XXXX-4-28植物組織培養(yǎng) 網(wǎng)通線路 電信線路

1、?1細(xì)胞工程（細(xì)胞克隆技術(shù)）第一節(jié) 植物細(xì)胞工程北京四中 畢詩秀2一、克隆（clone）和細(xì)胞工程的概念克隆即無性繁殖系（名詞） 指不經(jīng)過兩個分子、兩個細(xì)胞或兩個個體的結(jié)合，只由一個模板分子、母細(xì)胞或母體直接形成的新一代分子、細(xì)胞或個體 克隆作動詞用，指獲得無性繁殖系的過程31.分子水平的克隆:DNA很多堿基序列相同的DNA復(fù)制42.細(xì)胞水平的克隆3.個體水平的克隆細(xì)胞很多遺傳物質(zhì)相同的細(xì)胞有絲分裂遺傳背景相同的新個體組織、器官5細(xì)胞工程的概念 應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法，通過細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上的操作,按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù) 分為植

2、物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞工程6二、植物細(xì)胞工程植物細(xì)胞工程的發(fā)展簡史1.1902年，德國科學(xué)家哈伯蘭特（G.Haberlandt）發(fā)表植物細(xì)胞培養(yǎng)，認(rèn)為在某種情況下，采用培養(yǎng)基培養(yǎng)植物細(xì)胞，用新的觀點來實驗研究各種重要問題是可能的；并提出細(xì)胞全能性的設(shè)想，即：單細(xì)胞經(jīng)過人工培養(yǎng)，通過細(xì)胞分裂而恢復(fù)成完整植株并具有原植物的全部遺傳性。他也被后人稱為“組織培養(yǎng)之父”。72.1904年：德國植物學(xué)胚胎學(xué)家E.Hanning 用蘿卜、辣根的胚培養(yǎng)，提前長成小植株，首次獲得胚培養(yǎng)成功。 3.1922年：W.Kott用稀釋的Knop液加入有機(jī)物培養(yǎng)豌豆、玉米離體根尖獲得成功。 4.1925年-1929年，培養(yǎng)

3、亞麻種間雜種離體胚，證明遠(yuǎn)源雜交可行性。 5.1937年：White首先建立了植物組織培養(yǎng)的綜合培養(yǎng)基，其成分均為已知化合物，并發(fā)現(xiàn)B族維生素和生長素對離體根生長的重要作用。后稱為White培養(yǎng)基。86.1941年，Overbeck等首次將椰子汁加入到培養(yǎng)基中，發(fā)現(xiàn)其可以刺激曼陀羅胚的發(fā)育，當(dāng)時雖然不知道椰子汁中含有細(xì)胞分裂素，但其廣泛應(yīng)用于植物組織培養(yǎng)過程中。 7.1943年：White發(fā)表植物組織培養(yǎng)手冊，這是第一部有關(guān)植物組織培養(yǎng)技術(shù)的專著，使植物組織培養(yǎng)成為一門新興學(xué)科。 8.1948年：Skoog和崔澄在煙草切段和髓的培養(yǎng)研究中發(fā)現(xiàn)腺嘌呤與生長素的比例是控制芽和根分化的決定因素之一。

4、 9.1952年：崔澄發(fā)表化學(xué)物質(zhì)對植物器官形成的影響910.1958年：F.C.Steward和J.Reinert以胡蘿卜直根的單細(xì)胞懸浮培養(yǎng)誘導(dǎo)分化經(jīng)胚狀體（體細(xì)胞胚）發(fā)育成完整的小植株，使細(xì)胞全能性首次真正得到科學(xué)驗證。 11.1960年，用真菌纖維素酶分離原生質(zhì)體成功;1971年，煙草原生質(zhì)再生植株成功 12.1972年,煙草原生質(zhì)體融合獲得煙草體細(xì)胞雜種。10外植體用于離體培養(yǎng)的植物組織、細(xì)胞或器官1.植物組織培養(yǎng)的過程非洲紫羅蘭的葉片流水清洗消毒植物組織培養(yǎng)（plant tissue culture）11外植體接種于培養(yǎng)基上超凈臺無菌紙上切割外植體用酒精擦拭雙手加蓋封口膜、培養(yǎng)12愈傷組織叢苗（叢芽）移栽的小苗開花成株瓶中開花成株愈傷組織：由相對無分化的活薄壁細(xì)胞團(tuán)組成的新生組織細(xì)胞小、細(xì)胞核大、細(xì)胞質(zhì)濃、細(xì)胞壁薄胚性細(xì)胞13外植體愈傷組織有絲分裂脫（去）分化再分化植株142.植物組織培養(yǎng)的條件離體的植物器官、組織或細(xì)胞 無菌條件 消毒（殺死細(xì)菌、放線菌、霉菌等微生物營養(yǎng)體） 滅菌（殺死微生物營養(yǎng)體、繁殖體孢子、休眠體芽孢）151617適宜濃度和一定比例的激素誘導(dǎo) 細(xì)胞分裂素和生長素（或類似物）適宜的溫度、pH、光照等183.植物組織培養(yǎng)的概念植物組織培養(yǎng)就