白介素的抗腫瘤機

1、白細胞介素12的抗腫瘤機理(j l)研究斯坦福大學醫(yī)學院外科宗康拉共一百三十九頁內容提要(ni rn t yo)白介素12的抗腫瘤效果白介素12的抗腫瘤機理白介素12可能的臨床(ln chun)應用白介素12的歷史白介素12在國外的現狀白介素12申報國內腫瘤治療的可行性共一百三十九頁白介素12的抗腫瘤效果(xiogu)共一百三十九頁Interleukin 12 (IL-12) 白介素12由抗原呈遞細胞在受到外源物質（包括內毒素）刺激時分泌屬于“危險信號”之一：和外源侵入相關修飾T細胞或者NK細胞，決定后天免疫走向先天免疫與后天獲得性免疫之間的銜接因子刺激靶細胞g-干擾素分泌（Th1型免疫應答）

2、至今發(fā)現的最有效的抗腫瘤單因子作用(zuyng)與范圍與內毒素十分相似單獨用藥可以治愈小腫瘤（90%)2) 腫瘤體積減?。ㄉ僖?3) 治愈 （罕見)治療(zhlio)0-30 天 腫瘤細胞如何做腫瘤治療效果試驗共一百三十九頁白介素單獨使用的最佳治療(zhlio)效果實例白介素單獨治療一般只對某些初期建立的小腫瘤（3周）的大腫瘤負擔（15毫米直徑，%體重）一般無法治愈白介素配合(pih)化療在某些腫瘤模型有出奇的療效共一百三十九頁白介素12 結合(jih)化療治療32天小鼠MCA207腫瘤模型：治療前共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12（Cy+IL-12)治療(zhlio)一周共一百三十九頁環(huán)磷酰

3、胺加白介素12治療(zhlio)2周共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12治療(zhlio)3周共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12治療(zhlio)4周共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12治療(zhlio)5周共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12治療(zhlio)6周共一百三十九頁通過白介素12提高(t go)化療的抗腫瘤效果no RxCy aloneIL-12 aloneCy+IL-12共一百三十九頁18天腹腔實體(sht)MCA207腫瘤 共一百三十九頁14天靜脈注射建立(jinl)的肺擴散腫瘤模型共一百三十九頁Cy+IL-12在腹腔及肺擴散腫瘤(zhngli)模型中的治療效果接瘤途徑(tjng)

4、治療（起始天數）治愈率（存活天）i.p.腹腔i.p.腹腔i.v.肺擴散對照Cy+IL-12 (18)Cy+IL-12 (14)0/5 (20-27)0/5 (21-31)5/5 (90)8/8 (90)i.v.肺擴散對照共一百三十九頁IL-12和Cy+IL-12在Sa1腹水腫瘤模型中的治療(zhlio)效果100%50%0%對照(duzho)IL-12CyCy+IL-12010203040接種治療存活率天數共一百三十九頁白介素12的抗腫瘤機理(j l)研究共一百三十九頁Cy+IL-12的抗腫瘤作用(zuyng)是Th1型T免疫應答宿主(szh)治愈率正常T細胞受體敲除鼠（T細胞缺失）裸鼠（T和

5、B細胞缺失）咖瑪干擾素敲除鼠（Th 1型缺失）白介素-4敲除鼠（Th 2型缺失）10/100/50/200/2010/10共一百三十九頁與腫瘤排斥所對應(duyng)的強免疫反應CD4CD8治療(zhlio)之前治療之后共一百三十九頁白介素12啟動的抗腫瘤免疫(miny)細胞分布例子(l zi)1例子2T細胞巨嗜細胞共一百三十九頁巨噬細胞可能是靶效應(xioyng)細胞的證據T 細胞(xbo)染色TUNEL自殺細胞染色H&E組織學染色巨嗜細胞染色共一百三十九頁白介素12啟動的抗腫瘤免疫應答對腫瘤增生(zngshng)的抑制對照(duzho)治療溴嘧啶標記腫瘤增生共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素是

6、否對所有(suyu)腫瘤有效？有效(yuxio)腫瘤模型:C57B/6: MC203, MCA205, MCA207, FBL-3BALB/c: CT26, CSA1M, OV-HMA/J: Sa1無效腫瘤模型:C57BL/6: MCA101,B16, LLC, Pan02, EL-4C57BL/6: autochthonous primary tumorsBALB/c: 4T1, S180共一百三十九頁為什么白介素12在有的腫瘤治療(zhlio)模型里如此有效，但在其他腫瘤治療(zhlio)模型幾乎無效？共一百三十九頁對白介素12有無應答的腫瘤模型(mxng)對比共一百三十九頁免疫(miny

7、)型腫瘤與共存(預存)免疫的概念共一百三十九頁免疫型腫瘤就是(jish)能夠在接種后不久自動誘發(fā)宿主免疫識別的腫瘤識別的結果腫瘤生長與抗腫瘤免疫共存共一百三十九頁什么(shn me)是共存（預存）免疫？腫瘤與抗腫瘤免疫之間的平衡宿主免疫系統(tǒng)對腫瘤抗原有特異性識別腫瘤通過提供抗原維持這個免疫應答(yngd)這個免疫應答對腫瘤有遏制作用應答的性質屬于Th1型細胞應答共一百三十九頁預存免疫(miny)的狀態(tài)決定IL-12或Cy+IL-12療效共一百三十九頁免疫細胞轉導試驗(shyn)步驟正常(zhngchng)供體小鼠腫瘤疫苗腫瘤接種排斥接種T細胞缺失受體小鼠腫瘤接種14 day 輸入T細胞T ce

8、llIL-12/Cy+IL-12 治療治療效果?2 day共一百三十九頁預存免疫(miny)在白介素12治療中的關鍵作用 輸入(shr)細胞治療治愈率無未分化T細胞腫瘤特異T細胞IL-12生理鹽水IL-12IL-12Cy+IL-120/100/80/81/109/1210/10Cy+IL-120/5未分化T細胞未分化T細胞腫瘤特異T細胞腫瘤特異T細胞生理鹽水受體：帶MCA207腫瘤14天的T細胞缺失小鼠共一百三十九頁荷瘤鼠作為T細胞(xbo)供體（預存免疫）的試驗供體細胞治療(zhlio)手段治愈率生理鹽水IL-12IL-12Cy+IL-12Cy+IL-120/50/53/50/55/55/5

9、荷瘤0天脾臟T cellCy+IL-120/5受體：帶MCA207腫瘤14天的T細胞缺失小鼠荷瘤10天脾臟T cell荷瘤10天脾臟T cell荷瘤10天脾臟T cell荷瘤28天脾臟T cell荷瘤28天脾臟T cell荷瘤28天脾臟T cell生理鹽水共一百三十九頁預存免疫(miny)是決定荷瘤鼠對白介素12治療應答與否的關鍵條件為什么？共一百三十九頁白介素12受體表達(biod)特征未分化T細胞不表達白介素12 受體（不受影響）激活的T細胞表達白介素12受體表達為激活后的37天內，以后(yhu)不再表達共一百三十九頁環(huán)磷酰胺加白介素12療效解釋上的一個困惑(knhu)如果對白介素12應答

10、好壞由受體表達決定，那化療是如何提高白介素12受體表達的？共一百三十九頁傳統(tǒng)(chuntng)的解釋腫瘤晚期免疫受到抑制抑制性T細胞（Treg）生成T細胞不表達白介素12受體對白介素12單獨治療不應答化療藥殺死Treg抑制性T細胞由于代謝較高，對化療藥敏感去除抑制性T細胞之后釋放(shfng)了被抑制的抗腫瘤應答抗腫瘤T細胞被激活，表達白介素12 受體共一百三十九頁去除免疫抑制在我們的腫瘤模型(mxng)中不起關鍵作用其他解釋？化療對腫瘤的殺傷導致抗原釋放激活預存免疫共一百三十九頁化療(hu lio)激活抗腫瘤免疫？我們做的是化療還是免疫治療？共一百三十九頁預存免疫的狀態(tài)決定化療療效免疫參與對

11、化療療效的貢獻(gngxin)化療的療效在沒有免疫功能的情況下會不同嗎？無法在人體內進行對比但可以在試驗小鼠體內進行對比共一百三十九頁T細胞對腫瘤發(fā)展(fzhn)與化療療效的影響治療開始(kish)后天數腫瘤大小正常鼠+環(huán)磷酰胺T細胞敲除鼠+環(huán)磷酰胺正常鼠+對照T細胞敲除鼠+對照共一百三十九頁阿霉素與建擇在正常與T細胞(xbo)缺失鼠中的療效對比治療開始(kish)后天數腫瘤大小正常鼠+阿霉素T細胞敲除鼠+阿霉素正常鼠+建擇T細胞敲除鼠+建擇共一百三十九頁相似(xin s)的療效差異用T細胞清除抗體也能看到治療(zhlio)開始后天數腫瘤大小環(huán)磷酰胺環(huán)磷酰胺+ 抗CD4/CD8阿霉素阿霉素+抗

12、CD4/CD8抗CD4/CD8共一百三十九頁大腫瘤模型中T細胞(xbo)對化療療效的貢獻治療(zhlio)開始后天數腫瘤大小正常鼠+環(huán)磷酰胺T細胞敲除鼠+環(huán)磷酰胺共一百三十九頁化療是如何(rh)激活抗腫瘤免疫的呢？藥物對腫瘤細胞的直接殺傷是必要條件排除去抑制解釋：殺死抑制性T細胞（Treg）直接殺傷導致抗原短期集中釋放釋放的腫瘤抗原不足以啟動全新的抗腫瘤應答(yngd)，但可以激活預存的抗腫瘤應答(yngd)共一百三十九頁其他(qt)化療藥與白介素12的聯(lián)合使用療效化療(hu lio)+IL-12治愈率（%）阿霉素（全身）80100環(huán)磷酰胺阿霉素（瘤內，脂質體）060100建擇（全身）020建

13、擇（瘤內，自由體）20405氟0長春堿0腫瘤模型：24周MCA207皮下腫瘤， 1017毫米直徑治療：化療單次給藥，3天后開始白介素12（隔天一次x3次）化療或者白介素12單獨對照0%治愈率共一百三十九頁藥物必須對腫瘤細胞(xbo)有足夠的直接殺傷藥物(yow)及劑量對體細胞及腫瘤的殺傷療效（與對照比較）環(huán)磷酰胺25mg/kg10%無環(huán)磷酰胺50mg/kg30%弱環(huán)磷酰胺75mg/kg50%強環(huán)磷酰胺125mg/kg70%強阿霉素10mg/kg 全身70%90%100%100%100%白細胞10%50%70%50%?阿霉素5mg/kg瘤內50%10%?顯建擇150mg/kg全身30%?無建擇5

14、0mg/kg瘤內30%90天）共一百三十九頁獲得性耐藥的免疫(miny)解釋治療(zhlio)開始后天數腫瘤大小正常鼠免疫缺失鼠既然抗腫瘤免疫貢獻了療效的很大部分，當這個應答不再啟動時就會造成療效明顯下降共一百三十九頁耐藥與抗腫瘤應答(yngd)的關聯(lián)耐藥的荷瘤鼠體內看不到化療后的免疫應答Winn氏法測試(csh)：沒有抗腫瘤靶效應細胞存在體外與樹突細胞共培養(yǎng)：沒有伽瑪干擾素分泌瘤內T細胞浸潤：明顯減少為什么抗腫瘤免疫不再激活？預存免疫“衰竭”自身抗原的主動耐受其他？共一百三十九頁補充預存免疫(miny)不能扭轉耐藥的試驗預存免疫(miny)二次化療二次化療過繼后二次化療一次化療后時間腫瘤大小

15、結論：預存免疫衰竭不是耐藥的原因共一百三十九頁免疫耐受的可能(knng)耐受是機體保護自身免疫攻擊的有效機制耐受與否取決于機體對抗原外源性的判斷外源性侵入往往伴隨機體分泌“危險信號”沒有危險信號情況下的免疫應答自身抗原？腫瘤本質上是自身組織，不能誘發(fā)(yuf)危險信號在沒有危險信號條件下的抗腫瘤的應答有可能被機體看作自身免疫共一百三十九頁支持免疫耐受解釋的試驗觀察（干預化療療效(lioxio)的細胞過繼試驗）化療(hu lio)開始后天數腫瘤大小細胞過繼環(huán)磷酰胺未分化脾細胞耐藥脾細胞非耐藥脾細胞共一百三十九頁如何防止耐受提高(t go)療效？防止機體把抗腫瘤應答看作自身免疫引入“危險信號”？危

16、險信號一般由細菌及病毒(bngd)誘導陀樣受體（Toll like receptor）產生內毒素是典型的危險信號誘發(fā)因子內毒素誘發(fā)的危險信號之一就是白介素12化療后提供內毒素或者白介素12可以“欺騙”機體，把抗腫瘤應答誤認為是抗外源侵入應答共一百三十九頁白介素12與化療聯(lián)合使用的其他(qt)例子（與局部阿霉素聯(lián)合使用）化療開始(kish)后天數腫瘤大小IL-12阿霉素9天+IL-12阿霉素3天+IL-12共一百三十九頁為什么白介素12的用藥(yn yo)時間很關鍵？白介素12必須在化療之后提供(tgng)T細胞激活后表達白介素12受體化療之后最佳使用期：27天內白介素12受體表達短暫：24天白

17、介素12修飾過的T細胞不受抑制調控白介素12不能改變已經接受負調控的T細胞（不表達白介素12受體）共一百三十九頁局部(jb)阿霉素加白介素12在MCA203腫瘤模型里的治療試驗局部化療可以(ky)用來評判化療的直接殺傷與化療激活的免疫殺傷各自對療效的貢獻但環(huán)磷酰胺是前體藥物，不能局部給藥阿霉素脂質體可以局部給藥如果化療一個病灶并激活免疫，對遠端病灶會有什么療效？雙側接種的MCA203腫瘤模型可以用來回答以上問題共一百三十九頁白介素12與化療聯(lián)合使用的其他例子(l zi)（MCA203腫瘤模型）化療開始(kish)后天數腫瘤大小化療側非化療側阿霉素IL-12阿霉素+IL-12共一百三十九頁局部(

18、jb)建擇加樹突細胞加白介素12在低免疫性腫瘤Pan02模型中的療效治療(zhlio)開始后天數腫瘤大小建擇+DC+IL-12, 6/10建擇+DC+IL-12, 4/10建擇+IL-12無治療對照共一百三十九頁為什么白介素12與化療的聯(lián)合治療在某些(mu xi)情況下極為有效？化療集中釋放的大量腫瘤抗原激活預存免疫活化的T細胞表達白介素12受體外源提供的白介素12模擬危險信號機體認為激活的免疫應答是抗外源侵入(qnr)白介素12修飾的T細胞不再受抑制性調控抗腫瘤的應答得以擴大和持續(xù)共一百三十九頁化療加白介素12啟動(qdng)的抗腫瘤免疫與持續(xù)化療的關系環(huán)磷酰胺單藥加白介素12只需一個療程與

19、目前臨床持續(xù)化療的實踐不符合后續(xù)化療對免疫的打擊？臨床應用問題：需要改變現有的化療程序嗎？試驗模型：Cy+IL-12激活免疫其他化療制造外周血白細胞下降觀察療效(lioxio)及腫瘤局部免疫細胞變化共一百三十九頁其他手段(shudun)對Cy+IL-12療效的干擾試驗無治療(zhlio)Cy+IL-12+建擇+5Fu +抗CD4/8 干擾藥物：Cy+IL-12結束時（7天）開始建擇：每三天一次，每次2毫克， 一共4次5Fu ：5Fu 每天2毫克加葉酸（1.25毫克），8天（半數毒性致死）抗CD4/8：200微克抗體連續(xù)2天.以后每周一次x2周腫瘤大小外周血脾臟4M110M2.9M132M35M

20、2.1M0.2M33M2.3M92M共一百三十九頁結論(jiln)白介素12啟動的抗腫瘤應答一旦啟動后有很強的持續(xù)和抗抑制能力共一百三十九頁免疫對腫瘤宿主生存的支持腫瘤晚期，惡液質以及(yj)免疫紊亂白介素12的抗惡液質與抗腫瘤綜合效果共一百三十九頁腫瘤(zhngli)晚期的現象出現惡液質（消瘦衰竭代謝內分泌紊亂）停止對治療的應答（手術和其他減負治療）腫瘤發(fā)展加速腫瘤生長本身造成的？有些(yuxi)病人只有腫瘤標志物但幾乎看不到復發(fā)病灶癌癥病人死于腫瘤的直接作用嗎？除了功能性占位，腫瘤如何致死？共一百三十九頁有惡液質的癌癥病人死于免疫紊亂(wnlun)而非腫瘤腫瘤可以誘發(fā)惡液質的產生惡液質，而

21、非腫瘤，導致晚期癥狀惡液質是獨立致死疾病(jbng)惡液質的本質是系統(tǒng)炎癥（免疫紊亂）抑制系統(tǒng)炎癥可以抑制惡液質和死亡抗腫瘤免疫應答是最好的惡液質抑制和調控手段惡液質的發(fā)生標志著抗腫瘤免疫的消退共一百三十九頁惡液質的臨床表現體重下降（肌肉和脂肪(zhfng)萎縮）厭食，惡心，嘔吐弓背，眼窩塌陷精力及體力萎靡，喪失活動欲望胸腹水，水腫（肝臟功能低下）低燒，白細胞及中性粒細胞增加，特異免疫低下凝血異常（DIC，內出血）代謝紊亂心肺及其他器官衰竭共一百三十九頁實驗室與臨床的脫節(jié)(tu ji)：缺少合適的動物模型絕大多數動物腫瘤模型不形成惡液質腫瘤負擔可以達到基本上與體重相似而不會致死(zh s)極個

22、別早期惡液質模型主要以體重下降為表現缺少有臨床表現且腫瘤負擔不大的模型CHX207惡液質模型：皮下中小腫瘤導致惡液質及死亡共一百三十九頁為什么惡液質模型如此(rc)重要？大多數癌癥病人死于惡液質的直接或間接作用傳統(tǒng)治療（手術，放化療）有可能加速惡液質病人的死亡（醫(yī)生的忌諱）在非惡液質模型中開發(fā)的藥物不適用惡液質狀態(tài)下的治療（加速死亡）惡液質與特異抗腫瘤免疫(miny)之間相互排斥共一百三十九頁問題出在認識(rn shi)上惡液質是癌癥晚期的結果還是原因？腫瘤(zhngli)生長進入晚期惡液質死亡傳統(tǒng)觀念新觀念腫瘤生長進入晚期惡液質死亡共一百三十九頁惡液質和非惡液質模型(mxng)的對比體重(t

23、zhng)變化%接種后生長天數惡液質模型非惡液質模型共一百三十九頁惡液質模型(mxng)的發(fā)病率，生存期及體重變化惡液質發(fā)病率發(fā)病(f bng)后生存率體重變化率發(fā)病率：14天50%；18天70%生存率：70%死于發(fā)病后310天共一百三十九頁腫瘤負擔：發(fā)病(f bng)（兩天內7%體重下降）共一百三十九頁腫瘤負擔(fdn)：死亡共一百三十九頁體重，大小，脂肪(zhfng)，肌肉比較正常(zhngchng)荷瘤鼠惡液質荷瘤鼠共一百三十九頁宿主怎么就死于一個不大的皮下腫瘤？腫瘤誘發(fā)的惡液質導致宿主進入晚期(wnq)和死亡共一百三十九頁惡液質的本質是什么？怎么導致宿主(szh)死亡？惡液質是一個臨床

24、而不是病理(bngl)表述惡液質的機理一直不清楚早期認為是由于某些免疫因子（白介素6）惡液質致死的原因不清楚（代謝紊亂？）近期臨床上觀察到伴隨系統(tǒng)炎癥（因果不清）共一百三十九頁什么是系統(tǒng)(xtng)炎癥？先天免疫和獲得性免疫系統(tǒng)炎癥是先天免疫亢奮的表現由大量體細胞急性(jxng)死亡啟動無法過渡到獲得性免疫（缺少抗原）系統(tǒng)炎癥疾病：急性：膿毒癥；器官缺血灌注，無感染創(chuàng)傷（手術）慢性：乙肝；艾滋??；肺結核；慢性腎衰竭；某些慢性關節(jié)炎和心臟??；糖尿病等慢性頑疾粒細胞總數及比例升高，T細胞總數及比例下降共一百三十九頁惡液質和系統(tǒng)(xtng)炎癥：伴隨還是機理？白細胞T細胞(xbo)中性粒細胞細胞正常

25、值共一百三十九頁抑制炎癥(ynzhng)能防止或逆轉惡液質嗎？傳統(tǒng)炎癥抑制手段：激素：強地松非激素類：塞來昔布化療(hu lio)藥物：建擇，環(huán)磷酰胺免疫調控獲得性免疫與先天免疫之間的關系抗腫瘤免疫的雙重意義共一百三十九頁激素（強地松）對惡液質發(fā)病和死亡(swng)的影響發(fā)病率死亡率強地松= 5mg/kg/天 x 10天共一百三十九頁A塞來昔布抑制惡液質的進展并延長(ynchng)生存BC發(fā)病(f bng)后天數接種后后天數接種后后天數生存期體重變化腫瘤大小對照組治療組治療組對照組塞來昔布：發(fā)病兩天后開始，5毫克/天x10天共一百三十九頁吉西他濱（建擇）的抗炎癥(ynzhng)及惡液質效果生存

26、期體重(tzhng)變化腫瘤大小發(fā)病后天數接種后天數對照組治療組建擇：發(fā)病兩天后開始給藥，1毫克x2天共一百三十九頁吉西他濱抗炎癥(ynzhng)效果T細胞(xbo)粒細胞白細胞總數（百萬）3.98.31.91.0共一百三十九頁觀察結果抑制炎癥可以(ky)逆轉惡液質癥狀延長生存結論系統(tǒng)炎癥是造成惡液質和死亡的原因共一百三十九頁T細胞對惡液質發(fā)病率即病程(bngchng)的影響 發(fā)病率 生存率對照(duzho)鼠T細胞缺失共一百三十九頁T細胞(xbo)對惡液質發(fā)病率即體重的影響 沒有(mi yu)T細胞的小鼠 正常小鼠 不誘導惡液質的腫瘤共一百三十九頁通過提高抗腫瘤免疫可以(ky)防止惡液質的發(fā)

27、生和發(fā)展嗎？試驗一：通過細胞轉導在惡液質發(fā)生前輸入抗腫瘤T細胞，觀察惡液質的發(fā)病率變化試驗二：某些化療藥物(yow)（環(huán)磷酰胺）的抑制炎癥與激活免疫綜合作用試驗三：白介素12的抗惡液質的直接與間接作用共一百三十九頁通過(tnggu)輸入抗腫瘤T細胞來抑制惡液質發(fā)病率生存率無輸入(shr)未分化T細胞抗腫瘤T細胞抗腫瘤T細胞未分化T細胞無輸入腫瘤接種后天數發(fā)病率%生存率%共一百三十九頁環(huán)磷酰胺的綜合抗炎癥(ynzhng)及免疫激活效果生存率抗腫瘤體重(tzhng)變化對照組CyCy+抗CD4/CD8CyCy+抗CD4/CD8對照組CyCy+抗CD4/CD8共一百三十九頁days after tu

28、mor inocdays after cachexia onsetdays after cachexia onsetIL-12對照組days after tumor inoc體重(tzhng)變化白介素12的抗惡液質效果(xiogu)高劑量（100ng）生存率對照組IL-12腫瘤大小體重變化共一百三十九頁體重(tzhng)/生存率腫瘤(zhngli)大小IL-12對照組白介素12的抗惡液質效果低劑量（20ng）共一百三十九頁跟蹤(gnzng)研究以及結論白介素12具有直接與間接抗惡液質的作用白介素12的直接抗惡液質作用不需要通過T細胞，但需要通過伽瑪干擾素白介素12的間接抗惡液質作用是通過抑制

29、惡液質后激活抗腫瘤特異性免疫應答(yngd)進一步抑制腫瘤白介素12的抗惡液質作用不需要大劑量，但需要常劑量（每天一次）共一百三十九頁白介素12的臨床應用(yngyng)分析共一百三十九頁白介素12的開發(fā)(kif)歷史1989年完成分子鑒定1990年申請分子和應用專利（抗腫瘤和感染）1991發(fā)表抗腫瘤動物實驗19921994 開展早期臨床實驗（一期和二期）1994年出現嚴重臨床副作用（兩例死亡）19962005年開展后期臨床試驗2005年白介素12供應中斷(zhngdun)2008美國NIH啟用最后一批過期白介素122010年白介素12專利過期共一百三十九頁白介素12早期(zoq)臨床試驗GI

30、/Wyeth做的一期臨床40腫瘤病人（腎癌，黑色素癌，直腸癌）身體狀況良好（Karnofsky指數70）31000ng/kg/day 靜脈給藥，每周5天，隔周重復，一共兩次一個CR（melanoma)，一個PR(RCC) MTD為500ng/kg毒副作用：感冒癥狀（發(fā)燒，惡心，嘔吐，厭食，懶惰）口瘡肝臟轉胺酶升高(shn o)血液白細胞，淋巴細胞暫時下降（3080）共一百三十九頁白介素12早期(zoq)臨床試驗Roche做的準一期臨床10例黑色素瘤病人(bngrn)皮下給藥，每周一次，500ng/kg有混和臨床療效，但達不到PR標準毒副作用：感冒癥狀肝臟轉胺酶升高血液白細胞，淋巴細胞暫時下降共

31、一百三十九頁白介素12早期(zoq)臨床試驗Roche做的一期臨床28例腎癌病人皮下給藥，每周一次，100-1250ng/kgMTD為1000ng/kg1PR（500ng/kg）毒副作用：感冒癥狀（發(fā)燒，惡心，嘔吐，厭食，懶惰）口瘡肝臟轉胺酶升高血液白細胞，淋巴細胞暫時(znsh)下降（3080）共一百三十九頁白介素12早期(zoq)臨床試驗Roche做的二期臨床試驗設計80例，實際30例腎癌病人皮下給藥，每周一次，逐漸上升到1250ng/kg2例PR沒有明顯的毒副作用試驗由于達不到(b do)預期的臨床療效而停止共一百三十九頁白介素12的二期臨床(ln chun)事故GI做的二期臨床(ln

32、chun)17腎癌病人500ng/kg靜脈給藥，每周5天12個病人在兩次注射之后發(fā)生4級副作用2個病人最終死于副作用（胃腸道出血和結腸炎）共一百三十九頁白介素12二期臨床事故(shg)的原因二期省略了預備(ybi)注射（pre-dosing)步驟預備注射是在連續(xù)注射之前一周單獨給藥預備注射降低了連續(xù)給藥時的血液伽馬干擾素水平動物（小鼠和猴子）試驗可以證明預備注射降低毒副作用的意義實際問題是只要控制伽馬干擾素水平就可以防止白介素12的毒副作用共一百三十九頁白介素12后期(huq)臨床試驗自從事故發(fā)生后，兩家公司均對高劑量白介素12的臨床應用產生懷疑(huiy)此后的白介素12腫瘤臨床試驗多為學術

33、機構以研究為目的進行的中低劑量試驗新的動物試驗表明低劑量的白介素12有時也可以起到抗腫瘤效果共一百三十九頁白介素12后期(huq)臨床試驗降低給藥頻率，但保持(boch)500ng/kg給藥量28個腎癌病人每周兩次（第一，四天）靜脈注射一個PR三個SD停藥后仍觀察到持續(xù)的腫瘤消退沒有嚴重毒副作用因為療效與伽馬干擾素的持續(xù)誘發(fā)相關，認為增加白介素2可能會提高療效（后來證明是錯誤的）共一百三十九頁白介素12后期(huq)臨床試驗皮下注射，降低(jingd)單次藥量，增加頻率15個腎癌，黑色素癌及大腸癌病人每周三次，每次50，100，300ng/kg1CR（50ng/kg),1PR(300ng/kg

34、)毒副作用：白細胞，淋巴細胞和中性淋巴細胞抑制肝臟轉胺酶升高Beta2-微球蛋白及C反應蛋白升高(系統(tǒng)炎癥）共一百三十九頁白介素12后期(huq)臨床試驗低劑量白介素12與疫苗結合黑色素癌抗原Melan-A的片段IL-12:0100ng/kg,第一，第22天（靜脈(jngmi)或皮下）Melan-A肽段：第1，8，15，22，57gp100試驗：IL-12:30ng/kg與肽段同時，同點皮內注射gp100:兩周一次（x2)到四周一次(x2)到八周一次沒有明顯毒副作用沒有明顯白介素12與臨床效果的對應共一百三十九頁白介素12臨床(ln chun)失敗的主要原因沒有掌握白介素12 的最佳使用條件沒

35、有在T細胞激活時給藥排除任何接受放化療的病人沒有給藥依據白介素12受體表達不明：沒有任何測試給藥劑量錯誤高劑量造成NK細胞激活，T細胞抑止大量游離(yul)伽馬干擾素的副作用明顯共一百三十九頁白介素12在抗病毒方面(fngmin)的臨床試驗抗艾滋病（HIV）一期臨床試驗65個艾滋病毒感染者CD4細胞數300 x106皮下注射，30-300ng/kg, 一周兩次（共4周）沒有明顯毒副作用沒有明顯的抗病毒效果體外細胞特異(ty)免疫功能沒有明顯變化共一百三十九頁白介素12在抗病毒方面(fngmin)的臨床試驗抗慢性丙肝病毒（HCV）的I/II期臨床試驗（Roche)60個慢性丙肝病人皮下注射，30-500ng/kg,每周一次，一共10周毒副作用同以前報道過的相同，不嚴重，與劑量有關根據劑量有17-53的病人病毒RNA量下降50%肝臟轉胺酶沒有明顯下降沒有完全病毒轉陰的情況(qngkung)療效比不上a干擾素（10轉陰）共一百三十九頁白介素12在抗病毒方面(fngmin)的臨床試驗抗慢性(mn xng)丙肝病毒（HCV）的臨床試驗（GI）225個抗a干擾素的慢性丙肝病人皮下注射，500ng/kg,每周兩次，一共12周百分之三的