球菌分類和防治原則

1、 球菌分類和防治原則球菌（coccus）： 指個體形狀呈球形或橢圓形的一大類細(xì)菌。 病原性球菌（pathogenic coccus）：球菌 中對人類有致病性的球菌。包括四個屬 的一些球菌： 葡萄球菌屬：G球菌 鏈球菌屬：G球菌 腸球菌屬：G球菌 奈瑟菌屬：G球菌（腦膜炎、淋病奈 瑟菌） 化膿性球菌（pyogenic coccus）：引起機 體化膿性炎癥的球菌。第一節(jié) 葡萄球菌屬（staphylococcus）一、金黃色葡萄球菌（S. aureus） 二、凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）一、金黃色葡萄球菌（S. aureus） 球形，無鞭毛，無芽胞 葡萄串狀，革蘭染色陽性（G）（一）生物學(xué)性狀2.培

2、養(yǎng)特性易培養(yǎng)：普通平板 血平板產(chǎn)色素：金黃色 白色 檸檬色有些菌溶血，產(chǎn)生溶血環(huán)： 致病性葡萄球菌菌落呈金黃色，于血瓊脂平板上生長后，在菌落周圍還可見完全透明溶血環(huán)（溶血）。 3.生化反應(yīng)多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖。產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。致病性球菌分解甘露醇。觸酶陽性（與鏈球菌區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)）4.抗原構(gòu)造(1)葡萄球菌A蛋白： 細(xì)胞壁表面蛋白質(zhì)，完全抗原。 (2)莢膜多糖： 有利于細(xì)菌粘附 (3)多糖抗原： 存在于細(xì)胞壁，有群特異性。 SPAcapsuleteichoic acidpeptidoglycanSPA（staphylococcal protein A）SPAIgGFc receptorPHAG

3、OCYTEBACTERIUM 協(xié)同凝集試驗（coagglutination） SPA功能體內(nèi)作用： SPA與IgG結(jié)合后所形成的 復(fù)合物具有抗吞噬、促細(xì) 胞分裂、引起超敏反應(yīng)、 損傷血小板等多種生物活 性。體外作用： 用于多種微生物抗原檢測。 S.aureusAb 金黃色葡萄球菌（S. aureus） 表皮葡萄球菌（S. epidermidis） 腐生葡萄球菌（S. saprophyticus）性狀金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌菌落色素 金黃色 白色白色或檸檬色發(fā)酵甘露醇 + - -凝固酶 + - -溶素 + - -耐熱核酸酶 + - -致病性 + - -5.分類1)據(jù)色素、生化反應(yīng)致

4、病性葡萄球菌的鑒別三種葡萄球菌鑒別的主要性狀主要性狀金黃色葡萄球菌表皮/腐生性葡萄球菌色素金黃色白色/檸檬色血漿凝固酶（）甘露醇發(fā)酵溶血性耐熱核酸酶活性磷壁酸核糖醇型磷壁酸甘油型蛋白A（SPA）致病性強無或弱2）根據(jù)有無凝固酶分型： 凝固酶陰性菌和凝固酶陽性菌兩大型。繼而依據(jù)噬菌體分為4個噬菌體群和23個噬菌體型。III群引起葡萄球菌腸毒素食物中毒。3）根據(jù)核酸分析的遺傳學(xué)分型： DNA脈沖電泳分型、PCR分型等方法。 依16S rRNA不同，葡萄球菌屬分48個種和亞種。6.抵抗力對外界因素的抵抗力強于其他無芽胞菌對堿性染料（龍膽紫）敏感易產(chǎn)生耐藥性，特別對青霉素（MRSA）耐甲氧西林金黃色葡

5、萄球菌 葡萄球菌中金黃色葡萄球菌毒力最強，通過在宿主體內(nèi)增殖、擴散和產(chǎn)生有害的胞外物質(zhì)（酶和毒素）引起宿主疾病。 葡萄球菌的毒力因子（致病物質(zhì)）包括：酶；毒素；細(xì)菌的一些表面結(jié)構(gòu)蛋白。（二）致病性與免疫性1.致病物質(zhì)酶 凝固酶：血漿纖維蛋白原轉(zhuǎn)為纖維蛋白， 使血漿凝固 耐熱核酸酶：水解DNA 纖維蛋白溶酶：水解纖維素（纖維蛋白 溶酶、葡激酶） 透明質(zhì)酸酶：降解結(jié)締組織（擴散因子） 脂酶：分解脂肪 觸酶：分解H2O2毒素 葡萄球菌溶素 毒性休克綜合征毒素-1 殺白細(xì)胞素 腸毒素 表皮剝脫毒素表面結(jié)構(gòu)或蛋白 如粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖和SPA等 凝固酶（coagulase）概念：使含抗凝劑的人或兔

6、血漿發(fā)生凝固的酶類 游離凝固酶（free coagulas） 結(jié)合凝固酶（bound coagulase）意義：鑒別有無致病性的重要指標(biāo)致病機理：抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬；保護病菌不受 血清中殺菌物質(zhì)的破壞；使感染局限 化和形成血栓。引起金黃色燙傷樣皮膚綜合征 （staphylococcal scalded skin syndrome, SSSS）毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）引起機體發(fā)熱，增加對內(nèi)毒素的敏感性；引起多器官系統(tǒng)功能紊亂或毒性休克綜合征 （TSS）表皮剝脫毒素（exfoliative toxin）腸毒素（enterotoxin）約1/3臨床分離金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生引起急性胃腸炎

7、（即食物中毒）耐熱，抗胃腸液中蛋白酶作用機制：刺激嘔吐中樞導(dǎo)致以嘔吐為主要 癥狀的食物中毒還具有超抗原（superantigen）作用 葡萄球菌溶素（staphylolysin）溶素?fù)p傷細(xì)胞膜的毒素（細(xì)胞毒素）殺白細(xì)胞素（leukocidin）細(xì)胞毒素攻擊中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞抵抗宿主吞噬細(xì)胞，增強細(xì)菌侵襲力 2.所致疾病感染類型 所致疾病侵襲性 局部感染 全身感染毒素性 食物中毒 TSS SSSS 3.免疫性 人類有一定的天然免疫力，只有當(dāng)皮膚黏膜受傷后，宿主免疫力降低時，才易引起葡萄球菌感染。 感染后能獲得一定的免疫力，但不強，難以防止再次感染。小貓試驗標(biāo)本膿汁，血液，剩余食物，嘔吐物等分離

8、培養(yǎng)血漿凝固酶發(fā)酵甘露醇耐熱核酸酶直接涂片鏡檢革蘭陽性葡萄球菌生長現(xiàn)象色素，溶血生化反應(yīng)毒素檢查藥敏實驗動物實驗：對食物中毒患者（三）微生物學(xué)檢查法防 注意消毒隔離注意個人衛(wèi)生 防止醫(yī)源性感染 防止耐藥性產(chǎn)生治 抗菌素藥敏試驗自身菌苗療法四、防治原則二、凝固酶陰性葡萄球菌Coagulase negative staphylococcus, CNS泌尿系感染細(xì)菌性心內(nèi)膜炎敗血癥術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染 CNS已成為醫(yī)源性感染的常見重要病原菌，耐藥菌株日益增多；當(dāng)機體免疫功能低下或細(xì)菌進入非正常寄居部位時，CNS可引起多種感染，各類感染中僅次于大腸埃希菌，居病原菌的第2位，造成診治困難，引起臨

9、床微生物學(xué)工作者關(guān)注。 CNS除表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌外，還包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、頭葡萄球菌等30多種。 第二節(jié) 鏈球菌屬（Streptococcus）A群（化膿性）鏈球菌（S. pyogenes）肺炎鏈球菌（S. pneumoniae）概述1.概念 鏈球菌屬是一大類G、排列呈雙或 長短不一的鏈狀球菌。2.分類 1)溶血現(xiàn)象分類 鏈球菌在血瓊脂平板培養(yǎng)基上生長繁殖后，按產(chǎn)生溶血與否及其溶血現(xiàn)象分為3類：甲()型溶血；乙()型溶血；丙()型溶血。根據(jù)溶血現(xiàn)象分類溶血環(huán)現(xiàn)象名稱類別致病性草綠色溶血環(huán)溶血甲型溶血性鏈球菌多為條件致病菌完全溶血環(huán)溶血乙型溶血性鏈球菌溶血性鏈球菌致病力強不溶

10、血丙型鏈球菌不溶血性鏈球菌無致病性2）抗原結(jié)構(gòu)分類 據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁中抗原結(jié)構(gòu)（C多糖抗原）不同,運用血清學(xué)方法分成AV 20群。對人致病的鏈球菌菌株，90%左右屬A群，其他群少見。 同一群的鏈球菌又分若干型。A群根據(jù)其M抗原不同，可分成約100個型。3）生化反應(yīng)分類 對一些不具有群特異性的鏈球菌（如肺炎鏈球菌和草綠色鏈球菌等），需用生化反應(yīng)、藥物敏感和對氧的需要分類。對氧的需要分類分為：需氧、厭氧和微需氧鏈球菌。醫(yī)學(xué)常見鏈球菌鏈球菌 血清群 溶 血 診斷要點 引起常見疾病化膿性鏈球菌 A 群溶血；桿菌肽敏感皮膚感染，咽炎，風(fēng)濕熱，腎炎無乳鏈球菌 B 群溶血；桿菌肽不敏感新生兒敗血癥和腦膜炎水解

11、馬尿酸鹽牛鏈球菌 D 群不溶血；不耐6.5% NaCl敗血癥，心內(nèi)膜炎肺炎鏈球菌 溶血；膽鹽敏感肺炎，腦膜炎，心內(nèi)膜炎草綠色鏈球菌 或不溶血；膽鹽不敏感齲齒，心內(nèi)膜炎一、A群（化膿性）鏈球菌 本屬細(xì)菌的代表種，致病性強，對人致病的鏈球菌有90%屬此種。 1.形態(tài)與染色 球形或橢圓形，鏈狀排列，革蘭染色陽性（G），無芽胞，無鞭毛，透明質(zhì)酸的莢膜。(一)生物學(xué)性狀2.培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求高：血平板或含血清培養(yǎng)基；液體培養(yǎng)為沉淀生長；血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一，多數(shù)有透明溶血環(huán)（溶血現(xiàn)象）。 3.生化反應(yīng)分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。分解葡萄糖。不分解菊糖，不被膽汁溶解（可鑒別甲型溶血性鏈

12、球菌與肺炎鏈球菌）。鏈球菌不產(chǎn)生觸酶，與葡萄球菌不同。 4.抗原結(jié)構(gòu)分20個群，A群致病菌（溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌）根據(jù)蛋白抗原進一步分類M抗原莢膜細(xì)胞壁蛋白質(zhì)多糖肽聚糖細(xì)胞膜細(xì)胞質(zhì)1）多糖抗原（C抗原）群特異性抗原，細(xì)胞壁的多糖組分。 2）表面抗原或稱蛋白質(zhì)抗原：壁外的菌毛樣結(jié)構(gòu)含M蛋白，位于C抗原外層，具型特異性，有近100種血清型。M抗原與致病性有關(guān)。 3）P抗原或稱核蛋白抗原：無特異性。 5.抵抗力 一般鏈球菌均可在60被殺死，對常用消毒劑敏感。在干燥塵埃中生存數(shù)月。乙型鏈球菌對青霉素、紅霉素，四環(huán)素、桿菌肽和磺胺藥都很敏感。 A群鏈球菌有較強的侵襲力，產(chǎn)生多種外毒素和胞外酶。 致

13、病物質(zhì)可分三大類： 細(xì)菌的胞壁成分，胞壁上的粘附素 外毒素 胞外侵襲酶類（二）致病性與免疫性1)胞壁成分 (1)粘附素，包括： 脂磷壁酸（lipoteichoic acid, LTA）與生物膜有高度親和力，是該菌定植在機體皮膚和呼吸道黏膜等表面的主要侵襲因素。 F蛋白（protein F）位于化膿性鏈球菌細(xì)胞壁內(nèi)，其結(jié)合區(qū)暴露在菌體表面，是纖維粘連蛋白（fibronectin, FBP）的受體。有利于細(xì)菌定植和繁殖。(2)M蛋白（M protein） 是A群鏈球菌的主要致病因子，含M蛋白的鏈球菌具有抗吞噬和抵抗細(xì)胞內(nèi)殺菌作用；與某些超敏反應(yīng)疾病有關(guān)。(3)肽聚糖 A群鏈球菌的肽聚糖具有致熱、溶

14、解血小板、提高血管通透性和誘發(fā)實驗性關(guān)節(jié)炎等作用。 2）外毒素類 (1)致熱外毒素（pyrogenic exotoxin） 是人類猩紅熱的主要毒性物質(zhì)。致熱外毒素抗原性強，具有超抗原作用，對兔有致熱性和致死性。 (2)鏈球菌溶素（streptolysin） 溶解紅細(xì)胞、破壞白細(xì)胞和血小板。 A族鏈球菌可分為兩種溶血素（hemolysin）： 鏈球菌溶素O（SLO）：對哺乳動物多 種細(xì)胞有毒性作用 鏈球菌溶素S（SLS）：對白細(xì)胞和多 種組織細(xì)胞有破壞作用 3）侵襲性酶（invasive enzyme） A群鏈球菌可產(chǎn)生多種侵襲酶，均是擴散因子。（1）透明質(zhì)酸酶（hyaluronidase）：分

15、解 間質(zhì)內(nèi)透明質(zhì)酸，使病菌易擴散。（2）鏈激酶（streptokinase, SK）：與葡 激酶類似，使血液中纖維蛋白酶原 變成纖維蛋白酶，溶解血塊或阻止 血漿凝固，利于病菌擴散。（3）鏈道酶（streptodomase, SD）：亦稱 鏈球菌DNA酶，降解DNA，使膿 液稀薄，促進病菌擴散。 2.所致疾病A群鏈球菌引起的疾病約占人類鏈球菌感染的90% 淋巴管炎、蜂窩組織炎、扁桃體炎等。猩紅熱(3)超敏反應(yīng)性疾病(1)化膿性感染(2)中毒性疾病風(fēng)濕熱急性腎小球腎炎3.免疫性 可刺激機體產(chǎn)生各種抗體，獲得對同型鏈球菌的特異性免疫力。型別間無交叉免疫。 抗M蛋白抗體有保護作用，不同型M蛋白均可誘生

16、-干擾素。 猩紅熱患者可建立牢固的同型抗毒素免疫。標(biāo)本直接涂片鏡檢革蘭陽性鏈球菌分離培養(yǎng)膿汁，血液，咽喉拭子與金葡菌的鑒別與肺炎鏈球菌的鑒別典型鏈球菌形態(tài)典型的鏈球菌菌落必要時做：生化反應(yīng)或藥敏實驗等(三)微生物學(xué)檢查法血清學(xué)檢查 抗O試驗（ASO test）： 鏈球菌侵入體內(nèi)產(chǎn)生SLO，刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體ASO，當(dāng)兩者中和后，在加入SLO乳膠試劑，因病人血清中ASO量很多，未被中和的抗體與乳膠試劑反應(yīng)，產(chǎn)生凝集，為陽性；無凝集，為陰性。原理：中和試驗，用SLO檢測血清中的ASO方法：間接凝集結(jié)果：效價大于400單位意義：活動性風(fēng)濕熱及腎小球腎炎輔助診斷 積極治療兒童鏈球菌感染，防止發(fā)生急性

17、腎炎和風(fēng)濕熱。 抗生素首選青霉素：用長效青霉素預(yù)防鏈球菌感染，對減少腎小球腎炎及風(fēng)濕熱的發(fā)生有一定效果。(四)防治原則二、其他鏈球菌 （一）甲型溶血性鏈球菌：也稱草綠色鏈球菌（streptococcus viridians）。因無多糖抗原，故不屬于Lancefield血清學(xué)分類的任何族。包括多個種，條件致病，可引起下列兩種疾?。?1.齲齒（dental caries）：常由變形鏈球菌引起。 2.亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎（subacute bacterial endocarditis, SBE）由此菌引起的SBE占全部病例50%。 （二）B族鏈球菌 又稱無乳鏈球菌?？杉木佑谡D女陰道和直腸，也寄居

18、在健康人鼻咽部，故可引起皮膚感染、心內(nèi)膜炎、產(chǎn)后感染、新生兒敗血癥和腦膜炎。 （三）D族鏈球菌（條件致病菌） 本菌包括糞鏈球菌、牛鏈球菌和馬鏈球菌。D族鏈球菌正常寄居在皮膚、上呼吸道、消化道和泌尿生殖道，偶爾引起泌尿道感染、腹部化膿性感染、敗血癥和心內(nèi)膜炎。身體虛弱和免疫功能低下者易感染。 第三節(jié) 肺炎鏈球菌S. pneumoniae 在自然界廣泛分布，常寄居于正常人的鼻咽腔中，形成帶菌狀態(tài)，在機體抵抗力下降時引起疾病。主要引起大葉性肺炎，約占細(xì)菌性肺炎的80%。 1.形態(tài)與染色G，雙球菌矛頭狀：平面相對，尖面相背。有厚莢膜，無芽胞，無鞭毛。一、生物學(xué)性狀2.培養(yǎng)特性營養(yǎng)要求較高：常用血培養(yǎng)，

19、菌落與甲鏈 相似；能自溶。生化反應(yīng)：分解葡萄糖、乳糖和菊糖；膽 汁可溶菌。抵抗力：較弱 3.抗原結(jié)構(gòu) (1)莢膜多糖抗原 具有型特異性，可將肺炎鏈球菌分為型。 (2)其他抗原 肺炎鏈球菌含有M蛋白和C多糖。C反應(yīng) 蛋白（C reactive protein, CRP）不是 抗體，在炎癥活動期（如風(fēng)濕熱）含量 增多。致病物質(zhì)莢膜抗吞噬作用。所致疾病免疫性建立同型免疫，產(chǎn)生型特異的莢膜多糖抗體大葉性肺炎。還可引起急性或慢性支氣管炎、副鼻竇炎、中耳炎和兒童化膿性腦膜炎等。二、致病性與免疫性1.直接涂片鏡檢：G有莢膜的雙球菌2.分離培養(yǎng)：與甲鏈鑒別菊糖分解試驗?zāi)懼芫囼濷ptochin敏感試驗動物試

20、驗肺炎球菌莢膜（1000）“臍形”菌落三、微生物學(xué)檢查法多價肺炎球菌莢膜多糖菌苗預(yù)防治療抗生素四、防治原則第四節(jié) 奈瑟菌屬 Neisseria 奈瑟菌屬對人有致病性的有腦膜炎奈瑟菌(N. gonorrhoeae) 和淋病奈瑟菌（N. meningitidis），其余均為人類呼吸道正常菌群，偶而可引起腦膜炎和心內(nèi)膜炎等。 G雙球菌，無鞭毛、芽胞，有菌毛。 典型細(xì)胞內(nèi)寄生。一、腦膜炎奈瑟菌N. meningitidis G雙球菌,腎形或豆形，無鞭毛、芽胞，有菌毛。 專性需氧菌 巧克力培養(yǎng)基（一）生物學(xué)性狀3.抗原構(gòu)造與分類莢膜多糖群特異性抗原 分群外膜蛋白型特異性抗原 分型脂多糖抗原核蛋白抗原4.

21、抵抗力很弱四怕：熱、寒冷、干燥、消毒劑1.致病物質(zhì)主要是內(nèi)毒素2.所致疾病呼吸道傳播，飛沫或接觸流行性腦脊髓膜炎普通型暴發(fā)型慢性敗血癥型三種臨床類型菌毛：粘附于黏膜上皮細(xì)胞，利于定植；莢膜：有抵抗吞噬的作用；內(nèi)毒素：可引起發(fā)熱、微循環(huán)障礙，嚴(yán)重者可致內(nèi)毒素休克、血栓、DIC等。傳染源：病人和帶菌者（二）致病性與免疫性（三）免疫性 人對腦膜炎奈瑟菌抵抗力較強：機體感染后以體液免疫為主，血清中特異抗體能殺死腦膜炎奈瑟菌；抗體的調(diào)理作用能增強吞噬細(xì)胞的功能；分泌型IgA可阻止腦膜炎奈瑟菌對上呼吸道黏膜的粘附。 母體中的IgG還可通過胎盤傳給胎兒，故6個月內(nèi)嬰兒極少患流行性腦膜炎。（二）致病性與免疫性1.標(biāo)本3.分離培養(yǎng)與鑒定腦脊液、血液、出血點滲出液、鼻咽拭子保暖、保濕、立即送檢，培養(yǎng)基預(yù)溫。2.直接涂片鏡檢中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌，可作出初步診斷。巧克力（色）培養(yǎng)基