豬藍耳病及其防控策略ppt課件

1、豬藍耳病及其防控戰(zhàn)略 王和平湖南中岸生物藥業(yè)豬藍耳病概述豬繁衍與呼吸綜合征PRRS，簡稱豬藍耳病是由豬繁衍與呼吸綜合征病毒(PRRSV)引起的，以妊娠母豬流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎、木乃伊胎等生殖妨礙和各階段年齡的豬的呼吸道病癥和仔豬斷奶前死亡率高為主要特征的接觸性傳染病。1987，初次在美國 “豬的奧秘??；未分別到病毒。1990年六月在德國 “歐洲流產(chǎn)風(fēng)暴被命名為“母豬后期流產(chǎn)，1990年12月開場荷蘭的“豬流行性流產(chǎn)和呼吸道綜合征，1991年荷蘭出現(xiàn)了“藍色流產(chǎn)。1991年荷蘭中央獸醫(yī)局用豬肺泡巨噬細(xì)胞分別到致病因子“萊利斯塔的病毒LV- Lelystad地名 ，1992年

2、國際獸醫(yī)局決議運用“豬繁衍與呼吸綜合征。1998年我國的臺灣從美國引種豬時就帶入本?。?995年我國大陸是從加拿大引種查出PRRSV抗體并分別到病毒。1996年郭寶清初次從國內(nèi)發(fā)病的豬群中分別出PRRSV；2006年，首先在我國南方迸發(fā)的“豬無名高熱疫情中，農(nóng)業(yè)部最終調(diào)查結(jié)果闡明，豬繁衍與呼吸妨礙綜合征變異株在此次疫情中扮演了重要角色。PRRS的流行史分類位置 PRRSV屬于尼多病毒目(Nidovirales)、動脈炎病毒科、動脈炎病毒屬的成員，根據(jù)病毒的抗原性，基因組及致病性的差別，PRRSV可分為2個型，即歐洲型LV株為代表株和美洲型ATCC-VR2332株為代表株，兩種毒株間氨基酸的同源

3、性約為60%。 PRRS的病原學(xué)PRRSV在OIE和我國病毒分類屬于BII類動物傳染病。粒子為球形，呈20面體對稱，直徑48-65nm，有囊膜，外表有纖突。核衣殼直徑25-30nm，外繞脂質(zhì)雙層膜。N蛋白是核衣殼蛋白，抗原型最強E蛋白是由ORF5編碼的，能誘導(dǎo)中和抗體。該病毒不能凝集紅細(xì)胞，無血凝活性 PRRSV的形狀和理化特性PRRS的形狀PRRSV對乙醚、氯仿等脂溶劑敏感。不耐熱，56處置15-20分鐘，37處置10-24小時，20 放置6天，病毒滴度下降10倍。56處置45分鐘，37處置48小時，病毒徹底滅活。潮濕的環(huán)境有助于PRRSV 存活，低溫下保管的PRRSV具有較好的穩(wěn)定性，而枯

4、燥的環(huán)境中那么迅速失活。PRRSV只在一個很窄的pH值范圍堅持穩(wěn)定，pH小于5或大于7的情況下，其感染力下降90%以上。 理化特性 PRRSV基因組為不分節(jié)段、單股正鏈RNA病毒，其基因組長約15kb,含有8個開放閱讀框(ORF)，病毒基因組的每個ORF與相鄰的ORF發(fā)生部分重疊。 ORF1編碼病毒RNA的復(fù)制酶和聚合酶。 ORF2-7分別編碼病毒的GP2、GP3、GP4、 GP5、M和N蛋白。分子生物學(xué)ORF2ORF3ORF4ORF5ORF6ORF7AnORF1abAn 15.1kb GP2 GP3 GP4 GP5 M N 771bp 765bp 537bp 603bp 525bp 372b

5、pAnAnAnAnAnAnAnmRNA1234567 PRRSV VR2332 PRRSV基因組ORF1編碼病毒RNA的復(fù)制酶和聚合酶。 ORF2-7分別編碼病毒的GP2、GP3、GP4、GP5、M和N蛋白。由ORF5編碼的GP5蛋白為囊膜糖蛋白，可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，這能夠與疾病的發(fā)生有關(guān)。ORF6編碼的M蛋白是基質(zhì)蛋白，M蛋白不僅可誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體，還可以誘發(fā)很強的特異性細(xì)胞免疫應(yīng)對。 N蛋白即核衣殼蛋白，由ORF7編碼，N蛋白在病毒粒子中含量較高，免疫原性極強，是PRRS診斷中具有診斷意義的構(gòu)造蛋白之一，但其產(chǎn)生抗體無中和活性和維護性免疫反響。 基因及其編碼蛋白藍耳病的四個特點1、抗體依賴性病

6、毒增殖效應(yīng)(ADE) ADE是指在一定抗體存在下可介導(dǎo)和加強病毒的感染力。在肺泡巨噬細(xì)胞中參與一定滴毒的PRRSV抗體，可以使PRRSV滴度提高10-100倍。早期誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體可以促進病毒在機體內(nèi)的復(fù)制，促進藍耳病臨床病癥的構(gòu)成非中和抗體中和抗體無抗體存在有抗體存在藍耳病的四個特點、劇烈的免疫抑制破壞非特異免疫的巨噬細(xì)胞PAM系統(tǒng)使豬喪失了抗感染才干、對疫苗的反響才干和對藥物治療的支持才干極易引起混合感染或繼發(fā)感染巨噬細(xì)胞的作用 安康的豬巨噬細(xì)胞吞噬病源微生物- 機體安康 的保證藍耳病致病機理藍耳病毒強毒導(dǎo)致巨噬細(xì)胞死亡感染PRRSV鏈球菌支原體鏈球菌副豬鏈球菌鏈球菌巴氏桿菌鏈球菌傳胸鏈球菌

7、豬流感鏈球菌偽狂犬鏈球菌圓環(huán)鏈球菌豬瘟由藍耳病引起的混合感染和繼發(fā)感染是使被感染豬群死亡率高的主要緣由 繼發(fā)感染免疫抑制豬瘟疫苗免疫抗體上不去促進PCV2繁衍和分散才干藍耳病病毒感染對豬瘟疫苗免疫的影響豬數(shù)量72320201814藍耳感染平均程度（S/P）3.222.72.22.01.190.516 豬瘟平均抗體水平(阻斷率）49.15553.563.6563.575豬藍耳病感染與豬瘟疫苗免疫應(yīng)對的關(guān)系后備豬注：1.各組的S/P值范圍分別是3.0以上、 2.52.0、 2.01.5 、 1.51.0、1.0以下；2.共102頭后備母豬，豬瘟疫苗已免疫3次。 結(jié)果闡明，免疫后豬瘟抗體程度的高低與

8、藍耳病毒感染有很強的負(fù)相關(guān)性。藍耳病毒感染越嚴(yán)重，其瘟豬抗體程度越低；臨床檢測一豬數(shù)量1012151515藍耳感染平均程度（S/P）2.782.251.570.680.24 豬瘟平均抗體水平(阻斷率）40.547.249.950.160.9豬藍耳病感染與豬瘟疫苗免疫應(yīng)對的關(guān)系經(jīng)產(chǎn)母豬注：1.各組的S/P值范圍分別是2.5以上、2.52.0、2.01.0、1.00.4、0.4以下；2. 共67頭經(jīng)產(chǎn)母豬。 結(jié)果同樣闡明，經(jīng)產(chǎn)母豬免疫后豬瘟抗體程度的高低與藍耳病毒感染也有很強的負(fù)相關(guān)性。藍耳病毒感染越嚴(yán)重，其抗體程度越低；臨床檢測二豬數(shù)量1012971819藍耳感染強度（S/P）2.852.251

9、.851.270.670.25PCV抗體1.091.031.010.950.800.79PCV感染與藍耳感染關(guān)系注：為兩者之間的感染相關(guān)性直觀些，表中的數(shù)據(jù)進展了處置結(jié)論： 豬群藍耳病毒感染可劇烈干擾了豬瘟疫苗的免疫應(yīng)對，是目前豬瘟免疫不合格的一個重要緣由。 豬群感染圓環(huán)病毒PCV2后可加重藍耳病毒的感染強度，間接干擾母豬群對豬瘟疫苗的免疫應(yīng)對。方法：選擇合格的高效價的疫苗；加強管理提高豬體本身抵抗力。藍耳病的四個特點3、 容易變異藍耳病病毒是一切檢測到的RNA病毒里進化速度最快的病毒。 高致病性PRRSV 是NsP2基因533-561位延續(xù)缺失29個氨基酸和481位氨基酸的缺失毒株，使之表達

10、的E蛋白也發(fā)生了改動，毒力顯著加強。豬可以被兩種或兩種以上類型的藍耳病病毒感染藍耳病的四個特點4 、繼續(xù)感染豬感染后23周內(nèi)出現(xiàn)病毒血癥，且可以繼續(xù)67周。藍耳病毒可以在感染豬體內(nèi)存在數(shù)月，感染豬能排毒80-100天最長357天并感染同群豬。繼續(xù)性感染的后果：亞安康母豬存在，保育豬易感染。藍耳病的特征之一是其可以長時間在感染豬群及豬體內(nèi)存在，構(gòu)成繼續(xù)性感染主要傳播方式1.經(jīng)過初乳和乳汁將病毒傳給哺乳仔豬2.經(jīng)過精液傳給配種母豬；3.母豬假設(shè)在懷孕晚期感染PRRSV，那么可發(fā)生經(jīng)胎盤感染妊娠胎兒 疫病傳入的主要方式是引種藍耳病當(dāng)前主要病癥母豬沒有流產(chǎn)或偶爾出現(xiàn)；死胎、木乃伊能夠比較多或根本沒有；

11、產(chǎn)弱仔多，八字腿多；部分仔豬眼瞼水腫；母豬返情率很高；尤其配種后24-40天；44-61天返情；第一胎母豬返情率比較高；保育或中大豬呼吸道病很嚴(yán)重。喘氣、發(fā)燒比例20%以上。保育豬眼瞼腫脹、皮膚發(fā)白、毛粗硬、甚至腹部出現(xiàn)紫色出血點，耳朵發(fā)紫。PRRS-母豬繁衍妨礙表現(xiàn)方式：1、懷孕后期感染，流產(chǎn)，產(chǎn)新穎死胎，并且產(chǎn)活仔豬在斷奶前死亡率升高。2、母豬產(chǎn)前短時發(fā)熱或厭食，分娩時間延伸，產(chǎn)后無乳。3、母豬出現(xiàn)病毒血癥，背腹部或耳部出現(xiàn)針尖狀出血點。PRRS-仔豬呼吸妨礙表現(xiàn)方式：食欲不振，厭食，四肢皮膚出現(xiàn)“斑點樣充血或發(fā)紺；高熱，呼吸困難、腹式呼吸，犬坐；流淚，眼瞼水腫并構(gòu)成“淚斑1、發(fā)熱或不發(fā)熱

12、，厭食，流感樣病癥；2、難于控制的腹瀉；3、外表正常豬注射其他疫苗后即發(fā)病。PRRS-仔豬隱性感染PRRS-繼發(fā)感染皮膚發(fā)紅，發(fā)熱，減食，繼發(fā)細(xì)菌感染，副豬、鏈球菌、傳胸。呵斥病毒病免疫失敗，各種疾病混合感染。育肥豬發(fā)育緩慢，生長速度緩慢。保育階段損失20-30%防控措施控制藍耳病的三個根本點：合格、優(yōu)質(zhì)的弱毒苗免疫最根本的豬場生物平安措施必要的、適時的藥物保健措施藍耳病疫苗目前國內(nèi)現(xiàn)有滅活疫苗：傳統(tǒng)型滅活疫苗高致病性變異株滅活疫苗弱毒疫苗：傳統(tǒng)型毒株致弱活疫苗高致病性變異株致弱活疫苗自然弱毒株疫苗國內(nèi)豬繁衍與呼吸綜合征PRRS疫苗株活疫苗經(jīng)典PRRS疫苗 VR2332株CH-1RR98株高致

13、病性PRRS活疫苗湖南株HuN4-F112株 江西株JXA1-R株天津株TJM-F92藍耳病疫苗R98株 中岸，瑞普，南農(nóng)高科 3個廠豬繁衍與呼吸綜合征活疫苗(VR2332株) 德國 1個廠豬繁衍與呼吸綜合征活疫苗(Ch-1R株) 哈爾濱維科、上海海利、大北農(nóng)、成都天邦、普萊柯、諾倍威、南京乾元浩、華派和易邦 9個廠高致病性PRRSV活疫苗(JXA1-R株) 9個廠高致病性PRRSV活疫苗HuN4-F112株 4個廠高致病性PRRSV活疫苗TJM-F92株 5個廠豬繁衍與呼吸綜合征滅活疫苗(Ch-1a株 哈爾濱高致病性PRRSV滅活疫苗(JXA-1) 19個廠 藍耳病活疫苗列表31個廠目前的藍

14、耳病疫苗自然弱毒和人工弱毒的區(qū)別自然弱毒：本身不致病，在豬體內(nèi)天然存在，不會對豬產(chǎn)生任何影響致病，但是又具有良好的免疫原性，即接種后能有效的預(yù)防藍耳病的發(fā)生。人工弱毒：本是強毒，可以引起豬發(fā)病，但經(jīng)過人工方法致弱后，暫時不對豬產(chǎn)生致病性，接種后也可以預(yù)防藍耳病的發(fā)生，但后遺癥是假設(shè)干代后存在毒力返強的能夠，也就是說接種這種疫苗能夠會導(dǎo)致以后藍耳病的迸發(fā)。在科研中，自然弱毒株的疫苗是天然的疫苗，是可遇不可求的毒株，很多研討人員一輩子都得不到。37藍耳病弱毒苗免疫后的益處疾病形狀下縮短排毒時間縮短病毒血癥和繼續(xù)感染時間減輕肺組織的病變縮短病毒在臟器的存留時間預(yù)防情況下提高豬群免疫力杜絕了流產(chǎn)風(fēng)暴，

15、減輕PRDC的病情降低保育豬的發(fā)病率和死亡率、發(fā)病時疾病的可控程度顯著提高減少混合感染和繼發(fā)感染：可以降低圓環(huán)病毒感染對養(yǎng)殖場的影響影響PRRS疫苗質(zhì)量的關(guān)鍵要素免疫佐劑快速提升免疫力，加強免疫效果蘭芷優(yōu)-中國第1個藍耳病自然弱毒活疫苗蘭芷優(yōu)的優(yōu)勢自然弱毒株，平安穩(wěn)定不變異免疫原性好，經(jīng)典變異均維護抗原含量高，純真高效無應(yīng)激進口稀釋液，快速提升免疫力滴鼻和肌注，適用于任何豬群一、自然弱毒株，毒力不返強，平安穩(wěn)定不變異毒力返強實驗：R98株分別自藍耳抗體陽性而臨床安康的豬群，為美洲型自然弱毒株，高度平安穩(wěn)定。疫苗種毒在細(xì)胞上延續(xù)傳100代，豬體延續(xù)回歸10代，毒力穩(wěn)定，不返強。疫苗種毒體內(nèi)外延續(xù)

16、傳30代，病毒基因序列未發(fā)生變異，遺傳穩(wěn)定性好。蘭芷優(yōu)種毒不同代次病毒接種仔豬無致病性1-100代不返強不同代次病毒 仔豬發(fā)病率 病變陽性率病理變化臨床癥狀F1、F5、F10、0000F20、F35、F1000000蘭芷優(yōu)種毒不同代次病毒接種母豬無致病性實驗F1-F100)不同代次病毒 母豬發(fā)病率 病變陽性率病理變化臨床癥狀過胎率F1、F5、F1000000F20、F35、F10000000不同免疫劑量的平安性實驗：分別以單劑量和10倍劑量免疫1日齡仔豬、14日齡仔豬和不同日齡妊娠母豬配種前21天后備母豬，妊娠30天經(jīng)產(chǎn)母豬，妊娠60天經(jīng)產(chǎn)母豬及妊娠90天經(jīng)產(chǎn)母豬。免疫仔豬及母豬精神、食欲、體

17、溫均正常，無任何不良反響，母豬在預(yù)產(chǎn)期順利產(chǎn)仔，對各組所產(chǎn)仔豬進展RT-PCR檢測，均未檢測到藍耳病毒。結(jié)果闡明：該疫苗對豬是高度平安的。母豬平安性實驗?zāi)肛i種類后備母豬（配種前21天）經(jīng)產(chǎn)母豬（妊娠30天）經(jīng)產(chǎn)母豬（妊娠60天）經(jīng)產(chǎn)母豬（妊娠90天）組別免疫組對照組免疫組對照組免疫組對照組免疫組對照組母豬頭數(shù)55555555總產(chǎn)仔數(shù)5554555453545555死胎22122123弱仔11211211健康仔豬數(shù)5251525150515251檢測仔豬帶毒情況*0/550/540/550/540/530/540/550/55仔豬成活率94.5%94.4%94.5%94.4%94.3%94.4%

18、94.5%92.7% 注：各免疫每頭肌肉注射10頭份“蘭芷優(yōu)，對照組肌肉注射生理鹽水。免疫后察看豬體溫、采食量、增重情況，產(chǎn)仔情況及仔豬成活率等目的，并且對一切仔豬進展藍耳病毒PT-PCR檢測?！皺z測仔豬帶毒*：分母代表檢測數(shù)，分子代表陽性數(shù)。仔豬平安性實驗組別（10頭/組）接種劑量(頭份/頭)接種途徑連續(xù)觀察21日臨床表現(xiàn)連續(xù)28天RT-PCR檢測仔豬血清中PRRSV*7天14天21天28天7日齡健康易感仔豬1滴鼻10/10 正常9/106/100/100/107日齡健康易感仔豬1肌注10/10 正常10/106/101/100/107日齡健康易感仔豬對照肌注10/10 正常0/100/10

19、0/100/1014日齡健康易感仔豬10肌注10/10 正常10/107/102/100/1014日齡健康易感仔豬對照肌注10/10 正常0/100/100/100/10注：評價目的為：察看免疫豬體溫、采食量、增重情況；“*：分母代表檢測數(shù)，分子代表陽性數(shù)。蘭芷優(yōu)10個運用劑量注射后察看21天，豬的體溫、精神、食欲沒變化5頭份疫苗各注射0.2ml 察看10天全部存活蘭芷優(yōu)疫苗平安檢驗二、免疫原性好，經(jīng)典變異均維護R98株與美洲型經(jīng)典毒株VR2332株同源性高達99.5%以上，免疫后能有效刺激機體快速產(chǎn)生維護性抗體、細(xì)胞免疫和粘膜免疫，對藍耳病經(jīng)典毒株和變異毒株均能提供有效維護。對不同的藍耳病病

20、毒攻擊，均有良好的交叉維護，對普通藍耳病臨床維護95.4%以上，對高致病藍耳病維護率為80%以上。完全可替代進口藍耳病活疫苗。蘭芷優(yōu)對變異株藍耳病毒的攻毒維護實驗用2830日齡PRRSV抗體陰性安康仔豬5頭，每頭頸部肌肉注射1頭份蘭芷優(yōu)，同時設(shè)同齡PRRSV抗體陰性安康仔豬5頭作為對照。接種后30日，分別用變異毒株JXA1株105.0TCID50/ml攻擊，滴鼻2ml/頭，延續(xù)察看4周，根據(jù)體溫、臨床表現(xiàn)和轉(zhuǎn)歸情況進展斷定。結(jié)果闡明：疫苗免疫組發(fā)病率降低80%，死亡率降低40%。實驗證明：“蘭芷優(yōu)對變異株藍耳病有很好的免疫維護作用。見下表：蘭芷優(yōu)對變異株藍耳病毒的攻毒維護實驗組別豬號體溫40天

21、數(shù)臨床表現(xiàn)*歸宿* 發(fā)病率（%）死亡率（%）蘭芷優(yōu)免疫組A2- 20（1/5發(fā)?。?（0/5發(fā)?。〣4-C2-D5-E6 +-對照組F8 +100（5/5發(fā)病）40（2/5死亡）G10 +H6 +-I7 +-J8 +-注：實驗中攻毒毒株為豬繁衍與呼吸綜合征變異毒株JXA1株；臨床表現(xiàn)*：-無明顯臨床異常表現(xiàn)，+表示臨床病癥嚴(yán)重程度；歸宿*：-沒有死亡，剖殺，+死亡。三、抗原含量高，純真高效無應(yīng)激采用細(xì)胞工廠交換原有轉(zhuǎn)瓶消費工藝，同時采用病毒復(fù)種技術(shù)，在提高了病毒產(chǎn)量的同時，確保疫苗批內(nèi)一致，批間穩(wěn)定；采用超聲破碎收毒工藝，躲避傳統(tǒng)工藝對病毒免疫原性和效價的影響，確保每頭份疫苗抗原含量106.0

22、TCID50 (國標(biāo)105.0TCID50 )，病毒含量高，免疫無需加量，一次免疫僅需1頭份，即可產(chǎn)生較好的免疫維護。采用低溫延續(xù)流離心純化技術(shù)，快速有效地去除細(xì)胞培育液中細(xì)胞碎片等雜蛋白，疫苗純真無應(yīng)激。細(xì)胞工廠細(xì)胞工廠Cell Factory是一種設(shè)計精巧的細(xì)胞培育安裝，在有限的空間內(nèi)利用了最大限制的培育外表，從而節(jié)省了大量的廠房空間，無需進展任何廠房改造即可實現(xiàn)擴展產(chǎn)能的目的。采用世界最先進的丹麥NUNC公司消費的NUNC細(xì)胞工廠系統(tǒng)培育疫苗。目前有1，2，10和40層的規(guī)格的設(shè)備。低污染風(fēng)險，節(jié)省空間，培育外表經(jīng)測試保證最有利于細(xì)胞貼附和生長。特有的專利設(shè)計能有效的保證操作的無菌性，最大限制降低批間差別，提高病毒產(chǎn)量，實現(xiàn)操作規(guī)程化。細(xì)胞工廠培育設(shè)備病毒復(fù)種細(xì)胞長滿單層，接種病毒后，在培育液中再接種一層細(xì)胞，提高細(xì)胞密度，提高病毒產(chǎn)量，減少批間差別。延續(xù)流管式分別機低溫延續(xù)流離心純化技術(shù) Continuous centrifugation technique 1、去除雜蛋白等，降低疫苗副反響2、低溫環(huán)境，快速離心，堅持良好的抗原性四、進口公用稀釋液，快速提升免疫力中岸生物采用法國進口免疫加強劑，調(diào)理免疫功能，特別是提高細(xì)胞免疫效能，可有效提升疫苗的免疫效