天然藥物化學(xué)課程設(shè)計

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)天然藥物化學(xué)設(shè)計試驗開題報告題目：粉防己中粉防己堿的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定學(xué) 生： 學(xué) 號： 院 （系）： 專 業(yè)： 指導(dǎo)教師： 2011年1月1日天然藥物學(xué)課程實驗任務(wù)書題目：粉防己中粉防己堿的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定二、實驗任務(wù):查閱文獻資料并寫出粉防己化學(xué)研究進展的文獻綜述設(shè)計實驗方案并進行可行性分析（方案應(yīng)包括目的意義，設(shè)計原理、流程、實驗方法、時間安排、需要的儀器與試劑）。對實驗材料進行性狀、顯微和理化鑒定并將鑒定結(jié)果寫入實驗報告中。完成粉防己堿單體化合物的分離及結(jié)構(gòu)鑒

2、定，鑒定數(shù)據(jù)應(yīng)包括熔點、旋光度、紫外圖譜。對所得數(shù)據(jù)進行分析完成實驗報告并提交少量粉防己堿樣品2g。實驗要求:實驗中要求學(xué)生不完全依賴現(xiàn)成條件，能在教師指導(dǎo)下自己創(chuàng)造一些條件完成實驗。實驗方法應(yīng)有一定的創(chuàng)新性。實驗數(shù)據(jù)準確，須注明實驗條件。要求提供的樣品袋上注明樣品名稱、熔點、旋光度、制備者姓名、日期實驗報告內(nèi)容:題目實驗?zāi)康幕驹韺嶒炈迷噭x器的型號及生產(chǎn)廠家分離方法創(chuàng)新之處自制或創(chuàng)造了那些實驗條件條件實驗流程及操作方法結(jié)果與分析結(jié)論在所完成實驗的基礎(chǔ)上提出一個新的研究課題合理化建議粉防己中粉防己堿的提取分離及結(jié)構(gòu)鑒定一、文獻綜述 1、成分來源：為防己科植物粉防己的干燥根，以安徽質(zhì)量最

3、優(yōu)。結(jié)構(gòu)及化學(xué)成分： 粉防己堿的結(jié)構(gòu)式中文名稱粉防己堿 別 名 漢防己堿，粉防己甲素，粉防己堿 分 子 式 C38H42N2O6 分 子 量 Mw622.76 熔 點 215217 物理性質(zhì) 無色針狀結(jié)晶(乙醚),幾乎不溶于水,石油醚,溶于乙醚和某些有機溶劑 。藥理作用：對心臟有負性肌力作用，負性頻率作用及負性傳導(dǎo)作用，并降低心肌耗氧量可延長心肌的不應(yīng)期和房室傳導(dǎo)可增加心肌血流量可降低總外周血管阻力，使血壓下降，降壓時無反射性心率增快，由于后負荷降低，心輸出量可增加這些作用均與其鈣拮抗作用有關(guān) 本品為雙芐基異喹啉類生物堿。對心臟有負性肌力、負性頻率和負性傳導(dǎo)作用，其降壓時無反射性心率增快，并有

4、肌松、解熱、鎮(zhèn)痛和抗炎作用。2、研究意義：粉防己堿( tetrandrine，TET) 又名粉防己甲素，是從防己科千金藤屬植物石蟾蜍的干燥根中提取的一種雙芐基異喹啉生物堿。其分子式為C33H42N2O6 ，現(xiàn)代藥理研究證實，Tet是一種鈣離子拮抗劑，主要作用于鈣離子通道，影響鈣離子的跨膜轉(zhuǎn)運以及在細胞內(nèi)的分布利用. 近年來,Tet對肝纖維化的防治作用已漸漸為人們所重視. 隨著肝臟細胞分離培養(yǎng)技術(shù)的建立及分子生物學(xué)技術(shù)的進步，Tet抗肝纖維化的研究已深入到細胞、亞細胞及分子水平.二、實驗部分1、總堿的提?。海?）原理：利用萃取原理，化合物在兩種互不相溶（或微溶）的溶劑中或分配系數(shù)的不同，使化合物

5、從一種溶劑內(nèi)轉(zhuǎn)移到另外一種溶劑中。（2）步驟：稱取粉防已粗粉300克，置2000 ml圓底燒瓶中，加 7倍量95%乙醇（約需1400 ml）。水浴加熱回流3次（加熱期間振搖數(shù)次），每次一小時。最后將瓶內(nèi)藥渣倒在布氏漏斗上抽濾壓干，藥渣棄去。合并三次乙醇提取液，放冷后如有絮狀物析出，再抽濾一次，澄清液回收乙醇，減壓濃縮至糖漿狀無乙醇味為止，得乙醇總提取物。糖漿狀總提取物移至大三角燒瓶中，逐漸加入50，1 %鹽酸稀釋，充分攪拌使生物堿溶解，不溶物呈樹脂狀析出，直至加酸水溶液不再發(fā)生混濁為止（約需500 ml），靜置，傾出上清液，瓶底的樹脂狀雜質(zhì)以1 %鹽酸少量分次洗滌，直至洗液對生物堿沉淀試劑反應(yīng)

6、微弱時為止。合并洗液和濾液，靜置片刻，滴加濃氨水至PH 9左右，用環(huán)己烷乙酸乙酯（1：3）萃取3次，得有機相和堿水液（棄去）。有機相用無水硫酸鈉脫水蒸干抽松。轉(zhuǎn)移澄清液于干燥的圓底燒瓶中，加沸石少許，常壓回收有機溶劑。殘留物在圓底燒瓶中，加丙酮加熱溶解，過濾，用熱丙酮洗滌濾紙，濾液、洗液合并，回收丙酮至適量，放冷，加塞靜置待結(jié)晶析出。析出完全后抽濾收集。母液再濃縮重復(fù)處理，尚可得結(jié)晶。合并數(shù)次結(jié)晶即為粉防已堿和防已諾林堿的混合物。流程圖如下： 粉防己根粗粉（300g） 7倍量95乙醇回流3次，減壓濃縮 每次12h 糖漿狀物 傾入50，1鹽酸液中 酸水液 濃氨水調(diào)PH9 環(huán)己烷乙酸乙酯（1：3）

7、萃取3次 水層 有機層 無水硫酸鈉脫水蒸干抽松 濾液 回收有機溶劑 粗品 丙酮重結(jié)晶白色漢防己總堿2、粉防已堿和防已諾林堿的分離（1）原理：根據(jù)粉防己堿和防已諾林堿在硅膠上的吸附力不同而得到分離。（2）步驟：低壓柱色譜法：粉防己總堿用丙酮熱溶，上硅膠柱，以環(huán)己烷乙酸乙酯二乙胺（6：2：1）為洗脫劑，調(diào)節(jié)壓力0.50.6kg，流速0.70.8ml/分，每份57ml，TCL檢查，合并相同流份。4575ml流分為粉防己堿，80130ml流分為防己諾林堿。分別濃縮，丙酮重結(jié)晶，得純品。流程圖如下： 粉防己總堿（200300mg） 丙酮熱溶，上硅膠柱，以環(huán)己烷乙酸乙酯二乙胺（6：2：1）為洗脫劑，調(diào)節(jié)壓

8、力0.50.6kg， 流速0.70.8ml/分，每份57ml，TCL檢查， 合并相同流份。 4575ml流分 80130ml流分 濃縮 濃縮 粉防己堿 防己諾林堿 丙酮重結(jié)晶 丙酮重結(jié)晶 純品 純品三、 定性鑒別1、沉淀反應(yīng)：（1）碘化汞鉀試驗：取樣品的稀酸水溶液1 ml，加碘化汞鉀試劑（Mayer氏試劑）12滴，出現(xiàn)白色或類白色沉淀者為陽性反應(yīng)，表示有生物堿存在。（2）碘化鉍鉀試驗：取樣品的稀酸水溶液1 ml，加碘化鉍鉀試劑（Dragendorff氏試劑）12滴，出現(xiàn)棕黃至棕紅色沉淀者為陽性反應(yīng)，表示有生物堿存在。（3）碘-碘化鉀試驗：取樣品的稀酸水溶液1 ml，加碘-碘化鉀試劑（Wangn

9、er氏試劑）12滴，生成褐色至暗褐色沉淀者為陽性反應(yīng)，表示有生物堿存在。（4）雷氏銨鹽試驗：取樣品的稀酸水溶液（PH 45）1 ml，加雷氏銨鹽試劑數(shù)滴，生成黃紅色沉淀者為陽性反應(yīng)，表示有生物堿存在。（5）苦味酸試驗：取樣品的中性溶液1 ml，加苦味酸的飽和水溶液12滴，生成黃色沉淀者為陽性反應(yīng)，表示有生物堿存在。2、薄層色譜：吸附劑：中性氧化鋁（級）干法制板樣品：（1）粉防已堿 （2）防已諾林堿 （3）總提取物（均以氯仿溶解）展開劑：氯仿-丙酮-苯（314）顯色劑：噴以改良碘化鉍鉀試劑（干法鋪板顯色時，要在溶劑未干前噴顯色劑，否則氧化鋁粉末易飛散，使薄層破壞）。四、純度測試及結(jié)構(gòu)鑒定熔點數(shù)據(jù)

10、：（略）紅外法進行鑒定：取粉防己的干燥塊根，分別粉碎過40目篩，在NEXUS670型傅立葉變換紅外光譜儀，以O(shè)MNI采樣品附件，取粉末直接測定，結(jié)果：粉防己的FTIR中在3327、2928、1635、1508、1416、1369、1337、1151、1078、1015、933/cm處有吸收峰出現(xiàn)；五、含量測定取本品粉末（過三號篩）約lg，于80干燥4小時，精密稱定，置中，加濃氨試液6滴，放置1小時，加適量，加熱回流約6小時，提取液回收氯仿后，放冷，殘渣用無水乙醇分次溶解并全部移至2ml量瓶中，加無水至刻度，搖勻，靜置，作為供試品溶液。另取粉防己堿對照品適量，加氯仿制成每1ml含2mg的溶液，作

11、為對照品溶液。照薄層色譜法試驗，吸取供試品溶液100ml，點于G薄層板上使成條狀，取對照品溶液10ml，點于供試品條斑一側(cè)，作為對照，以氯仿-丙酮-甲醇-濃氨試液（20：3：2：0.1）為展開 劑，展開，取出，待溶劑揮盡，立即置燈（365nm）下照射約數(shù)十分鐘后，刮取與對照品斑點相應(yīng)位置上的供試品條斑，同時刮 取同一薄層板上與對照品條斑等面積的硅膠G作空白，照柱色譜法，置兩個相同的（0.7cm10cm）中，用甲醇30ml分次洗脫，洗脫液收集于蒸發(fā)皿中，蒸干，冷卻，加0.1molL溶液10ml使殘渣完全溶解，照分光光度法，在280nm的波長處測定吸收度。按 粉防己堿（C38H42N2O6）的吸收

12、系數(shù)（E1%1CM）為113計算，即得。六、預(yù)算預(yù)計藥材用量：粉防己中粉防己堿的含量約為0.6%，所以要得到2g產(chǎn)品，大約需要350g的藥材粗粉。但實驗中會有損失，因此需要500g藥材粗粉。 （1）預(yù)算表：儀器序號名稱規(guī)格數(shù)量序號名稱規(guī)格數(shù)量1回流裝置500ml1套9燒杯500ml2個2柱色譜裝置2.52.51套10薄層色譜裝置1套3分液漏斗500ml1個11玻璃漏斗2個4減壓蒸餾裝置500ml1套12玻璃棒2根5抽濾裝置1套13沸石少許6具塞三角燒瓶250ml1個14索氏提取器1套7量筒10ml 50ml 100ml各1個15濾紙8燒杯50ml 100ml各1個表2-1 實驗儀器試劑序號名稱單位數(shù)量序號名稱單位數(shù)量195%乙醇瓶510碘化鉍鉀試劑ml102鹽酸瓶111碘-碘化鉀試劑ml103環(huán)己烷 L1.612雷氏銨鹽試劑ml104乙酸乙酯L3.213苦味酸試劑ml105濃氨水瓶114碘化汞鉀試劑ml106無水硫酸鈉g2015中性氧化鋁板塊27丙酮瓶116硅膠ml3008二乙胺ml100170.7%CMC-Naml5009粉防己甲素標準品ml1018粉防己乙素標準品ml10表2-2 實驗試劑（2）時間預(yù)算：三天（03.19到0