中醫(yī)試驗研究的基本方法與要求課件

1、第二節(jié) 中醫(yī)實驗研究的基本方法和要求為什么要介紹“中醫(yī)實驗研究的基本方法和要求”？兩條：（1）當(dāng)代的醫(yī)學(xué)實驗業(yè)已形成一套比較完整、公認(rèn)的方法學(xué)體系，長期以來推動了醫(yī)學(xué)研究與探索的發(fā)展，豐富了生命科學(xué)，以及防病、治病的知識。這樣的知識體系在國內(nèi)外研究中被普遍采納，中醫(yī)藥實驗研究也不例外。因此要掌握。（2）中醫(yī)實驗研究，在選題、設(shè)計等方面還具有鮮明的學(xué)術(shù)特色，應(yīng)予重視。1一、選題什么叫選題？選題是確定研究具體方向的過程。選題是開展任何一項科研活動的第一步，它是科研工作的起點，其目的就是要確定研究工作的內(nèi)容和對象?！罢n題的形成和選擇，無論作為外部的經(jīng)濟(jì)技術(shù)的要求，還是作為科學(xué)本身的要求，都是研究工作

2、中最復(fù)雜的一個階段，一般說來，提出問題比解決問題更困難。所以，評價和選定課題，便成為研究戰(zhàn)略的起點?！保ㄘ悹柤{）選題是研究工作者對某一問題在理論認(rèn)識上和實驗手段方面的概括。2如何選題，如何選擇實驗研究的領(lǐng)域、范圍？（一）選題的范圍 總的原則和范圍：“中醫(yī)藥學(xué)實驗研究必須為防病治病，保護(hù)人民健康服務(wù)”。 這句話涉及：醫(yī)學(xué)、中醫(yī)藥學(xué)兩個層次，表明是應(yīng)用或應(yīng)用基礎(chǔ)研究。這是本專業(yè)的特色。比如2003年春夏之交在我國發(fā)生了“非典”，成為了萬眾矚目的焦點，此時如何具體選題？能不能作為選題？什么叫“非典”？3非典的臨床表現(xiàn)： 病人通常以發(fā)熱（體溫38以上）為首發(fā)癥狀，多為高熱，并可持續(xù)12周以上，可伴有寒

3、戰(zhàn)或其他癥狀，包括頭痛、全身酸痛和不適、乏力，部分病人在早期也會有輕度的呼吸道癥狀（如咳嗽、咽痛等）。發(fā)病27天后，病人會有干咳、少痰、呼吸困難，少數(shù)進(jìn)展為急性呼吸窘迫綜合癥，約10的病人需要機械性通氣。血液化驗時白細(xì)胞數(shù)大多正?；蚪档?，胸部X線片顯示出不同程度的肺炎改變。 臨床診斷：上述疑似病例（1）加胸片顯示肺炎改變；上述疑似病例（2）加抗生素治療無明顯效果。4WHO關(guān)于SARS監(jiān)測的病例定義： 2003年4月1日，WHO公布SARS監(jiān)測病例定義如下：（1）疑似病例定義 任何人2002年11月1日以來，表現(xiàn)有以下病史： 發(fā)熱（38）和 咳嗽或呼吸困難和 癥狀出現(xiàn)10天前有以下一項或多項流行

4、病學(xué)暴露史 與疑似或可能SARS病例有密切接觸 到過有SARS地方性傳播地區(qū)（根據(jù)實際情況調(diào)整）的旅行史 有SARS地方性傳播地區(qū)的居民 （2）臨床診斷病例定義 疑似SARS病例并且有胸部X線肺炎表現(xiàn)或呼吸窘迫綜合癥的X線表現(xiàn)或 疑似SARS病例尸檢結(jié)果顯示呼吸窘迫綜合癥的病理改變并且沒有明確病因。 5能不能作為選題？如何選題？ 一些給出的選題范圍，可供參考：兵馬未動，糧草先行?？蒲行枰?jīng)費，經(jīng)費哪里來？在我國主要有縱向課題經(jīng)費與橫向課題經(jīng)費之分?？v向課題主要指國家到地方立項資助的課題。包括國家任務(wù)課題、指導(dǎo)性課題、自選課題等。橫向課題指非縱向課題，一般由企業(yè)、事業(yè)單位，以及民間機構(gòu)、個人等委

5、托研究的課題。6國家任務(wù) 是國家根據(jù)國民經(jīng)濟(jì)發(fā)展規(guī)劃與需求制訂的科研項目，屬于指令性的計劃調(diào)節(jié)項目。如國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃“973”計劃項目、“十一五”國家支撐計劃重大項目等。指導(dǎo)性課題 是國家自然科學(xué)基金委員會、國家中醫(yī)藥管理局、科技部、教育部、各省市科技廳/科技委員會、省市教育廳/教育委員會等部門設(shè)立的科研招標(biāo)項目。如自然科學(xué)基金資助類別有面上項目、重點項目、重大項目、重大研究計劃、國家杰出青年科學(xué)基金、海外及港澳青年學(xué)者合作研究基金、創(chuàng)新研究群體科學(xué)基金、國家基礎(chǔ)科學(xué)人才培養(yǎng)基金、專項項目、聯(lián)合資助基金項目以及國際（地區(qū)）合作與交流項目等。教材有詳細(xì)的介紹。7自選課題 是指縱向課題未

6、招標(biāo)的課題，由科研人員根據(jù)科學(xué)發(fā)展需要和專長提出的課題。通?？v向課題會留有一定的資助空間，接受自選課題，并予以資助。委托研究 一般來講是指接受企事業(yè)單位委托的應(yīng)用基礎(chǔ)及應(yīng)用開發(fā)研究，如新藥的藥學(xué)研究、藥理毒理學(xué)研究等。以上，除自選課題外，均有明確的招標(biāo)指南，明確了選題的范圍。大多研究人員會從中尋找有興趣的領(lǐng)域，申報項目，開展研究。許多人以后會持續(xù)活躍在這一領(lǐng)域。8 一些研究的分類：基礎(chǔ)研究（應(yīng)用基礎(chǔ)研究）是運用現(xiàn)代科技方法和手段，對中醫(yī)藥基本理論、人與自然界、遺傳與疾病的關(guān)系，以及病因與發(fā)病規(guī)律等給予探索，闡明中醫(yī)藥的特點和規(guī)律，如國家自然科學(xué)基金資助的項目多屬此類。應(yīng)用研究是指應(yīng)用基礎(chǔ)研究的

7、理論知識和成果，使自然科學(xué)基礎(chǔ)知識形成通用的技術(shù)原理和方法的研究，如參術(shù)膠囊治療脾虛胃癌癌前病變的研究。開發(fā)研究是指把基礎(chǔ)研究和應(yīng)用研究的成果進(jìn)一步開發(fā)應(yīng)用于防病治病的新方法、新產(chǎn)品、新材料、新技術(shù)的研究，如前列消炎止痛片的藥理毒理研究、銀黃滴丸的新藥開發(fā)研究等。9如何選題，有哪些基本原則？（二）選題的原則1需求原則。即選題的必要性，這是選題的最基本原則。必須根據(jù)國家經(jīng)濟(jì)建設(shè)和社會、學(xué)科發(fā)展的需要出發(fā)；以及根據(jù)中醫(yī)藥事業(yè)的發(fā)展以及中醫(yī)教育、臨床、科研的需要去選題。為什么？使得研究有意義、有價值，也容易獲得經(jīng)費資助。如何了解國家、地方和企業(yè)的需求呢？如何了解中醫(yī)學(xué)繼承和發(fā)展的需求呢？了解有關(guān)領(lǐng)域

8、國內(nèi)外研究動態(tài)、了解招標(biāo)指南；長期投身中醫(yī)藥科學(xué)研究積累經(jīng)驗，發(fā)現(xiàn)需求、判斷需求的輕重緩急。 切忌憑個人好惡。102重點原則。在若干選題中重要的，個人或項目組有能力完成的。對重點的判斷，有賴于豐富的學(xué)識和科學(xué)的洞察力。如何選擇？（1）研究各招標(biāo)指南。這是捷徑。（2）從自身的優(yōu)勢出發(fā)，揚長避短、發(fā)揮優(yōu)勢。例如，肝癌發(fā)病機制的研究、治療方案優(yōu)化的研究、肝癌腹水的研究、肝癌鎮(zhèn)痛的研究、肝癌食療的研究、肝癌脈診的研究等，如何選擇重點？選擇哪些好些，哪些不宜選擇？113創(chuàng)新原則。不宜重復(fù)、炒冷飯。何謂創(chuàng)新？創(chuàng)新包含探索和創(chuàng)造兩個連續(xù)的過程，探索是創(chuàng)新的前提，創(chuàng)新是探索中的發(fā)現(xiàn)和發(fā)明，是探索的結(jié)果和實現(xiàn)，

9、是探索的新發(fā)展。探索是從“未知”向“已知”的迫近，而創(chuàng)新則是“已知”的到達(dá)，是把“尚無”的認(rèn)識，變?yōu)椤耙阎钡恼J(rèn)識。創(chuàng)新涉及：理論、思路、方法、技術(shù)、成果等多方面。12如何做到選題的創(chuàng)新？（1）了解行情、動態(tài)，站在巨人的肩膀上。方法：查閱和研讀大量的文獻(xiàn)資料。早先“陰火”撰文沖動的故事。（2）研究中發(fā)現(xiàn)所存在問題、了解發(fā)展趨勢、明確突破口/切入點，具備判斷選題的洞察力。方法：開展長期的獨立研究、探索、思索、博聞（包括學(xué)術(shù)沙龍）。研究人員、團(tuán)隊是關(guān)鍵因素；研究方法手段先進(jìn)、高效是必要的。134科學(xué)性原則。包含3方面：（1）依據(jù)充分。包括前人經(jīng)驗和個人積累。（2）符合客觀規(guī)律。（3）符合科學(xué)和邏輯

10、。例如對研究工作的手段、方法、進(jìn)度、人才等做到合理組織、安排，人、財、物落實等。145可行性原則。指主要技術(shù)指標(biāo)實現(xiàn)的可能性，包括4個要素：（1）人力：個人和/或團(tuán)隊的知識結(jié)構(gòu)、能力與素質(zhì)、精力和年齡、專業(yè)及研究背景。（2）物力：研究條件，如實驗室、儀器設(shè)備等。（3）財力：研究經(jīng)費。（4）信息：獲得信息及信息處理的條件。許多選題明顯違反“可行性原則”，這是大多所申請項目未能批準(zhǔn)的原因。6特色原則。中醫(yī)藥課題須突出中醫(yī)特色，這也是客觀存在的行業(yè)分工。157效益性原則。指投資與預(yù)期成果的綜合效益。投資者希望有所回報，主要是出成果、出效益。基礎(chǔ)研究與應(yīng)用研究不同： 基礎(chǔ)研究 期望達(dá)到新的科學(xué)水平和社

11、會效益，集中體現(xiàn)在高水準(zhǔn)的學(xué)術(shù)論文、專著、會議論文，產(chǎn)生廣泛的學(xué)術(shù)影響； 應(yīng)用研究 則期望獲得使用價值和經(jīng)濟(jì)效益。常見的問題是對此不了解、不重視，甚至混淆兩者關(guān)系?？傊x題的原則包括：需求、重點、創(chuàng)新、科學(xué)、可行、特色、效益等7條。需要綜合考慮和應(yīng)用的。16中醫(yī)藥研究選題，有哪些基本思路？（三）選題思路選題思路指發(fā)現(xiàn)問題、提出問題、構(gòu)思解決方案的思考過程。選題思路即是選題過程的思考階段，思路往往來源于實踐，比如從學(xué)習(xí)、教學(xué)、科研等活動中產(chǎn)生靈感。主要有這樣一些經(jīng)驗：1從既往研究所開拓出的研究領(lǐng)域選題。這樣的研究，可以是自己的，也可以是他人的（通過文獻(xiàn)分析），這是選題的主要來源。在研究中，發(fā)現(xiàn)

12、問題，提出問題，解決問題。172從中醫(yī)療效優(yōu)勢出發(fā)。關(guān)鍵是如何確定優(yōu)勢所在，要有充分的依據(jù)。3從名老中醫(yī)和民間有獨特療效的經(jīng)驗和療法中去選題。這里也涉及到優(yōu)勢。4從中、西醫(yī)理論的不同中去選題。前提是不同的理論確實反映了真實。5從西醫(yī)空白點、中醫(yī)特點出發(fā)去選取課題。類似于第4點。6從中醫(yī)藥文獻(xiàn)收集、整理中去選題。同上，重點在開拓思路。18討論 冬令進(jìn)補臨近冬至，市面上流行“進(jìn)補”。說冬令進(jìn)補，春季打虎。有人贊成，有人反對；有的處方昂貴，有的處方便宜；有的處方大，有的處方小，等等。 忌口腫瘤患者手術(shù)、化療等治療后，體質(zhì)虛弱，習(xí)慣要求進(jìn)補。市面上盛傳不能吃飼養(yǎng)場出品的雞，要吃草雞，或者不能吃雞；甲魚

13、要野生的，不能吃人工養(yǎng)殖的。值得研究否？能不能作為選題？19（四）選題過程1大致明確范圍、形成思路，初步以選題原則衡量，修正。這可以有一個過程，甚至?xí)掷m(xù)很長時間。2如果你已經(jīng)開展了研究，那么仔細(xì)分析自己的研究結(jié)果，尋找新的選題是重要的途徑。3查閱、研究、分析國內(nèi)外有關(guān)文獻(xiàn)。了解研究現(xiàn)狀（甚至是沿革）、存在問題、發(fā)展趨勢，尋找新的起點和突破口。 目前最常用的是計算機關(guān)鍵詞檢索，比如前面介紹的CNKI，國際的PubMed等，一些流行的搜索引擎也可以。研究時間長了，會了解某一領(lǐng)域的知名學(xué)者，可以通過作者，檢索其最新研究動態(tài)。初涉者，可以先檢索某一領(lǐng)域的綜述，了解大致進(jìn)展，然后再跟蹤綜述后的進(jìn)展。2

14、04積極參加先進(jìn)實驗室的學(xué)術(shù)沙龍，小型研討會，以及國內(nèi)外一流的研討會。了解和掌握最新信息與動態(tài)。5把初步的想法與同道和學(xué)術(shù)權(quán)威交流，聽取意見和建議。這是捷徑。有人擔(dān)心，這樣一來，思路可能被別人拿去。對此，你可以選擇交流者。大多那些活躍在科研一線的學(xué)者，其研究往往已暴露出許多新的研究選題，往往無暇改變其研究方向，因此，不必多慮。而且，交流本身是雙向的，可以相互借鑒的，這也是交流的目的?？傊鲃优c具有經(jīng)驗者探討、請教等，不失為有效的方法。6以上 5 條，往往交錯進(jìn)行，使得選題、假說、設(shè)計逐步完善。大多研究人員一直在從事這些活動。一些大型研究中心，甚至動態(tài)公布各研究小組、實驗室最新研究進(jìn)展，促進(jìn)交流

15、。21選題完成的重要標(biāo)志之一是形成假說。什么叫假說？ （五）假說假說是根據(jù)已知的醫(yī)學(xué)原理和醫(yī)學(xué)事實，對所研究中醫(yī)學(xué)的現(xiàn)象及其本質(zhì)規(guī)律所作的一種假定性的說明，是醫(yī)學(xué)理論思維的一種重要形式。221假說的構(gòu)成要素和基本特點 “艾滋病致病因子的逆轉(zhuǎn)錄病毒假說”便是一個醫(yī)學(xué)假說的典型事例：艾滋?。ˋIDS），即人體獲得性免疫缺損綜合征，是當(dāng)代最引人注目的一種新發(fā)現(xiàn)的傳染病，被稱為“超級腫瘤”。艾滋病的病因是什么？人們根據(jù)有限的事實材料，提出過種種假說，“逆轉(zhuǎn)錄病毒假說”就是其中一種重要的假說。 1980 年和1982年期間，美國國立癌癥研究院的Robert Gallo（加洛），從兩個患同類型T 細(xì)胞癌的

16、患者體內(nèi)，成功地分離出一種能直接引起人類T淋巴細(xì)胞白血病的病毒（HTLV）。HTLV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，它的遺傳物質(zhì)是RNA，感染細(xì)胞后其RNA轉(zhuǎn)錄為DNA，并整合到宿主DNA基因組內(nèi)，導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生癌變。這提示HTLV就是人類T細(xì)胞白血病的特異抗原。23這期間（1981年），美國疾病控制中心首次報告了艾滋病病例，這種病不久便成了國際事件，引起了廣泛的研究。這些研究表明，艾滋病是通過身體的密切接觸或血液傳播的，其特點與HTLV的習(xí)性一致；HTLV主要侵犯T細(xì)胞，艾滋病的缺損也正好在T細(xì)胞；HTLV在加勒比海地區(qū)和非洲呈地方性流行，這與艾滋病的流行專區(qū)也很一致。根據(jù)人體逆轉(zhuǎn)錄病毒的這種傳染特征、流行

17、特征與艾滋病特征的相似性，加洛提出了艾滋病致病因子的逆轉(zhuǎn)錄病毒假說。24那么，假說有什么特征呢？從上可見，假說由4個基本要素構(gòu)成：（1）新的事實。如艾滋病的傳染、免疫缺損和流行特征。（2）醫(yī)學(xué)知識。如人類T淋巴細(xì)胞白血病病毒的傳染特征、流行特征及病毒遺傳學(xué)知識等。（3）對現(xiàn)象本質(zhì)符合邏輯的推測。上述假說的形成大體上就是運用了這樣一種規(guī)律，即HTLV有A、B、C、D特征，AIDS有A、B、C特征，HTLV是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒，所以ADIS的致病因子也可能是一種逆轉(zhuǎn)錄病毒。（4）推演出來的預(yù)言或預(yù)見。25歸納起來，假說具有以下兩個基本特點：（1）科學(xué)性。假說是建立在已有的醫(yī)學(xué)理論和醫(yī)學(xué)事實材料基礎(chǔ)上的

18、，它既不同于毫無事實根據(jù)的主觀臆測，也不同于缺乏科學(xué)論證的科學(xué)幻想。（2）假定性。假說往往是在醫(yī)學(xué)事實材料不充分的情況下，對疾病本質(zhì)規(guī)律和因果關(guān)系的一種推測，帶有假定性成分，有待于臨床或?qū)嶒灥臋z驗和理論論證，因而與確實可靠的醫(yī)學(xué)理論不同。26為什么要提出假說？2假說的作用（1）在醫(yī)學(xué)研究中的導(dǎo)向作用：提出新實驗或新觀察。（2）在醫(yī)學(xué)認(rèn)識中的橋梁作用：醫(yī)學(xué)知識延伸的觸角、藤蔓、橋梁，發(fā)現(xiàn)新知識、新領(lǐng)域。3提出假說應(yīng)遵循的原則（1）解釋性原則。指假說與事實的無矛盾性。（2）對應(yīng)原則。指假說與醫(yī)學(xué)理論的無矛盾性。（3）可檢驗性原則。指假說原則上要能夠用實驗進(jìn)行檢驗。27假說的重要性事例：“在大學(xué)二年

19、級第二學(xué)期的一次研討會上，我第一次接觸柏拉圖的理想國（柏拉圖）。它告訴我，一些重要問題需要提出來，這些問題并非全有答案；即便有答案，問題的提出也顯得更為重要?！保ü饡?，295，馬丁.A.林斯基，哈佛大學(xué)約翰.肯尼迪管理學(xué)院講師）28二、實驗研究設(shè)計實驗研究設(shè)計是指研究者制定實驗的具體方法，包括明確受試對象，處理因素和方法，控制條件，觀察指標(biāo)等。周密的實驗設(shè)計有助于獲得資助，并取得高效獲得可靠的研究結(jié)果。如何開展實驗研究設(shè)計？實驗研究設(shè)計包括哪些內(nèi)容？有以下一些要求：（一）實驗設(shè)計的3個基本原則哪3個基本原則？實驗設(shè)計的3個基本原則對照、隨機、重復(fù)。29為什么實驗要遵循這3個基本原則？為了提

20、高和保證實驗觀察結(jié)論的可靠性、真實性。1對照原則對照設(shè)立的目的：有助于判斷處理因素的作用及其程度，發(fā)現(xiàn)處理因素以外其他因素的影響，有效地控制偏差。對照設(shè)立的要求：把研究對象隨機地分入對照組與實驗組，各組例數(shù)相等，保證對照組與實驗組各條件一致，同時進(jìn)行實驗。對照的常見類型：正常對照、模型對照、空白對照、陽性處理因素對照、陰性處理因素對照、自身前后對照、交叉對照等。302隨機原則隨機（Randomization）是指每個受試對象都有同等機會被抽取，尤其是保證不受研究者主觀因素的影響。隨機方法是指將實驗對象隨機分配到各組中，以保證各組之間的均衡性和齊同性。隨機化方法一般采用抽簽法和查隨機數(shù)字表（或隨

21、機排列表）。前者簡單易行，但不適用于觀察例數(shù)較多的樣本；后者利用隨機數(shù)字表或隨機排列表，選擇可從任意行任意列開始，取出行列中的數(shù)字進(jìn)行隨機化分組，可以利用統(tǒng)計軟件例如SPSS、SAS進(jìn)行隨機分組。313重復(fù)原則重復(fù)（Replication，復(fù)制）是要求研究樣本對于相應(yīng)的總體具有代表性，因而要求研究樣本滿足與相應(yīng)總體的同質(zhì)性，以及足夠的樣本含量這兩個條件。當(dāng)研究樣本同質(zhì)性難以充分滿足時，則要求擴大樣本量；一旦當(dāng)實驗樣本大小受到具體操作的限制時，則要求多次重復(fù)實驗、多中心重復(fù)實驗。32（二）研究設(shè)計的基本要素實驗設(shè)計的基本要素包括處理因素、受試對象和實驗效應(yīng)?；疽氐恼_確定直接影響到實驗的結(jié)果

22、。因此，任何一項實驗都要從這3個要素著手，開展實驗設(shè)計。研究設(shè)計有哪4個基本要求？即研究設(shè)計的3個基本要素： 處理因素、 研究對象、 實驗效應(yīng)等基本要求，以及 樣本大小的確定。1處理因素處理因素又稱為研究因素，系指根據(jù)研究目的而施加的某種實驗措施，例如：一種藥品、一種治療方法等。33（1）處理因素的性質(zhì)及其分類1）自然因素，包括各種環(huán)境因素（物理的、化學(xué)的、生物的、社會的）和體內(nèi)因素（如高血壓、高血脂、年齡、性別等）。2）人為因素，是研究者從外部施加的干預(yù)因素，如治療的藥物，手術(shù)、心理危機干預(yù)等。通常實驗的處理因素為人為干預(yù)因素，通過干預(yù)了解其效果。（2）非處理因素非處理因素指除處理因素之外的

23、所有可能影響實驗結(jié)果的因素。如年齡、性別、飲食、環(huán)境等均會影響實驗的效果，但這些往往不是研究所提供，并關(guān)心的問題，屬非處理因素。實驗中要采取各種措施，盡可能使這些非處理因素控制在一定的程度內(nèi)，且各組保持一致，以免影響到實驗結(jié)果。34（3）處理因素的強度研究因素的次數(shù)、強度。例如，藥物的每次劑量和總量。即使是研究對象本身所具有的某些特征作為研究因素，也有一個類似強度的問題。顯然，研究因素的使用強度應(yīng)適宜，過大則易傷害對象或?qū)嶋H上無法使用，過小則難以觀察到應(yīng)出現(xiàn)的效應(yīng)，失去意義。（4）處理因素的數(shù)量一般來說，一次實驗的處理因素越少越好。因為處理因素一多，對研究結(jié)果可能造成綜合的、多方面的影響，不易

24、分解各處理因素的作用，對結(jié)果分析帶來一定困難。但在病因研究、影響診斷水平和療效的因素分析中，又常用多處理因素，且每個因素可能還有多個水平，可用多因素分析的方法分出主要的和次要的因素，了解相互間的交互作用。35（5）處理因素的標(biāo)準(zhǔn)化處理因素在整個實驗中應(yīng)保持一致和穩(wěn)定，否則將影響實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。如用藥必須使用同一批號，藥物在相同條件下保存，手術(shù)者操作熟練程度一致等。在正式研究開始后，不允許輕易更動，這樣就能在整個研究過程中，使研究因素的條件始終一致，所獲得的資料具有可比性，有利于分析研究因素與效應(yīng)之間的關(guān)聯(lián)。此外，在設(shè)計中應(yīng)將研究因素的使用方法規(guī)定得具體、細(xì)致。標(biāo)準(zhǔn)的制定要求參考國家、專業(yè)學(xué)術(shù)

25、團(tuán)體頒布的有關(guān)診斷、治療、藥劑等標(biāo)準(zhǔn)。36撕紙實驗（課堂作業(yè)）方法：左上角撕出方塊形、中間撕出圓形、右下角撕出三角形。37撕紙實驗方法：左上角撕出方塊形、中間撕出圓形、右下角撕出三角形。具體方法：左上角方塊正方形，邊長50mm，左、上邊距紙張邊緣分別為20mm。中間圓圓點位于紙張正中，直徑40mm。右下角三角直角三角形，直角邊的右側(cè)和下側(cè)邊與紙張右下角分別平行，距紙張邊緣分別為20mm，直角邊的邊長為40mm。38該實驗引申出的結(jié)論：（1）同樣的提法，認(rèn)識會有不同，學(xué)術(shù)爭鳴部分來源于此（以往經(jīng)驗差異導(dǎo)致認(rèn)知差異）；（2）方法要詳細(xì)準(zhǔn)確（常常出現(xiàn)：沒有說清楚、定義不細(xì)致或不準(zhǔn)確）；（3）工具要先

26、進(jìn)（尺、筆、剪）；（4）技術(shù)要培訓(xùn)、熟練嚴(yán)格的實驗，可以達(dá)到精準(zhǔn)的重復(fù)。“在科學(xué)研究中，說明概念的產(chǎn)生及測量的操作定義是必須的，這樣才會使實驗更為大眾所周知，同時也使專業(yè)研究更加準(zhǔn)確?！?9方法問題的笑話：警察問醉漢在路燈下干嗎，醉漢答道在尋找丟失在某個黑暗地方的鑰匙，警察問他為什么不在丟失的地方找，醉漢回答，路燈下光線好科學(xué)在某種程度上就如同那醉漢，在它工具能夠提供最好解釋的地方尋找整理。以上事例的提示：（1）選擇合適的方法，如白天。（2）發(fā)明創(chuàng)造新的方法，如金屬探測儀。（3）拓展思路，積極進(jìn)取；而非慵懶、迷戀或受制于已有技術(shù)、方法。中醫(yī)藥科研方法的選擇也是如此。402研究對象研究對象主要指

27、正常人或患者、實驗動物、組織器官或細(xì)胞。 413實驗效應(yīng)實驗效應(yīng)主要指處理因素作用于受試對象所引起的反映，這種效應(yīng)將通過觀察指標(biāo)顯示出來。觀察指標(biāo)按其性質(zhì)的不同可分為：連續(xù)變量與離散變量。 連續(xù)變量 又稱計量指標(biāo)、線性變量、量變量或區(qū)間變量，用整數(shù)、分?jǐn)?shù)或小數(shù)來表示；變量的大小，在同類同單位之間存在著相等的距離，如身長、體重、血壓、血鈉等的計量。 離散變量 又稱計數(shù)指標(biāo)，是將變量指標(biāo)按其屬性或類別分組，然后數(shù)清其個數(shù)，它又可分為有序等級變量和無序等級變量。42選擇觀察指標(biāo)應(yīng)注意如下問題：（1）特異性：指所選用的指標(biāo)與研究目的要有本質(zhì)上的聯(lián)系，并能確切地反映出研究因素的效應(yīng)，易于揭示研究問題的本

28、質(zhì)，不易為其他因素干擾，回答所要回答的問題。如觀察藥物的鎮(zhèn)咳作用，就應(yīng)該選擇咳嗽的潛伏期和咳嗽次數(shù)作為評價指標(biāo)。（2）靈敏度：指所選用的指標(biāo)能夠如實地反映研究對象體內(nèi)微量效應(yīng)變化。如研究某藥治療缺鐵性貧血的效果，可以選用血紅蛋白、血清鐵蛋白的含量作為指標(biāo)，但以血清鐵蛋白的含量較能靈敏地反映處理因素的效應(yīng)。（3）真實性（又稱準(zhǔn)確性）：系指研究結(jié)果與相應(yīng)測定事物真實情況符合或接近的程度。由指標(biāo)的靈敏性和特異性兩個指標(biāo)構(gòu)成。43（4）客觀性：指所選指標(biāo)能客觀地記錄，不易受主觀因素指標(biāo)的影響。如在抗炎實驗中，評價二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響時，選擇耳腫脹度作為評價指標(biāo)。當(dāng)然還有一些細(xì)胞水平、分子水平的客

29、觀指標(biāo)。（5）精確性：比如在長期毒性實驗中，評價藥物的安全性時選擇血常規(guī)、肝功能（ALT、AST等）、腎功能（BUN、CREA等）等公認(rèn)的精確指標(biāo)。（6）可靠性（又稱重復(fù)性、重現(xiàn)性）：指反復(fù)測量一種相對穩(wěn)定現(xiàn)象時，所獲結(jié)果彼此接近或符合的程度。44有人提出理想指標(biāo)分為3類12個要求。第一類：合理性、正確性、特異性、重現(xiàn)性和客觀性，這5個要求中不符合其中之一者，該指標(biāo)就不能選用。第二類：靈敏性、無偏性、技術(shù)上可能性，這3個是對指標(biāo)的進(jìn)一步要求，選定時盡可能滿足。第三類：可轉(zhuǎn)換性或變換性（即從指標(biāo)所測得變量直接看不出規(guī)律， 要進(jìn)行數(shù)學(xué)上的變換）、能分級（指質(zhì)的指標(biāo)，其變化程度可分級比較以便統(tǒng)計分析

30、）、 能與其他指標(biāo)配合，以及對人體試驗所用的指標(biāo)的無害性。當(dāng)選取兩個以上的指標(biāo)時，除應(yīng)用每個指標(biāo)說明效果之外，還需要把幾種指標(biāo)的結(jié)果綜合在一起來總體評價。45（三）樣本大小的確定（第三章論述詳細(xì)，可參）樣本量與處理因素、受試對象、實驗效應(yīng)，以及隨機、重復(fù)等有關(guān)。若樣本量過少，往往容易得到假陰性的結(jié)果，檢驗效能低，影響結(jié)論正確性；若樣本量過大，會增加研究的困難，造成不必要的人力、物力、時間和經(jīng)濟(jì)上的浪費。樣本大小的確定，就是要保證科研結(jié)論具有一定可靠性條件下，確定最小觀察例數(shù)。1樣本大小的粗略估計藥理學(xué)有關(guān)大動物、中等動物、小動物數(shù)量參見教材。這主要是考慮到實驗操作的可行性，數(shù)量大則難以操作，會

31、增加實驗的誤差，且也成本高。462決定樣本大小的一些因素（1）各組別樣本數(shù)量與實驗設(shè)計有關(guān)。有些設(shè)計的樣本需求量大，有些則小些。其大小依次為：完全隨機設(shè)計配對設(shè)計隨機區(qū)組設(shè)計拉丁方設(shè)計序慣設(shè)計，所需樣本容量依次減少。（2）樣本之間的個體差異越小，所需樣本容量越少。（3）實驗方法越精確，誤差小，所需樣本容量越少。（4）處理效果越明顯，組間差別越大，所需重復(fù)數(shù)越小。（5）計量資料比分類計數(shù)資料所需樣本數(shù)少，容易取得統(tǒng)計學(xué)意義。（6）實驗樣本數(shù)與檢驗水準(zhǔn)成反比，比如取P0.01所需樣本自然比取P0.05所需要的樣本容量大。473樣本大小估算的一些指標(biāo)一些指標(biāo)：（1）具有研究指標(biāo)的總體均數(shù)、總體率的估

32、計值，樣本均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差S 及樣本率P，這些值來源于以往的實驗，通過查閱文獻(xiàn)資料得到，或從預(yù)實驗結(jié)果中得到。（2）確定容許誤差，即相比較的兩總體參數(shù)的差值，如=1-2 。（3）第I類錯誤的概率（即檢驗水準(zhǔn)）。越小，需要的例數(shù)越多。一般取0.05，亦可根據(jù)具體情況選取。（4）第II類錯誤的概率，1-又稱為檢驗效能，1-越大，需要的例數(shù)越多。一般取=0.1，大則 易出現(xiàn)非真實的陰性結(jié)果，即假陰性結(jié)果。（5）考慮是單側(cè)檢驗還是雙側(cè)檢驗。484樣本大小的估算（1）定性反應(yīng)結(jié)果的樣本容量估計（更正部分?jǐn)?shù)據(jù)）（2）定量反應(yīng)結(jié)果的樣本含量估計1）兩樣本均數(shù)的比較2）治療前后或配對計量資料的比較教材上有詳細(xì)的論

33、述，請仔細(xì)閱讀。49（四）常用實驗設(shè)計方案常用實驗設(shè)計方案有哪些，各自的意義如何？如何選擇應(yīng)用？實驗設(shè)計方案總的來說可以分為單因素與多因素兩大類：單因素設(shè)計方案 就是一個觀察因素的不同強度水平作用效應(yīng)間差異的研究，或稱為單因素K水平的實驗設(shè)計（其中K=1為單組設(shè)計，K=2為配對或成組設(shè)計，K3為稱為單因素多水平設(shè)計）。多因素設(shè)計方案 就是兩個以上觀察因素的不同強度水平作用效應(yīng)間差異的研究，包括交叉設(shè)計、配伍組設(shè)計、拉丁方設(shè)計、裂區(qū)設(shè)計、正交設(shè)計、析因設(shè)計和具有重復(fù)測量的多因素設(shè)計。50教材介紹了9個實驗，并附有實例，請參閱。1完全隨機設(shè)計2配對設(shè)計3配伍組設(shè)計（先將條件相近的受試對象配成一配伍

34、組，每個配伍組的受試對象數(shù)取決于對比組的組數(shù)，然后將每個配伍組中的受試對象按隨機方法分配到多個對比組中去，給以不同處理。）4分層隨機設(shè)計（首先根據(jù)研究目的，結(jié)合研究對象的特征，選定某些可能對研究結(jié)果有重要影響的的因素（非處理因素）進(jìn)行分層，然后再從每一層中隨機抽取研究對象按規(guī)定分配到各實驗組去。）5交叉實驗設(shè)計（將A、B兩種處理因素先后施加于同一批受試對象，隨機地使半數(shù)對象先接受A，后接受B；另一半對象先接受B，后接受A，兩種處理在全過程中交替進(jìn)行。）516析因?qū)嶒炘O(shè)計（是一種多因素（例如A兩個水平、B兩個水平）的交叉實驗設(shè)計，可檢驗各因素之間的交互作用，節(jié)約樣本含量。）7拉丁方實驗設(shè)計（3個

35、因素的實驗，且三因素水平數(shù)相等；行間、列間、處理間均無交互作用。按拉丁方的字母，行和列安排處理及影響因素。）8正交實驗設(shè)計（利用一套規(guī)格化的正交表，使每次實驗的因素及水平得到合理的安排。用來找出各因素對指標(biāo)的影響，并可指出哪些是主要的，哪些是次要的，哪個起獨立作用，哪個起交互作用；選出各因素中的一個最佳水平。）9序貫實驗設(shè)計（逐一實驗逐一分析，一旦可以下結(jié)論時，立即停止實驗。）52思考：中藥講究藥性；中藥配伍后，藥性是否會發(fā)生變化？或者復(fù)方是否存在藥性？西藥是否存在藥性？如何檢測和評價中藥、方劑，或者西藥的藥性？能不能設(shè)計這樣的實驗？是什么樣的設(shè)計？53三、研究準(zhǔn)備研究準(zhǔn)備是實驗研究過程中的關(guān)

36、鍵環(huán)節(jié)。主要包括以下內(nèi)容：1開題和項目論證。目的：（1）由專家審定項目設(shè)計是否可行，并提出建設(shè)性意見。（2）申請項目資助。2落實和管理研究經(jīng)費。通過不同途徑獲得實驗研究經(jīng)費后，要求嚴(yán)格管理，專項專用。543研究方法的突擊進(jìn)修大多初次從事實驗研究者，以及那些具有長期研究背景者，將采用所不熟悉的新方法、新技術(shù)時，均要求對將要采用的技術(shù)、方法進(jìn)行了解、比較，突擊進(jìn)修。比如類似技術(shù)的不同方法、研究條件、研究費用，方法的穩(wěn)定性、重復(fù)性；以及具體操作、關(guān)鍵技術(shù)，檢測單樣本的耗時、前后支撐技術(shù)等。這些問題不解決、不掌握，會影響到實驗的具體設(shè)計、安排，以及實驗的質(zhì)量。而了解這些的最佳途徑就是進(jìn)修，從頭到尾親身

37、經(jīng)歷一遍，甚至幾遍，到熟練掌握為止。4預(yù)初實驗預(yù)初實驗通常指在正式實驗前的準(zhǔn)備性、探索性的小實驗，是為正式實驗作鋪墊、準(zhǔn)備。55預(yù)初實驗的內(nèi)容廣泛，比如開展導(dǎo)向性實驗，以判斷正式實驗的意義；觀察性實驗，為正式實驗參考；篩選性實驗，對藥物、技術(shù)、方法等進(jìn)行篩選，如選定劑型（水煎劑、片劑等）、決定給藥途徑、確定劑量、對任何一種特定的分析方法的回收率、變異率、標(biāo)準(zhǔn)誤差等進(jìn)行試驗性研究、估計正式試驗動物數(shù)量和統(tǒng)計方法；決斷性實驗，初步驗證假說，等等。廣泛意義上的預(yù)初實驗還包括熟練掌握儀器的操作方法、了解儀器的設(shè)計原理、校正儀器、造模和方法學(xué)建立等等，而這些對于一個初涉實驗研究的學(xué)生、學(xué)者尤為重要。56

38、預(yù)初實驗的廣度和深度也是不一樣的。有時，以往的研究積累，在某種意義上講也是在此基礎(chǔ)上的后一項研究的預(yù)初實驗。在本科生的教學(xué)中，預(yù)初實驗往往包含技能的培訓(xùn)和實驗方法建立的雙重目的。對于那些缺乏研究基礎(chǔ)，缺乏研究背景的初從事實驗研究者，預(yù)初實驗十分必要。沒有這樣的準(zhǔn)備，直接耗巨資去從事某項實驗研究是有重大風(fēng)險的：實驗者是否具備實驗的能力，假說能否得到合理的驗證，研究的思路和技術(shù)方案是否合理，等等均不明朗。這樣不能樹立起投資者的信心，獲得資助的可能性會非常小。575實驗方法、實驗材料、試劑的整理。正式開展實驗前，要求整理出詳細(xì)的實驗方法；整理出詳細(xì)的試劑、材料；整理出詳細(xì)的儀器設(shè)備，以及操作方法。6

39、研究對象、試劑、材料的準(zhǔn)備（1）研究對象的準(zhǔn)備：中醫(yī)實驗的對象主要有人、實驗動物和細(xì)胞。要求細(xì)化和落實具體實驗對象及其方法，包括與實驗對象密切相關(guān)的實驗環(huán)境、場所。如細(xì)胞生物學(xué)實驗，選用哪一種細(xì)胞系，初步培養(yǎng)和傳代，了解其生物特性。細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境及設(shè)備，如倒置顯微鏡、培養(yǎng)箱、超凈臺、無菌室等條件、環(huán)境要求準(zhǔn)備就緒。58（2）試劑的準(zhǔn)備：當(dāng)試劑清單列出后，貨比三家，制定出最為合理的購買計劃，申購。獲得試劑后，要求按試劑的存放要求，以及實驗室試劑管理制度合理存放。一些具有危害性的試劑要求按有關(guān)規(guī)定進(jìn)行使用記錄，專人保管。所有試劑及其試劑母液應(yīng)盡可能在實驗前給予配置完成，貼上標(biāo)簽，按要求歸類存放。對p

40、H有要求的試劑，要求先調(diào)整試劑的pH值，最后才定容，以免失去調(diào)整pH值的容積。（3）材料的準(zhǔn)備：申購實驗材料，分類存儲。以及玻璃試管、培養(yǎng)皿、量筒、漏斗的清洗等。59（4）中藥制劑的準(zhǔn)備：在中醫(yī)實驗中中藥使用得十分頻繁，經(jīng)常在動物模型制作、治療干預(yù)等方面使用。中藥制劑的制備建議參考中藥制劑專著，參考臨床用藥要求，必要時建議參考古代用藥方法。制劑完成后應(yīng)該按要求合理存放。標(biāo)簽上注明內(nèi)容、濃度、日期等項目。7實驗場所的準(zhǔn)備和實驗流程的制定（1）實驗場所的準(zhǔn)備，包括取材或組織材料收集的場所，以及實驗觀察的場所的準(zhǔn)備。（2）制定詳細(xì)合理的實驗流程和方案。60四、實驗實施實驗實施是指在研究準(zhǔn)備工作完成之

41、后所開展的正式實驗。實驗實施的注意事項如下：1受試對象。首先依據(jù)研究計劃，落實和篩選受試對象。受試對象要求符合實驗要求，因此要依據(jù)條件逐一入選或剔除。然后依據(jù)研究計劃進(jìn)行分組，安排到不同的組別中去。比如購入一批小鼠后，進(jìn)行初步檢測，剔除那些體重過大、過小，或畸形者。一些要求造模的實驗動物，在造模結(jié)束后，要求剔除那些造模不成功，以及那些不符合實驗要求的模型動物，保證受試對象的條件近似。612處理因素。嚴(yán)格按計劃選用處理因素對受試對象進(jìn)行干預(yù)，例如不同標(biāo)準(zhǔn)的治療方法、強度、頻率等，實驗動物往往采用灌胃、注射等給藥方法。以造模為目的的實驗，實施造模方法，有采用中西藥物的，有手術(shù)切除某一組織器官的，有

42、模擬人類外傷的，有遺傳篩選的，等等，應(yīng)該根據(jù)不同實驗的要求查閱有關(guān)文獻(xiàn)確立，并觀察模型成功與否。623實驗效應(yīng)。大多實驗，研究的主要工作在實驗效應(yīng)的觀察、實驗數(shù)據(jù)的收集與記錄，以及實驗數(shù)據(jù)的分析。（1）觀察：觀察大體可以分為非創(chuàng)傷性檢測和創(chuàng)傷性檢測兩類。前者如測量血壓、大多影像學(xué)檢測，以及中醫(yī)四診的觀察等；后者，創(chuàng)傷性檢測，集中在動物實驗，如某組織的取材、處理、組織中目標(biāo)成分的檢測等，涉及到大量的檢測技術(shù)：生理、解剖取材、生化、病理、免疫、分子生物學(xué)技術(shù)等，一些新近發(fā)明或改良的方法技術(shù)，可以參考有關(guān)期刊的文獻(xiàn)報道。當(dāng)檢測項目多、樣本大、參與人員多，則要求制定詳細(xì)的分工和安排。63觀察往往是整個

43、實驗階段占時間最長、涉及的人員最多、步驟最復(fù)雜的工作，因而也是最容易發(fā)生誤差或差錯的一環(huán)。因此，實驗的質(zhì)量控制應(yīng)貫穿在實驗的全過程，涉及到實驗人員的質(zhì)量意識、責(zé)任心、業(yè)務(wù)水平，儀器設(shè)備的檢驗和校正，實驗材料及實驗動物的標(biāo)準(zhǔn)化，試樣的采集、預(yù)處理，測量和實驗方法的規(guī)范與標(biāo)準(zhǔn)，儀器與試劑的校準(zhǔn)與標(biāo)定、全部操作到讀取實驗數(shù)據(jù)，以及實驗環(huán)境控制等整個測量過程或測量系統(tǒng)的質(zhì)量控制方面。64有兩個概念：GLP（Good Laboratory Practice）：藥品非臨床安全性研究質(zhì)量管理規(guī)范，即實驗室優(yōu)化管理規(guī)則。SOP（Standard Operation Procedure，標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序）是將某一事

44、件的標(biāo)準(zhǔn)操作步驟和要求以統(tǒng)一的格式描述出來，用來指導(dǎo)和規(guī)范日常的工作。SOP格式：標(biāo)題、目的、職責(zé)、參考文件、材料器具、操作程序。這些對于實驗的各個環(huán)節(jié)、步驟均有效。65（2）實驗數(shù)據(jù)的收集與記錄：任何一項實驗結(jié)果均需用實驗數(shù)據(jù)來說明。因此要求采用正確的收集方法，保證所獲得的實驗數(shù)據(jù)真實、可靠、全面。實驗數(shù)據(jù)的收集的關(guān)鍵環(huán)節(jié)是實驗記錄。如實驗檢測結(jié)果的記錄、臨床觀察記錄、各種化驗和檢查記錄、調(diào)查詢問記錄等。記錄的表達(dá)形式根據(jù)指標(biāo)的類型不同也不相同。無論采用何種獲取或表達(dá)方式，都必須采取相應(yīng)的措施確保實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。作好原始記錄是執(zhí)行科研設(shè)計的重要工作。原始記錄是科研工作客觀事實的唯一反映形式

45、，是科研工作的最重要的檔案。為了規(guī)范中醫(yī)藥科研實驗記錄，提高中醫(yī)藥科研實驗質(zhì)量，國家中醫(yī)藥管理局頒發(fā)了中醫(yī)藥科研實驗記錄規(guī)定，要求在實驗研究中認(rèn)真執(zhí)行。其原則是恰當(dāng)、統(tǒng)一、真實和準(zhǔn)確、完整、清楚。66為了保證工作質(zhì)量，應(yīng)采用定人、定量、定質(zhì)、定物的措施。定人即對一些重要的數(shù)據(jù)資料，由專門指定的或受過訓(xùn)練的人員去負(fù)責(zé)收集，不隨便指派他人或經(jīng)常換人；定量指按照設(shè)計要求每天必須完成的記錄項目、次數(shù)等，使之形成習(xí)慣，避免遺漏；定質(zhì)是為了保證數(shù)據(jù)質(zhì)量的科學(xué)性，遵照規(guī)定的時間、操作要求、判斷標(biāo)準(zhǔn)作出真實準(zhǔn)確的記錄；定物指自始至終使用同一個經(jīng)過校準(zhǔn)的檢測用具，以減少儀器誤差。同時在實驗實施過程中要經(jīng)常地、定

46、期地進(jìn)行檢查，隨時發(fā)現(xiàn)問題，及時給予解決和糾正，以保證順利地、有質(zhì)量地完成實驗數(shù)據(jù)資料的收集工作。674制定與貫徹研究計劃（1）制訂嚴(yán)密、細(xì)致的實施方案。涉及： 按照科研設(shè)計方案把復(fù)雜的科研內(nèi)容按不同的性質(zhì)及要求分解為一個一個的研究問題，并對每個問題提出明確的技術(shù)要求。 安排好各個研究問題的先后順序及時間進(jìn)度安排，把每天作的具體工作落實到具體的人員，認(rèn)真詳細(xì)地作好日計劃、周計劃、月計劃等，需要對課題組成員進(jìn)行明確的分工，制定出工作起止日期、工作量、技術(shù)要求等。并對研究過程中可能出現(xiàn)的某些問題進(jìn)行必要的分析和提出預(yù)防措施。 合理安排科研實驗條件及經(jīng)費。 制訂相關(guān)制度。如嚴(yán)格做好實驗記錄、質(zhì)量控制

47、制度、按時歸檔制度、定期檢查制度、綜合分析評價制度、獎懲制度等。68（2）實施條件落實和監(jiān)督保障。涉及： 課題組成員明確分工、定期交流實驗進(jìn)展情況，協(xié)調(diào)開展。涉及協(xié)作單位者，亦要求分工、研究時間節(jié)點明確和落實。 項目承擔(dān)單位要定期檢查項目組項目開展情況，進(jìn)行質(zhì)量監(jiān)控；并在人力、物力、財力和時間等方面給予保證和支持。69五、 常見的偏倚、誤差及控制方法1偏倚與誤差 什么叫偏倚和誤差？ 偏倚（Bias） 是指在實驗過程中，由于某些非處理因素的干擾所形成的系統(tǒng)誤差，歪曲了處理因素的真實效果。偏倚實際上是一種系統(tǒng)誤差，就是對真實情況的偏離。誤差 是指實驗中的原始數(shù)據(jù)與真實值之差，樣本的統(tǒng)計量與相應(yīng)的總

48、體參數(shù)之差。70常見的有：（1）選擇性偏倚：主要是納入觀察對象的方法不正確而產(chǎn)生的的偏倚。例如選入實驗組和對照組的體重、年齡、性別等差異懸殊，影響到最后的實驗結(jié)果。（2）測量性偏倚：測量性偏倚又稱觀察性偏倚，產(chǎn)生于科研實施階段，系由于兩個研究組所采用的測量和觀察方法不一致所造成的系統(tǒng)誤差。測量性偏倚常見原因如污染、干擾、依從和非依從、失訪、檢查和診斷結(jié)果不一致、觀察記錄的失誤等。一些誤差如：1）過失誤差：指研究者在實驗過程中偶然失誤造成的誤差。如閱讀誤差、抄寫錯誤等，在實驗過程中應(yīng)注意檢查，否則將影響實驗研究結(jié)果的準(zhǔn)確性。712）系統(tǒng)誤差：在實驗過程中產(chǎn)生的一些誤差，假若其值衡定不變，或按一定

49、的規(guī)律變化，稱為系統(tǒng)誤差。3）隨機誤差：在同一條件下對同一對象反復(fù)進(jìn)行測量，在極力消除或改正明顯的系統(tǒng)誤差之后，每次測量結(jié)果仍然會出現(xiàn)一些無規(guī)律的隨機性變化，對這些變化稱為隨機誤差。如果隨機誤差是服從正態(tài)分布，可用統(tǒng)計學(xué)的方法進(jìn)行分析判斷。（3）混雜性偏倚：觀察結(jié)果時，由于與研究因素同時并存的非實驗因素的作用，該作用影響到觀察的結(jié)果，造成混雜因素的偏倚，稱為混雜性偏倚。72如何在實驗中控制偏倚和誤差？2偏倚、誤差的控制方法（1）選擇性偏倚的控制方法1）強調(diào)嚴(yán)格的科研設(shè)計：多數(shù)偏倚發(fā)生于科研的設(shè)計階段，可來源于選擇研究對象或?qū)φ盏牟煌祝绯闃臃椒ú徽_，診斷標(biāo)準(zhǔn)不統(tǒng)一，樣本大小不適當(dāng)，觀察組和對

50、照組缺乏可比性等。也可來源于決定調(diào)查方法和資料收集方法時考慮不周，如調(diào)查表設(shè)計不好，實驗室指標(biāo)缺乏質(zhì)控，判斷結(jié)果時缺乏客觀的方法等。2）隨機化方法和盲法，正確設(shè)立對照。3）采用分層/限制抽樣的方法。4）配對。73（2）測量性偏倚的控制方法1）盲法實驗。2）檢查實驗對象的依從情況。3）儀器設(shè)備的定期校正，操作技術(shù)的標(biāo)準(zhǔn)及執(zhí)行，以及操作人員的培訓(xùn)。4）對每種實驗方法、診斷標(biāo)準(zhǔn)、重復(fù)判斷的一致性應(yīng)在實驗前作出估計。5）定期檢查研究記錄，發(fā)現(xiàn)問題，及時糾正和彌補。（3）混雜偏倚的控制方法：采用分層抽樣，貫徹隨機化原則等措施能有效地控制混雜偏倚。在某些情況下，為節(jié)約樣本含量、節(jié)省實驗時間等種種原因，研究

51、者可以保留少數(shù)混雜偏倚，最后在分析時用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計分析方法處理。74（4）數(shù)據(jù)處理對偏倚、誤差的校正1）分層：分層是指將科研資料按某些影響因素分成數(shù)層（亞組）進(jìn)行分析。2）標(biāo)準(zhǔn)化：當(dāng)我們比較兩個率時，如果兩組對象內(nèi)部構(gòu)成存在差別足以影響結(jié)論時，可用率的標(biāo)準(zhǔn)化加以校正，亦即使可能影響結(jié)果的因素受到同等的加權(quán)，則這兩個率可比，無偏倚，這種方法稱為標(biāo)準(zhǔn)化（或調(diào)正）。753）多變量分析：Logistic回歸模型是現(xiàn)代流行病學(xué)危險因素研究的首選方法。不論在病因和發(fā)病因素的研究或預(yù)后的研究中，危險因素或預(yù)后因素和疾病的關(guān)系都是非常復(fù)雜的，各種危險因素或預(yù)后因素之間可以互相影響，它們對結(jié)果的影響大小也不相同。

52、采用該模型進(jìn)行多變量分析，能在復(fù)雜關(guān)系中平衡多種混雜因素的作用，進(jìn)一步篩選出主要的危險因素或預(yù)后因素，及其在決定病因和發(fā)病以及預(yù)后中的相對比重。76阿司匹林鎮(zhèn)痛實驗。哈迪等自身的實驗發(fā)現(xiàn)阿司匹林具有鎮(zhèn)痛作用。他們給不知情的軍人實驗，用藥前后檢測耐受灼熱的程度，但是讓他們吃驚的是，一半以上的被試，結(jié)果相反！以后克拉克等人（1969，1974）發(fā)現(xiàn)阿司匹林降低了感覺系統(tǒng)的敏感性，而針灸和安慰劑改變了報告感知疼痛決策的閾值。這樣的結(jié)論是否可靠、全面？實際是阿司匹林的鎮(zhèn)痛作用并不強，類似于中藥對于一些病證。77六、實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析為什么要對實驗數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析？統(tǒng)計學(xué)處理 就是對研究資料進(jìn)行條理化和系

53、統(tǒng)化的加工過程，通過對大量資料進(jìn)行數(shù)量分析、通過偶然發(fā)現(xiàn)必然，透過現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)規(guī)律。中醫(yī)藥實驗研究常用的統(tǒng)計分析方法有哪些？ 統(tǒng)計方法有許多，如何選擇呢？781根據(jù)研究目的選擇統(tǒng)計分析方法選擇統(tǒng)計分析方法，要確定研究目的是統(tǒng)計描述，還是統(tǒng)計推斷。統(tǒng)計描述主要描述樣本特征，不考慮抽樣誤差問題。描述的形式有列表描述，圖示描述和特征數(shù)描述（如平均數(shù)、標(biāo)準(zhǔn)差、百分比、百分率等）。統(tǒng)計推斷是通過樣本所提供的信息來推斷總體特征，考慮了抽樣誤差問題。推斷的內(nèi)容包括：（1）估計總體參數(shù)：用樣本指標(biāo)估計總體指標(biāo)的所在范圍，如總體均數(shù)或總體率的區(qū)間估計。（2）比較差別：通過參數(shù)檢驗或非參數(shù)檢驗，運用邏輯推理判斷方法，

54、確定事物間的差別是隨機的（差別無統(tǒng)計學(xué)意義），還是非隨機（本質(zhì)）的（差別有統(tǒng)計學(xué)意義）。如 t 檢驗、F 檢驗、X2 檢驗、u 檢驗、H 檢驗、Ridit 分析等。79（3）尋找關(guān)系：尋找事物內(nèi)在的聯(lián)系和事物之間的關(guān)聯(lián)性。 描述和分析兩個變量以及多個變量的相關(guān)關(guān)系。如直線相關(guān)、等級相關(guān)分析；多元線性相關(guān)；配對四格表資料的相關(guān)性、吻合性；雙向有序資料的相關(guān)性；行列表資料行列屬性的獨立性等等。 描述和分析一個因變量y與一個自變量x 之間，一個因變量Y與兩個自變量 X1，X2 之間以及一個因變量 Y 與多個自變量 X1，X2Xm 之間的依存關(guān)系、曲線回歸。 病因分析，尋找危險因素（如吸煙與肺癌的關(guān)系

55、），而且還可分析出危險因素作用的強弱，如病例對照研究；隊列研究。80（4）正常值范圍、容許區(qū)間的估計：應(yīng)根據(jù)資料的頻數(shù)分布類型選定估計方法。常用的估計方法有： 正態(tài)分布法（包括均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差法、對數(shù)正態(tài)分布的均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差法、正態(tài)概率紙法）； 容許區(qū)間法； 百分位數(shù)法； 直線回歸法； 圓形分布法（角度正常值的估計）等。（5）圓形分布的研究：如晝時性或季節(jié)性資料，尋找“好發(fā)”時間。（6）事物分類：判別分析和聚類分析是研究事物分類的統(tǒng)計分析方法。前者是根據(jù)已總結(jié)出的類別來判斷新的觀察單位應(yīng)屬于哪一已知類別，可用于計量診斷及預(yù)測；后者是在尚不知事物的類別時對它進(jìn)行分類，可用于生物及醫(yī)學(xué)現(xiàn)象的分類研究。（7）

56、其他：如病例隨訪資料的生存分析等等。81以下內(nèi)容請自修教材：2根據(jù)資料類型選擇統(tǒng)計分析方法3根據(jù)統(tǒng)計設(shè)計類型選擇統(tǒng)計分析方法4根據(jù)資料的總體分布類型是否已知選擇統(tǒng)計分析方法5結(jié)合統(tǒng)計學(xué)與專業(yè)知識選擇統(tǒng)計分析方法826實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析的小結(jié) 綜上所述，中醫(yī)藥統(tǒng)計分析的主要步驟與方法如下：（1）收集與統(tǒng)計整理資料。（2）常用統(tǒng)計指標(biāo)：集中趨勢（如算術(shù)平均數(shù)、中位數(shù)M等）與離散趨勢（如標(biāo)準(zhǔn)差S、方差S2、變異系數(shù)CV等）；相對數(shù)（如率、構(gòu)成比）；相關(guān)系數(shù) r、回歸系數(shù)b；半數(shù)有效量ED50、半數(shù)致死量LD50等。（3）分析資料：計算標(biāo)準(zhǔn)誤進(jìn)行參數(shù)估計，根據(jù)資料的性質(zhì)選擇檢驗方式（如 t 檢驗、u 檢

57、驗、X2 檢驗、F 檢驗、非參數(shù)檢驗、Ridit 分析等）。83（4）多元統(tǒng)計方法：醫(yī)學(xué)現(xiàn)象復(fù)雜多變，如疾病的發(fā)生、病情的變化、轉(zhuǎn)歸、預(yù)后等往往包含著眾多因素的作用，為充分運用觀察資料的綜合信息，分析其因果關(guān)系及內(nèi)在聯(lián)系，作出科學(xué)的符合實際的結(jié)論，須采用多因素分析的方法，比如多元線性回歸、逐步回歸、判別分析、聚類分析、主成分分析、因子分析、典型相關(guān)分析、logistic與Cox回歸分析等。（5）統(tǒng)計結(jié)果采用統(tǒng)計圖與統(tǒng)計表表述在實驗數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析中，建議使用計算機及其統(tǒng)計軟件。計算機的應(yīng)用為大量的信息儲存與檢索、復(fù)雜數(shù)據(jù)的處理、抽樣模擬等，尤其是對多因素分析的開展提供了條件，我們應(yīng)該充分利用好統(tǒng)計

58、軟件，如SAS統(tǒng)計軟件、SPSS統(tǒng)計軟件等。84注意：有的學(xué)者十分重視統(tǒng)計結(jié)論，甚至忽視了數(shù)據(jù)的實際意義。 臨床意義與統(tǒng)計意義。貝爾納 在其實驗醫(yī)學(xué)研究導(dǎo)言（1865）說：統(tǒng)計學(xué)不可能產(chǎn)生出實驗科學(xué)，僅可以推測關(guān)于某個特定事例的或大或小的概率，但是卻永遠(yuǎn)不可能獲得任何確實性，也永遠(yuǎn)不可能獲得任何絕對的決定。只有以實驗的決定論為基礎(chǔ)，它才能夠成為一門真正的科學(xué)，即一門可靠的科學(xué)。85有關(guān)香煙消費與肺癌死亡的國際調(diào)查十分有趣：國家1930年香煙消費量1950年死亡人數(shù)/百萬*澳大利亞480180加拿大500150丹麥380170芬蘭1100350英國1100460荷蘭490240冰島23060挪威

59、25090瑞典300110瑞士510250美國1300200* 肺癌患者。* 實驗心理學(xué)（p62）沒有標(biāo)記出香煙消費量的單位（支/箱）。86 相關(guān)系數(shù)=0.737，P =0.01 直線回歸系數(shù)b=0.228，P =0.01 20年后肺癌死亡人數(shù)/百萬 = 0.228 香煙消費量 - 0.228 香煙消費量均數(shù) + 20年后肺癌死亡人數(shù)/百萬均數(shù)87有關(guān)研究結(jié)論一些說法：“人生并非主要或甚至很大程度上由事實和事件組成，而是由大腦中永遠(yuǎn)迸發(fā)的思想狂暴構(gòu)成的?！保∕ARK TWAIN）被訓(xùn)練的小白鼠將硬幣銜回籠內(nèi)，并不意味著小白鼠是守財奴。88巴甫洛夫：“怎樣對條件反射進(jìn)行研究呢？一般說來狗吃東西時

60、，你會看到它的肌肉在蠕動，還不時地把食物塞進(jìn)嘴里，嚼著、咽著。根據(jù)這一切我們可以說，它從吃食中得到了很大樂趣但繼續(xù)解釋和分析卻發(fā)現(xiàn)，我們已經(jīng)陷入了一個老掉牙的問題中了，即我們不得不設(shè)法處理好狗的感情、希望等難題。結(jié)果令人非常震驚，我與另一個同事之間發(fā)生了不可調(diào)和的分歧，我們不能達(dá)成共識，也無法證明到底誰對仔細(xì)反思這種情況后，我們發(fā)現(xiàn)很可能是我們的路走錯了必須要選擇另一條出路終于我們實現(xiàn)了真正的純客觀。我們絕對禁止自己（實驗室里有一個具體的強制性懲罰措施）使用諸如狗想、狗需要、狗希望等此類的心理學(xué)術(shù)語?！贝罂茖W(xué)家有，小科學(xué)家也會發(fā)生，這是很自然的。問題在于如何主動避免、形成避免的機制，并貫徹。8