全國(guó)艾滋病檢測(cè)技術(shù)規(guī)范(2015年修訂版)檢測(cè)策略課件

1、第六章 艾滋病病毒感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)策略疫情監(jiān)測(cè)相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告；臨床診斷相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告；血液篩查相關(guān)的檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告。一、規(guī)范修改背景1. 艾滋病疫情的不斷發(fā)展，感染人群的變化，對(duì)艾滋病監(jiān)測(cè)和檢測(cè)的需求也不斷增加。原有規(guī)范不能滿足目前艾滋病檢測(cè)工作的實(shí)際需求。2.國(guó)家相關(guān)政策的出臺(tái)，擴(kuò)大檢測(cè)，診斷即治療等，要求檢測(cè)提供更多更好的方法。3. 艾滋病檢測(cè)新技術(shù)不斷進(jìn)展。出現(xiàn)了抗原抗體聯(lián)合診斷試劑和核酸檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用等等。4. 國(guó)際上發(fā)達(dá)國(guó)家的艾滋病指南也不斷更新，WHO也出臺(tái)了很多技術(shù)性文件。二、主要修改、增補(bǔ)和完善內(nèi)容 增加了疫情監(jiān)測(cè)的HIV匿名無關(guān)聯(lián)試驗(yàn)流程； 修改HIV抗

2、體篩查流程，增加了可以用原有試劑雙孔雙份復(fù)檢程序，對(duì)復(fù)檢結(jié)果有反應(yīng)的情況，既可以選擇抗體確證，也可選擇核酸診斷； 新增加抗原檢測(cè)流程圖；新增核酸檢測(cè)流程圖； 新增高危人群快速試劑檢測(cè)策略和快速+酶聯(lián)試劑的檢測(cè)策略； 新增血液HIV血清學(xué)篩查試驗(yàn)流程和血液核酸HIV試驗(yàn)流程； 修改了艾滋病感染產(chǎn)婦所生兒童HIV感染早期感染檢測(cè)流程，制備干血斑，而不用EDTA抗凝的全血。1.HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程先用試劑1進(jìn)行初篩試驗(yàn)，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性”，不再進(jìn)行復(fù)檢試驗(yàn)；結(jié)果有反應(yīng)，進(jìn)入復(fù)檢試驗(yàn)。所有初篩有反應(yīng)的樣品，使用試劑2進(jìn)行復(fù)檢，結(jié)果無反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陰性”；結(jié)果有反應(yīng)，報(bào)告“H

3、IV抗體陽性”。HIV感染疫情報(bào)告檢測(cè)流程見圖1 HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程。實(shí)名關(guān)聯(lián)疫情監(jiān)測(cè)，需采取臨床診斷相關(guān)檢測(cè)策略及結(jié)果報(bào)告。試劑-1有反應(yīng)無反應(yīng)試劑-2有反應(yīng)無反應(yīng)報(bào)告HIV抗體陽性報(bào)告HIV抗體陽性圖1 HIV匿名無關(guān)聯(lián)檢測(cè)流程試劑-1有反應(yīng) 無反應(yīng) 試劑1雙份或雙孔檢測(cè)或兩種試劑均有反應(yīng)或 一有反應(yīng)一無反應(yīng) 均無反應(yīng)補(bǔ)充實(shí)驗(yàn)報(bào)告HIV抗體陰性 圖2 使用抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程 3.使用抗原抗體檢測(cè)試劑的檢測(cè)流程抗原抗體檢測(cè)試劑分為兩類，一類是抗原和抗體在一個(gè)反應(yīng)體系內(nèi)，不能區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)結(jié)果；另一類是抗原和抗體分別在不同的反應(yīng)體系內(nèi)，可區(qū)分抗原和抗體檢測(cè)結(jié)果。不區(qū)分抗原抗體的檢

4、測(cè)試劑有反應(yīng)無反應(yīng)抗體檢測(cè)有反應(yīng)無反應(yīng)補(bǔ)充試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或P24抗原試驗(yàn)或2-4周后隨訪報(bào)告HIV抗體陰性P24抗原陰性圖3 使用不區(qū)分抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試劑的檢測(cè)區(qū)分抗原抗體檢測(cè)試劑抗體有反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體有反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原有反應(yīng)抗體無反應(yīng)抗原無反應(yīng)抗體檢測(cè)*有反應(yīng)無反應(yīng)抗體確證試驗(yàn)HIV-1核酸試驗(yàn)或24周后隨訪報(bào)告HIV抗體陰性， HIV P24抗原陰性圖4 區(qū)分抗原抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)流程4.補(bǔ)充試驗(yàn)檢測(cè)策略補(bǔ)充試驗(yàn)分為抗體確證試驗(yàn)和HIV-1核酸試驗(yàn)?？贵w確證試驗(yàn)包括免疫印跡試劑（WB）和條帶/線性免疫試驗(yàn)（RIBA/LIA）， 特定條件下的替代檢測(cè)（三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、

5、三種快速試驗(yàn)或者酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)），免疫層析或免疫滲濾試驗(yàn)。HIV-1核酸試驗(yàn)包括定性和定量試驗(yàn)。免疫印跡試驗(yàn)(WB/RIBA)不確定陰性陽性出現(xiàn)HIV-2指示帶核酸試驗(yàn)或24周后隨訪報(bào)告HIV-1抗體陰性報(bào)告HIV-1抗體陽性根據(jù)情況進(jìn)一步檢測(cè)HIV-2圖5 免疫印跡試驗(yàn)流程抗體確證在特定條件下的替代檢測(cè)三種酶聯(lián)免疫試驗(yàn)、三種快速試驗(yàn)酶聯(lián)免疫加快速試驗(yàn)流程 特定條件： 高流行地區(qū)（大于5%），高危人群（男男同性戀人群，吸毒人群），三種試劑經(jīng)過使用地區(qū)中心實(shí)驗(yàn)室評(píng)價(jià)。三種快速試劑檢測(cè)策略是指應(yīng)用3種快速試劑的檢測(cè)策略。三種快速試劑可以是血液檢測(cè)試劑，也可以是口腔黏膜滲出液檢測(cè)試劑；三種快速試

6、劑至少應(yīng)檢測(cè)兩種不同的生物樣本，如血液或口腔黏膜滲出液或尿液，且至少有一種血液快速試劑?；蚴窍薅ㄈN快速試劑均為血液快速試劑，且至少應(yīng)包含二種不同原理的試劑?？焖僭噭?無反應(yīng)報(bào)告陰性，有反應(yīng)用試劑2和試劑3復(fù)檢，若均有反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陽性”；若均無反應(yīng)或一種有反應(yīng)，需進(jìn)一步做抗體確證或核酸試驗(yàn)。檢測(cè)流程見圖7?？焖僭噭?有反應(yīng) 無反應(yīng)快速試劑2+快速試劑3均有反應(yīng)一有反應(yīng)，均無反應(yīng)報(bào)告HIV抗體陽性報(bào)告HIV抗體陰性補(bǔ)充試驗(yàn)圖7 三種快速試劑試驗(yàn)流程快速+酶聯(lián)試劑的檢測(cè)策略是指使用一種快速兩種酶聯(lián)免疫試劑，或兩種快速一種酶聯(lián)免疫試劑的檢測(cè)策略。兩種酶聯(lián)免疫試劑應(yīng)針對(duì)不同樣本，如血液酶聯(lián)+

7、尿液酶聯(lián)試劑檢測(cè)；快速試劑應(yīng)至少有一種為血液快速試劑。試劑1 無反應(yīng)報(bào)告陰性，有反應(yīng)用試劑2和試劑3復(fù)檢，若均有反應(yīng)，報(bào)告“HIV抗體陽性”；若均無反應(yīng)或者一種有反應(yīng)，需進(jìn)一步做抗體確證或核酸試驗(yàn)。檢測(cè)流程見圖7。6.HIV核酸檢測(cè)流程1.對(duì)HIV抗體復(fù)檢試驗(yàn)有反應(yīng)樣品（見圖2），進(jìn)行HIV-1核酸試驗(yàn)。2.抗體確證試驗(yàn)不確定或抗體陰性疑似急性期感染的樣品，可進(jìn)行兩次HIV-1核酸試驗(yàn) 。3.定性檢測(cè)結(jié)果有反應(yīng)，報(bào)告“HIV-1核酸陽性”；無反應(yīng)，報(bào)告“HIV核酸陰性”。定量檢測(cè)結(jié)果低于檢測(cè)限，報(bào)告低于檢測(cè)限；檢測(cè)結(jié)果5000CPs/ml，報(bào)告檢測(cè)值；檢測(cè)結(jié)果5000CPs/ml，建議重新采樣

8、檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果報(bào)告檢測(cè)值。臨床醫(yī)生可結(jié)合臨床及流行病史、CD4+T淋巴細(xì)胞檢測(cè)值或HIV-1抗體隨訪檢測(cè)結(jié)果等進(jìn)行診斷或排除診斷。4.對(duì)于核酸檢測(cè)無反應(yīng)的建議進(jìn)行抗體確證試驗(yàn)。HIV-1核酸檢測(cè)HIV-1核酸定性檢測(cè)HIV-1核酸定量試驗(yàn)有反應(yīng)報(bào)告HIV-1核酸陽性無反應(yīng)報(bào)告HIV-1核酸陰性報(bào)告低于檢測(cè)限5000cp/ml,報(bào)告檢測(cè)值;5000cp/ml重新采樣檢測(cè)高于檢測(cè)限低于檢測(cè)限圖-1核酸試驗(yàn)流程7.血液篩查相關(guān)的檢測(cè)策略1.血液抗原抗體篩查試驗(yàn)流程2.血液HIV核酸試驗(yàn)流程HIV 1/2抗體或抗原抗體聯(lián)合檢測(cè)試驗(yàn)無反應(yīng)有反應(yīng)方案1：相同樣本相同試驗(yàn)雙孔復(fù)試方案2復(fù)試結(jié)果無反應(yīng)-，-復(fù)試結(jié)果有反應(yīng)-，+；+，-反應(yīng)性報(bào)告血液檢測(cè)不合格。如需進(jìn)一步檢測(cè)，參照臨床診斷檢測(cè)策略陰性報(bào)告血液檢測(cè)合格圖9 血液抗原抗體篩查試驗(yàn)流程8.HIV感染母親兒童抗體檢測(cè)流程 兒童第一次采血時(shí)已滿12個(gè)月，則應(yīng)首先按照“艾滋病.感染產(chǎn)婦所生兒童HIV抗體檢測(cè)流程”（ 圖12）進(jìn)行HIV抗體檢測(cè)。 若兩種不同原理或廠家生產(chǎn)的HIV抗體檢測(cè)試劑檢測(cè)結(jié)果均為陰性，則排除兒童感染； 若HIV抗