如何制作檢驗(yàn)科質(zhì)控圖 (2)講稿

1、關(guān)于如何制作檢驗(yàn)科質(zhì)控圖 (2)第一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)控血清 1內(nèi)部對照質(zhì)控血清 2外部對照質(zhì)控血清 外部對照質(zhì)控血清是各級實(shí)驗(yàn)室為了監(jiān)控每次檢測的重復(fù)性和穩(wěn)定性以及檢驗(yàn)試劑盒批間差異而設(shè)置的一套陰性和陽性對照血清。設(shè)立外部對照還可以提示標(biāo)本處于臨界值狀態(tài)時(shí)的檢驗(yàn)操作情況。 第二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 一、外部對照質(zhì)控血清的組成 理想的外部對照應(yīng)該包括陽性對照、弱陽性對照、臨界值對照和陰性對照。 在每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)設(shè)置一個(gè)單一濃度水平的質(zhì)控品即弱陽性對照。這個(gè)弱陽性對照的值以設(shè)定在該試劑盒Cut-off值的23倍為宜。第三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于

2、2022年6月 二、外部對照質(zhì)控血清的來源和選擇1）通過向有關(guān)機(jī)構(gòu)購買獲得2）通過實(shí)驗(yàn)室制備獲得 ( 比較經(jīng)濟(jì)的方法 ) 混合試劑盒內(nèi)部對照血清，等量分裝。 混合HIV抗體陽性或陰性人血清，3000轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，用0.2m 生物濾膜過濾除菌后再進(jìn)行56 30分鐘加熱滅活處理。弱陽性對照可以通過使用HIV抗體陰性的正常人血清梯度稀釋HIV抗體強(qiáng)陽性血清并經(jīng)標(biāo)定后得到。弱陽性對照的OD值以23倍于Cut-off為宜。第四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月三、外部對照質(zhì)控血清的保存1）外部對照血清或血漿的一次制備量應(yīng)該足夠本實(shí)驗(yàn)室一年使用2）外部對照血清應(yīng)該均一、無菌3）外部對照血清

3、標(biāo)定后應(yīng)該等量分裝，每個(gè)分裝的量應(yīng)足夠一周使用4）外部對照應(yīng)該分類作好標(biāo)記，使用不同顏色的標(biāo)簽5）外部對照血清應(yīng)該存放在70 ，如無條件則存放在非自動(dòng)除霜的20 冰箱6）外部對照血清一旦融解以后應(yīng)該存放在 28 ，一周后必須棄去，不能重新凍存。第五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 四、外部對照質(zhì)控血清的使用 原則上每一次實(shí)驗(yàn)必須使用外部對照質(zhì)控血清，建立質(zhì)控圖，以便監(jiān)控實(shí)驗(yàn)操作的一致性和結(jié)果的準(zhǔn)確性。同時(shí)可以了解各批試劑盒之間的誤差(批間差異)。第六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月質(zhì)控圖(1)X-2SXX+SX-SX+2S第七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 建立

4、質(zhì)控圖參數(shù) 對HIV抗體檢測(ELISA)外部對照質(zhì)控血清的評價(jià)采用多次測定的OD值的均值上下各兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的范圍，即外部對照OD值的95可信限為 x 2s。各個(gè)外部對照的標(biāo)定即確定外部對照的均值和可信限， 可用下列幾個(gè)統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)來確定可信限: 算術(shù)平均值( x )代表一組OD值數(shù)的平均值。 標(biāo)準(zhǔn)差(s) 變異系數(shù)(cv)，第八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月次數(shù)質(zhì)控血清ODCut-off值ODS/CO值10.1800.1051.7120.1900.1051.8130.2000.1051.9040.2280.1051.8150.1370.1051.0960.2210.1052.1070

5、.1500.1051.4380.1700.1051.6290.1800.1052.14100.1500.1051.43110.2000.1051.90120.1420.1051.35130.2100.1052.00140.2210.1051.52150.1800.1051.71160.1900.1051.81170.1600.1051.52180.2210.1052.10190.2100.1052.00200.1500.1051.43范例：參考鄭懷競主編免疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控，1997年出版。第九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 x 計(jì)算公式為： x x = N s 計(jì)算公式為

6、： ( xn - x )2 s = N cv 計(jì)算公式為： s cv = x 100 % x 第十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 通過上表，計(jì)算S/CO值的均值（x），標(biāo)準(zhǔn)差（s）和變異系數(shù)（cv） x =1.72 s =0.29 cv =16.9% 根據(jù)以上數(shù)據(jù)繪制室內(nèi)質(zhì)控框架圖, 開始質(zhì)量控制次數(shù)日期質(zhì)控血清ODCut-off值 S/CO值217.40.1600.1051.52227.70.1900.1051.81237.80.2000.1051.90247.110.2280.1051.81257.120.1390.1051.10267.150.2210.1052.10277.

7、160.1500.1051.43287.180.1700.1051.62297.190.2250.1052.14第十一張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)控圖(Levey-Jennings控制圖)第十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)控圖的判定和分析 如果檢驗(yàn)進(jìn)入質(zhì)控狀態(tài)時(shí)，質(zhì)控對照值超出 2s，則本次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不能被接受( 失控 )。 位移：如果幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對照值 (3-5次) 都落在均值(中心線)的一邊則稱之為位移，通常表示存在大的變化 ( 失控 )。 引起位移的原因有使用新批號的試劑盒、使用新試劑、實(shí)驗(yàn)員的更換、孵育溫度的改變、儀器 ( 移液器 ) 故障等。 第十三

8、張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)控圖的判定和分析 趨勢：當(dāng)幾個(gè)連續(xù)質(zhì)控對照值(5-7個(gè))幾乎按一個(gè)方向分布時(shí)稱之為趨勢(失控)，通常由參數(shù)的緩慢改變引起，如試劑失效和移液器逐漸不準(zhǔn)確等。 發(fā)生漂移和趨勢的最常見的原因是試劑(如酶標(biāo)記物)或?qū)φ盏氖?。第十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn) a可以先進(jìn)行最佳條件下的變異測定，即在最佳條件下(人、儀器、試劑、實(shí)驗(yàn)室等因素)對同一批質(zhì)控血清連續(xù)進(jìn)行測定20次以上，獲得一組數(shù)據(jù)，求 x 和s值。然后求出常規(guī)條件下的 x 和 s。如果常規(guī)條件下的 x 和s 值與最佳條件下的 x 和s值比較接近，則可

9、以接受。若不作最佳條件下的測定，可以用本室以往處于控制狀態(tài)下的數(shù)值替代。b采用S/CO比值制圖要比單用OD或A值制圖的方法給出更為精確的評估，因?yàn)樗鼘⒚看?每天OD值的浮動(dòng)考慮在內(nèi)。從S/CO質(zhì)控圖中可以直觀地發(fā)現(xiàn)外部對照值的漂移和趨勢。第十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn)c 由專人負(fù)責(zé)建立質(zhì)控圖，每月(月末)定期召開質(zhì)量控制會(huì)，討論本月檢測的質(zhì)量控制情況。檢驗(yàn)人員在每次檢驗(yàn)之前，了解一下質(zhì)控圖的結(jié)果，做到心中有數(shù)。d 建議長期和穩(wěn)定地使用一種質(zhì)量好的試劑盒。第十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn)e使用新批號

10、或使用不同廠家的試劑盒都必須在質(zhì)控圖上注明使用日期。原則上，如果改用新批號試劑盒，應(yīng)重新制作室內(nèi)質(zhì)控框架圖，并建議對新舊兩批試劑盒進(jìn)行平行性試驗(yàn)。f 發(fā)現(xiàn)全部對照值劇烈位移，立即報(bào)告室主管，分析原因，若是試劑盒質(zhì)量問題，立刻通知廠家。第十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 質(zhì)量控制圖建立和分析的注意要點(diǎn)h 外部和內(nèi)部陰性對照質(zhì)控血清出現(xiàn)高值傾向，應(yīng)該注意試劑、技術(shù)或設(shè)備出現(xiàn)問題(如洗板機(jī)等)。i實(shí)驗(yàn)室配制新批次的外部對照質(zhì)控血清或變動(dòng)外部對照質(zhì)控血清的值時(shí)，必須重新計(jì)算均值和標(biāo)準(zhǔn)差，建立新的質(zhì)控圖。j 操作者在測定質(zhì)控血清時(shí)，發(fā)現(xiàn)質(zhì)控血清數(shù)據(jù)違背了控制規(guī)則，應(yīng)填寫失控報(bào)告單，上交室負(fù)

11、責(zé)人，由室負(fù)責(zé)人決定是否要發(fā)出檢驗(yàn)報(bào)告。第十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月第十九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 “即刻法”質(zhì)控采用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計(jì)方法，只需在常規(guī)條件下對外部質(zhì)控血清連續(xù)測定3次，按以下統(tǒng)計(jì)方法計(jì)算，如連續(xù)測定3次的結(jié)果都在控制范圍之內(nèi)，即可對第3次結(jié)果進(jìn)行質(zhì)控，以保證檢驗(yàn)結(jié)果的質(zhì)量。第二十張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 “即刻法”的建立參見鄭懷競主編免 疫學(xué)檢驗(yàn)室間質(zhì)評與室內(nèi)質(zhì)控具體計(jì)算方法如下：先將測定值從小到大排列：x1，x2，x3xn(x1為最小值，xn為最大值)計(jì)算 X 和 s計(jì)算SI上限值和SI下限值第二十一張，PPT共三十二

12、頁，創(chuàng)作于2022年6月SI上限= X 最大值 X S SI下限=X - X最小值 S 將SI上限、SI下限與SI值表中的數(shù)字比較。第二十二張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月SI值表N n3s n2s N n3s n2s3 1.15 1.15 122.552.294 1.49 1.46 132.612.335 1.75 1.67 142.662.376 1.94 1.82 152.712.417 2.10 1.94 162.752.448 2.22 2.03 172.792.479 2.32 2.11 182.822.5010 2.41 2.18 192.852.5311 2.48 2

13、.23 202.882.56第二十三張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月當(dāng)SI上限和SI下限 n3s值時(shí)，說明該值已在3s范圍之外，屬“失控”。第二十四張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 處于“告警”和“失控”狀態(tài)的數(shù)值應(yīng)舍去，需重新測定該外部質(zhì)控血清和病人樣本。 舍去的只是本次失控的數(shù)值及同時(shí)測定的樣本，其他次測定值仍可繼續(xù)使用。 當(dāng)檢測的數(shù)值超過20次后,不必再使用“即刻法”質(zhì)控統(tǒng)計(jì)計(jì)算,可以轉(zhuǎn)入常規(guī)的質(zhì)控圖的質(zhì)控。第二十五張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 21次質(zhì)控血清檢測S/CO值 次數(shù) S/CO值 次數(shù) S/CO值 1 1.71 12 1.35 2 1.81

14、13 2.00 3 1.90 14 1.52 4 1.81 15 1.71 5 1.09 16 1.81 6 2.10 17 1.52 7 1.43 18 2.10 8 1.62 19 2.00 9 2.14 20 1.43 10 1.43 21 1.52 11 1.90第二十六張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月在第3次測定后按“即刻法”計(jì)算：n=3三次S/CO值從小到大排列為： 1.711.811.90 求出X= 1.81, S = 0.10 計(jì)算: SI下限 =1.81-1.71=1.0 0.10 SI上限=1.90-1.81=0.9 0.10查SI值表: n=3時(shí), n2s=1.

15、15, n3s=1.15， SI上限和SI下限均小于n2s，表示該三次檢測數(shù)據(jù)在控制范圍內(nèi)。第二十七張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 在第5次測定后,按上法計(jì)算:n=5 1.09 1.71 1.81 1.811.90 X=1.66, S = 0.33 SI下限=1.66-1.09=1.73 0.33 SI上限=1.90-1.66=0.73 0.33查SI值表： n=5時(shí), n2s=1.67, n3s=1.75 n2s(1.67) SI下限(1.73) n3s (1.75), SI下限值在n2s和n3s之間,說明該值在2s3s范圍，處于“告警”狀態(tài)，故本次數(shù)據(jù)及同時(shí)測定的樣本結(jié)果應(yīng)棄去

16、后重新測定。第二十八張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月 第6次檢測，n仍為5進(jìn)行計(jì)算:n=5 1.71 1.81 1.81 1.90 2.10 X =1.87, S = 0.15 SI下限=1.87-1.71=1.07 0.15 SI上限=2.10-1.87=1.53 0.15 查SI值表: n=5時(shí), n2s=1.67, n3s=1.75. SI上限和SI下限均小于n2s，數(shù)據(jù)在控制范圍內(nèi)，說明本次測定樣本結(jié)果可靠?？衫^續(xù)檢測并計(jì)算。第二十九張，PPT共三十二頁，創(chuàng)作于2022年6月當(dāng)測定達(dá)到21次時(shí),應(yīng)舍去一個(gè)數(shù)據(jù)(第5個(gè)),n=20,排序如下: 1.351.431.431.431.521.521.621.711.711.811.811.811.901.901.902.002.002.102.102.14