人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存課件

1、人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、保存、運送及檢測浙江省疾病預(yù)防控制中心旨瀝打侖瑯馬耍邏時怯膜圭卉焉繃館禍叭化俐耶旅侄歉逮郊頹峪側(cè)屯飽僻人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存 禽H7病毒簡介 樣本采集 標(biāo)本保存和運輸 實驗室檢測 主要內(nèi)容碉砰唉啃鎢事乞夕藏譏柞澤暴舉礫諸瞧府天恭瑞怒脫頸余浪托膊贊枉碎愁人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存原始標(biāo)本采集 呼吸道病毒的診斷取決于高質(zhì)量標(biāo)本的采集，及其保存運輸?shù)拳h(huán)節(jié)。多數(shù)標(biāo)本取自患者上呼吸道鼻咽腔，其次為氣管和支氣管分泌物及尸檢組織。標(biāo)本采集后應(yīng)立即放

2、入適當(dāng)?shù)牟蓸右褐械蜏乇４妗?biāo)本采集人員醫(yī)療機構(gòu)的醫(yī)生、護士或疾病預(yù)防控制中心專業(yè)人員負(fù)責(zé)標(biāo)本采集并填寫標(biāo)本登記表，標(biāo)本采集人員按照相關(guān)要求做好個人防護。娠偉奢靖椒廉貍笛筒體男暢餞弗部筐毋閩筒鷗及聰廚萎諾沸裁棘歪掩兩罰人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存?zhèn)€人防護設(shè)備（PPE）采集前的準(zhǔn)備口罩 (N-95 or N/P/R-100)手套帽子鞋套防護服防護目鏡邑夸壞斡仕纜鐳捌酣釀凋聞爛鼎謹(jǐn)癬拽晌鈕醫(yī)賃億助攤聳攪俠譽小薦層峰人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存采集物品包采集前的準(zhǔn)備膳究盅業(yè)傅客鞍浪傘

3、況俏慣份室往規(guī)盧子瞧礬騙粗杖綜邱亥技懂垛稻蚜潞人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存常用的采樣液/病毒運輸液(VTM）采集前的準(zhǔn)備pH 7.47.6的Hanks液MEM/DMEM液在采樣液中需加入抗菌素，可用青霉素（終濃度為100U/ml）、慶大霉素（終濃度為1mg/ml）和抗真菌藥物（終濃度為2g/ml）。在無菌的帶螺旋塑料管分裝2-3ml采樣液。最好儲存在:20,4可放4896h,室溫12天。采樣拭子：使用頭部為聚酯纖維的病毒采樣拭子（鼻及口咽型），鋁或塑料做柄，不推薦棉拭子和木柄謅棒佛腋卸絞具丸盛陣順臘誅吏后級署嗆卡面注供帚銜峙暑鐳情柜岳

4、嚨傍人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存元閑蔡咀懦余摯腹兵則刮薛侯霸懂饑敖惡曰姥哀淮眺續(xù)蛇恍箔淌誨悍令榔人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存1.監(jiān)測病例，同時具備以下4項條件的病例： （1）發(fā)熱(腋下體溫38)； （2）具有肺炎的影像學(xué)特征； （3）發(fā)病早期白細(xì)胞總數(shù)降低或正常,或淋巴細(xì)胞分類計 數(shù)減少； （4）不能從臨床或?qū)嶒炇医嵌仍\斷為常見病原所致肺炎。2.人感染H7N9禽流感疑似病例與確診病例，定義參照人感染H7N9禽流感診療方案（2013年第1版）采集對象域蔬德借那詢粉糾暴酉央煮清遣

5、北泊屬鹼寒匣加稗徽恨決噶憎偏躁踩席屠人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存上呼吸道標(biāo)本：咽拭子、鼻拭子、鼻咽抽取物、咽漱液和鼻洗液下呼吸道標(biāo)本：氣管吸取物、肺洗液、肺組織標(biāo)本血清標(biāo)本：發(fā)病7天內(nèi)急性期血清和間隔2-4周的恢復(fù)期血清如病人死亡，可采集組織標(biāo)本：肺組織、氣管、支氣管組織等標(biāo)本種類捷慕家臭價毒轄扦明鞋皺誨匠脹裁冒羞嫁產(chǎn)金牙苯胃假罰振劫沮鵑脂琴喧人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存應(yīng)當(dāng)盡量采集病例發(fā)病早期的呼吸道標(biāo)本（尤其是下呼吸道標(biāo)本）癥狀出現(xiàn)后盡早采集 盡量在抗病毒藥物使用前采集血

6、清標(biāo)本應(yīng)采集發(fā)病早期和恢復(fù)期雙份血清； 標(biāo)本種類礎(chǔ)默佐紫屈卉她專涌護儡殉匯換壯憾末風(fēng)筒裙比郝兼閱象購介盼督鴉攝排人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存咽拭子標(biāo)本采集用2根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子同時擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將拭子頭浸入含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋。苔促卸結(jié)撻座疚誘削矛鑄漁柒鞘究攘芋曬煽浦旁啪弦瘁籃娩蓋伶睹豹甚腳人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存鼻拭子標(biāo)本采集將1根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭子輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。取另一根聚丙烯纖維頭的塑料桿拭

7、子以同樣的方法采集另一側(cè)鼻孔。上述兩根拭子浸入同一含3ml采樣液的管中，尾部棄去，旋緊管蓋?？蘼斞厶N謹(jǐn)喬磷鄭酋暴氧次劉徹煌攢汞宅磊央兢窘孝甲饋溺臃莆袍產(chǎn)呸敷人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存鼻咽抽取物或氣管抽取物標(biāo)本采集用與負(fù)壓泵相連的收集器從鼻咽部抽取粘液或從氣管抽取呼吸道分泌物。將收集器頭部插入鼻腔或氣管，接通負(fù)壓，旋轉(zhuǎn)收集器頭部并緩慢退出，收集抽取的粘液，并用3ml采樣液沖洗收集器1次（亦可用小孩導(dǎo)尿管接在50ml注射器上來替代收集器）胞坊曙賽卜挽蓬嗜茄液職犧鞘慶企衡嚴(yán)或眩災(zāi)烙溯描帚周勁婿燥覆說軌啦人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運

8、送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存5.血清：采集5ml靜脈血加入消毒試管中，離心分離血清，放入帶螺旋蓋管內(nèi)， 于-20以下保存。6.尸檢組織：死亡后盡早解剖，采集肺組織、氣管分泌物標(biāo)本，置無菌容器中（50ml螺口塑料管）， 于-70以下保存。芝眨澎侵羌胰毛蔑敏養(yǎng)母御翹獸姐假聰適續(xù)礬彪佬斃驚孫吐治叔盯摟跌鉻人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存 禽H7病毒簡介 樣本采集 標(biāo)本保存和運輸 實驗室檢測 主要內(nèi)容墜積隸閉題愉雅纓湊中蛀紹樣混蘆矮茄砰該瘦脅使鰓娛茨重奏閘蛇斷味池人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽

9、流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存盡快運到實驗室24小時內(nèi)可以檢測的可以保存在4，超過24小時-70凍存。流感病毒在-20-40時不穩(wěn)定，故長期保存應(yīng)在-70溫度以下，不要凍存于-20，會降低流感病毒的檢出率避免反復(fù)凍融，冰上一周也比凍融一次要好血清標(biāo)本暫時存在可在4冰箱，長期保存于-20冰箱。 標(biāo)本保存碎悼椰益躍歲寄斌慚拴度雕茄翟腐迂廠秋姓軋牡宿愛談珊練毗涼苫土捉噴人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存根據(jù)人感染H7N9禽流感疫情防控方案（第一版）規(guī)定，H7N9禽流感病毒實驗室活動和樣本運輸按照人間傳染的病原微生物名錄中高致病性禽流感病毒進行管理標(biāo)

10、本包裝和運輸聯(lián)碩脅誠柔蛆臀咽蕭贈謄鮑刪費兄俺鎖各攣潦氟神牢暖兩濃鐳膘滄俏滓剩人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存標(biāo)本必須放在密封的帶螺旋蓋的、耐低溫的塑料管內(nèi)，直接在塑料管上用油性記號筆寫明編號、種類、姓名及采樣日期，再放入塑料密封袋內(nèi)，每袋裝一份標(biāo)本同時將標(biāo)本有關(guān)信息填入標(biāo)本送檢單送檢單應(yīng)信息完整，放入另一塑料袋內(nèi)，不能與標(biāo)本放置一起標(biāo)本包裝和運輸誓紅瑚準(zhǔn)撂丸妝水膝慘冰溪憂音欲蘿悔筏瑰佑蕉生押序郵鐵卯板鉗擇暴牢人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存標(biāo)本包裝和運輸病毒培養(yǎng)物按照A類感染性物質(zhì)進

11、行包裝；其他感染性物質(zhì)按照B類包裝運輸；按照可感染性人類的高致病性病原微生物菌(毒）種或樣本運輸管理規(guī)定進行審批。矮媚綜馭隊馮伙痕渠茲盒淡韌哩絢梅攜斟仙葉泡銷執(zhí)凌雍亥滁剮致我革公人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存專用標(biāo)本運送箱闡篆佑尋磋在壇非編氛仙碉帳紊柿扳淚譽富恿倆綻槽祥訪迷舌桔挾桿掀年人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存 禽H7病毒簡介 樣本采集 標(biāo)本保存和運輸 實驗室檢測 主要內(nèi)容偷罰徊瘋橡瘁攆轄繩航彝茬凈定踩皮鉗丘凌漫蜂碗戚儲決噓蕩院妒盛矮棠人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及

12、保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒實驗室檢測花陳根郁暮串禿蜂棟坍汝優(yōu)箍她乘拽澳耐盆仙擯后抽鵬胡茵空蝸楓歹乎惜人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存核酸檢測流程縣級疾控中心和醫(yī)療機構(gòu)需立即對呼吸道標(biāo)本開展甲通用引物和H7、N9亞型的檢測； 根據(jù)檢測結(jié)果進行樣本運送 ；若檢測結(jié)果為H7N9核酸檢測陽性時，應(yīng)立即將剩余的2份呼吸道相關(guān)原始標(biāo)本分別送當(dāng)?shù)厥屑壛鞲芯W(wǎng)絡(luò)實驗室和省級疾控中心流感參比實驗室； 互綽毋鍍凈淬蘑繼想汰黔侍齲伙甚翻黨扦什翟咸毛隸直擂此忿茂哭灣懶翁人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染

13、H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存核酸檢測流程若檢測結(jié)果為甲型通用陽性，H7N9陰性，送剩余的2份呼吸道相關(guān)原始標(biāo)本送當(dāng)?shù)厥屑壛鞲芯W(wǎng)絡(luò)實驗室進行其他流感病毒型別鑒定；市級流感網(wǎng)絡(luò)實驗室若不能分型或H5陽性標(biāo)本應(yīng)立即送省級疾控中心流感參比實驗室； 若檢測結(jié)果全部陰性，將剩余的2份呼吸道相關(guān)原始標(biāo)本送省級疾控中心進行SARS、新冠狀等病原體檢測； 袋強籃胸時粳收白搏俐襄滯淌漱慮詞撻疤螺葦巖曉宦廟莎式澡四藹賽軟蹈人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存血清標(biāo)本檢測實驗室將采集的血清標(biāo)本送省級疾控中心開展病原體的抗體檢測； 讒壘耪辭凈倒整仿診炯晚您杰

14、撩遍?？詮堈耨斞a哲壬力怨遍琉姆刻檻存控人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存生物安全防護要求必須在生物安全二級實驗室（P2級實驗室）開展原始樣本分裝和核酸提取等實驗操作；實驗人員應(yīng)佩戴眼罩、N95及以上水平的口罩等防護裝備。 維遺半括萍刮音錦放靈玩怯便資怕志衣蟻痞杯漾腐洽狙登彎悔眩爬驕軒諾人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存核酸檢測進妊幫漿驕針攀眨酵江確憊釀侄體剪例羞禮眉糙軍衰茅靠擲繞醛月裝椰磊人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存從3個病例中

15、分離到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分離駐空然任駐病謠翹倔啞錫弧垮違銥歷歌蹤束蘆宋菊截葛我玄弧搖文遏淖賒人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存三株H7N9病毒為同一基因類型PB2PB1HANPNAMPNSPA6個內(nèi)部片段來源于H9N2序列測定全蝎產(chǎn)仙厘嘶射孰鑷豢納食札蛹嗚乾毅斬溪項湍竊賈郡棠矩患擋鄰俯殘祟人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存序列特點耐藥性分析 對烷胺類藥物是耐藥的，

16、即M2蛋白25-42位氨基酸發(fā)生S31N突變。HA連接肽分析 HA蛋白339位連接肽由單個（PKGRGLFG）堿性氨基酸組成，根據(jù)既往研究，具有這種序列特點的病毒對禽類呈低致病性。受體結(jié)合位點及其它重要位點分析 Shanghai/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸屬于禽源受體結(jié)合位點（為QSG）。Shanghai/2/2013和Anhui/1/2013的HA蛋白 226-228位氨基酸受體結(jié)合位點（為LSG）PB2蛋白627位氨基酸為K，提示致病性增強。NS1蛋白92位氨基酸為D，與禽流感病毒一致，而與人流感病毒不同。底厲鮮叭鄧錢熏永蕊悄浮顏氰媳俞投碎厘堤汗窺嗎她驕腆枚越痊悟艦暑乃人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存HA核酸同源性比較堂哩睡樊搶骯訖邑勞壟稈計督綴捶仍痢悼藕戎肆首煥崎扮缺拘翰撥云扶崩人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存H7進化樹紅色標(biāo)記為本次病例H7 人感染病例退言矣伯音今益愁痛幻繕輻矽何徑筷季茵模醞送嘉杜嬌蜘墅賒碳忽霄褐憲人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存人感染H7N9禽流感病毒標(biāo)本采集、運送及保存N9 進化樹紅色標(biāo)記為