任務(wù)一水中菌落總數(shù)的測定課件

1、 綜合實(shí)訓(xùn)三 水中菌落總數(shù)及大腸菌群數(shù)的測定任務(wù)一 水中菌落總數(shù)的測定 綜合實(shí)訓(xùn)三 水中菌落總數(shù)及大腸菌群數(shù)的測定任務(wù)一水中菌落總數(shù)的測定檢驗(yàn)依據(jù)：GB/T5750.12-2006方法：平皿計(jì)數(shù)法水中菌落總數(shù)的測定檢驗(yàn)依據(jù)：GB/T5750.12-2006菌落總數(shù)（colony forming unit)菌落總數(shù)（cfu)水樣經(jīng)過處理，在一定條件下培養(yǎng)后,所得1mL水樣中細(xì)菌菌落數(shù)量。細(xì)菌總數(shù)一定數(shù)量水樣經(jīng)過處理，在顯微鏡下對細(xì)菌進(jìn)行直接計(jì)數(shù)。 菌落總數(shù)（colony forming unit)菌落總數(shù)（實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)掌握生活飲用水菌落總數(shù)的測定方法掌握水源水菌落總數(shù)的測定方法判定水被細(xì)菌污染的程度

2、和水的衛(wèi)生質(zhì)量實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)掌握生活飲用水菌落總數(shù)的測定方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1培養(yǎng)基制備2水樣稀釋與接種3結(jié)果分析與報(bào)告實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1培養(yǎng)基制備2水樣稀釋與接種3結(jié)果分析與報(bào)告實(shí)驗(yàn)器材水樣1、4號自來水2、5號水源水（養(yǎng)殖場）3、6號桶裝水培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基實(shí)驗(yàn)器材水樣實(shí)驗(yàn)器材設(shè)備、器材無菌工作臺(tái)、酒精燈、滅菌吸管、滅菌試管、稀釋液、滅菌平皿、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌器、菌落計(jì)數(shù)器、天平、電爐等實(shí)驗(yàn)器材檢驗(yàn)程序生活飲用水水源水傾注培養(yǎng)基培養(yǎng)接種平皿稀釋菌落計(jì)數(shù)檢驗(yàn)程序生活飲用水水源水傾注培養(yǎng)基培養(yǎng)接種平皿稀釋菌落計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)操作生活飲用水用滅菌吸管吸取1mL充分混勻的水樣，注入滅菌平皿中水源水吸取1ml充分混勻的

3、水樣，注入盛有9ml滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成1 : 10稀釋液吸取1 : 10的稀釋液1ml注入盛有9mL滅菌生理鹽水的試管中，混勻制成1 ：100稀釋液實(shí)驗(yàn)操作生活飲用水實(shí)驗(yàn)操作按同法依次稀釋成1: 1000 , 1: 10000稀釋液等備用根據(jù)對水樣污染情況的估計(jì)，選擇3個(gè)適宜稀釋度,分別作10倍遞增稀釋的同時(shí)，即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿中實(shí)驗(yàn)操作按同法依次稀釋成1: 1000 , 1: 100001ml1ml1ml1:1001:101:10001ml1ml1ml加入46營養(yǎng)瓊脂1520ml水樣稀釋劑1ml1ml1ml1ml1:1001:101:10001ml1m

4、l每遞增稀釋一次，必須更換一支1mL滅菌吸管每個(gè)稀釋度制作2個(gè)平皿同時(shí)做空白試驗(yàn)每遞增稀釋一次，必須更換一支1mL滅菌吸管實(shí)驗(yàn)操作傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基溫度：46左右用量：15mL20mL培養(yǎng)溫度：36士1時(shí)間：48士2h水樣與培養(yǎng)基混勻后實(shí)驗(yàn)操作傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基水樣與培養(yǎng)基混勻后48小時(shí)后任務(wù)一水中菌落總數(shù)的測定課件平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿 一個(gè)水樣所有平皿平皿菌落平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿 一個(gè)水樣所有平皿平皿菌平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿一個(gè)水樣所有平皿平皿菌落平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿一個(gè)水樣所有平皿平皿菌落平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿一個(gè)水樣所有平

5、皿平皿菌落平皿菌落生長情況平皿菌落生長情況同一稀釋度兩個(gè)平皿一個(gè)水樣所有平皿平皿菌落平菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法記下各平板的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)選擇平均菌落數(shù)在30300之間者進(jìn)行計(jì)算菌落計(jì)數(shù)及報(bào)告方法記下各平板的菌落數(shù)后，求出同一稀釋度兩個(gè)平不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范圍時(shí)，則將該菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告（見表中實(shí)例1）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式 （CFU/mL）10-110-210-3113651642016 40016 000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只有一個(gè)稀釋度的平均菌落數(shù)符合此范不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法

6、若有兩個(gè)稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在30300之間，則視二者之比值來決定（見表中實(shí)例2、3、4）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式 （CFU/mL）10-110-210-322760295661.63775038 00032890271602.22710027 0004 150 308 2 1500 1500不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法若有兩個(gè)稀釋度，其生長的菌落數(shù)均在不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于300，則應(yīng)按稀釋度最高的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表中實(shí)例5）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式

7、（CFU/mL）10-110-210-35多不可計(jì)1650513513000510 000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均大于3不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只有若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于30，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表中實(shí)例6）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式 （CFU/mL）10-110-210-3627 115270270不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法只有若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均小于不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30300之間，則應(yīng)以最接近30或300的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)報(bào)告之（見表中實(shí)

8、例7）實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式 （CFU/mL）10-110-210-37多不可計(jì)305123050031 000不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法若所有稀釋度的平均菌落數(shù)均不在30不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法若所有稀釋度的平板上均無菌落生長，則以未檢出報(bào)告之不要用“多不可計(jì)”報(bào)告不同稀釋度的選擇及報(bào)告方法若所有稀釋度的平板上均無菌落生長，菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)按實(shí)有數(shù)字，以整數(shù)報(bào)告菌落數(shù)大于100時(shí)第3位數(shù)“四舍五入”，取前2位數(shù)字，后面用0代替也可用10的指數(shù)來表示 見表中“報(bào)告方式”欄菌落計(jì)數(shù)的報(bào)告菌落數(shù)在100以內(nèi)時(shí)實(shí)例不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋

9、度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)（CFU/mL）報(bào)告方式 （CFU/mL）10-110-210-31136516420-16 40016 000或1.610422760295661.63775038 000或3.810432890271602.22710027 000或2.71044 150 308 2 1500 1500或1.51035多不可計(jì)1650513-513000510 000或5.1105627 115- 2702707多不可計(jì)30512-3050031 000或3.1104不同稀釋液的平均菌落數(shù)兩個(gè)稀釋度菌落數(shù)之比菌落總數(shù)報(bào)告方式 注意事項(xiàng) 1.無菌操作。 2.進(jìn)行稀釋時(shí),吸管口不得與下一個(gè)

10、稀釋液接觸。 3.從開始稀釋到傾注最后一個(gè)平皿所用時(shí)間不宜超過15min。注意事項(xiàng) 4.稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)逆反現(xiàn)象，不可作為水樣計(jì)數(shù)報(bào)告的依據(jù)。考慮水中含抑菌物質(zhì) 5.應(yīng)提前作好稀釋用試管和各稀釋度培養(yǎng)皿的標(biāo)記。 6.若空白對照上有菌落生長，則此次檢測結(jié)果無效。 4.稀釋倍數(shù)愈高菌落數(shù)愈少，稀釋倍數(shù)愈低菌落數(shù)愈多。如出現(xiàn)習(xí)題作業(yè)1.平皿計(jì)數(shù)法(GB/T5750.12-2006)測定的細(xì)菌數(shù)量是樣品中的實(shí)際菌數(shù)嗎？為什么？2.某樣品菌落總數(shù)測定時(shí)，所有稀釋度平板上都無菌落生長，試分析出現(xiàn)此結(jié)果的原因有哪些。 習(xí)題作業(yè)1.平皿計(jì)數(shù)法(GB/T5750.12-2006)測習(xí)題作業(yè) 3.某種雞廠對生產(chǎn)用水井的水樣進(jìn)行菌落總數(shù)測定時(shí)，按國家標(biāo)準(zhǔn)將水樣處理及培養(yǎng)后，培養(yǎng)皿上生長的菌落數(shù)量記錄如下： 稀釋度皿號 菌落數(shù)10-110-210-31#2913502#279