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以FABP為例（檢測抗原）金標記F14A抗體雙抗體夾心?原理金-F14A-FABP抗鼠IgG不顯色顯示紅色Y1=F14A（標記了膠體金）Y2=F104B（固定在NC膜上即T線）Y3=羊抗鼠IgG（固定在NC膜上即C線）此方法較常用，主要用于較大分子量的蛋白（抗原）的檢測。要求兩株抗體針對一個抗原的不同位點才可以。也有個別的檢測項目是雙抗原夾心檢測抗體的，原理類似。以嗎啡為例（檢測抗原）金標記嗎啡抗體不顯色顯示紅色陽性反應(yīng)Y2=嗎啡-BSA偶聯(lián)物Y3=羊抗鼠此方法主要用于小分子抗原（毒品、農(nóng)藥、肽鏈等）的檢測。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上，常常用化學(xué)方法把小分子偶聯(lián)到BSA等大分子物質(zhì)上再固定于NC膜上。此結(jié)果與雙抗原夾心法相反，陰性CT兩條都是紅線，陽性只有C線一條紅間接法原理不顯色此方法主要用于血清中抗體檢測，純化或者重組的抗原固定于NC膜上，標記多為蛋白A（ProteinA或叫SPA,抗體Fc端結(jié)合而與其它蛋白質(zhì)不結(jié)合）。此方法要求膠體金過量，一般來說樣品再加入前需要稀釋或者加極少量后再加緩沖液。斑點免疫滲濾法使用就是間接法

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