醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒培訓(xùn)課件

1、醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒學(xué)習(xí)要求重點(diǎn)掌握：蟲媒病毒的定義及在我國(guó)流行的蟲媒病毒病乙腦病毒和登革病毒流行病學(xué)特征：傳染源、傳播媒介、流行特點(diǎn)乙腦病毒、登革病毒和森林腦炎病毒的致病性與免疫性乙腦病毒和登革病毒的微生物學(xué)檢查法及預(yù)防措施難點(diǎn)： 乙型腦炎病毒和登革病毒的致病與免疫機(jī)制2醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒學(xué)習(xí)要求重點(diǎn)掌握：2醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒蟲媒病毒的重要特性蟲媒病毒通過(guò)吸血的節(jié)肢動(dòng)物叮咬易感的脊椎動(dòng)物而傳播疾病的病毒。 蟲媒病毒能在節(jié)肢動(dòng)物體內(nèi)增殖，并可經(jīng)卵傳代。節(jié)肢動(dòng)物既是病毒的傳播媒介，又是儲(chǔ)存宿主。帶毒的節(jié)肢動(dòng)物通過(guò)叮咬人或自然界的脊椎動(dòng)物而致病，并維持病毒在自然界的循環(huán)。

2、蟲媒病毒病是自然疫源性疾病，也是人畜共患病。蟲媒病毒病具有明顯的地方性和季節(jié)性。3醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒蟲媒病毒的重要特性蟲媒病毒通過(guò)吸血的節(jié)肢動(dòng)物叮咬易感的脊4 在我國(guó)流行的蟲媒病毒及蟲媒病毒病 流行性乙型腦炎病毒 -流行性乙型腦炎登革病毒-登革熱、登革出血熱登革休克綜合征森林腦炎病毒-森林腦炎基孔肯雅病毒-基孔肯雅熱發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒-發(fā)熱伴血小板減少綜合征醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒4 在我國(guó)流行的蟲媒病毒及蟲媒病毒病 流行性乙型腦炎病毒 -乙型腦炎病毒Japanese encephalitis virus, JEV5醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒乙型腦炎病毒Japanese encephal

3、itis 形態(tài)與結(jié)構(gòu)病毒分類： 黃病毒科、黃病毒屬病毒顆粒呈球形，有包膜，直徑3040nm, 核衣殼呈二十面體立體對(duì)稱 一、生物學(xué)性狀 6醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒形態(tài)與結(jié)構(gòu)一、生物學(xué)性狀 6醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒7基因結(jié)構(gòu)與功能病毒核酸: ss+RNA 基因組全長(zhǎng)10976 bp 僅含一個(gè)開放讀碼框（ORF）醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒7基因結(jié)構(gòu)與功能病毒核酸: ss+RNA 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病8C基因編碼衣殼蛋白（capsid protein, C蛋白）C蛋白富含堿性氨基酸在病毒復(fù)制過(guò)程中起重要作用PrM基因編碼M蛋白前體（prM蛋白）膜蛋白（ membrane protein, M蛋白）由prM蛋白加工

4、而來(lái)，存在于成熟的病毒顆粒中 M蛋白與C蛋白和E蛋白緊密結(jié)合，在病毒包裝過(guò) 程中起作用醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒8C基因編碼衣殼蛋白（capsid protein, C蛋白E基因編碼包膜蛋白（envelope protein, E蛋白) E蛋白是鑲嵌在病毒包膜上的糖蛋白 可與細(xì)胞表面受體結(jié)合，決定病毒的細(xì)胞嗜性 含中和抗原表位和型特異性抗原表位 具有血凝素活性，能凝集雛雞、鵝和綿羊的紅細(xì)胞 與其他黃病毒成員有交叉抗原性9醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒E基因編碼包膜蛋白（envelope protein, E蛋NS基因編碼7種非結(jié)構(gòu)蛋白（NS） NS1、NS2a、NS2b、NS3、NS4a、NS4b、NS5NS

5、1抗原性強(qiáng)，其誘生的抗體雖然沒有中和病毒的作用，但具有免疫保護(hù)性。NS3具有蛋白酶、RNA三磷酸酶、解旋酶等活性NS5具有RNA聚合酶、甲基轉(zhuǎn)移酶活性10醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒NS基因編碼7種非結(jié)構(gòu)蛋白（NS）10醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒培養(yǎng)特性能在白紋伊蚊C6/36細(xì)胞、Vero細(xì)胞和BHK21細(xì)胞中增殖引起明顯的細(xì)胞病變 最易感的動(dòng)物是乳鼠 11醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒培養(yǎng)特性11醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒 抵抗力對(duì)脂溶劑敏感不耐熱56 30 min、100 2 min均可滅活對(duì)化學(xué)消毒劑敏感12醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒 抵抗力12醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒二、流行病學(xué)特征傳染源 主要是帶毒的豬、牛、馬、驢、羊、鴨

6、、鵝、雞等家畜、家禽和鳥類豬是最重要的傳染源和中間宿主，特別是幼豬具有高的感染率和高滴度的病毒血癥 病人的病毒血癥短暫，且血中病毒滴度不高，故病人不是主要的傳染源蝙蝠亦可能為乙腦病毒的傳染源和長(zhǎng)期宿主。 13醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒二、流行病學(xué)特征傳染源 13醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒傳播媒介主要傳播媒介是三帶喙庫(kù)蚊感染的蚊子可帶毒越冬并可經(jīng)卵傳代，因此蚊子不僅是傳播媒介又是重要的儲(chǔ)存宿主 病毒通過(guò)蚊子在蚊-豬-蚊等動(dòng)物中不斷循環(huán)，其間帶毒蚊子若叮咬人類，則可引起人類感染。14醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒傳播媒介14醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒流行特征 流行季節(jié)：夏、秋季(與蚊子密度的高峰期一致 )易感人群：10歲以下

7、兒童主要流行地區(qū)：熱帶和亞熱帶國(guó)家和地區(qū)中國(guó)是乙腦的高流行區(qū) 除新疆、青海、西藏外均有流行15醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒流行特征 15醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒三、致病性與免疫性致病過(guò)程病毒先在皮膚毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞和局部淋巴結(jié)增殖，然后進(jìn)入血流，引起第一次病毒血癥；病毒隨血流播散到肝、脾等處的單核巨噬細(xì)胞中大量增殖，再次入血，引起第二次病毒血癥；少數(shù)患者，病毒可突破血腦屏障侵犯中樞神經(jīng)系統(tǒng)，在腦組織神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)增殖，引起腦實(shí)質(zhì)和腦膜炎癥。16醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒三、致病性與免疫性致病過(guò)程16醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒致病機(jī)制血-腦屏障通透性增加：病毒誘導(dǎo)單核巨噬細(xì)胞分泌某些細(xì)胞因子，使血-腦屏障通透性增加，易于侵

8、入中樞神經(jīng)系統(tǒng)細(xì)胞因子釋放增加：病毒感染刺激免疫細(xì)胞釋放TNF-、IL、IFN等炎癥細(xì)胞因子，引起炎癥反應(yīng)和細(xì)胞損傷免疫復(fù)合物介導(dǎo)的免疫損傷病毒感染導(dǎo)致的細(xì)胞凋亡17醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒致病機(jī)制17醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒高熱劇烈頭痛、頻繁嘔吐、頸項(xiàng)強(qiáng)直昏迷中樞性呼吸衰竭腦疝病死率：10%30%后遺癥：5% 20% 表現(xiàn)為癡呆、失語(yǔ)、 癱瘓等臨床特征18醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒高熱臨床特征18醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒19 免疫性乙腦病毒抗原性穩(wěn)定，只有1個(gè)血清型病后免疫力牢固而持久，隱性感染也可獲得牢固的免疫力 體液免疫起主要作用IgM中和抗體：感染后1周產(chǎn)生，2周達(dá)高峰IgG 中和抗體：維持?jǐn)?shù)年血凝抑制

9、抗體：感染后第5天出現(xiàn)，2周達(dá)高峰， 維持1年以上。 特異性細(xì)胞免疫可阻止病毒侵入腦組織醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒19 免疫性乙腦病毒抗原性穩(wěn)定，只有1個(gè)血清型醫(yī)學(xué)微生物20四、微生物檢查病毒的分離培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)或乳鼠腦內(nèi)接種 病毒抗原檢測(cè)：血液或腦脊液中的病毒抗原檢測(cè)血清學(xué)試驗(yàn)：檢測(cè)IgG、IgM或血凝抑制抗體病毒核酸檢測(cè)：Real-time RT-PCR或RT-PCR技術(shù)檢測(cè)乙腦病毒核酸醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒20四、微生物檢查病毒的分離培養(yǎng)：細(xì)胞培養(yǎng)或乳鼠腦內(nèi)接種 醫(yī)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒培訓(xùn)課件 登革病毒是登革熱 的病原體 登革熱是分布最廣、發(fā)病最多的蟲媒病毒病 流行于熱帶和亞熱帶100多個(gè)國(guó)家和

10、地區(qū) 全球25億人口受登革熱的威脅， 每年病例 5000萬(wàn)1億 我國(guó)南方時(shí)有流行登革病毒( Dengue virus)22醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒 登革病毒是登革熱 的病原體 登革病毒( D23形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因組特征與乙腦病毒相似有4個(gè)血清型 DENV-1、DENV-2、DENV-3、DENV-4型間有交叉抗原性，但沒有交叉免疫保護(hù)作用 一、重要的生物學(xué)性狀 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒23形態(tài)結(jié)構(gòu)和基因組特征與乙腦病毒相似 一、重要的生物學(xué)性狀24傳染源-病人、隱性感染者自然儲(chǔ)存宿主-人、靈長(zhǎng)類動(dòng)物傳播媒介-埃及伊蚊、白紋伊蚊易感人群-人群普遍易感 二、流行病學(xué)特征白紋伊蚊埃及伊蚊醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒24

11、傳染源-病人、隱性感染者 二、流行病學(xué)特征白紋伊蚊埃25三、致病性與免疫性臨床類型登革熱（dengue fever, DF） 登革出血熱/登革休克綜合征（ DHF /DSS）（dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome） 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒25三、致病性與免疫性臨床類型醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒26潛伏期約48天，典型的臨床表現(xiàn)為：發(fā)熱、極度疲乏疼痛：頭痛、全身關(guān)節(jié)及肌肉疼痛（100%）皮疹 （70%）淋巴結(jié)腫大自限性疾病，預(yù)后良好登革熱醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒26潛伏期約48天，典型的臨床表現(xiàn)為：登革熱醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲27 登革出血熱/登革休克綜合征（

12、DHF/DSS）明顯出血現(xiàn)象 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒27 登革出血熱/登革休克綜合征（DHF/DSS）明顯出血28登革病毒抗體依賴的增強(qiáng)作用 （ADE） （antibody-dependent enhancement） 醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒28登革病毒抗體依賴的增強(qiáng)作用 （ADE）醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病29DHF/DSS的發(fā)病機(jī)制DSS/DHF的發(fā)病機(jī)制尚未完全清楚目前認(rèn)為與“抗體依賴的增強(qiáng)作用”（ADE）有關(guān)ADE: antibody-dependent enhancement初次感染登革病毒后機(jī)體可產(chǎn)生非中和類IgG抗體，當(dāng)再次感染同型或異型登革病毒時(shí)，病毒與非中和類抗體形成免疫復(fù)合物，通過(guò)單核

13、巨噬細(xì)胞表面的Fc受體，增強(qiáng)病毒對(duì)靶細(xì)胞的吸附和感染作用。醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒29DHF/DSS的發(fā)病機(jī)制DSS/DHF的發(fā)病機(jī)制尚未完全四、微生物學(xué)檢查病毒的分離培養(yǎng)采集早期病人血清接種白紋伊蚊C6/36細(xì)胞 血清學(xué)檢查 用抗體捕獲ELISA法或免疫層析法檢測(cè)病人血清中特異性IgM抗體和IgG抗體 病毒核酸檢測(cè) 用RT-PCR檢測(cè)登革病毒核酸30醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒四、微生物學(xué)檢查病毒的分離培養(yǎng)30醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒 五、防治原則無(wú)預(yù)防登革熱的疫苗無(wú)特效治療藥物防蚊滅蚊是目前預(yù)防登革熱的主要手段 31醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒 五、防治原則無(wú)預(yù)防登革熱的疫苗31醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒復(fù)習(xí)思考題比較乙腦

14、病毒和登革病毒的免疫特點(diǎn)。試述乙腦病毒的致病機(jī)制。試述乙型腦炎病毒的流行與傳播特點(diǎn)及預(yù)防措施。試述登革病毒的傳播特點(diǎn)及防治原則。32醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒復(fù)習(xí)思考題比較乙腦病毒和登革病毒的免疫特點(diǎn)。32醫(yī)學(xué)微生物學(xué)中英文關(guān)鍵詞Arbovirus 蟲媒病毒encephalitis B virus 乙型腦炎病毒Japanese encephalitis virus 日本腦炎病毒Culextritaeniorhymchus 三帶喙庫(kù)蚊Aedesaegypti（Aaegypti） 埃及伊蚊Aedesalbopictus（Aalbopictus） 白紋伊蚊dengue virus 登革病毒dengue f

15、ever, DF 登革熱33醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒中英文關(guān)鍵詞Arbovirus 蟲媒病毒33醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒中英文關(guān)鍵詞dengue hemorrhagic fever/dengue shock syndrome, DHF /DSS登革出血熱/登革休克綜合征antibody-dependent enhancement, ADE 抗體依賴的增強(qiáng)作用forest encephalitis virus 林腦炎病毒severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus，SFTSV 發(fā)熱伴血小板減少綜合征布尼亞病毒34醫(yī)學(xué)微生物學(xué)蟲媒病毒中英文關(guān)鍵詞dengue hemorrhagic fever課外閱讀資料1 Brooks G F, Carroll K C, Butel J S , et al. Jawetz, Melnick, & Adelbergs Medical Microbiology 25th ed. International edition, 2010 2 David M. Knipe, Peter M.Fields V