預(yù)防09分子生物學(xué)習(xí)題集

1、分子生物學(xué)復(fù)習(xí)題第十九章 分子生物學(xué)常用技術(shù)一、 單選題 1. “Sourthern Blotting”指的是 (A) 將DNA轉(zhuǎn)移到膜上，用DNA做探針雜交 (B) 將RNA轉(zhuǎn)移到膜上，用DNA做探針雜交 (C) 將DNA轉(zhuǎn)移到膜上，用蛋白質(zhì)做探針雜交 (D) 將RNA轉(zhuǎn)移到膜上，用RNA做探針雜交 (E) 將DNA轉(zhuǎn)移到膜上，用RNA做探針雜交 2. 分子雜交試驗不能用于 (A) 單鏈DNA分子之間的雜交 (B) 單鏈DNA與RNA分子之間的雜交 (C) 抗原與抗體分子之間的結(jié)合 (D) 雙鏈DNA與RNA分子之間的雜交 (E) RNA與RNA之間的雜交 3. 探針是經(jīng)過什么標(biāo)記的核酸分子

2、 (A) 用放射性同位素標(biāo)記 (B) 用生物素標(biāo)記 (C) 用地高辛標(biāo)記 (D) A、B、C都對 (E) 用抗體標(biāo)記 4. 下列哪一條在分子印漬技術(shù)中不適用 (A) DNA向NC膜轉(zhuǎn)移 (B) 蛋白質(zhì)向PVDF膜轉(zhuǎn)移 (C) DNA向尼龍膜轉(zhuǎn)移 (D) RNA向NC膜轉(zhuǎn)移 (E) 蛋白質(zhì)向一號濾紙轉(zhuǎn)移 5. 用于核酸雜交的探針至少應(yīng)符合下列哪條 (A) 必須是雙鏈DNA (B) 必須是雙鏈RNA(C) 必須是單鏈DNA (D) 必須是 100bp以上的大分子DNA (E) 必須是蛋白質(zhì) 6. 核酸斑點雜交試驗中可省略的步驟是 (A) 電泳 (B) 核酸樣品固定于NC膜 (C) 雜交信號檢測 (

3、D) 標(biāo)記探針 E) 制備樣本核酸 7. 免疫印漬技術(shù)中不適合應(yīng)用的步驟是 (A) 聚丙烯酸胺凝膠電泳 (B) 用NC膜或PVDF膜 (C) 靠毛細(xì)管作用進(jìn)行轉(zhuǎn)移 (D) 用同位素標(biāo)記抗體(E) 用非同位素標(biāo)記抗體 8. 原位雜交是指 (A) 在NC膜上進(jìn)行雜交操作 (B) 在組織切片或細(xì)胞涂片上進(jìn)行雜交操作 (C) 直接將核酸點在NC膜上的雜交 (D) 在PVDF膜上進(jìn)行雜交操作 (E) 在凝膠電泳中進(jìn)行的雜交 9. 有關(guān)DNA鏈末端終止法的不正確說法是 A) 需要ddNMP (B) 需要ddNTP (C) dNTP：ddNTP的比例要合適 (D) 需要放射性同位素或熒光染料 (E) 需要d

4、NTP 10. 有關(guān)DNA序列自動化測定的不正確敘述是 (A) 用熒光代替了同位素標(biāo)記 (B) 激光掃描分析代替人工讀序 (C) 基本原理與手工測序相同 (D) 不再需要引物 (E) 需要與手工序列分析相同的模板 11. 某種遺傳性疾病是由一個點突變（無限制性內(nèi)切酶位點變化）引起，可以 (A) 用DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析突變 (B) 用限制性片段長度多態(tài)性分析突變 C) 用 Western Blotting分析突變 (D) 用電泳分析基因組DNA (E) 用電泳分析細(xì)胞中的所有蛋白質(zhì) 12. 免疫印漬技術(shù)指的是 (A) 結(jié)合在膜上的蛋白質(zhì)分子與抗體分子結(jié)合 B) 結(jié)合在膜上的DNA分子與抗體結(jié)

5、合 (C) 結(jié)合在膜上的RNA分子與抗體結(jié)合 (D) 結(jié)合在膜上的DNA分子與RNA分子結(jié)合 (E) 結(jié)合在膜上的免疫分子與DNA的結(jié)合 13. 同位素標(biāo)記探針檢測NC膜上的RNA分子(A) 叫做Northern Blotting (B) 叫做Southern Blotting (C) 叫做Western Blotting (D) 蛋白分子雜交 (E) 免疫印漬雜交 14. 用做探針的DNA分子必須 (A) 在雜交前變性 (B) 在雜交前復(fù)性 (C) 長于30個核著酸 (D) 短于30個核著酸 (E) 是雙鏈分子 二、填空題 1 只要 DNA 或 RNA 的單鏈分子之間存在著一定程度的_ ，就

6、可以在不同的分子間形成_ 。 2 利用_ 使膠中的生物大分子或大分子的片段_ ，可使之成為固相化分子。 3 存在于 NC 膜上的生物分子可以放到雜交液中，與_ 進(jìn)行_ 。 4 Southern blotting 主要用于_ 的分析，也可以用于_ 。 5 Northern blotting 主要用于檢測_ 的表達(dá)水平以及比較_ 表達(dá)情況。 6 蛋白質(zhì)的印漬分析，也稱為_ 。7 目前 DNA 序列的手工測定或自動化測定所基于的技術(shù)原理一為 _，二為_ 法。 8 限制性片段長度多態(tài)性分析（ RFLP ）是利用_ DNA 分子再經(jīng)_ 即可檢測出突變 DNA 。 9 基因轉(zhuǎn)移技術(shù)包括_ 水平的基因轉(zhuǎn)移，

7、而且可以進(jìn)行_ 水平的轉(zhuǎn)移。 10 在轉(zhuǎn)基因技術(shù)中，被導(dǎo)人的目的基因稱為_ ，目的基因的受體動物稱為_ 。 11 單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析（ SSCP ）的原理基于 DNA 單鏈具有_ 特點，這種特點的形成取決于_ 。12.就克隆一個基因（DNA片段）來說，最簡單的質(zhì)粒載體必須具備三個部分： 、 、 。一個理想的質(zhì)粒載體最好分子量 。13.為了防止DNA的自身環(huán)化，可用 脫去雙鏈DNA 。14.l噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長度應(yīng)在噬菌體基因組的 的范圍內(nèi)。15.受體細(xì)胞的感受態(tài)是_ _。人工感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞在溫度為_時吸附DNA, _時攝入DNA。16.A/T cl

8、oning 是利用 Taq 酶 的性質(zhì) 。17.RNA干擾過程中三個重要組成元件是 ， ， 和 。18.PCR擴(kuò)增反應(yīng)中一個循環(huán)的三個步驟依次是 ， ， 和 。19.用于熒光定量PCR標(biāo)記的Taqman水解探針是在PCR循環(huán)中的 階段中發(fā)光。20 DNA芯片的原理為 ，蛋白質(zhì)芯片的原理為 。21.常規(guī)PCR技術(shù)是 對PCR擴(kuò)增反應(yīng)的 進(jìn)行定性及定量分析；熒光定量PCR技術(shù)對PCR擴(kuò)增反應(yīng)中 的產(chǎn)物進(jìn)行定量分析。22.PCR反應(yīng)體系中除了含有Mg2+的緩沖體系外，還要具備 、 和 等四大要素。23.假定表達(dá)一個編碼某種蛋白質(zhì)的基因，必須考慮其表達(dá)載體的三個基本條件：(1)_ _ _ (2) _

9、_(3) _。24.較常用的定點誘變方法一般有兩種即 和 。25.基因克隆時，應(yīng)根據(jù)所要分離的外源基因的大小選擇合適的載體，這些載體通常包含有 噬菌體、YAC 以及 、 和 等。26.蛋白質(zhì)雙向電泳中的第一向和第二向分別是 和 27.l噬菌體載體由于受到包裝的限制，插入外源DNA片段后，總的長度應(yīng)在噬菌體基因組的 的范圍內(nèi)。28.為了防止DNA的自身環(huán)化，可用 脫去雙鏈DNA 。29.載體按照功能可分為 載體和 載體兩類。三、名詞解釋題 1 DNA 印漬技術(shù) 2 RNA 印漬技術(shù) 3 蛋白質(zhì)印漬技術(shù) 4 探針（ probe ） 5 基因敲除6 限制性片段長度多態(tài)性分析（ RFLP ） 7. D

10、NA 芯片 8.RT-PCR 9.CT值 10.感受態(tài)細(xì)胞11.雙向電泳12單鏈多態(tài)構(gòu)象分析（ SSCP ）13.定點誘變技術(shù)14.實時定量PCR 15.SiRNA 16.TaqMan探針17.DNA指紋圖譜五、問答題 1 核酸分子雜交的主要實驗方法有哪些？主要用途是什么？ 2 基因轉(zhuǎn)移和基因剔除技術(shù)在醫(yī)學(xué)上可能有哪些用途？ 3 簡述 RFLP 和 SSCP 檢測基因突變的原理。 4 簡述 DNA 末端合成終止法測定 DNA 序列的原理？ 5. PCR的基本原理是什么?用PCR擴(kuò)增某一基因，必須預(yù)先得到什么樣的信息?6.簡述將一個基因從mRNA到克隆到表達(dá)載體的過程（列出所需關(guān)鍵的酶和注意點）

11、？7.簡述用RNAi技術(shù)減低目的基因表達(dá)水平的機(jī)理？8.酵母雙雜交的原理是什么？9.引物是 PCR 反應(yīng)體系的四大要素之一， PCR 的許多應(yīng)用都是通過引物設(shè)計來實現(xiàn)的，請問引物設(shè)計的一般原則是什么？10.何為 -互補(bǔ)？如何利用 -互補(bǔ)來篩選插入了外源 DNA 的重組質(zhì)粒？11.何謂基因克隆？簡述基因克隆的基本過程。第二十章 基因重組與基因工程一選擇題1. F因子從一個細(xì)胞轉(zhuǎn)移至另一個細(xì)胞的基因轉(zhuǎn)移過程稱為 (A) 轉(zhuǎn)導(dǎo)(B) 轉(zhuǎn)化 (C) 轉(zhuǎn)座 (D) 轉(zhuǎn)染 (E) 接合 2. 通過自動獲取或人為地供給外源DNA使受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型，稱為 (A) 轉(zhuǎn)化 (B) 轉(zhuǎn)座 (C) 接合 (D

12、) 轉(zhuǎn)導(dǎo) (E) 轉(zhuǎn)染 3. 由插人序列和轉(zhuǎn)座子介導(dǎo)的基因移位或重排稱為(A) 接合 (B) 轉(zhuǎn)染 (C) 轉(zhuǎn)導(dǎo) (D) 轉(zhuǎn)座 (E) 轉(zhuǎn)化 4. 由整合酶催化、在兩個DNA序列的特異位點間發(fā)生的整合稱 (A) 位點特異的重組 (B) 同源重組 (C) 隨機(jī)重組 (D) 基本重組 (E) 人工重組 5. 限制性核酸內(nèi)切酶切割DNA后產(chǎn)生 (A) 5磷酸基和3羥基基團(tuán)的末端 (B) 5磷酸基和3磷酸基團(tuán)的末端 (C) 5羥基和3羥基基團(tuán)的末端 (D) 3磷酸基和5羥基基團(tuán)的末端 (E) 以上都不是 6. 可識別并切割特異DNA序列的稱(A) 非限制性核酸外切酶 (B) 限制性核酸內(nèi)切酶 (C)

13、限制性核酸外切酶 (D) 非限制性核酸內(nèi)切酶 (E) DNA酶（DNase） 7. 在重組DNA技術(shù)中催化形成重組DNA分子的是DNA (A) 解鏈酶 (B) 聚合酶 (C) 連接酶 (D) 內(nèi)切酶 (E) 拓?fù)涿?8. 在重組DNA技術(shù)領(lǐng)域所說的分子克隆是指 (A) 建立多克隆抗體 (B) 建立單克隆抗體 (C) 有性繁殖DNA (D) 無性繁殖DNA (E) 構(gòu)建重組DNA分子 9. 在下述雙鏈DNA序列（僅列出其中一條鏈序列）中不屬于完全回紋結(jié)構(gòu)的是 (A) GGAATTCC (B) TGAATTCA (C) AGAATTCT (D) CGTTAAGC (E) AGATATCT 10.

14、無性繁殖依賴DNA載體的最基本性質(zhì)是 (A) 卡那霉素抗性 (B) 青霉素抗性 (C) 自我復(fù)制能力 (D) 自我表達(dá)能力 (E) 自我轉(zhuǎn)錄能力 11. 在已知序列的情況下獲得目的DNA最常用的是 (A) 篩選cDNA文庫 (B) 篩選基因組文庫 (C) 化學(xué)合成法 (D) 聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng) (E) DNA合成儀合成 12. 重組DNA技術(shù)領(lǐng)域常用的質(zhì)粒DNA是 (A) T病毒基因組DNA的一部分 (B) 細(xì)菌染色體外的獨立遺傳單位 (C) 細(xì)菌染色體DNA的一部分 (D) 真核細(xì)胞染色體外的獨立遺傳單位 (E) 真核細(xì)胞染色體DNA的一部分 13. 某限制性內(nèi)切核酸酶按GGGCGCCC方式切割

15、產(chǎn)生的末端突出部分含 (A) l個核苷酸 (B) 2個核苷酸 (C) 3個核苷酸 (D) 4個核苷酸 (E) 5個核苷酸 14. 某限制性內(nèi)切核酸酶切割5GGGGGGAATTCC3序列后產(chǎn)生 (A) 5突出末端 (B) 5或3突出末端 (C) 5及3突出末端 (D) 3突出末端 (E) 平末端 15. 直接針對目的DNA進(jìn)行篩選的方法是 (A) 氨芐青霉素抗藥性 (B) 青霉素抗藥性 (C) 分子雜交 (D) 分子篩 (E) 電泳 16. “克隆”某一目的DNA的過程不包括 (A) 重組DNA分子導(dǎo)人受體細(xì)胞 (B) 外源基因與載體的拼接 (C) 基因載體的選擇與構(gòu)建 (D) 篩選并無性繁殖含

16、重組分子的受體細(xì)胞 (E) 表達(dá)目的基因編碼的蛋白質(zhì) 17. 表達(dá)人類蛋白質(zhì)的最理想的細(xì)胞體系是 (A) 酵母表達(dá)體系 (B) 原核表達(dá)體系 (C) Ecoli表達(dá)體系 (D) 昆蟲表達(dá)體系 (E) 哺乳類細(xì)胞表達(dá)體系 18. 不能用作克隆載體的DNA是 (A) 質(zhì)粒DNA (B) 噬菌體DNA (C) 細(xì)菌基因組DNA (D) 腺病毒DNA (E) 逆轉(zhuǎn)錄病毒DNA 19. 克隆的基因組DNA可在多種系統(tǒng)表達(dá)，例外的是 (A) Ecoli表達(dá)體系 (B) 昆蟲表達(dá)體系 (C) 酵母表達(dá)體系 (D) 哺乳動物細(xì)胞表達(dá)體系 二、填空題 1 通過自動獲取或人為地供給外源 _ ，使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)

17、胞獲得新的 _ ，這就是轉(zhuǎn)化作用。 2 由 _ 和 _ 介導(dǎo)的基因移位或重排，稱為轉(zhuǎn)座。 3 基因重組有兩種類型，即 _ 和 _ 。 6 一個完整的基因克隆過程應(yīng)包括：目的基因的獲取， _ 的選擇與改造， _ 的連接，重組 DNA 分子導(dǎo)人受體細(xì)胞，篩選出含感興趣基因的重組 DNA 轉(zhuǎn)化細(xì)胞。 7 限制性核酸內(nèi)切酶是一類識別 _ 的 _ 核酸酶。 8 科學(xué)家感興趣的外源基因又稱 _ ，其來源有幾種途徑：化學(xué)合成，酶促合成 cDNA ，制備的基因組 DNA 及 _ 技術(shù)。 9 外源 DNA 離開染色體是不能復(fù)制的。將 _ 與 _ 連接，構(gòu)建成重組 DNA 分子，外源 DNA 則可被復(fù)制。 10

18、根據(jù)采用的克隆載體性質(zhì)不同，將重組 DNA 分子導(dǎo)人細(xì)菌的方法有 _ 、 _ 及感染。 三、名詞解釋題 1 質(zhì)粒 2 限制性內(nèi)切酶 3 ，載體4 DNA 克隆 5 目的基因 6 cDNA 文庫 7 基因組 DNA 文庫 8 回文結(jié)構(gòu) 9 轉(zhuǎn)座 四、問答題 1 何謂基因克?。亢喪龌蚩寺〉幕具^程。 2 何謂限制性核酸內(nèi)切酶？寫出大多數(shù)限制性核酸內(nèi)切酶識 DNA 序列的結(jié)構(gòu)特點。 3 何謂目的基因？寫出其主要來源或途徑。 4 解釋質(zhì)粒，為什么質(zhì)?？勺鳛榛蜉d體。 5 解釋基因載體，說出哪些 DNA 可作為基因的載體。 6 簡述 E coli 和真核表達(dá)體系各自的優(yōu)、缺點。 7. 何為 -互補(bǔ)？如

19、何利用 -互補(bǔ)來篩選插入了外源 DNA 的重組質(zhì)粒？8. 為了繪制長為3.0Kb BamH 限制性片段的限制性圖譜，分別用EcoR 、Hpa 、EcoR + Hpa 消化這個片段的三個樣品，然后通過凝膠電泳分離DNA片段，EB染色后觀察DNA帶型（如下圖）。請根據(jù)這個結(jié)果，繪制一個限制性內(nèi)切圖譜，要標(biāo)明EcoR 和Hpa 識別位點間的相對位置，以及它們之間的距離（Kb）。9.打算在細(xì)菌中表達(dá)一種稀有的人類某種蛋白質(zhì)，以便能夠大量制備這種蛋白。為確 保分離純化，決定將一段6個組氨酸的短肽加到該蛋白質(zhì)的N端或C端。這些帶有組氨酸標(biāo)簽的蛋白質(zhì)能夠緊緊地同Ni2+柱結(jié)合，但很容易被EDTA或咪唑溶液洗

20、脫。此法可以一步完成大量蛋白質(zhì)的純化。 下圖是編碼該蛋白的核苷酸序列。請設(shè)計一對PCR引物，各含有18個同該基因同源的核苷酸，能夠用于擴(kuò)增該基因的編碼序列，另外，在N端有一個起始密碼，其后是6個組氨酸密碼子（組氨酸密碼子為CAT）。另外設(shè)計一對引物，能夠在C端加上6個組氨酸和一個終止密碼。 N末端 M A T R R A A5-GGT CGT ATG GCT ACT CGT CGC GCT GCT CTT GCT GCA AGT CTC TCT TAG AAG TGT-3 L A A S L S * C末端第二十一章 基因診斷與基因治療一、選擇題1. 內(nèi)源基因的變異并不包括 (A) 基因結(jié)構(gòu)突

21、變 (B) 基因重排 (C) 病原體基因侵人體內(nèi) (D) 基因表達(dá)異常 (E) 基因擴(kuò)增 2. 病原體基因侵人人體主要引起哪種疾??？ (A) 遺傳病 (B) 腫瘤 (C) 心血管疾病 (D) 傳染病(E) 高血壓3. 內(nèi)源基因結(jié)構(gòu)突變發(fā)生在生殖細(xì)胞可引起哪種疾??？ (A) 遺傳病(B) 腫瘤(C) 心血管疾病(D) 傳染病(E) 高血壓4. 下列何種方法不是基因診斷的常用技術(shù)方法(A) 核酸分子雜交(B) 基因測序(C) 細(xì)胞培養(yǎng)(D) RFLP分析(E) PCR5. 目前認(rèn)為最為確切的基因診斷方法是(A) 核酸分子雜交(B) 基因測序(C) 細(xì)胞培養(yǎng)(D) RFLP分析(E) PCR6. 下列哪種方法不是目前基因治療所采用的方法(A) 基因缺失(B) 基因矯正(C) 基因置換(D) 基因增補(bǔ)(E) 自殺基因的應(yīng)用7. 目前基因治療中選用最多的基因載體是(A) 質(zhì)粒(B) 噬菌體(C) 脂質(zhì)體(D) 逆轉(zhuǎn)錄病毒(E) 腺病毒相關(guān)病毒8. 下列哪種方法不屬于非病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的物理方法？ (A) 電穿孔(B) 脂質(zhì)體介導(dǎo)(C) DNA直接注射法(D) 顯微注射(E) 基因槍技術(shù)9. 下列哪種方法屬于非病毒介導(dǎo)基因轉(zhuǎn)移的化學(xué)方法？(A) 電穿孔(B) 基因槍技術(shù)(C) DNA直接注射法(D) 顯微注射(E) DEAE一葡聚糖法1