活性測(cè)定一般代謝酶的活性測(cè)定 乙酰膽堿酯酶乙酰膽堿酯酶 腺三磷酶腺三磷酶解毒系統(tǒng)酶類誘導(dǎo)作用的檢測(cè)解毒系統(tǒng)酶類誘導(dǎo)作用的檢測(cè) 混合功能氧化酶的誘導(dǎo)作用混合功能氧化酶的誘導(dǎo)作用 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶抗氧化防御系統(tǒng)檢測(cè)抗氧化防御系統(tǒng)檢測(cè) 過氧化氫酶過氧化氫酶 谷胱甘肽過氧化酶谷胱

15、甘肽過氧化酶3.4 生物致突變、致畸和致癌效應(yīng)檢測(cè)生物致突變、致畸和致癌效應(yīng)檢測(cè)3.4.1致突變?cè)囼?yàn)致突變?cè)囼?yàn)致突變?cè)囼?yàn)的目的致突變?cè)囼?yàn)的目的 致突變?cè)囼?yàn)的目的是為了檢查受試物對(duì)機(jī)體遺傳過致突變?cè)囼?yàn)的目的是為了檢查受試物對(duì)機(jī)體遺傳過程有無影響的方法。程有無影響的方法。致突變?cè)囼?yàn)方法致突變?cè)囼?yàn)方法 基因突變?cè)囼?yàn)，例如基因突變?cè)囼?yàn)，例如Ames試驗(yàn)，下文以鼠傷寒沙試驗(yàn)，下文以鼠傷寒沙門氏菌門氏菌/哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)法為例介紹。哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)法為例介紹。 染色體畸變?cè)囼?yàn)染色體畸變?cè)囼?yàn) DNA損傷試驗(yàn)損傷試驗(yàn)Ames試驗(yàn)試驗(yàn)Ames試驗(yàn)原理試驗(yàn)原理 同一種微生物的營養(yǎng)缺陷型突變型菌株與受試物接

16、同一種微生物的營養(yǎng)缺陷型突變型菌株與受試物接觸，若此化學(xué)物質(zhì)具有致突變性，可使突變型微生觸，若此化學(xué)物質(zhì)具有致突變性，可使突變型微生物再發(fā)生一次突變，重新成為野生型微生物。這種物再發(fā)生一次突變，重新成為野生型微生物。這種突變叫做回復(fù)突變。突變叫做回復(fù)突變。鼠傷寒沙門氏菌鼠傷寒沙門氏菌/哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)法哺乳動(dòng)物微粒體酶試驗(yàn)法 方法原理：在動(dòng)物體外將待測(cè)物經(jīng)肝微粒體酶系活方法原理：在動(dòng)物體外將待測(cè)物經(jīng)肝微粒體酶系活化后，檢測(cè)其所誘發(fā)的沙門氏菌回變菌落數(shù)，即由化后，檢測(cè)其所誘發(fā)的沙門氏菌回變菌落數(shù)，即由不能自行合成組氨酸的營養(yǎng)缺陷型突變菌株（不能自行合成組氨酸的營養(yǎng)缺陷型突變菌株（his），回

17、復(fù)為能自行合成組氨酸的（），回復(fù)為能自行合成組氨酸的（his）菌落數(shù)。）菌落數(shù)。 突變率誘發(fā)回復(fù)突變菌落數(shù)突變率誘發(fā)回復(fù)突變菌落數(shù) / 自發(fā)回復(fù)突變的菌自發(fā)回復(fù)突變的菌落數(shù)（對(duì)照）落數(shù)（對(duì)照） 當(dāng)突變率大于當(dāng)突變率大于2.0時(shí)，為陽性結(jié)果。時(shí)，為陽性結(jié)果。染色體畸變實(shí)驗(yàn)染色體畸變實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)原理試驗(yàn)原理 利用光學(xué)顯微鏡直接觀察生物體細(xì)胞在受致突變物作利用光學(xué)顯微鏡直接觀察生物體細(xì)胞在受致突變物作用后，染色體發(fā)生數(shù)目和結(jié)構(gòu)改變的情況?？稍隗w細(xì)用后，染色體發(fā)生數(shù)目和結(jié)構(gòu)改變的情況。可在體細(xì)胞，亦可在生殖細(xì)胞中進(jìn)行；體內(nèi)體外皆可進(jìn)行。胞，亦可在生殖細(xì)胞中進(jìn)行；體內(nèi)體外皆可進(jìn)行。具體方法見教材具體方法見教

18、材微核試驗(yàn)微核試驗(yàn)微核是由染色單體或染色體的無著絲點(diǎn)片段或因仿錘微核是由染色單體或染色體的無著絲點(diǎn)片段或因仿錘體受傷而失去的整個(gè)染色體，在分裂后期，仍留在細(xì)體受傷而失去的整個(gè)染色體，在分裂后期，仍留在細(xì)胞質(zhì)中，或因核膜受損后和物質(zhì)向外突出延伸形成的胞質(zhì)中，或因核膜受損后和物質(zhì)向外突出延伸形成的小體，其嗜染性與細(xì)胞核相似，比主核小而稱微核。小體，其嗜染性與細(xì)胞核相似，比主核小而稱微核。一切進(jìn)行分裂的細(xì)胞，在染色體斷裂劑的作用下均能一切進(jìn)行分裂的細(xì)胞，在染色體斷裂劑的作用下均能產(chǎn)生微核，因此可用微核率的變化來檢測(cè)誘變物。產(chǎn)生微核，因此可用微核率的變化來檢測(cè)誘變物。3.4.2 致畸效應(yīng)致畸效應(yīng)致畸作

19、用的毒理學(xué)特點(diǎn)致畸作用的毒理學(xué)特點(diǎn) 胚胎與致畸物接觸時(shí)因胚胎處于不同的發(fā)育階段而胚胎與致畸物接觸時(shí)因胚胎處于不同的發(fā)育階段而呈現(xiàn)不同的敏感性。呈現(xiàn)不同的敏感性。 種屬差異較為明顯。種屬差異較為明顯?；瘜W(xué)致畸作用機(jī)理化學(xué)致畸作用機(jī)理 突變引起胚胎發(fā)育異常；突變引起胚胎發(fā)育異常； 對(duì)細(xì)胞的生長分化較為重要的酶類受到抑制；對(duì)細(xì)胞的生長分化較為重要的酶類受到抑制； 母體正常代謝過程被破壞；母體正常代謝過程被破壞； 細(xì)胞分裂過程的障礙細(xì)胞分裂過程的障礙致畸試驗(yàn)致畸試驗(yàn) 致畸試驗(yàn)的目的檢測(cè)環(huán)境污染物能否通過妊娠母體引致畸試驗(yàn)的目的檢測(cè)環(huán)境污染物能否通過妊娠母體引起胚胎畸形。起胚胎畸形。 一般試驗(yàn)動(dòng)物要求其

20、對(duì)化學(xué)物質(zhì)的代謝過程與人相似，一般試驗(yàn)動(dòng)物要求其對(duì)化學(xué)物質(zhì)的代謝過程與人相似，胎盤結(jié)構(gòu)也相似，還要求孕期短，產(chǎn)仔多，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，胎盤結(jié)構(gòu)也相似，還要求孕期短，產(chǎn)仔多，經(jīng)濟(jì)實(shí)用，如家兔、大鼠、小鼠等。如家兔、大鼠、小鼠等。致畸作用的評(píng)價(jià)致畸作用的評(píng)價(jià) 注意與自然變異區(qū)分；注意與自然變異區(qū)分； 注意種屬差異；注意種屬差異； 注意試驗(yàn)的閾劑量與人類實(shí)際可能攝入量之間的差別。注意試驗(yàn)的閾劑量與人類實(shí)際可能攝入量之間的差別。3.4.3 致癌效應(yīng)致癌效應(yīng)細(xì)胞癌變學(xué)說細(xì)胞癌變學(xué)說體細(xì)胞突變、分化障礙、癌基因體細(xì)胞突變、分化障礙、癌基因癌變過程癌變過程 引發(fā)階段引發(fā)階段 促進(jìn)階段促進(jìn)階段 浸潤和轉(zhuǎn)移階段浸潤和轉(zhuǎn)

21、移階段致癌試驗(yàn)致癌試驗(yàn) 致癌試驗(yàn)是檢驗(yàn)受試物及其代謝產(chǎn)物是否具有致癌致癌試驗(yàn)是檢驗(yàn)受試物及其代謝產(chǎn)物是否具有致癌效應(yīng)或誘發(fā)腫瘤作用的慢性毒性試驗(yàn)法。效應(yīng)或誘發(fā)腫瘤作用的慢性毒性試驗(yàn)法。 短期篩檢方法短期篩檢方法 長期動(dòng)物誘癌試驗(yàn)長期動(dòng)物誘癌試驗(yàn)3.5 微宇宙法微宇宙法微宇宙（微宇宙（Microcosm） 是研究污染物在生物種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)和生物是研究污染物在生物種群、群落、生態(tài)系統(tǒng)和生物圈水平上的生物效應(yīng)的一種方法，又稱模型生態(tài)系圈水平上的生物效應(yīng)的一種方法，又稱模型生態(tài)系統(tǒng)法?？煞譃樽匀晃⒂钪婧腿斯の⒂钪婊蚍譃樗y(tǒng)法。可分為自然微宇宙和人工微宇宙或分為水生微宇宙和陸生微宇宙。微宇宙和陸

22、生微宇宙。標(biāo)準(zhǔn)化水生微宇宙標(biāo)準(zhǔn)化水生微宇宙 用于在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定有毒物質(zhì)在多物種水平對(duì)淡水生用于在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定有毒物質(zhì)在多物種水平對(duì)淡水生態(tài)系統(tǒng)的影響。態(tài)系統(tǒng)的影響。 試驗(yàn)時(shí)間試驗(yàn)時(shí)間64天，容器為天，容器為4L的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物包括包括10種藻、種藻、4種無脊椎動(dòng)物、種無脊椎動(dòng)物、1種細(xì)菌。對(duì)溫度、種細(xì)菌。對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、光照強(qiáng)度、pH值等理化參數(shù)均有具體要求。值等理化參數(shù)均有具體要求。燒杯水生微宇宙燒杯水生微宇宙 試驗(yàn)時(shí)間試驗(yàn)時(shí)間1214周，容器為周，容器為1L的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)的玻璃廣口瓶，試驗(yàn)生物包括生物包括4種藻、種藻、2種無脊椎動(dòng)物、一些細(xì)菌和原生種無脊椎動(dòng)物、一些細(xì)菌和原生動(dòng)物。對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、動(dòng)物。對(duì)溫度、光照強(qiáng)度、pH值等理化參數(shù)均有具值等