實驗十五胰酶對蛋白質(zhì)的消化和影響酶作用的因素

1、重慶醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)實驗報告年級系班組姓名胰酶對蛋白質(zhì)的消化和影響酶作用的因素實驗?zāi)康模?、學(xué)習(xí)和掌握影響酶作用的因素。2、熟悉酶的催化作用。實驗原理：蛋白質(zhì)或者多種肽物質(zhì)在蛋白水解酶的作用下，水解肽鍵，生成小分子肽或者 氨基酸。蛋白水解酶對肽鍵具有一定的選擇性，在消化道中，幾種蛋白水解酶共同作用才能 使蛋白質(zhì)徹底水解為氨基酸。本實驗隨著白明膠的不斷水解，以還原的銀顆粒逐漸脫落下來， 底片逐漸變透明，根據(jù)底片是否透明以及透明的程度來判斷胰酶的活性的高低。酶是一種生 物催化劑，酶的活性受到多種因素的影響，這些包括酶濃度，底物濃度、溫度、pH、抑制 劑和激活劑。實驗材料和器材：1、器材曝光定影底片

2、、試管與試管架、吸量管、恒溫水浴箱、電熱水 浴鍋、冰浴。2、試劑 胰酶溶液、0.1mol/L磷酸緩沖液（pH=5）、0.1mol/L磷酸緩沖液（pH=7）、 0.1mol/L 磷酸緩沖液（pH=10）、0.2mol/L HgCl2 溶液（劇毒）、0.2mol/L NaCl。實驗步驟:1、酶濃度對酶活性的影響試劑試劑編號1234胰酶溶液（ml）1.51.00.5-蒸餾水（ml）-0.51.01.5磷酸緩沖液（ph=7）3.03.03.03.0放入相同大小曝光底片1張，記錄時間，40r水域加熱。2、溫度對酶活性的影響試劑試管編號1234胰酶溶液（ml）1.01.01.01.0磷酸緩沖液（ph=7）

3、3.03.03.03.0加曝光片前100C水浴40C水浴冰浴冰浴保溫觀察40C水浴40C水浴40C水浴冰浴放入相同大小曝光底片1張，記錄時間，40r水浴，反應(yīng)溶液應(yīng)該完全浸沒底片。3、pH對酶活性的影響。試劑試管編號123胰酶溶液（ml）111磷酸緩沖液（ph=5）3-磷酸緩沖液（ph=7）-3-磷酸緩沖液（ph=10）-3放入相同大小曝光底片1張，記錄時間，40r水浴。4、抑制劑對酶活性的影響試劑試管編號123胰酶溶液（ml）1.01.01.0磷酸緩沖液（ph=7）3.03.03.0Nacl溶液（滴）-3-Hgcl2 溶液（滴）-3放入相同大小曝光底片1張，記錄時間，40r水浴?！緦嶒灲Y(jié)果】

4、：1、酶濃度對酶活性的影響（表1）2、溫度對酶活性的影響（表2）3、pH對酶活性的影響（表3）、抑制劑對酶活性的影響（表4）實驗結(jié)論：在酶觸反應(yīng)系統(tǒng)中，當(dāng)?shù)孜餄舛冗h遠超過酶濃度時，酶觸反應(yīng)速度與酶濃度成正比關(guān)系。酶 觸反應(yīng)速度隨著酶濃度的增加而加快，隨著酶濃度的降低而減慢。溫度對酶活性有顯著影響。 低溫時酶反應(yīng)速度緩慢。當(dāng)溫度逐漸回升時候，酶觸反應(yīng)速度加快。低溫時酶活性雖然很低， 但酶很穩(wěn)定，不容易發(fā)生變形，溫度回升后，酶可以恢復(fù)活性。達到某一溫度時酶觸反應(yīng)速 度最大，酶活性最高，此溫度成為酶的最適溫度，胰酶的最適溫度在40攝氏度左右。胰酶 的最適pH在7左右。Hg離子能抑制胰酶的活性。酶濃度

5、，底物濃度、溫度、pH、抑制劑 和激活劑等多種因素，都影響酶的活性。注意事項：1、在研究一種因素對酶的活性的時，需要嚴格的控制反應(yīng)中其他因素保持不變， 只能改變要研究的某一種因素。2、掌握好水解程度是本實驗的關(guān)鍵之一。3、HgCl2有毒， 操作時要格外小心，嚴防中毒。思考題：1、除了本試驗中觀察的因素以外，影響酶活性的因素還有哪些？答：底物濃度等。2、酶反應(yīng)的最適溫度是一個常數(shù)嗎？它和哪些因素有關(guān)？高溫和低溫對酶活性的影響有何 不同？答：酶的最適溫度對于酶不是一個特征性常數(shù)，它與反應(yīng)的條件（如作用時間的長短、底物 濃度、酶濃度、pH等）有關(guān)。低溫時酶活性降低，溫度回升后，酶可以恢復(fù)活性，高溫時 酶活性降低，適當(dāng)降低溫度，酶可以恢復(fù)活性，溫度過高時，酶變性，降低溫度，不能