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以FABP為例(檢測(cè)抗原)金標(biāo)記F14A抗體雙抗體夾心?原理金-F14A-FABP抗鼠IgG不顯色顯示紅色Y1=F14A(標(biāo)記了膠體金)Y2=F104B(固定在NC膜上即T線)Y3=羊抗鼠IgG(固定在NC膜上即C線)此方法較常用,主要用于較大分子量的蛋白(抗原)的檢測(cè)。要求兩株抗體針對(duì)一個(gè)抗原的不同位點(diǎn)才可以。也有個(gè)別的檢測(cè)項(xiàng)目是雙抗原夾心檢測(cè)抗體的,原理類似。以嗎啡為例(檢測(cè)抗原)金標(biāo)記嗎啡抗體不顯色顯示紅色陽(yáng)性反應(yīng)Y2=嗎啡-BSA偶聯(lián)物Y3=羊抗鼠此方法主要用于小分子抗原(毒品、農(nóng)藥、肽鏈等)的檢測(cè)。由于抗原分子量小不能直接固定于NC膜上,常常用化學(xué)方法把小分子偶聯(lián)到BSA等大分子物質(zhì)上再固定于NC膜上。此結(jié)果與雙抗原夾心法相反,陰性CT兩條都是紅線,陽(yáng)性只有C線一條紅間接法原理不顯色此方法主要用于血清中抗體檢測(cè),純化或者重組的抗原固定于NC膜上,標(biāo)記多為蛋白A(ProteinA或叫SPA,抗體Fc端結(jié)合而與其它蛋白質(zhì)不結(jié)合)。此方法要求膠體金過量,一般來說樣品再加入前需要稀釋或者加極少量后再加緩沖液。斑點(diǎn)免疫滲濾法使用就是間接法
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