蛋白質免疫印跡技術及常見問題分析

1、蛋白質免疫印跡技術及常見問題分析11、獲得的成功越大，就越令人高興。野心是使人勤奮的原因，節(jié)制使人枯萎。12、不問收獲，只問耕耘。如同種樹，先有根莖，再有枝葉，爾后花實，好好勞動，不要想太多，那樣只會使人膽孝懶惰，因為不實踐，甚至不接觸社會，難道你是野人。(名言網)13、不怕，不悔(雖然只有四個字，但?？闯Ｐ?。14、我在心里默默地為每一個人祝福。我愛自己，我用清潔與節(jié)制來珍惜我的身體，我用智慧和知識充實我的頭腦。15、這世上的一切都借希望而完成。農夫不會播下一粒玉米，如果他不曾希望它長成種籽；單身漢不會娶妻，如果他不曾希望有小孩；商人或手藝人不會工作，如果他不曾希望因此而有收益。-馬釘路德。蛋

2、白質免疫印跡技術及常見問題分析蛋白質免疫印跡技術及常見問題分析11、獲得的成功越大，就越令人高興。野心是使人勤奮的原因，節(jié)制使人枯萎。12、不問收獲，只問耕耘。如同種樹，先有根莖，再有枝葉，爾后花實，好好勞動，不要想太多，那樣只會使人膽孝懶惰，因為不實踐，甚至不接觸社會，難道你是野人。(名言網)13、不怕，不悔(雖然只有四個字，但?？闯Ｐ?。14、我在心里默默地為每一個人祝福。我愛自己，我用清潔與節(jié)制來珍惜我的身體，我用智慧和知識充實我的頭腦。15、這世上的一切都借希望而完成。農夫不會播下一粒玉米，如果他不曾希望它長成種籽；單身漢不會娶妻，如果他不曾希望有小孩；商人或手藝人不會工作，如果他不曾希

3、望因此而有收益。-馬釘路德。蛋白質免疫印跡技術及常見問題分析張紹進stean allafa Western Blot簡介a Western Blot一般流程a Western Blot常見問題分析音樂欣賞，顧名思義，是欣賞者通過聽覺對音樂進行聆聽，并從中獲得音樂美的享受、精神的愉悅和理性的滿足的活動。音樂欣賞是一種最直接、最具體的審美教育活動。它以一定的音樂為審美對象，以參與欣賞活動的人為審美主體，形成一種特殊的審美觀。通過這種對音樂的聆聽，實現(xiàn)對音樂美的感受和鑒賞。從音樂實踐的總體來看，音樂欣賞的存在不是可有可無的。正如美國音樂學家默塞爾所說：“音樂欣賞在一定意義上是音樂活動的基本形式，是作

4、曲家和演奏家工作的出發(fā)點和歸宿?！?它與其他的藝術形式有著本質的區(qū)別，音樂是以聲音來表達內心情感的藝術，人世間的喜怒哀樂都可以找到相應音樂來表達。一切音樂都可以給人聽覺上的愉悅感。音樂是最富于情感的藝術。但音樂的情感不是任何人都能準確、深刻感受到的，更不是任何人都能恰當?shù)乇憩F(xiàn)出音樂情感的。這主要是因為音樂的情感不單是人的本能生理現(xiàn)象，而是一種高級的、社會性的美感。初中音樂欣賞課是一門新的課題，在擔任初中音樂教學的幾年中，我一直在探索適合初中音樂課的上課方法，我個人認為音樂欣賞在音樂教學中有著舉足輕重的作用。通過欣賞課不僅使學生學到多方面的知識，更能獲得精神上的享受，提高審美情趣，同時也培養(yǎng)學生

5、的創(chuàng)新精神和實踐能力。所以，音樂欣賞是欣賞者對音樂作品的審美活動，也屬于一種創(chuàng)造性的精神活動。隨著社會的發(fā)展和教育改革的不斷深入，對于祖國下一代的美育教育日趨倍受人們的關注。新課程改革標準指出“音樂教育以審美為核心，主要作用于人的情感世界?！比绻麑W生缺乏最起碼的體驗感受音樂美的音樂欣賞能力，就談不上產生情感共鳴，更談不上凈化心靈，陶冶情操了。因此，在教學中我們一定要重視音樂欣賞課并上好欣賞課。我們知道,創(chuàng)造性是一種新穎、獨特的思維方式的體現(xiàn)，音樂欣賞教學由于以音樂作品為媒介，音樂作品的不確定性給教學帶來很大的藝術空間。因此，音樂欣賞課創(chuàng)造性教學不是創(chuàng)造前人沒發(fā)現(xiàn)的知識，而是老師對學生有目的地引

6、導，使學生創(chuàng)造性地聽，創(chuàng)造性地想象和創(chuàng)造性地活動，把個性化的東西以及自己的生活經驗和感受通過語言藝術或非語言藝術表現(xiàn)出來，這一表現(xiàn)的過程，就是創(chuàng)造性的體現(xiàn)。欣賞是聽覺，感知和聯(lián)想相結合的特殊認識過程。在聽音樂時，往往使我們想到聽覺以外的事物。在傳統(tǒng)教學中，教師常常把作品背景、內容、特點、思想等直接傳授給學生，或者只是從這幾個方面簡單地進行介紹，然后欣賞；由于學生經驗不足和音樂的“不確定性”，創(chuàng)造性教學就應該從多方面，多角度挖掘作品，從深度、廣度掌握作品的實質，使學生能聽，會聽、創(chuàng)造性地聽。在欣賞民族樂器“葫蘆絲”演奏的月光下的鳳尾竹時，我是這樣進行的，先介紹云南的自然風光及民俗風情文化(從網上

7、下載圖片輔助進行)；再介紹民族樂器“葫蘆絲”，并且試奏一下主題音樂；最后引導學生欣賞、分析、體驗，這就體現(xiàn)了音樂與人文、地理相結合，豐富了學生的文化知識，拓寬了學生的視野。音樂還可以與舞蹈、美術、文學等許多學科有機的結合，只要我們平時多觀察、思考，不僅我們的學生學的輕松，我們自己也教的輕松，而且會取得你意想不到的效果。再如，在教黃河大合唱中的“黃水瑤”這部分時我是這樣進行的，首先欣賞作品，然后適當引導學生各抒己見，談自己的感受。(第一樂段描繪黃河兩岸美麗風光?，敘述人民過著和平而寧靜的日子；第二樂段揭露了日本帝國主義者侵略中國的罪行，敘述兩岸人民背迫背井離鄉(xiāng)，四處逃亡的悲慘生活；第三樂段是第一

8、樂段的再現(xiàn)，它發(fā)出令人悲傷的感嘆。即黃河依然如故，黃河水奔流不止，然而物在人去，天各一方，情緒十分凄涼。)最后我就啟發(fā)學生讓學生根據自己的愛好，特長把黃水謠這部分用自己最喜歡的方式進行創(chuàng)作表現(xiàn)，結果有的采用歌唱，有的三兩個一組創(chuàng)作音樂小品，有的拿起手中的筆進行素描，有的采用的即興演講整個教室熱鬧非凡，雖然水平不高，但他們根據自己的愛好發(fā)揮了想象，并把自己所感悟到的東西用自己的方式表現(xiàn)出來了，這種全身心的投入，正是我們所要達到的目的。如果沒有先前的欣賞，那就無法做到這一點了。當然，對世界影響很大的音樂家的生平進行簡介和對他作品的欣賞對學生的興趣發(fā)展也相當重要。在給七年級每一個班級上第一堂音樂課的

9、時候，我都要給他們介紹享有全球華人第一男中音美譽的世界著名歌唱家廖昌永的不平凡的人生簡歷和從藝道路，并欣賞他唱歌的美妙聲音，來激勵大家的學習音樂的積極性。通過一系列的實踐，我發(fā)現(xiàn)了音樂欣賞對音樂教學有一種推波助瀾的作用，所以，我在上音樂課的時候就把欣賞部分設計的更加完美、生動、形象一些，上課效果也取得了一定成效，學生也獲得了不少知識，也有了學習音樂的濃厚興趣。如果取消了音樂欣賞教育，不僅談不上培育音樂鑒賞力，而且連音樂的審美價值也無從實現(xiàn)。鑒于音樂欣賞具有突出的審美教育價值，因此在普通中學音樂欣賞課教學占有十分重要的位置。為了更好地適應新課程改革發(fā)展的要求，將素質教育落到實處，推動德、智、體、

10、美育全面發(fā)展，我將會不斷地在教學實踐當中總結出更多、更好、更有益音樂課堂教學的方法和措施。生動有趣的生活為教育提供了豐富的教學素材，幫助學生尋找生活的真諦，引導學生領略知識的魅力。小學品德與社會教學更是如此，其對學生“三觀”的樹立具有舉足輕重的作用。因此，在小學品德與社會教學中，教師要引導學生熱愛生活，在實際生活中掌握品德與社會知識，使學生能將所學知識運用于實際生活，全面提升自己的能力。 一、根據教學內容，引導學生發(fā)現(xiàn)生活 品德與社會教學的目標是讓學生用心體會、品味生活中的酸甜苦辣，享受生活的幸福美好，從而豐富自己的內心世界，充實自己的情感生活，讓心溫暖起來、細膩起來。傳統(tǒng)的品德與社會課堂只注

11、重知識的教授，忽視情感的滋潤，無法激發(fā)學生的興趣，調動學生的學習積極性。因此，在小學品德與社會教學中，教師要將課堂與生活結合在一起，擴大學生的知識面，讓學生的情感變得更加豐富。 現(xiàn)在的孩子大多是獨生子女，備受寵愛，有人評價他們是最沒有責任感的一代。教師可借助家里的煩人事一課培養(yǎng)學生的責任感，讓他們在生活中觀察父母的生活，懂得家里每個人的付出，學會體諒家人，自己的事情自己做，用自己的實際行動回報家人的付出，減輕家人的壓力。教師的引導，調動了學生的學習主動性，使學生了解生活、接觸社會，為學生未來的發(fā)展奠定基?A。 在小學品德與社會教學中，教師要將教學內容與學生的實際生活結合起來，讓學生深入生活、體

12、驗生活，豐富自己的思想。 二、結合教學目標，引導學生走進生活 小學生的世界是天真的、精彩的，他們的生活難免會有與課本知識矛盾的問題，令他們困惑，如果教師不能幫學生解決這些問題，教育就失去了意義。在小學品德與社會教學中，教師不能只做知識的傳播者，而要走進學生的世界，傾聽學生的心聲，了解學生的困惑，將學生的注意力引到課本之外，讓他們走進實際生活，在生活中學會做人，形成良好的道德品質。 例如，在教學請到我的家鄉(xiāng)來一課的時候，教師為學生播放一段視頻，并提出相應的問題：“視頻里介紹的是什么內容？歌曲里唱的又是什么？你還能想到哪些事物？”學生看得很仔細，而且越來越興奮，因為他們很快發(fā)現(xiàn)視頻里介紹的就是自己

13、生活的地方，優(yōu)美的風景、豐富的特產，讓他們倍感親切。學生爭先恐后地回答老師的問題，還補充了很多關于家鄉(xiāng)的信息。學生的熱情在家鄉(xiāng)的風光中被點燃，很快便能夠說出自己的體會，激發(fā)自己對家鄉(xiāng)的熱愛之情。 無論教師的講解多么細致和生動，學生總有厭煩的時候，甚至對品德與社會課堂產生反感。因此，教師要引導學生走進生活，讓學生產生愉悅的感覺，提高課堂教學效率。 三、運用所學知識，引導學生感受生活 要想取得好的教學效果，僅僅靠四十分鐘的課堂時間是不夠的，尤其是品德與社會學科。這門學科的教學目的是培養(yǎng)學生良好的道德品質，這是一個長期的過程。因此，在小學品德與社會教學中，教師要拓展教學陣地，實現(xiàn)知識的延伸，引導學生

14、在廣闊的社會生活中領悟知識的價值，使學生學有所得。 例如，在教學我的勞動感受一課的時候，教師為學生布置相應的任務主動參加勞動，親身體驗勞動的艱辛與樂趣。第二天，教師對學生進行調查，讓學生交流勞動的感受。有的學生釘了扣子，有的學生擦了地板，還有的學生剝了花生不管他們做了什么，都有一個共同的感受，那就是勞動太辛苦啦！教師趁機教育學生：“同學們，你們只做了一次就覺得累，而我們的親人每天都要勞動，他們更累，但他們任勞任怨，所以我們要珍惜他們的勞動成果！”學生感觸很深，紛紛表示贊同，這樣教學實現(xiàn)了知識的遷移。 在生活中驗證品德與社會知識，是讓學生獲得真知的有效途徑。因此，教師要引導學生將課上所學知識與現(xiàn)

15、實生活結合起來，引導學生向更高的層次發(fā)展。 品德與社會學科的社會性極強，它的學科性質決定了它的教學不能僅局限于課堂，而要植根于現(xiàn)實生活。所以，在小學品德與社會教學中，教師要密切關注學生的生活實際，打造精彩的生活化課堂，讓品德與社會課堂更接地氣。 蛋白質免疫印跡技術及常見問題分析張紹進2.stean allafa Western Blot簡介a Western Blot一般流程a Western Blot常見問題分析3.stean allafWestern blot簡介:口印跡法( blotting)是指將樣品轉移到固相載體上,而后利用相應的探測反應來檢測樣品的一種方法1975年, Southe

16、rn建立了將DNA轉移到硝酸纖維素膜(NC膜)上,并利用DNA-RNA雜交檢測特定的DNA片段的方法,稱為 Southern印跡法。而后人們用類似的方法,對RNA和蛋白質進行印跡分析對RNA的印跡分析稱為 Northern印跡法,對單向電泳后的蛋白質分子的印跡分析稱為 Western印跡法,對雙向電泳后蛋白質分子的印跡分析稱為 Easterr印跡法4.stean allafWestern blot基本原理pirateProductsss8EarTery CSecondary antibodBLocking agentenzymeProteinarete5.stean allafWestern

17、blot優(yōu)點口高分辨率的電泳技術口特異敏感的抗原-抗體反應1-5ng中等大小的靶蛋白6.stean allafWestern Blot應用口目的蛋白的表達特性分析口目的蛋白與其乞蛋白的互作口目的蛋白的組織定位口目的蛋白的表達量分析7.stean allafProtein blot onWestern Blot流程蛋白樣品的制備SDS轉膜封閉Detect Antibody一抗雜交二抗雜交底物顯色of Interest8.stean allaf蛋白樣品的提取通過有機溶劑或水溶法制備總蛋白水溶液提取法針對水、稀鹽、稀酸或堿溶液中的蛋白質。稀鹽和緩沖系統(tǒng)的水溶液對蛋白質穩(wěn)定性好、溶解度大、是提取蛋白質

18、最常用的溶劑。有機溶劑提取法對于分子中非極性側鏈較多的蛋白質可用有機溶劑提取,包括乙醇、丙酮和丁醇等。通過層析或電洗脫法制備目的蛋白9.stean allaf蛋白樣品的定量目前常用比色法測定樣品蛋白的含量: Bradford法(考馬斯亮藍法)、 Lowry法( Folin-酚試劑法)、BCA法等。但各有優(yōu)缺點,大家可以根據具體情況選取。按相應蛋白質定量試劑盒操作說明操作,測定樣品濃度。蛋白質濃度測定的各種方法匯總:bbs.bbioo/thread-23639-1-1.html10.stean allaf蛋白樣品的變性口2 SDS上樣緩沖液100 mM Tris-HCI(pH6.8)1M Tris-HCl(pH6.8)10 ml200 mM DTT1M DTT20 ml4%SDSSDS4 g0.2%溴酚蘭20%甘油甘油溴酚藍02gddH2O總體積100m口DTT可臨用前以1:4比例混合加入,亦可全部配好分裝,-20凍存口按1:1比例與蛋白質樣品混合,95100加熱515min,冰上冷卻后再上樣,上樣量一般為20-25p,總蛋白量2050go11.12.