VEGF在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達及其意義

1、VEGF在子宮內(nèi)膜異位癥中的表達及其意義【摘要】 目的 觀看血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）在子宮內(nèi)膜異位癥（EMS）中的表達并探討其在 EMS發(fā)病機制中的作用。方式 利用免疫組化法檢測 VEGF在 30 例 EMS的異位內(nèi)膜及在位內(nèi)膜組織、 30 例正常子宮內(nèi)膜組織中的表達。結(jié)果 VEGF 在異位內(nèi)膜的表達顯著高于在位內(nèi)膜和正常子宮內(nèi)膜（P ）。VEGF在 EMS在位內(nèi)膜的表達顯著高于正常子宮內(nèi)膜（ P ）。結(jié)論 VEGF在 EMS的發(fā)生、進展中起重要作用?！娟P(guān)鍵詞】血管內(nèi)皮生長因子； 子宮內(nèi)膜異位癥； 免疫組織化學(xué)； 表達ABSTRACT:ObjectiveToobservetheexpres

2、sionofvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)inendometriosis,andtoexploreitspossibleroleinthe pathogenesisofendometriosis.Methods The expressionofVEGF in30normalendometrium,30ectopic endometrium and eutopic endometrium were detected byimmunohistochemistry,andthedatawasanalyzedwithstatistical software.

3、 Results The expression level of VEGF inthe ectopicendometriotictissueswas significantlyhigherthanthoseintheeutopicendometriumandnomal endometrium(P,andtheexpressionlevelofVEGF intheeutopicendometrium was significantlyhigherthanthatinnomalendometrium (P.ConclusionsVEGF may contributetothepathogenesi

4、s of endometriosis.KEY WORDS:Vascular endothelial factor;Endometriosis;Immunohistochemistry;Expressiongrowth子宮內(nèi)膜異位癥（ EMS）發(fā)病機制涉及到多基因遺傳、環(huán)境因素、免疫異樣、血管生成異樣及內(nèi)分泌異樣等多個環(huán)節(jié)。種植灶子宮內(nèi)膜的快速生長需要大量的新生血管，血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是血管內(nèi)皮細胞的有絲割裂原和成形素，并對內(nèi)皮細胞有趨化作用。在月經(jīng)周期中 VEGF參與子宮內(nèi)膜的修復(fù)， 具有很強的促血管形成能力。 本研究采納免疫組化技術(shù)檢測了 VEGF在 EMS異位內(nèi)膜、在位內(nèi)膜和正常

5、子宮內(nèi)膜中的表達，以了解其在 EMS發(fā)病機制中所起的作用。資料與方式一樣資料30 例 EMS異位內(nèi)膜標(biāo)本取自武漢大學(xué)人民醫(yī)院20062020 年因卵巢巧克力囊腫行手術(shù)的患者，均經(jīng)病理證明，術(shù)前未用激素藥，排除其他系統(tǒng)疾病?；颊吣挲g2545 歲，平均 32 歲。 EMS在位內(nèi)膜取自手術(shù)前診斷性刮宮。 30 例正常子宮內(nèi)膜標(biāo)本取自同期病理學(xué)診斷為正常增生期及分泌期的內(nèi)膜，患者年齡2543 歲，平均年齡 31 歲。檢測方式卵巢子宮內(nèi)膜異位組織及在位內(nèi)膜、 正常內(nèi)膜組織經(jīng)生理鹽水沖洗凈后 10%福爾馬林固定，石蠟包埋，制備成組織蠟塊， 5m持續(xù)切片，HE染色后鏡下觀看到典型子宮內(nèi)膜組織為入選標(biāo)本。采納

6、 SP免疫組化的方式檢測VEGF，試劑一抗（ VEGF單克隆抗體）、U1traSensitive TM S P 超敏試劑盒及 DAB顯色劑系福州邁新生物技術(shù)開發(fā)產(chǎn)品， 操作按說明書進行， 用已知的標(biāo)本作為陽性對照， PBS 代替一抗作為陰性對照。結(jié)果分析利用 Media Cybernetics 公司生產(chǎn)的 Image pro plus 免疫組化彩色圖像分析系統(tǒng)進行圖像分析 , 選擇測定平均光密度 (OD)作為評判參數(shù)。每一個切片選擇 5 個視野，每一個視野測定 3 次后取均值。 統(tǒng)計學(xué)方式用統(tǒng)計軟件進行。選用 t 查驗、方差分析， P 為不同有顯著性意義。結(jié) 果VEGF 要緊位于子宮內(nèi)膜腺上皮

7、細胞的胞漿和部份基質(zhì)血管內(nèi)皮細胞的胞漿，部份間質(zhì)細胞有弱著色。 VEGF在 3 種內(nèi)膜中的陽性表達見圖13。VEGF在 EMS異位內(nèi)膜中的表達（）顯著高于在位內(nèi)膜（）和正常內(nèi)膜（），P均 。3 討 論脫落的子宮內(nèi)膜粘附并種植在腹膜或組織器官上依托于足夠血液供給的成立和維持，種植灶子宮內(nèi)膜的快速生長需要大量的新生血管。因此新生血管形成是種植成功的必要條件，也是子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生的關(guān)鍵步驟。血管形成有許多細胞因子和生長因子及酶的參與。迄今為止較為確信的促血管發(fā)生因子中， VEGF被以為是誘導(dǎo)血管生成的最重要、最關(guān)鍵的因子，在血管形成中起中心調(diào)劑作用。VEGF 是一種特異性地作用于血管內(nèi)皮細胞的多功

8、能細胞因子，具有增進微靜脈、小靜脈通透性增加，血管內(nèi)皮細胞割裂、增殖、細胞質(zhì)鈣聚集和誘導(dǎo)新生血管形成等作用。VEGF是由單一基因編碼， 含 8 個外顯子和 7 個內(nèi)含因子。由于VEGF mRNA的選擇性剪切，其結(jié)果產(chǎn)生VEGF12一、 VEGF14五、 VEGF18九、 VEGF20六、 VEGF165等至少 5 種蛋白形式 1 。 VEGF12一、 VEGF145及 VEGF165是分泌型可溶性蛋白，能增進血管內(nèi)皮細胞有絲割裂， 且可增加內(nèi)皮細胞通透性 2 ，VEGF189及 VEGF206是與細胞外基質(zhì)緊密結(jié)合的不溶性蛋白 3 ，僅有增加內(nèi)皮細胞通透性作用。VEGF 可在正常人或動物的很多

9、組織中表達，但一樣水平很低。一些代謝旺盛、血供豐碩的組織如腎小球足突細胞、心肌細胞、前列腺上皮細胞、精子細胞及腎上腺皮質(zhì)細胞等， VEGF的表達常高于其他組織；胚胎組織、胎盤、增生期子宮內(nèi)膜、黃體等，由于生理性血管形成的需要，VEGF的表達水平較高。 在病理條件下，尤其是惡性腫瘤組織中，VEGF往往過量表達。 1993 年 Oosterlynck等4 報導(dǎo)，與正常婦女的腹水比較，內(nèi)異癥患者腹水刺激血管形成的活性明顯增加。1996年McLaren等5報導(dǎo)，在正常婦女及內(nèi)異癥患者的腹水中都有VEGF的存在，但內(nèi)異癥患者腹水中的VEGF含量明顯高于正常對照婦女。Donnez等6 測定了 43 例 E

10、MS患者的在位內(nèi)膜、異位內(nèi)膜和10 例正常婦女的在位內(nèi)膜上腺上皮和間質(zhì)細胞的VEGF水平，結(jié)果顯示EMS患者不管是在位內(nèi)膜仍是異位內(nèi)膜均比正常的在位內(nèi)膜要高。本研究的結(jié)果顯示在 EMS患者的異位內(nèi)膜、 在位內(nèi)膜和正常內(nèi)膜中均有VEGF的表達， VEGF在異位內(nèi)膜的表達顯著高于在位內(nèi)膜和正常子宮內(nèi)膜，提示 VEGF水平的增高使內(nèi)膜血管生長增加， 可能是 EMS種植生長的決定因素。 VEGF的高表達使病灶部位有著更為豐碩的血管生成，為異位內(nèi)膜的種植和存活提供條件，同時異位內(nèi)膜的生長可表達更多的VEGF?！緟⒖嘉墨I】1Tischer E,Mitchell R,Hartman T,et human g

11、ene for endothelial growth protein forms are encodedvascularthroughalternative exon splicingJ.J Biol Chem,1991,266:119472Neufeld G,Cohen T,Gengrinovitch S,et endothelial growth factor(VEGF)and its recepeorsJ.FASEB J,1999,13:93Park J,Keller GA,Ferrara vascular endothelial growth factor isoforms:diffe

12、rentisl depsoition into the subepithelial extracellular matrix and bioactivity of extracellular matrix bound VEGFJ.Mol Biol Cell,1993,4:13174Oosterlyneck Peritoneal fluidDJ,Meuleman C,Sobis from xomen withM,etactivityendometriosisJ.FetilofSteril,1993,59:7785Mclaren J,Prentice A,CharnockJones DS,et endothelialgrowth