診斷試劑性能指標(biāo)評估課件

1、體外診斷試劑分析性能評估指導(dǎo)原則2013.04.25目錄1.檢測限2.線性范圍3.可報(bào)告范圍4.準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）5.準(zhǔn)確度（方法學(xué)比對）6.精密度7.干擾實(shí)驗(yàn)8.穩(wěn)定性9.參考值（參考區(qū)間）基本要求實(shí)驗(yàn)人員儀器設(shè)備試劑檢測限（limit of detection）1、定義：檢測限是指檢測方法可檢測出的最低被測量濃度，也稱檢測低限或最小檢出濃度，有時(shí)也稱分析靈敏度。2、檢測方法：一次運(yùn)行中將空白樣本重復(fù)測定20次。3、空白樣本制備：空白樣本應(yīng)不含被測物，但其基質(zhì)應(yīng)與待測常規(guī)樣本相同。若空白樣本難以得到，可采用5%牛血清或人血清白蛋白溶液，或根據(jù)測定項(xiàng)目選用相應(yīng)基質(zhì)樣本，但應(yīng)將基質(zhì)效應(yīng)減至最小。

2、4、數(shù)據(jù)處理記錄：記錄初始響應(yīng)值，如吸光度值等。 統(tǒng)計(jì)：計(jì)算20次結(jié)果的均值X與標(biāo)準(zhǔn)差SD。5、結(jié)果報(bào)告 以空白均值加兩倍標(biāo)準(zhǔn)差報(bào)告方法的檢測限。（即X+2SD）線性范圍線性：測量結(jié)果與樣品中被測量的值直接成比例的能力。樣本要求樣本基質(zhì)應(yīng)與臨床實(shí)驗(yàn)樣本相似。樣本不得含有干擾物質(zhì)：溶血、脂血、黃疸等。實(shí)驗(yàn)過程建立線性范圍：在預(yù)期線性范圍內(nèi)選擇9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次。驗(yàn)證線性范圍：測定4-6個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測定3-4次?？蓤?bào)告范圍（reportable range）可報(bào)告范圍包括可報(bào)告低限和可報(bào)告高限樣本要求低值樣本：接近方法線性范圍低限濃度水平的樣本，一般為

3、5個(gè)濃度水平，濃度水平間隔應(yīng)小于線性范圍低限的10%。高值樣本：含有被測物的高值樣本，必要時(shí)可加入被分析物純品，并計(jì)算出理論值。將該高值樣本稀釋使其接近于線性范圍的上1/3區(qū)域內(nèi)，并記錄稀釋倍數(shù)。至少選擇3個(gè)高濃度樣本?？蓤?bào)告范圍（reportable range）實(shí)驗(yàn)過程在一次運(yùn)行中將低值樣本重復(fù)測定10次，高值稀釋樣本重復(fù)測定3次。數(shù)據(jù)處理數(shù)據(jù)記錄數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)：分別計(jì)算AVE、SD、CV值。對于可報(bào)告高限還應(yīng)計(jì)算乘以稀釋倍數(shù)后的還原濃度和相對偏差。可報(bào)告范圍（高限）數(shù)據(jù)記錄表濃度1濃度2濃度3123AVE稀釋倍數(shù)還原濃度理論濃度相對偏差（%）可報(bào)告范圍（reportable range）結(jié)果報(bào)

4、告可報(bào)告范圍低限：以方法性能標(biāo)示的CV值為可接受界值，由數(shù)據(jù)中選取CV值等于或小于可接受界值的最低濃度水平作為可報(bào)告低限。可報(bào)告范圍高限：選取還原濃度與理論濃度的偏差（%）等于或小于方法標(biāo)示的界值時(shí)的最大稀釋倍數(shù)為方法推薦的最大稀釋倍數(shù)，方法線性范圍的上限與最大稀釋倍數(shù)的乘積為該方法可報(bào)告范圍的高限。準(zhǔn)確度（回收實(shí)驗(yàn)）準(zhǔn)確度：一個(gè)測量值與可接受的參考值之間的一致程度。樣本制備1、選擇合適濃度的常規(guī)檢測樣本，分為體積相同的3-4份。2、在其中2-3份樣本中加入不同量的待測物標(biāo)準(zhǔn)，制成2-3個(gè)不同加入濃度的回收樣本，計(jì)算加入的待測物的濃度。3、在另一份樣本中加入同樣量的無被測物的溶劑，制成基礎(chǔ)樣本

5、。注意事項(xiàng)1、加入體積：加入的標(biāo)準(zhǔn)液體積一般在樣本體積的10%以內(nèi)2、加入待測物的濃度：保證總濃度在方法分析測量范圍內(nèi)。3、標(biāo)準(zhǔn)物濃度：因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)物溶液加入體積不到10%，為保證得到不同濃度的回收樣本，標(biāo)準(zhǔn)物的濃度應(yīng)該足夠高。范例-某法測定血清葡萄糖回收率1、樣本制備基礎(chǔ)樣本：血清1ml（濃度5.5mmol/L）+蒸餾水0.1ml回收樣本1：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃度22mmol/L）回收樣本2：血清1ml+0.1ml葡糖糖水溶液（濃:55mmol/L）2、數(shù)據(jù)結(jié)果3、計(jì)算平均回收率：平均回收率=（103+99）/2100%=101%4、計(jì)算比例系統(tǒng)誤差：比例系統(tǒng)誤差=/100%-

6、101%/=1%測定濃度mmol/L加入濃度mmol/L回收濃度mmol/L回收率%基礎(chǔ)樣本5.00回收樣本17.062.002.06103回收樣本29.955.004.9599精密度批內(nèi)精密度：嚴(yán)格的相似條件下，所得到的最佳精密度。批間精密度：指在同一實(shí)驗(yàn)室，由同一（組）操作員在同一儀器上，使用同一方法和同種、同一批號試劑，在一段時(shí)間內(nèi)（一般為一個(gè)月或20個(gè)工作日）對同一測試樣品（常用質(zhì)控品）測量結(jié)果的精密度。精密度只評估批內(nèi)精密度 1、試劑和標(biāo)準(zhǔn)品：應(yīng)使用同一種類、同一批號的試劑和校準(zhǔn)物。2、方法：在一次檢測中，對同一樣本至少進(jìn)行20次重復(fù)測定。3、數(shù)據(jù)處理：記錄所有數(shù)據(jù)，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差及變異系數(shù)。4、離群值：結(jié)果與總均值的差值超過4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為該結(jié)果為離群值。一次評估只能有一個(gè)離群值，當(dāng)離群值超過一個(gè)時(shí)，應(yīng)懷疑該方法的穩(wěn)定性及操作者的熟練程度。精密度同時(shí)評價(jià)批內(nèi)和批間精密度依據(jù)樣品的情況選擇實(shí)驗(yàn)方法1、每天做2個(gè)批次的測試，每批對同一樣品作雙份測量，工作20天，共80 個(gè)測試結(jié)果。2、每天做1個(gè)批次的測試，每批對同一樣品作4次測量，工作20天，共80 個(gè)測試結(jié)果。3、每天做2個(gè)批次的測試，每批對同一樣品作8次測量，工作5天，共80 個(gè)測試結(jié)果。穩(wěn)定性（sta