-血栓與止血檢驗分析前的質量控制ppt課件

1、血栓與止血檢驗分析前的質量控制. 根底實際. 一、血管壁的止血功能1、收縮反響加強：傷口減少，血流減慢。2、血小板的激活:構成血小板血栓，堵塞傷口。3、凝血系統(tǒng)的激活：激活，啟動內源凝血系統(tǒng)；釋放組織因子，啟動外源凝血系統(tǒng)。4、部分血粘度增高：部分血管通透性添加，血漿外滲，血液濃縮，血粘度增高，血流減慢，有利于止血。.二、血小板的止血功能1、粘附功能：粘附于血管內皮下組份。2、聚集功能：血小板相互粘附。3、釋放反響：釋放、致密、溶酶體顆粒。4、促凝功能：如PF3的促凝活性，顆粒中的凝血因子釋放。5、血塊收縮功能：血凝塊的收縮，有利于傷口的減少和愈合。6、維護血管內皮的完好性.三、血液凝固機制1

2、、凝血因子特性：14個，F(xiàn)存在全身組織中。共分4組。1、依賴VITK的凝血因子2、接觸凝血因子：、3、對凝血酶敏感的凝血因子：F、F、F、FX4其它因子：F、F.四、血液的抗凝系統(tǒng)和纖溶系統(tǒng)1、細胞抗凝作用：主要經過單核-巨噬細胞系統(tǒng)、肝細胞、血管內皮細胞。2、體液抗凝作用：AT-、PC、PS、TM血栓調理蛋白等。3、其它抗凝物質：組織因子途經抑制物3、纖維蛋白溶解系統(tǒng)：包括組織型和尿激酶型纖溶酶原激活物、纖溶酶原、纖溶酶、纖溶抑制物。.一、檢測系統(tǒng)的要求二、室內質量控制的方法及要求三、血凝儀之間的比對實驗四、參考范圍確實定五、標本采集闡明六、常見分析前緣由異常結果分析.一、檢測系統(tǒng)的要求血凝

3、儀的試劑、校準品、耗費品配套運用： 運用非配套分析系統(tǒng)的實驗室應按照NCCLS-EP9的要求與配套分析系統(tǒng)的結果進展比對，以驗證分析系統(tǒng)的有效性。儀器運用前的評價： 驗證其性能能否能到達制造商的性能要求制造商規(guī)定的性能要求必需滿足臨床需求。如：精細度、準確度、攜帶污染、可報告范圍等。.批內精細度：實驗方案：取正常、異常新穎血漿或質控， 延續(xù)反復測定20次，計算CV，SD。要求：CV 在1/4CLIA88 范圍內。批間精細度：實驗方案：延續(xù)20天測定同一批號室內質控正常、 異常兩個程度，分別計算CV、SD。要求：CV 在1/3CLIA88范圍內。.攜帶污染率高值樣本對低值樣本的污染實驗方案：取新

4、穎樣本或定值質控，將低值樣本置樣本架1和3位置，高值樣本置于2位置，每個樣本分別測定3次，記錄結果：N1、N2、N3、A1、A2、A3、N4、N5、N6。計算：k1=N4-MeanN1，N2，N3/MeanN1，N2，3100%要求：k1在1/4CLIA88的范圍內。低值樣本對高值樣本的污染 將1、3位置放高值，2位置放低值， 方法和要求同上.準確度：實驗方案：根據(jù)本室參與的最近一年臨床檢驗中心室間質評報答結果，以本室上報測定值(X軸)和本次質評報答的靶值(Y軸)求回歸曲線，用醫(yī)學決議程度代入回歸曲線求得相應的預測值，計算醫(yī)學決議程度和預測值的相對偏向來驗證準確度。醫(yī)學決議程度：INR:3.6

5、,APTT:40s,FIB1.5g/L要求:在 1/2CLIA88的范圍內。.質控品的選擇：制定程序和方法，以評價質 控品的質量和適用性。二、室內質量控制的方法及要求質控品的濃度程度：應至少運用2個濃度程度 含正常和異常程度質控工程：一切檢測工程均應開展質控頻度：檢測當天至少1次.室內質量控制質控品均值確實定： 20個測定值，至少10天獲得每天上下午各測一次，與上批號交叉 試劑改換新批號或儀器進展重要調整時， 應重新確定均值。規(guī)范差： 采用前一個月或前3個月的平均規(guī)范差 制造商提供的數(shù)據(jù)僅供參考.室內質量控制失控的判別規(guī)那么：至少運用1-3s規(guī)那么，多種質控 規(guī)那么的運用可提高誤差撿出概率。

6、常用1-3s +2-2s失控報告：描畫失控的情況、核對方法、緣由分 析、糾正措施及糾正效果的評價質控數(shù)據(jù)的管理：原那么上每月統(tǒng)計1次， 至少應保管2年。.三、血凝儀之間的比對實驗條件：同一個系統(tǒng)儀器、試劑時間：6個月至少一次或改換重要部件后凝血實驗不同系統(tǒng)為什么不能比對？ 不同儀器的檢測原理不同 凝血反響為瀑布式，對不同試劑敏感性不一 無調理系數(shù)凝血反響沒規(guī)律性 處理方法：建立各自的參考區(qū)間、驗證等。.血凝儀之間的比對實驗實驗方案：預備10份新穎血漿樣本含正常和異常標本，整個實驗應在2h內完成。分別在基準儀器和比對儀器上檢測，計算比對儀器和基準儀器之間的結果偏向百分比。要求：偏向絕對值在此范圍

7、內1/2CLIA88為滿足要求，80%以上標本滿足要求為合格 以相對穩(wěn)定的儀器作為基準機 CLIA88 PT、APTT:15%，F(xiàn)IB:20%) .四、參考范圍確實定參考范圍不是操作規(guī)程或教科書上訂出的簡單的固定的范圍，而是隨著儀器、試劑、年齡、性別以及環(huán)境等要素而變化的制定建立參考范圍的程序，以確定不同檢測系統(tǒng)的參考范圍如：PT的INR參考范圍為 0.851.15 其秒數(shù)的范圍，不同批號試劑應根據(jù)以下公式計算：INR=實驗秒數(shù)對照秒數(shù)ISI.正常對照 采集20份以上，年齡在1855歲，男女各半， 剔除服藥者、肝腎功能異常及脂濁溶血標本， 安靜形狀下采血。 檢測各管，結果取均值作為正常對照值

8、試劑改換批號，正常對照均應重新獲取 廠家提供的參考值或參考范圍 不能作為正常對照.正?；旌涎獫{ 采集20份以上，年齡在1855歲，男女各半，剔除服藥者、肝腎功能異常及脂濁溶血標本， 安靜形狀下采血。 離心后將各管血漿均勻混合，然后分裝保管 -20 兩周、-40 兩月、-70半年。 用途： 判別開瓶后試劑的有效性、室內質控品.參考范圍的驗證：實驗方案：測定40份男女各半安康 人員新穎血樣本。要求：判別檢測結果能否落在本室設定 的參考區(qū)間內95以上。.確認病人的身份及容器硅化或塑料。多次反復采血的病人在同一條件下采血。止血帶不要超越5分鐘，強調采血順利。迅速將血液和抗凝劑悄然的顛倒混勻。五、標本采

9、集闡明.各管采血順序血培育凝血管血清管 肝素抗凝管血常規(guī)管血糖管美國BD公司引薦多管采集順序 凝血管總是放第二，當只需一只凝血管時建議先采集一只空管丟掉再采集凝血管。 由于，當針頭進入血管前要經過組織，此時組織液易進入針管。血液混入組織液后即刻啟動外源凝血途徑。.標本的儲存 全血需在實驗室規(guī)定的時間內離心并分別血漿； 假設標本不能在4小時內檢測，需分別出血漿并轉移至干凈枯燥的符合要求的試管中加蓋保管于28。 當天不能檢測的樣本需在-20條件下保管，兩周內完成檢測； -70條件下的保管期限可達6個月。. 抗凝劑 枸櫞酸鈉，0.109mol/L 抗凝劑與血液比例嚴厲按1：9 當Hct增高55%或1

10、20APTT 180TT 17.1/17.0FIB 3.12 g/LPLT 204x109/L分析： 肝素？ 標本稀釋？ 采集緣由？II、VII、IX、XV處置： 聯(lián)絡臨床訊問病史 檢測凝血因子活性常見于誤食老鼠藥治療六、常見分析前緣由異常結果分析. 依賴維生素K凝血因子 包括FII、VII、IX、X，其共同特點-氨基末端含有數(shù)量不等的 -羧基谷氨酸 在肝合成必需依賴VK，否那么無凝血活性 VK缺乏可導致新生兒出血或獲得性成人出血性疾病 具有結合Ca+的才干，并借助于Ca+ 與磷脂膜結合，Ca+起“搭橋作用。 -羧基谷氨酸Ca+磷脂膜II、VIIIX、XVK.結果2PT 16.9/12.5AP

11、TT 180TT 180FIB 2.17 g/L分析： 標本被肝素污染 靜脈留置管 血透時所采集處置： 聯(lián)絡臨床 確認標本的正確采集 建議重新采血復查常見分析前緣由異常結果分析.肝素的抗凝原理： 肝素+AT構型改動暴露活性中心精氨酸 +IIa、Xa、XIIa、XIa、IXa (絲氨酸蛋白酶) 1：1構成復合物 從而使這些酶失去活性 VIIa 不被AT抑制PT為外源凝血系統(tǒng)的挑選實驗，其啟動因子 VIIaAPTT為內源凝血系統(tǒng)的挑選實驗，其啟動因子 XIIaTT所用的試劑成份是 IIa.結果3PT 11.2/12.5APTT 20.3/36.0TT 19.0/17.0FIB 2.33 g/L分析

12、： 采血不順利 部分凝固 抗凝劑缺乏處置： 檢查標本抗凝比例、凝塊 重新采血常見于：腎病、產科、多發(fā)傷常見分析前緣由異常結果分析. 因子X的激活： FX FXa V FVa FIXa-VIIIa-Ca+-PF3TF-VIIa- Ca+Ca+PF3此復合物有FVa參與活性添加30萬倍 凝血酶的生成因子V的激活：Ca+PF3+FXa+FVaIIa II.結果4PT 13.4/12.5APTT 57.2/36.0TT 16.8/17.0FIB 3.32 g/LFVIII 46%FIX 52%FXI 48%FXII 39%分析: 抗磷脂抗體綜合征 抗磷脂抗體干擾凝血因子測定，而不是凝血因子活性真的降低

13、。LAC 1.73以上凝血因子檢測是在APTT根底上進展常見分析前緣由異常結果分析舒普生類抗菌素干擾.外表接觸FXIIFXIIaFXIFXIaHMWKFIXFIXaFVIIIaCa+PF3Ca+FXaFVaCa+PF3FXFIIFIIaFgFbLAC抗凝機制內源凝血系統(tǒng)LAC.結果5 ：羊水栓塞患者時間PT(s)APTT(s)FIB(g/L)TT(s)Ca+(mmol/L)產前12.133.04.7014.52.23DIC后22.474.90.5136.71.89DIC后24h17.682.51.1025.41.99DIC后48h13.1107.85.2814.11.65DIC后72h13.2

14、68.05.9015.52.08DIC后96h13.049.64.6214.82.51參考范圍11.714.829.043.02.004.0014.020.02.102.55時間F:CF:CF:CF:CF:CF:CF:CF:CDIC后48h1041411911911891318487DIC后96h1091451392221261408877參考范圍8211472134851207812868128841228211872113常見分析前緣由異常結果分析.時間懸浮紅細胞(u)新鮮冰凍血漿(ml)單采血小板(u)5%白蛋白針(ml)24h內72740102502448h21400102504872

15、h-5401025072!96h-250該患者在手術及發(fā)生DIC 后不同時間輸注的各種血量該患者輸注了大量的血制品，體內存留過量的枸櫞酸鹽，導致APTT明顯延伸。.PT原理： 外源凝血啟動到凝血酶生成只需8秒鐘血漿37 Ca+足量組織凝血活酶APTTT原理： 血漿 足量激活劑PF337 Ca+內源凝血啟動到凝血酶生成需求35分鐘.受檢血漿乏因子血漿 PT 或APTT試劑患者正常凝血因子活性檢測原理：制備不同稀釋度時間活度凝血因子測定通常先將受檢血漿做1:10稀釋該患者APTT高度異常是由于血漿中過量的枸櫞酸鹽干擾APTT實驗引起，而不是凝血因子缺乏導致。.PT測定的臨床意義參考范圍：10-15

16、SPT時間延伸見于：1.因子減低，較少見。2.肝臟疾病，3.VK缺乏癥：膽石癥、膽道腫瘤、慢性腸炎、偏食、2-7個月的新生兒以及長期服用廣普抗生素的患者。4.血液中的抗凝物質增多，如肝素和FDP增多。5.用于香豆素類口服抗凝劑的監(jiān)控，即PT值在參考值的兩倍，INR2-3。PT縮短見于口服避孕藥、高凝形狀和血栓性疾病。.APTT檢測的臨床意義：參考范圍：24-40SAPTT時間延伸：1.、缺乏。2.運用肝素治療時，APTT監(jiān)測藥物用量。3.血管性血友?。河捎诨颊遃WF缺陷，F(xiàn)不穩(wěn)定，故APTT時間延伸。4.異?？鼓镌龆啵貉巡患者長期輸F，可產生F抑制物，APTT時間延伸。5.纖溶亢進：如DIC，產生大量FDP，APTT時間延伸。.纖維蛋白原測定的臨床意義：參考范圍：2-4g/L增高：見于糖尿病、急性心肌堵塞、急性傳染病、結締