女貞子中齊墩果酸的提取分離和鑒別

1、- -女貞子中齊墩果酸的提取分離和鑒別女貞子為木犀科植物女貞LigustrumlucidumAit.的干燥成熟果實(shí)。甘、苦，涼。歸肝、腎經(jīng)。能補(bǔ)肝腎陰，烏須明目。主治眩暈耳鳴，腰膝酸軟，須發(fā)早白，目暗不明，視力減退，陰虛發(fā)熱。為常用的扶正固本中藥。藥理研究表明其提高免疫的主要有效成分為齊墩果酸、熊果酸及乙酰齊墩果酸。齊墩果酸以游離態(tài)和結(jié)合成苷的形式同存于女貞子中。女貞子還含有橄欖苦苷、D-甘露醇、硬脂酸、植物蠟等，其他成分尚有特女貞子苷、女貞苦苷、女貞子酸、芹黃素、甘露醇、葡萄糖、棕櫚酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、槲皮素和B-谷甾醇等。一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆杖祁惢衔锏奶崛》蛛x原理和操作方法；掌握三萜

2、類化合物的結(jié)構(gòu)和一般性質(zhì)的關(guān)系；熟悉三萜類化合物的基本鑒別方法。二、儀器與試藥（一）儀器RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀SHB-循環(huán)水式多用真空泵HHS型電熱恒溫水浴鍋玻璃儀器氣流烘干器圓底燒瓶（500mL）ZF-2型三用紫外儀電熱恒溫干燥箱移液管（10mL、5mL）分液漏斗（125mL）（二）試藥女貞子乙醇?xì)溲趸c鹽酸氯仿pH試紙活性炭醋酐濃硫酸苯甲酸乙酯甲酸甲醇甲苯乙酸乙酯冰醋酸三、主要成分的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)表91黃芩中主要成分的物理性質(zhì)中英名稱分子式性狀熔點(diǎn)溶解性齊墩果酸(Oleanolicacid)CHO30483白色針狀結(jié)晶（乙醇）308310C溶于甲醇、乙醇、乙醚、丙酮和氯仿，不溶于水。乙酰齊墩果酸

3、(acetyloleanolicacid)CHO32505白色簇晶258260C溶于氯仿、乙醚、無水乙醇，不溶于水熊果酸(ursolicacid)CHO32505白色針狀結(jié)晶（95%乙醇）286287C易溶于吡啶?？扇苡跓嵋掖?，微溶于苯、氯仿、乙醚，不溶于水。齊墩果酸R=H乙酰齊墩果酸R=COCH3四、實(shí)驗(yàn)原理1利用齊墩果酸，乙酰齊墩果酸可溶于95%乙醇的性質(zhì)進(jìn)行提??；2在堿性條件下水解乙酰齊墩果酸，然后酸化，用氯仿將萃取出已游離的齊墩果酸3用無水乙醇水對齊墩果酸進(jìn)行重結(jié)晶。五、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容（一）齊墩果酸的提取分離和精制女貞子粗粉100g95%乙醇200mL回流提取1小時，過濾濾液藥渣95%乙醇1

4、50mL回流提取1小時，過濾濾液藥渣（棄去）減壓回收乙醇至總體積約5080mL,加入10%氫氧化鈉適量調(diào)pH至10-11,水浴回流20分鐘，離心機(jī)離心5分鐘，殘?jiān)壢ィ┥锨逡旱渭訚恹}酸調(diào)pH23,用氯仿萃取3次（30、20、20mL）氯仿液殘液回收氯仿至干，用無水乙醇20mL多次將殘留物轉(zhuǎn)溶出來，放在小燒杯中，滴加蒸餾水，產(chǎn)生大量沉淀，過濾，濾渣用熱蒸餾水洗35次濾液沉淀（粗品）加95%乙醇約lOOmL加熱溶解后，加活性炭1g回流脫色10-15分鐘，過濾，在濾液中滴加蒸餾水，產(chǎn)生大量沉淀，過濾，用熱蒸餾水洗35次濾液沉淀在沉淀中加入無水乙醇約20mL水浴加熱溶解，再滴加蒸餾水，產(chǎn)生大量沉淀，

5、放冷析晶，過濾，抽干齊墩果酸純品（二）鑒別實(shí)驗(yàn)1化學(xué)檢識（1）醋酐-濃硫酸反應(yīng)：取少量樣品，加ImL醋酐溶解，再加5滴濃硫酸，觀察顏色變化，可產(chǎn)生黃f紅f紫f藍(lán)等顏色變化，最后變?yōu)楹稚?。?）氯仿-濃硫酸反應(yīng)：取少量樣品，溶于氯仿，加入濃硫酸后，觀察顏色變化，可發(fā)現(xiàn)在氯仿層呈現(xiàn)紅色或藍(lán)色，氯仿層有綠色熒光出現(xiàn)。2薄層層析法吸附劑：青島硅膠G以0.4%CMC-Na水溶液制板，105C活化40分鐘。展開劑：（1）苯-甲酸乙酯-甲酸（5：4：1）（2）氯仿-甲醇（40：1）（3）甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸（12：4：0.5）顯色劑：（1）噴10%硫酸的95%乙醇溶液顯色（105C加熱5分鐘顯紫色）；（2）噴磷鉬酸試液顯色（110C加熱10分鐘顯蘭色）六、實(shí)驗(yàn)結(jié)果1記錄齊墩果酸提取分離和純化的過程。2詳細(xì)記錄定