核殼型白藜蘆醇分子印跡微球研制及應(yīng)用

1、核-殼型白藜蘆醇分子印跡微球研制及應(yīng)用【摘要】以外貌修飾乙烯基團(tuán)的si2微球?yàn)榛w，白藜蘆醇為模板分子，丙烯酰胺aa為成效單體，乙二醇二甲基丙烯酸酯egda為交聯(lián)劑，接納外貌印跡技能制備核-殼型白藜蘆醇印跡微球。接納紅外光譜ir、掃描電子顯微鏡se對(duì)該分子印跡微球舉行表征，效果表白，si2外貌樂(lè)成接枝一層厚度為200n的印跡聚合物，該印跡微球顆粒疏散勻稱。接納高效液相色譜技能對(duì)印跡微球的吸附性舉行研究表白，此印跡微球具有精良的識(shí)別性能，使用sathard模子闡發(fā)得出印跡微球的最大吸附量別離為qax1=9.087g/g和qax2=13.80g/g。此印跡微球樂(lè)成用于疏散虎杖提取液中白藜蘆醇?！娟P(guān)

2、鍵詞】分子印跡微球；白藜蘆醇；吸附性能；核-殼型keyrdsleularlyiprintedirsphere；resveratrl；adsrptinprperty；re-shell1弁言比年來(lái)，新型印跡技能不竭涌現(xiàn)，包羅接納溶膠-凝膠技能舉行本體聚合1，2，在硅膠外貌舉行外貌聚合35。前者聚合物存在模板分子包埋過(guò)深、難以洗脫、外形不規(guī)矩、機(jī)器性能低等缺點(diǎn);后者的外貌印跡質(zhì)料的巨細(xì)可控，顆粒勻稱，輕易洗脫，尤其通過(guò)操縱外貌聚合殼層的厚度，可有用淘汰包埋征象。虎杖系蓼科屬多年生草本植物，具有祛風(fēng)利濕、散瘀定痛、止咳化痰的作用，重要含有蒽醌類和芪類化合物，此中芪類身分白藜蘆醇resveratrl具有

3、抗癌、抗氧化、抗自由基、抗細(xì)菌和真菌等作用6。如今，提取疏散白藜蘆醇的要領(lǐng)重要有溶劑提取和酶法提取7及印跡技能1。向海燕等以溶膠-凝膠法合成白藜蘆醇印跡聚合物，但是其印跡聚合物模板分子包埋過(guò)深，難以洗脫，粒徑不規(guī)矩、不勻稱。為了降服這些缺陷，本研究以si2微球?yàn)檩d體，通過(guò)接枝乙烯基三甲氧基硅烷vts，在si2微球外貌引入雙鍵，合成核-殼型的白藜蘆醇分子印跡微球，并用于疏散虎杖提取液中的白藜蘆醇。2實(shí)行部門(mén)2.1儀器與試劑l-2022aht型高效液相色譜儀日本島津公司；gh-30a型雙光束紅外分光光度計(jì)天津港東科技生長(zhǎng)；kq-250e型超聲波洗濯器昆山市超聲儀器；lg10-2.4a臺(tái)式高速離心機(jī)

4、北京醫(yī)用離心機(jī)廠。正硅酸乙酯tes，siga公司；丙烯酰胺aa，闡發(fā)純；白藜蘆醇標(biāo)樣，中國(guó)藥檢所；乙二醇二甲基丙烯酸酯egda，siga公司；偶氮二異丁腈aibn，闡發(fā)純；乙烯基三甲基硅烷vts，siga公司；乙腈色譜純；乙酸、無(wú)水乙醇、氨水、hl闡發(fā)純；虎杖采自湖南張家界粉末。2.2印跡微球的制備取0.5g外貌活化的si2微球，疏散于10.0l50%乙醇的水溶液中，參加0.75lvts，50下反響24h。硅烷化后，用乙醇在超聲下洗去未反響的vts，然后于100下枯燥3h，使vts與si2外貌的羥基充實(shí)交聯(lián)鍵合，得到乙烯基修飾的si2微球vt-si2。非印跡微球nniprintedplyers

5、，nips的合成要領(lǐng)與分子印跡微球合成要領(lǐng)完全同等，只是在合成時(shí)不參加模板分子。2.3印跡微球的吸附性能研究及其表征接納gh-30a型雙光束紅外分光光度計(jì)，對(duì)si2微球、vt-si2微球、洗脫脫模板分子白藜蘆醇前、后的ips舉行紅外表征。2.4現(xiàn)實(shí)樣品檢測(cè)取1.0g洗脫后的分子印跡微球，裝入直徑為1.0、容量為10.0l的聚丙烯柱中，柱子的下端口用棉花塞住，從上口裝入印跡微球，再塞上棉花，參加乙醇抽濾，使印跡微球在柱內(nèi)排布精細(xì)。取3.0g虎杖質(zhì)料粉末投入100l圓底燒瓶中，參加30.0lv(甲醇)v(乙酸)=82混淆溶液，超聲30in，80下回流3h，然后舉行過(guò)濾，蒸出溶劑，用甲醇重新溶解，得

6、虎杖提取液。取5.0l虎杖提取液，注入提取柱，抽濾，網(wǎng)絡(luò)過(guò)柱液，先用5.0l甲醇沖洗提取柱，然后用5.0lv(甲醇)v(乙酸)=91混淆溶液冼脫，網(wǎng)絡(luò)洗脫液，用hpl檢測(cè)白藜蘆醇的含量。圖1si2微球外貌印跡制備途徑圖略fig.1synthesisrutinefsi2leularyiprinedplyers3效果與討論3.1印跡微球的制備及形貌表征以vts為毗連si2和aa的前言，接納熱聚合技能，以白藜蘆醇為模板分子，aa為成效單體，egda為交聯(lián)劑，顛末abin引發(fā)，在暖和的條件下制備出包覆了白藜蘆醇的印跡聚合薄層。顛末甲醇-乙酸溶液洗脫后，白藜蘆醇從印跡微球聚合薄層中洗脫出來(lái)，在印跡微球的

7、薄層中留下對(duì)白藜蘆醇具有特異汲取的清閑。si2微球外貌印跡微球制備途徑如圖1所示。制備的分子印跡聚合物微球有以下特點(diǎn)：在si2微球外貌引入了雙鍵，加強(qiáng)了分子印跡聚合物薄層與載體之間的共價(jià)鍵作用力，使聚合物薄層安穩(wěn)地聚合在微球外貌；通過(guò)改變vt-si2，aa和egda的比例，操縱殼層厚度，有用淘汰了包埋，利于洗脫。研究表白，當(dāng)vt-si2，aa和egda的質(zhì)量比為119，其殼層厚度可操縱在200n以下；可加強(qiáng)分子印跡聚合物微粒外貌的影象效應(yīng)和機(jī)器性能。圖2si2和印跡微球的掃描電鏡圖略fig.2sanningeletrnirspi(se)iagesfsi2andleularlyiprintedp

8、lyers(ips)掃描電鏡對(duì)si2微球和ips舉行形貌闡發(fā)的效果見(jiàn)圖2。si2微球粒徑勻稱約為200n、規(guī)矩。ips外貌平滑，粒徑勻稱，粒徑約為600n。由此可估算外貌印跡聚合物殼層厚度約為200n。3.2吸附實(shí)行接納靜態(tài)吸附法，通過(guò)hpl檢測(cè)，別離得出ips和nips對(duì)白藜蘆醇的吸附等溫線，如圖3a所示。效果表白，ips對(duì)白藜蘆醇具有較強(qiáng)的吸附本領(lǐng)，而nips對(duì)白藜蘆醇的吸附本領(lǐng)小，這表白ips對(duì)白藜蘆醇具有較強(qiáng)的印跡效應(yīng)。進(jìn)一步使用sathard模子7闡發(fā)，sathard方程為：q/=qaxq/kd。式中，kd是接合位點(diǎn)的平衡解離常數(shù)；qax是結(jié)合位點(diǎn)的最大表不雅結(jié)合量g/g；表現(xiàn)吸附平

9、衡液的平衡濃度g/l。以q/對(duì)q作圖可得兩條差異歪率的直線圖3b，ips在研究濃度范疇內(nèi)對(duì)模板分子存在兩種吸附的結(jié)合位點(diǎn)。按照歪率和截距可以得出親和位點(diǎn)解離常數(shù)和最大表不雅結(jié)合量別離為kd1=0.1724g/l，qax1=9.087g/g；kd2=0.6018g/l，qax2=13.80g/g。圖3印跡微球和非印跡微球的吸附等溫線(a)及sathhard曲線(b)略fig.3adsrptinisthers(a)andsathardplts(b)fadsrptinisthersfipsandnniprintedplyers(nips)3.3紅外光譜闡發(fā)將si2，vt-si2，ips模版洗脫后、i

10、ps未洗脫模版別離舉行紅外光譜闡發(fā)(圖4)。比力圖4a和4b可見(jiàn)，在1413和16371有汲取峰，此中14131處是甲基的彎曲振動(dòng)，16371是的伸縮振動(dòng)，這表白乙烯基硅烷樂(lè)成的修飾到si2微球外貌。在圖4和4d中，35001是h的汲取峰，315034001是nh鍵的伸縮振動(dòng)地區(qū)，17251屬于的伸縮振動(dòng)。圖4d中，145016601屬于苯環(huán)的伸縮振動(dòng)，31001是苯環(huán)h和乙烯基h的伸縮振動(dòng)，而圖4卻沒(méi)有這些峰，這表白白藜蘆醇分子可以從印跡微球外貌洗脫干凈。圖4si2(a)、乙烯基修飾的si2(b)、ips(模板洗脫后)()、ips(未洗脫模板)(d)的紅外圖譜略fig.4irspetrafs

11、i2(a)，si2difiedithvinyl(b)，ips(afterelutingtheteplate)()，ips(befreelutingteplate)(d)3.印跡微球?qū)⒄忍崛∫褐邪邹继J醇的疏散接納hpl檢測(cè)白藜蘆醇尺度溶液，確定白藜蘆醇的出峰時(shí)間，別離檢測(cè)虎杖提取液、過(guò)柱液、洗脫液中白藜蘆醇的含量，如圖所示。比擬虎杖提取液圖b和過(guò)柱液圖的色譜圖，盤(pán)算提取液中白藜蘆醇的含量為45.7%，過(guò)柱后溶液中白藜蘆醇含量為5.4%，這表白虎杖提取液通過(guò)印跡疏散柱，白藜蘆醇輕易被印跡添補(bǔ)物吸附。用甲醇沖洗印跡柱后，再用v(甲醇)v(乙酸)=91混淆溶液洗脫，網(wǎng)絡(luò)洗脫液、檢測(cè)，得色譜圖d，柱洗脫液中白藜蘆醇含量為89.3%。效果表白，本印跡添補(bǔ)質(zhì)料具有較強(qiáng)的吸附性能，白藜蘆醇與印跡微球的結(jié)合鍵比力安穩(wěn)，可以或許將虎杖溶液中的白藜蘆