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1、福建農(nóng)林大學(xué)本科畢業(yè)論文開題報(bào)告論文題目:茶樹離體培養(yǎng)體系優(yōu)化學(xué)院:一園 藝_專業(yè)年級(jí):茶學(xué) 2011學(xué)號(hào):41姓名:韋素娟指導(dǎo)教師、職稱:孫威江教授/2014年3月15日一、立題意義及國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀與存在問(wèn)題,主要研究?jī)?nèi)容及擬解決的關(guān)鍵性問(wèn)題(含文獻(xiàn)綜述)本項(xiàng)目研究的意義離體培養(yǎng)又稱植物組織培養(yǎng),是近幾十年發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)用于植物無(wú)性繁殖的新技術(shù),它主要是以植物細(xì)胞的全能性為理論依據(jù),利用植物的器官(根、莖、葉、花、果實(shí)、種子)、組織(表皮、胚、胚乳)細(xì)胞(如體細(xì)胞)以及原生質(zhì)體等,通過(guò)無(wú)菌操作,在人工控制條件下對(duì)其進(jìn)行 培養(yǎng),誘導(dǎo)出不定芽、愈傷組織、不定根,最后獲得完整的再生植株的過(guò)程。利

2、用組織培養(yǎng)技術(shù) 可以培育新品種,且周期比較短,生長(zhǎng)快,不存在變異,能夠保持母本的一切遺傳特征,也可以 解決一些植物不產(chǎn)種子或種子少的難題等。本項(xiàng)目研究在國(guó)內(nèi)外的研究現(xiàn)狀茶樹種質(zhì)資源保存一般是通過(guò)建立茶樹資源圃進(jìn)行保存,即在外界的自然環(huán)境條件下進(jìn)行種 質(zhì)的保存。這種保存方法較可靠,但是也有很多弊端,如消耗人力財(cái)力,占地面積廣,管理繁瑣, 容易遭受病蟲害、干旱、霜凍等自然災(zāi)害。優(yōu)化茶樹的離體培養(yǎng)體系,并將體系運(yùn)用到種質(zhì)資源 保存,可以縮小占用空間,增大繁殖系數(shù),且讓茶樹不受外界不利的環(huán)境條件或栽培因數(shù)的影響。茶樹組織培養(yǎng)始于上世紀(jì)60年代末,是由英國(guó)的劍橋大學(xué)用茶樹幼嫩精短的一部分材料通過(guò)組織培養(yǎng)

3、來(lái)研究咖啡堿的離體合成【1】。我國(guó)在茶樹組織培養(yǎng)方面起步較晚,不過(guò)近些年在各研究者的共同努力下,通過(guò)對(duì)茶樹的莖段、葉片、腋芽、種子等進(jìn)行組織培養(yǎng),相繼獲得完整的植株 【2】。本項(xiàng)目研究的主要內(nèi)容及擬解決的問(wèn)題本實(shí)驗(yàn)在吳婉婉是師姐的基礎(chǔ)上進(jìn)行。主要是通過(guò)黃旦的葉片進(jìn)行愈傷培養(yǎng),得到一定愈傷數(shù)量后進(jìn)行愈傷分化,即分化出芽,根。在愈傷培養(yǎng)階段加入碳粉試探碳粉對(duì)的愈傷組織的成長(zhǎng)發(fā) 育是否有影響,以及碳粉是否可以降低愈傷組織的褐化率。愈傷分化的目的主要是通過(guò)對(duì)植物調(diào) 節(jié)激素的量的控制來(lái)篩選出最佳激素配方的培養(yǎng)基。參考文獻(xiàn):郭玉瓊,陳財(cái)珍,等.茶樹花藥愈傷組織誘導(dǎo)及茶多酚含量測(cè)定J.福建茶葉,2001(4

4、):7-10江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)第四期,江昌俊茶樹育種學(xué)M.北京:中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社,2005.楊國(guó)偉,蘭蓉,等茶樹愈傷組織誘導(dǎo)和組織培養(yǎng)J.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2006(04):122-124.程柳,湯浩如.茶樹組織培養(yǎng)及影響因素 J.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007(07):1960-1963張學(xué)文,劉選明,等.茶樹愈傷組織誘導(dǎo)與共培轉(zhuǎn)化的初步研究J.湖南農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào),1994(06):5劉德華.茶樹愈傷組織繼代培養(yǎng)與體細(xì)胞胚發(fā)生J.作物學(xué)報(bào),1995(04):470-4747袁弟順,林麗明,等.不同品種茶樹愈傷組織的培養(yǎng)與茶氨酸的積累J.福建農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004(02): 178-181方祖檉.茶樹愈傷組織多倍體誘

5、導(dǎo)J.黃山學(xué)院學(xué)報(bào),2007(06):87許益娟.茶樹組織培養(yǎng)再生體系優(yōu)化與遺傳轉(zhuǎn)化的研究J.南京農(nóng)業(yè)大學(xué),2012(01):6成浩 楊素娟,等.茶樹愈傷組織培養(yǎng)及其兒茶素累積J.茶葉科學(xué),1993(02):109-114陳志輝.茶樹黃觀音幼籽愈傷組織誘導(dǎo)與分化初步研究J.福建茶葉,2010(09):32-35成浩 李素芳.茶樹組織培養(yǎng)再生技術(shù)的研究J.中國(guó)茶葉,1996(03):28-30吳揚(yáng),鄧婷婷,等.茶樹組織培養(yǎng)的影響因素及應(yīng)用展望J.茶葉通訊,2009(02): 14-17黃燕芬,周國(guó)蘭,等.降低茶樹組織培養(yǎng)中外植體褐化程度的研究J.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2009(05):1492-1495

6、陳志輝茶樹不同外植體組織培養(yǎng)與試管苗保存研究初探J.福建農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2010(06):726-730楊亞萍,鄭新強(qiáng)茶樹組織培養(yǎng)中的褐化控制研究J.茶葉,2013(01):3-7吳婉婉,孫威江.茶樹組織培養(yǎng)研究進(jìn)展J.亞熱帶農(nóng)業(yè)研究,2013(02):133-139段運(yùn)裳茶樹組織培養(yǎng)研究進(jìn)展J.福建茶葉,2007(02):7-9趙瑋茶樹組織培養(yǎng)中外植體褐化的控制J.甘肅農(nóng)業(yè)科技,2008(06):10-12陳曉玲.茶樹離體再生體系與微型嫁接的研究J.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué),2011(07):51鄔秀宏,李中林,等茶樹組織培養(yǎng)中外植體褐化控制的研究J.西南農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2012(03)1065-1068二、本課題

7、的主要研究?jī)?nèi)容和方法、步驟、預(yù)期目的研究的主要內(nèi)容:黃旦愈傷組織的培養(yǎng)愈傷組織的芽的誘導(dǎo)愈傷組織根的誘導(dǎo)移植得到完整植株方法及步驟愈傷培養(yǎng)基制配:a:MS+ 6-BA+ NAA+30g 蔗糖 + 瓊脂 +0b:MS+ 6-BA+30g 蔗糖 + 瓊脂 + Cc: MS+ 6-BA+30g 蔗糖 + 瓊脂 + Cd: MS+30g 蔗糖 + 瓊脂 + Cd: MS+30g 蔗糖 + 瓊脂 + C實(shí)驗(yàn)材料的選取,并進(jìn)行愈傷接種:取黃旦較嫩鮮葉經(jīng)過(guò)殺菌處理后在無(wú)菌工作臺(tái)上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,將葉片切成小塊四方形(5mn 5mr)接在無(wú)菌培養(yǎng)基里。暗處理一周后,在室溫16 2C,光照時(shí)間12h/d,光照強(qiáng)度

8、1000 1500Lx。經(jīng)常去試驗(yàn)室去檢查有沒(méi)有污染,要及時(shí)清理,以免造成更多的污染,發(fā)現(xiàn)污染的要及時(shí)找出原因,作出調(diào)整。分析碳對(duì)愈傷生長(zhǎng)的影響。篩選長(zhǎng)好的愈傷組織分化培養(yǎng)基制配:a: MS+30g蔗糖+瓊脂b: MS+30g蔗糖+瓊脂c: MS+30g蔗糖 + 瓊脂d: MS+30g蔗糖+瓊脂e: MS+30g蔗糖+瓊脂f: MS+30g蔗糖+瓊脂g: MS+30g蔗糖+瓊脂h: MS+30g蔗糖+瓊脂i: MS+30g蔗糖+瓊脂j: MS+30g蔗糖+瓊脂在無(wú)菌操作臺(tái)上進(jìn)行愈傷移植至分化培養(yǎng)基中,在室溫16 2C,光照時(shí)間 12h/d,光照強(qiáng)度1000- 1500LX條件下培養(yǎng)。經(jīng)常去試驗(yàn)室去檢查有沒(méi)有污染,要及時(shí)清理,以免造成更多的污染。并記錄分化情況。獲得植株并移植預(yù)期目的本次實(shí)驗(yàn)的成功取決于愈傷組織的培養(yǎng),得到足夠的愈傷才可進(jìn)行下一步的誘導(dǎo)分化。及篩選出 好的分化培養(yǎng)基。三、研究工作總體安排及具體進(jìn)度2013年12月至2014年3月:茶樹織培養(yǎng)研究現(xiàn)狀等文獻(xiàn)的查閱,收集文獻(xiàn)資料和試驗(yàn)材料;2014年3月至4月:進(jìn)行茶樹愈傷組織接種培養(yǎng)實(shí)驗(yàn),記錄

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